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    鮐魚(yú)貯藏過(guò)程中的品質(zhì)變化及腐敗微生物多樣性分析

    2019-11-13 01:27:18姜曉娜馮俊麗戴志遠(yuǎn)
    中國(guó)食品學(xué)報(bào) 2019年10期
    關(guān)鍵詞:真空包裝氣調(diào)組胺

    姜曉娜 孟 璐 馮俊麗,2* 戴志遠(yuǎn),2

    (1 浙江工商大學(xué)海洋食品研究院 杭州 310012

    2 浙江省水產(chǎn)品加工技術(shù)研究聯(lián)合重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 杭州 310012)

    鮐魚(yú)(Pneumatophorus japonicus)是一種遠(yuǎn)洋暖水性中、上層深海魚(yú)類,廣泛分布在中國(guó)的沿海水域[1]。繼大小黃魚(yú)、墨魚(yú)、帶魚(yú)資源銳減以后,鮐魚(yú)已成為我國(guó)近年來(lái)主要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類之一[2]。鮐魚(yú)的蛋白質(zhì)和脂肪含量豐富,并且二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量也很高。據(jù)相關(guān)研究報(bào)道,EPA含量達(dá)8%~10%,而DHA的含量較EPA更高[3]。EPA和DHA有促進(jìn)嬰幼兒、青少年智力發(fā)育,預(yù)防心血管疾病,抑制腫瘤生長(zhǎng),減少癌癥發(fā)病率等保健作用[4]。鮐魚(yú)魚(yú)肉具有較好的滋補(bǔ)功效,尤其對(duì)于慢性胃腸道疾病、神經(jīng)衰弱等方面有很大作用[4]。

    鮐魚(yú)在捕獲后極易腐敗變質(zhì),當(dāng)魚(yú)體變質(zhì)或鮮度較差時(shí),會(huì)產(chǎn)生大量的腐敗微生物[5]。據(jù)報(bào)道,魚(yú)類制品加工和包裝的微小變化都可能導(dǎo)致微生物群落的多樣性和組成發(fā)生巨大變化,并導(dǎo)致不同類型的腐敗[6]。通常認(rèn)為,導(dǎo)致魚(yú)類腐敗的大部分微生物是革蘭氏陰性細(xì)菌,如腐敗假絲酵母、假單胞菌屬和腸桿菌科等[7]。有研究表明真空包裝可以抑制魚(yú)類中需氧細(xì)菌的生長(zhǎng),使得革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌比革蘭氏陰性細(xì)菌增加明顯[8-10]。Dalgaard等[11]報(bào)道含有CO2和N2的氣調(diào)包裝能抑制細(xì)菌的呼吸作用。Stamatis等[12]分析了鮐魚(yú)在3℃和6℃下的真空包裝和氣調(diào)包裝的感官、化學(xué)和微生物菌群變化,主要通過(guò)傳統(tǒng)的微生物學(xué)方法,如板活菌數(shù)、分離和生化鑒定來(lái)進(jìn)行研究。Prakash等[13]的研究結(jié)果表明自然界中只有一小部分的細(xì)菌可以培養(yǎng)。Stamatis等[12]的研究中可能忽略了一些生長(zhǎng)緩慢的細(xì)菌信息。研究腐敗過(guò)程中的微生物污染物,并確定特定腐敗微生物與產(chǎn)品保質(zhì)期之間的關(guān)系具有重要意義[14]。本文采用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)真空包裝和氣調(diào)包裝條件下不同貯藏期鮐魚(yú)的品質(zhì)及腐敗微生物菌落組成和群落變化進(jìn)行分析,為進(jìn)一步探討腐敗微生物與鮐魚(yú)貯藏環(huán)境、貨架期的相互關(guān)系積累數(shù)據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 材料與試劑

