刺參“參優(yōu)1號”

一、品種概況

（一）培育背景

刺參（Apostichopus japonicus Selenka），又稱仿刺參，分類地位為棘皮動物門（Echinodermata），游走亞門（Eleutherozoa），海參綱（Holothuroidea），楯手目（Aspidochirota），刺參科（Stichopodidae），仿刺參屬（Apostichopus），自然分布于北緯35°到44°的西北太平洋沿岸，分布區(qū)域北起俄羅斯遠東沿海，經(jīng)過日本海、朝鮮半島到我國渤海和黃海。因其具有極高的營養(yǎng)保健功能和醫(yī)用價值，被列為“海產(chǎn)八珍”之一，是我國北方主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種。自上世紀80年代人工繁育技術(shù)突破以來，其養(yǎng)殖規(guī)模迅速拓展，養(yǎng)殖面積迅速擴展至遼寧、山東、河北、江蘇、浙江及福建等地，形成了北參南養(yǎng)、東參西養(yǎng)的養(yǎng)殖格局，為沿海經(jīng)濟結(jié)構(gòu)調(diào)整和漁民就業(yè)增收開辟了新途徑，產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟社會效益。在養(yǎng)殖面積迅速擴張以及集約化養(yǎng)殖情況下，養(yǎng)殖過程中相繼出現(xiàn)了病害頻發(fā)、養(yǎng)殖成活率低、生長速度慢等一系列種質(zhì)退化問題。刺參病害的頻繁發(fā)生，每年造成約30億元的經(jīng)濟損失，給刺參產(chǎn)業(yè)造成了重創(chuàng)，成為制約刺參養(yǎng)殖健康發(fā)展的重要瓶頸。通過提高刺參自身抵抗力抵御病害是刺參健康養(yǎng)殖最有效的方法。因此，對刺參進行遺傳改良，培育出具有抗病力強、生長速度快等優(yōu)良性狀的新品種，對于抵抗產(chǎn)業(yè)風險，重拾養(yǎng)殖業(yè)者信心，提高產(chǎn)業(yè)效益具有重要的現(xiàn)實意義，是刺參養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的重要保證。

圖1 刺參“參優(yōu)1號”選育技術(shù)路線

（二）育種過程

1.親本來源

收集大連、煙臺、威海、青島以及日本沿海刺參，共收集規(guī)格大于200g/頭的刺參5050頭，作為刺參“參優(yōu)1號”的選育基礎(chǔ)群體。

2.技術(shù)路線

刺參“參優(yōu)1號”選育的總體策略是以抗燦爛弧菌侵染能力和生長速度作為選育性狀，利用群體選育方法構(gòu)建刺參抗逆選育系，采用致病原半致死濃度（LD50）脅迫馴化技術(shù)、刺參親本生態(tài)促熟技術(shù)、性腺發(fā)育積溫控制技術(shù)、選育遺傳參數(shù)評估以及選育世代遺傳多樣性監(jiān)測等多項關(guān)鍵技術(shù)，對每代群體進行脅迫和選擇，實行群體定向、累代閉鎖繁育，同時評估其在池塘養(yǎng)殖過程中的優(yōu)勢性狀，并通過多代連續(xù)選育形成性狀穩(wěn)定的新品種，詳見圖1。

3.培育過程

2006年～2007年：收集我國刺參主要分布區(qū)大連、煙臺、威海、青島以及日本沿海刺參，共收集規(guī)格大于200g/頭的刺參5050頭，作為刺參“參優(yōu)1號”的選育基礎(chǔ)群體。

2007年～2008年：自基礎(chǔ)群體中挑選規(guī)格大于300g/頭的刺參1987頭，采用前期通過實驗獲得的刺參腐皮綜合征（也稱化皮病）致病原—燦爛弧菌24h半數(shù)致死濃度1.5×106CFU/mL（LD50）對5個群體親本進行連續(xù)脅迫24h后解除脅迫，并進行30d的養(yǎng)殖觀察，淘汰攻毒后出現(xiàn)化皮癥狀的個體，對未發(fā)病的976頭個體混群后進行留種，組建核心育種群體，經(jīng)PCR探針檢測無燦爛弧菌攜帶后投放到室外池塘進行養(yǎng)殖和成熟培育。