    鮐魚(yú),中國(guó)浙江杭州水產(chǎn)品市場(chǎng),大小規(guī)格基本一致(200~300 g)。食品級(jí)聚乙烯包裝袋(250 mm×200 mm),生工生物工程股份有限公司。異丙醇、冰乙酸、EDTA等均為分析純級(jí),國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑北京有限公司;瓊脂糖凝膠(分析純),西班牙進(jìn)口分裝;Taq DNA 聚合酶、1000 bp Marker,日本TakaRa公司;細(xì)菌基因組DNA小量提取試劑盒,康寧生命科學(xué)(吳江)有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    RC-6 Plus高速冷凍離心機(jī)、Fresco21微量離心機(jī),美國(guó)Thermo公司;PCR儀、凝膠電泳儀,美國(guó)BIO-RAD公司;Mili-O超純水機(jī)Gradient型,美國(guó)GRANT公司;LRH-150-S恒溫恒濕培養(yǎng)箱,廣東省醫(yī)療器械廠;DQB-360W多功能氣調(diào)包裝機(jī),DZQ-F氣體自動(dòng)混合機(jī),張家港德順機(jī)械有限責(zé)任公司;Ultra-Turrax T18 basic均質(zhì)機(jī),德國(guó)IKA公司。

    1.3 試驗(yàn)方法

    將鮐魚(yú)快速放入冰袋中,并在1 h之內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。鮐魚(yú)樣品去除內(nèi)臟、沖洗干凈后分割成質(zhì)量約50 g的魚(yú)塊,并于4℃晾干3 min。之后鮐魚(yú)樣品隨機(jī)分成2組,第1組為真空包裝組,抽真空;第2組為氣調(diào)包裝組,充入50%CO2+50%N2的混合氣體。所有的包裝袋都進(jìn)行熱封處理,并置于4℃貯藏。每個(gè)處理做4次平行,結(jié)果取平均值。

    1.3.1 感官評(píng)價(jià) 由6名經(jīng)培訓(xùn)后的感官評(píng)定人員進(jìn)行感官評(píng)定。感官評(píng)定的具體指標(biāo)如表1所示,并依據(jù)鮐魚(yú)樣品的體表、氣味、鰓和組織彈性進(jìn)行打分,總體感官評(píng)分=體表+氣味+鰓+組織彈性。當(dāng)感官評(píng)分≥32分表示品質(zhì)較好,16~31分表示品質(zhì)尚可,15分為可接受界限,低于15分則表示不能食用。

    表1 鮐魚(yú)感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)Table1 Sensory evaluation standard for Pneumatophorus japonicus

    1.3.2 pH值 按GB/T 9695-2008《肉與肉制品pH測(cè)定》進(jìn)行測(cè)定。

    1.3.3 TVB-N值 按照GB/T 5009.44-2003《肉與肉制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》中半微量定氮法測(cè)定。

    1.3.4 組胺 根據(jù)SN/T 2209-2008規(guī)定的《進(jìn)出口水產(chǎn)品中有毒生物胺的測(cè)定方法》中高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。

    1.3.5 鮐魚(yú)宏基因組學(xué)研究

    1.3.5.1 宏基因組細(xì)菌基因組DNA模板的提取 在無(wú)菌條件下,取20 g鮐魚(yú)樣品放入200 mL無(wú)菌生理鹽水溶液中,低速混合2 min。用50 μm過(guò)濾器過(guò)濾勻漿物以除去魚(yú)屑,在8 500×g,4℃離心15 min后,用滅菌水溶解沉淀物,并使用Bacterial Genome DNA Miniprep試劑盒(Axygen Scientific Inc.,CA,USA)提取細(xì)菌總 DNA。

    1.3.5.2 16S rDNA V4區(qū)PCR擴(kuò)增 PCR擴(kuò)增引物為520FP:(5-AYTGGGYDTAAAGNG-3),802RP:(5-TACNVGGGTATCTAATCC-3)。PCR 反應(yīng)體系:總體積 50 μL,ddH2O 37.5 μL,10 Buffer 5 μL,dNTP 4 μL,正向引物 1.0 μL,反向引物 1.0 μL,rTaq 0.5 μL,DNA 模板 1.0 μL。 PCR 擴(kuò)增條件為預(yù)變性94℃,5 min;隨后94℃變性5 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s,35個(gè)循環(huán);最后72℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物進(jìn)行核酸電泳,并送至杭州博訊生物科技有限公司進(jìn)行Illumina雙末端宏基因組測(cè)序。