2008年～2011年：F1代群體選育，自核心育種群中選取性腺成熟的734頭刺參作為繁育親本，培育F1代選育苗種。6月齡刺參F1代苗種病原菌脅迫后成活率比對照組提高2.41%，收獲時平均體重增長率比對照組提高14.38%，養(yǎng)殖成活率提高6.26%。

2011年～2013年：F2代群體選育，對6月齡F1代苗種進行燦爛弧菌攻毒侵染脅迫，篩選健康存活個體作為刺參F2代親本進行培育。2011年5月以體重為選擇指標篩選自然成熟的F1代個體為親本進行F2代苗種培育，留種率為1.24%，選擇強度為2.578。6月齡刺參F2代苗種病原菌脅迫后成活率比對照組提高9.92%，收獲時選育群體的平均體重增長率比對照組提高28.71%，成活率提高28.22%。

2013年～2015年：進行F3代群體選育，按照F2代的選育策略，以體重為選擇指標從F2代養(yǎng)殖池塘中篩選大規(guī)格刺參進行冬季生態(tài)促熟培育，于2013年3月進行F3代選育苗種的培育，F(xiàn)3代的留種率為1.67%，選擇強度分別為2.415。6月齡刺參F3代苗種病原菌脅迫后成活率比對照組提高11.17%，收獲時選育群體的平均體重增長率比對照組提高27.86%，成活率提高7.78%。

2015年～2017年：進行F4代群體選育，按照F3代的選育策略和親參培育方法，于2015年3月進行F4代選育苗種的培育，F(xiàn)4代的留種率為2.51%，選擇強度分別為2.341。6月齡的刺參F4代苗種病原菌脅迫后成活率比對照組提高11.38%，收獲時選育群體的平均體重增長率比對照組提高38.75%，養(yǎng)殖成活率提高25.62%。

表1 刺參“參優(yōu)1號”苗種與未選育苗種攻毒脅迫后成活率比較

表2 刺參“參優(yōu)1號”苗種與未選育苗種生產(chǎn)性對比養(yǎng)殖試驗結(jié)果

至2015年經(jīng)過連續(xù)4代群體選育，形成了特征明顯、性狀穩(wěn)定的刺參新品種，命名為刺參“參優(yōu)1號”。

（三）品種特性和中試情況

1.品種特性

刺參“參優(yōu)1號”的外部特征在選育過程中未出現(xiàn)明顯改變，參體呈圓筒狀，兩端稍細，背部隆起，肉刺堅挺，具有4排～6排不規(guī)則排列的圓錐形疣足?？谄诟姑?，周圍生有20個楯狀觸手，肛門偏于背面。體色黃褐、棕褐或綠褐色，部分個體疣足周圍有黑色斑點。

2.優(yōu)良性狀

（1）抗燦爛弧菌能力強。在6月齡時燦爛弧菌侵染后成活率提高11.68%，可顯著提高抗化皮病的能力。

（2）生長速度快。池塘養(yǎng)殖收獲時其平均體重提高38.75%，可顯著提高刺參的產(chǎn)量和經(jīng)濟效益。

（3）成活率高。池塘養(yǎng)殖收獲時成活率提高23%以上。

3.中試情況

為評估刺參“參優(yōu)1號”新品種的生產(chǎn)性狀，2015年～2017年在青島西海岸海洋漁業(yè)科技開發(fā)有限公司的苗種擴繁車間和養(yǎng)殖池塘對2015年3月和2016年3月所繁育的兩批次苗種進行了“參優(yōu)1號”新品種連續(xù)兩年生產(chǎn)性對比養(yǎng)殖實驗。對照組為未選育苗種，苗種繁育方式均為升溫育苗。