    1.3.5.3 16S rDNA基因序列分析 運(yùn)用Qiime軟件對(duì)測(cè)序得到的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行過(guò)濾,去除5’端引物錯(cuò)配堿基數(shù)>1的序列,去除含有 N(模糊堿基)的序列,去除含有連續(xù)相同堿基數(shù)>8的序列、去除長(zhǎng)度≤150 bp的序列,去除嵌合體序列[15-16],得到最終用于后續(xù)分析的優(yōu)質(zhì)序列。

    用Qiime軟件中的uclust[17]方法根據(jù)相似度對(duì)優(yōu)質(zhì)序列進(jìn)行聚類分析,將序列歸為多個(gè)OUT(Operational taxonomic units,操作分類單元)。 利用Qiime中BLAST[18]方法對(duì)序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),獲得每個(gè)OTU代表序列的分類學(xué)信息。利用軟件mothur計(jì)算豐度指數(shù)Chao1和ACE,覆蓋度指數(shù),以及多樣性指數(shù)Simpson和Shannon,進(jìn)行Alpha多樣性分析,并得到在不同分類水平上(門(mén)、綱、目、科、屬)的物種豐度表和多樣品物種分布圖。根據(jù)微生物菌群的結(jié)構(gòu)分析,確定鮐魚(yú)在氣調(diào)包裝與真空包裝條件下門(mén)與屬兩個(gè)分類水平上的微生物菌株的物種豐度與物種分布。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用SPSS 16.0 for windows和Origin 8.0等統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析、顯著性檢驗(yàn)和相關(guān)性分析,P<0.05表示差異性顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 感官評(píng)價(jià)

    本試驗(yàn)貯藏期間鮐魚(yú)的感官評(píng)定結(jié)果如圖1所示,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),各組魚(yú)肉感官評(píng)價(jià)的分?jǐn)?shù)均呈下降趨勢(shì)。在貯藏第10天,真空包裝組和氣調(diào)包裝組的感官評(píng)分分別從初始值34.5分降至18分和21分。真空包裝組和氣調(diào)包裝組分別在貯藏的第12天和第16天時(shí),魚(yú)本來(lái)的體色已經(jīng)基本消失,伴有較重酸臭味,彈性消失,感官評(píng)價(jià)的分?jǐn)?shù)均低于感官評(píng)價(jià)的可接受界限15分,達(dá)到鮐魚(yú)的貨架期。氣調(diào)包裝組相比真空包裝組的貨架期延長(zhǎng)了4 d,這與Goulas等[19]的研究結(jié)果相一致。因此,從感官評(píng)價(jià)這一指標(biāo)可以得出,氣調(diào)包裝組保鮮效果明顯優(yōu)于真空包裝組。

    圖1 鮐魚(yú)不同包裝組感官評(píng)價(jià)的變化Fig.1 Change of sensory evaluation of Pneumatophorus japonicas samples under different packaging groups

    2.2 pH值

    貯藏期間鮐魚(yú)的pH值變化結(jié)果如圖2所示,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),各組pH值均呈先下降后上升的趨勢(shì),各試驗(yàn)組之間沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。從圖2中可以看出,從第4天起氣調(diào)包裝組的pH值始終比真空包裝組和空氣包裝組的pH值略低,推測(cè)原因是高比例的CO2溶于魚(yú)肉中產(chǎn)生了酸性物質(zhì)[20]。

    圖2 鮐魚(yú)不同包裝組pH值的變化Fig.2 Change of pH values of Pneumatophorus japonicas samples under different packaging groups

    2.3 TVB-N值

    TVB-N值是反映魚(yú)肉中蛋白質(zhì)分解的重要指標(biāo)[21-23]。本試驗(yàn)貯藏期間鮐魚(yú)的TVB-N值變化結(jié)果如圖3所示,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),各組TVB-N值均呈上升趨勢(shì)。在貯藏前8天,兩個(gè)試驗(yàn)組的TVB-N值均沒(méi)有明顯變化。貯藏8 d后,真空包裝組的TVB-N值迅速增加,明顯高于氣調(diào)包裝組(P<0.05)。我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB 2733-2005要求魚(yú)類等海制品的TVB-N值最高限量為30 mg/100 g,當(dāng)TVB-N值≤13 mg/100 g時(shí)判定為一級(jí)新鮮度,當(dāng)13 mg/100 g≤TVB-N值≤30 mg/100 g時(shí)判定為二級(jí)新鮮度。從圖3來(lái)看,到貯藏4 d,真空包裝組和氣調(diào)包裝組的TVB-N值分別達(dá)到了(16.1±1.9)mg/100 g和(14.8±1.6)mg/100 g,已經(jīng)超出了13 mg/100 g的標(biāo)準(zhǔn),均達(dá)不到一級(jí)新鮮度的要求。到貯藏的第12天,真空包裝組的TVBN 值是(36.0±2.9)mg/100 g,已經(jīng)不在可食用的安全范圍內(nèi);第12天氣調(diào)包裝組的TVB-N值是(24.7±2.1)mg/100 g,在可食用安全范圍。貯藏 16 d,氣調(diào)包裝組的TVB-N 值是(34.1±2.7)mg/100 g,也不可食用。Lalitha等[24]研究表明氣調(diào)包裝能減緩TVB-N的產(chǎn)生,與本研究的結(jié)論一致。

    2.4 組胺

    貯藏期間鮐魚(yú)的組胺變化結(jié)果如圖4所示,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),各組組胺含量均呈上升趨勢(shì)。Jiang等[25]和Tao等[26]研究都表明新鮮鮐魚(yú)的組胺含量在0~3.5 mg/100 g。在本研究中,初始組胺含量是(5.23±0.52)mg/100 g。真空包裝組在貯藏前8天,組胺含量基本不變;從第8天開(kāi)始,組胺含量開(kāi)始上升;貯藏12 d后,組胺含量急劇增加。到貯藏的第16天,真空包裝組和氣調(diào)包裝組的組胺含量分別是(12.44±0.20)mg/100 g和(35.86±0.25)mg/100 g。雖然該組胺含量在我國(guó)規(guī)定的安全范圍以內(nèi)(100 mg/100 g),但以超出美國(guó)FDA(5 mg/100 g)和歐盟(10 mg/100 g)規(guī)定的鯖科魚(yú)類組胺安全指標(biāo)。

    圖3 鮐魚(yú)不同包裝組TVB-N的變化Fig.3 Change of TVB-N of Pneumatophorus japonicas samples under different packaging groups

    圖4 鮐魚(yú)不同包裝組組胺的變化Fig.4 Change of histamine of Pneumatophorus japonicas samples under different packaging groups

    2.5 鮐魚(yú)宏基因組學(xué)分析

    2.5.1 宏基因組測(cè)序基本數(shù)據(jù)處理結(jié)果 將真空包裝組和氣調(diào)包裝組的第0天、第10天和第16天的鮐魚(yú)樣品進(jìn)行宏基因組分析,結(jié)果如表2所示,共獲得了388 763個(gè)有效序列,其中有358 267個(gè)高品質(zhì)序列,獲得的大部分(約90%)序列為225 bp。

    表2 鮐魚(yú)樣品的有效序列分析Table2 Statistical analysis of the sequences from Pneumatophorus japonicus samples

    2.5.2 OTU聚類結(jié)果 鮐魚(yú)真空包裝組和氣調(diào)包裝組的OTU聚類結(jié)果如表3。根據(jù)表3可以得出,在真空和氣調(diào)包裝條件下,鮐魚(yú)貯藏過(guò)程中菌株序列的OTU聚類結(jié)果差距明顯,真空包裝鮐魚(yú)樣品在不同的生物學(xué)分類下的OTU聚類結(jié)果都遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于在氣調(diào)包裝鮐魚(yú)樣品。

    表3 OTU聚類結(jié)果Table3 Statistical analysis of OTU

    2.5.3 AlpHa多樣性結(jié)果分析 AlpHa多樣性是指一個(gè)特定區(qū)域或生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)的多樣性,與以下兩個(gè)因素有關(guān):(1)種類數(shù)目,即豐富度;(2)種類中個(gè)體分配的均勻性。常用的度量指數(shù)有:群落豐富度指數(shù)(Chao和ACE),以及群落多樣性指數(shù)(Shannon和Simpson)。Chao和ACE指數(shù)越大,說(shuō)明群落豐富度越高。而Shannon指數(shù)越大,說(shuō)明群落多樣性越高。

    為了評(píng)估獲得序列的多樣性和豐富性,對(duì)每個(gè)鮐魚(yú)樣品構(gòu)建了稀疏曲線,如圖5所示,真空包裝組的樣品趨于飽和,而氣調(diào)包裝組的樣品仍有上升趨勢(shì),所以真空包裝組樣品的多樣性和豐富度顯著低于氣調(diào)包裝組樣品多樣性和豐富度(P<0.05)。該結(jié)果通過(guò)計(jì)算α多樣性指數(shù)得到確認(rèn),表4顯示第10天和第16天的真空包裝組樣品的Ace,Chao,Shannon指數(shù)顯著低于氣調(diào)包裝組樣品的Ace,Chao,Shannon 指數(shù)。

    圖5 鮐魚(yú)不樣品在97%相似水平的稀疏曲線Fig.5 Rarefaction curves for Pneumatophorus japonicas samples at 97%similarity level

    表4 生物多樣性指數(shù)表Table4 AlpHa diversity metrics of instant octopus products

    2.6 鮐魚(yú)微生物群落結(jié)構(gòu)分析

    2.6.1 門(mén)水平上的微生物群落結(jié)構(gòu)分析 根據(jù)OUT分類結(jié)果,可以得到各個(gè)樣品內(nèi)微生物在各分類水平【門(mén)(phylum)、綱(class)、目(order)、科(family)、屬(genus)】上的物種組成比例情況,反映樣品在不同分類學(xué)水平上的群落結(jié)構(gòu)。真空包裝組和氣調(diào)包裝組的鮐魚(yú)微生物于門(mén)水平上的群落分布如圖6所示。由圖6可知,初始鮐魚(yú)中最主要的微生物是變形菌門(mén)(Proteobacteria,60.42%),放線菌門(mén)(Actinobacteria,6.53%)、和擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes,5.76%)。此外,還有少量的浮霉菌門(mén)(Planctomycetes,3.74%)、厚壁菌門(mén)(Firmicutes,2.70%)和綠屈撓菌門(mén)(Chloroflexi,2.24%)。與初始鮐魚(yú)樣品相比,氣調(diào)包裝鮐魚(yú)樣品在貯藏期間,放線菌門(mén)和變形菌門(mén)細(xì)菌比例相對(duì)恒定。而真空包裝鮐魚(yú)樣品在貯藏的過(guò)程中變形菌門(mén)迅速發(fā)展成為絕對(duì)優(yōu)勢(shì)菌群。在貯藏的第10天和第16天,變形菌門(mén)細(xì)菌分別占到細(xì)菌總數(shù)的94.24%和99.22%。

    圖6 門(mén)水平上鮐魚(yú)樣品中優(yōu)勢(shì)微生物的組成和相對(duì)豐度Fig.6 Composition and relative abundance of dominant microbes at the phylum level for Pneumatophorus japonicus samples

    2.6.2 科和屬水平上的微生物群落結(jié)構(gòu)分析 在科與屬分類水平上分析真空包裝鮐魚(yú)樣品和氣調(diào)包裝鮐魚(yú)樣品的微生物群落結(jié)構(gòu)差異,其中主要優(yōu)勢(shì)菌的豐度差異如表5所示。根據(jù)表5所示,貯藏第0天,主要優(yōu)勢(shì)菌是遠(yuǎn)洋桿菌科(Pelagibacteraceae,10.18%)、海洋細(xì)菌(SAR324,5.32%)、鹽單胞菌科(Halomonadaceae,8.46%)、硫桿菌科(Thiohalorhabdaceae,2.52%)和魚(yú)立克次體科(Piscirickettsiaceae,2.31%)。到貯藏第 10天,真空包裝組鮐魚(yú)樣品的主要優(yōu)勢(shì)菌是希瓦氏菌科(Shewanellaceae,56.67%)、弧菌科【Vibrionaceae,34.69%,其中包括發(fā)光桿菌屬(Photobacterium,14.57%),別弧菌屬(Aliivibrio,11.68%)和弧菌屬(Vibrio,8.44%)】;氣調(diào)包裝組鮐魚(yú)樣品第 10 天的主要優(yōu)勢(shì)菌是遠(yuǎn)洋桿菌科(Pelagibacteraceae,10.16%)、鹽單胞菌科(Halomonadaceae,11.69%)和紅細(xì)菌科(Rhodobacteraceae,4.85%);貯藏第 16天,真空包裝組鮐魚(yú)樣品中僅發(fā)現(xiàn)希瓦氏菌科(Shewanellaceae,13.39%)、弧菌科【Vibrionaceae,84.19%,其中包括發(fā)光桿菌屬(Photobacterium,67.99%)、別弧菌屬(Aliivibrio,5.27%)和弧菌屬(Vibrio,10.93%)】;氣調(diào)包裝組鮐魚(yú)樣品貯藏第16天的主要優(yōu)勢(shì)菌是遠(yuǎn)洋桿菌科(Pelagibacteraceae,5.65%),鹽單胞菌科(Halomonadaceae,6.11%),海洋細(xì)菌屬(SAR324,7.92%)和莫拉菌科(Moraxellaceae)嗜冷桿菌屬(Psychrobacter,12.11%)。從結(jié)果可以看出,在貯藏過(guò)程中氣調(diào)包裝組的鮐魚(yú)樣品中的微生物組成除了嗜冷桿菌屬在貯藏后期顯著增加外,其它細(xì)菌均沒(méi)有明顯變化。然而真空包裝組的微生物組成發(fā)生很大變化。到貯藏第10天,希瓦氏菌科和弧菌科細(xì)菌成為鮐魚(yú)樣品中的優(yōu)勢(shì)菌群。這些腐敗微生物導(dǎo)致鮐魚(yú)真空包裝樣品在貯藏后期腐敗變質(zhì)嚴(yán)重,所以相對(duì)于真空包裝,氣調(diào)包裝更適合作為鮐魚(yú)保鮮的包裝方式。

    3 結(jié)論

    通過(guò)對(duì)4℃環(huán)境中鮐魚(yú)貯藏過(guò)程的感官評(píng)價(jià)、化學(xué)評(píng)價(jià)(pH值、TVB-N值和組胺)和微生物群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究,得到如下結(jié)論:

    1)與真空包裝組相比,氣調(diào)包裝組鮐魚(yú)品質(zhì)下降較慢,保鮮效果較理想。

    落群物生微要主的品樣魚(yú)鮐組裝包空真和組裝包調(diào)氣中境環(huán)℃4的定確因基A N rR S 6 1的菌細(xì)定測(cè))%1>度豐對(duì)相(臺(tái)平q e iS M用使于基5表cing en sequ on based℃4 at ples sam japonicusorusatoph neum P aged pack-m vacuu and packaged hereosp atm odified m of unities m com icrobial m t inan dom e h T 5 le ab T)1%>ce an und ab(relative s latform p iSeq M g usin acterial b of es gen A N rR 16S e th裝包空真裝包調(diào)氣天0第述描類分天6 1第天10第天6 1第天10第屬科目)( 2.63%9 57 1)( 0.62%21 4)( 1.79%3 33 1 09c 34 A Z)icrobiales( Acidim目菌微酸)( 2.18%9 30 1)( 1.31%95 8)( 1.33%91 9 06 K T)( 0.97%80 5)( 4.30%29 9 2)( 1.25%32 9 5 15 S C O)( 1.18%06 7)( 1.15%85 7)( 1.53%3 13 1)acteriaceae( Flavob科菌桿黃)( Flavobacteriales目菌桿黃)( Lactobacillales科菌桿酸乳)( 0.49%5 34)8%( 2.3 4 91 1)( Carnobacteriaceae科菌桿肉)( 0.09%64)( 0.43%5 34)( 0.97%85 5)( 1.26%60 8)( 1.96%3 45 1)( Bacillus屬菌桿孢芽)( Bacillaceae科菌桿孢芽)( Bacillales目菌桿胞芽)6%( 1.2 8 00 1 a scalinduatusandid C iaceae) Brocad iales( Brocad目德卡羅布門(mén)菌霉浮)%49(1.14 8 laceae irellu P irellulales P).65%(5 2 39 3)6%14(10.1 69)8%61(10.1 75科菌桿洋遠(yuǎn)ettsiales)ick(R目體氏次克立)( 1.28%66 7)( 4.85%4) 330( 2.16%8 60 1科菌細(xì)紅)odobacterales(Rh目菌細(xì)紅)( 1.09%53 6)( 0.74%01 5)( 1.16%64 8 hodospirillaceae R)odospirillales(Rh目菌螺紅)( 7.92%3 75 4)( 1.35%18 9)( 5.32%2 95 3 4 32 R SA菌細(xì)洋海3 85 va0 S)( 1.02%11 6)( 1.77%4 20 1)( 1.09%13 8 7 2 M O)( Myxococcales目菌球粘)( 1.85%2 11 1)( 1.45%84 9)( 1.79%3 33 1)( Glaciecola屬菌細(xì)微超)aceae ad on( Alterom科菌胞單替交)onadales( Alterom目菌胞單替交)( 13.39%) 9443( 56.67%500 45屬菌氏瓦??凭贤呦#?1.12%3 79)( 0.75%2 60)( Morganella屬菌根摩)( Enterobacteriaceae科菌桿腸)acteriales terob(En目菌桿腸)( 4.33%3 60 2)( 9.04%0) 615( 4.60%9 41 3 portiera atusandid C科菌胞單鹽)ospirillales( Ocean目菌螺洋海)( 0.07%57)( 1.78%7 06 1)( 2.65%1) 180( 3.86%0) 287 onas( Halom屬菌胞單鹽嗜科菌胞單鹽)%(0.03 24).37%(0 9 29).44%(1 7 06 1 as)on dom seu(P屬菌胞單假adaceae)on dom seu(P科菌胞單假onadales)om seud(P目菌胞單假)1%.1 72(12 72)%54(0.67 4屬菌桿冷嗜科菌拉莫)( 1.89%5 13 1)( 2.52%4 87 1科菌桿硫hiohalorhabdales T)( 3.03%0 82 1)( 1.78%0) 121( 2.31%7 71 1科體氏次克立魚(yú))ales( Thiotrich目菌發(fā)硫)9%( 67.9 3) 4793( 14.57%696 11屬菌桿光發(fā)科菌?。﹔ionales( Vib目菌弧)7%( 5.2 4 71 3)%( 11.68 8 37 9屬菌弧別科菌?。?10.93%4 770)4%( 8.4778 6屬菌弧科菌弧

    2)氣調(diào)包裝能減緩鮐魚(yú)中TVB-N和組胺含量增加,相比于真空包裝能將保質(zhì)期延長(zhǎng)4 d,達(dá)到16 d。

    3)細(xì)菌16S rDNA的宏基因組分析顯示在腐敗期間細(xì)菌群落發(fā)生很大變化。真空包裝組在貨架期終點(diǎn)(第12天)的主要微生物是發(fā)光桿菌、希瓦氏菌和弧菌;氣調(diào)包裝組在貨架期終點(diǎn)(第16天)的主要微生物是遠(yuǎn)洋桿菌、鹽單胞菌和嗜冷桿菌。

    4)關(guān)于微生物變化和品質(zhì)惡化的研究對(duì)于評(píng)估產(chǎn)品的保存期很重要,并且有助于構(gòu)建預(yù)測(cè)模型。然而對(duì)于鮐魚(yú)中細(xì)菌的腐敗潛力和活性需要進(jìn)一步研究,并開(kāi)發(fā)合適的質(zhì)量控制技術(shù)來(lái)減少產(chǎn)品的損失。

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