（1）抗燦爛弧菌侵染力比較：分別在2015年11月份和2016年11月份對兩批次6月齡苗種進行攻毒脅迫，攻毒的病原菌為刺參重大疾病“腐皮綜合征”的致病菌—燦爛弧菌（Vibrio splendidus），浸浴濃度為燦爛弧菌對刺參的半致死濃度——1.5×106CFU/mL，集中浸浴24h后恢復(fù)正常養(yǎng)殖條件，統(tǒng)計脅迫后的成活率。由兩批刺參“參優(yōu)1號”苗種的燦爛弧菌攻毒侵染存活率統(tǒng)計結(jié)果（表1）可以看出，兩批次“參優(yōu)1號”苗種的攻毒侵染后成活率分別為51.92%和53.68%，分別較未選育組（對照組）提高11.38%和12.56%，“參優(yōu)1號”刺參攻毒侵染后的平均成活率為52.80%。

（2）生長性狀及成活率比較：2015年～2017年進行第一批次生產(chǎn)性對比試驗。刺參“參優(yōu)1號”苗種選擇6個標準化養(yǎng)殖池塘（共240畝），對照苗種選擇3個刺參標準化養(yǎng)殖池塘（共120畝）。在2016年6月（15月齡）時自養(yǎng)殖池塘中抽取養(yǎng)殖個體進行體重測定，計算體重平均值，并比較其與未選育組的差異。在2017年6月（27月齡）進行清池收獲，測定體重平均值并統(tǒng)計養(yǎng)殖成活率，比較其與對照組的差異。2016年～2017年進行第二批次生產(chǎn)性對比試驗，刺參“參優(yōu)1號”苗種選擇5個標準化養(yǎng)殖池塘（共200畝），對照苗種選擇3個刺參標準化養(yǎng)殖池塘（共120畝），在2017年6月（15月齡）時自養(yǎng)殖池塘中抽取養(yǎng)殖個體進行體重測定，計算體重平均值，并比較其與對照組的差異。

各個試驗池塘連續(xù)兩年生產(chǎn)性對比養(yǎng)殖試驗結(jié)果見表2。由“參優(yōu)1號”苗種與未選育組對比養(yǎng)殖的統(tǒng)計結(jié)果可以看出，相同養(yǎng)殖條件下，2015年3月所繁育的第一批苗種經(jīng)過15個月的養(yǎng)殖，2016年6月“參優(yōu)1號”刺參體重較對照組苗種提高22.26%，經(jīng)過27個月的養(yǎng)殖，截止到2017年6月收獲時，“參優(yōu)1號”刺參體重較對照組提高23.58%，成活率提高25.33%。2016年3月所繁育的第二批苗種經(jīng)過15個月的養(yǎng)殖，2017年6月“參優(yōu)1號”刺參體重較對照組苗種提高25.80%。

二、人工繁殖技術(shù)

（一）親本選擇與培育

1.親本來源

刺參“參優(yōu)1號”親本保存在特定的良種場，是經(jīng)過選育的性狀優(yōu)良、遺傳穩(wěn)定、適合擴繁推廣的群體。用于生產(chǎn)的刺參“參優(yōu)1號”親本要求個體重量在300g以上。

2.親參培育

（1）培育方式：采取常溫育苗的親參培育方式，主要是生態(tài)露天池塘養(yǎng)殖，養(yǎng)殖到5月份，性腺發(fā)育良好時將親參轉(zhuǎn)移到室內(nèi)水泥池中蓄養(yǎng)，池塘養(yǎng)殖的密度一般在2頭/m2～3頭/m2，水泥池蓄養(yǎng)的密度一般在20頭/m2～25頭/m2。采取升溫育苗的親參培育方式是生態(tài)促熟車間養(yǎng)殖，即11月份將大于200g的親參轉(zhuǎn)移到生態(tài)促熟車間進行成熟培育，養(yǎng)殖密度一般在3頭/m2～4頭/m2，翌年3月份性腺發(fā)育良好時直接進入產(chǎn)卵池孵化。

（2）親參管理：池塘養(yǎng)殖過程中大潮期換水，每天換水量為1/5～1/4。生態(tài)促熟車間每天換水一次，換水量為1/4～1/3。親參培育過程中經(jīng)常觀測刺參的活力、攝食、健康狀況，并抽檢測定親參的性腺指數(shù)。性腺成熟后注意觀察親參的活動狀況和精卵排放情況，以安排苗種繁育生產(chǎn)。

（二）人工繁殖

將選擇好的親參用清潔海水沖洗后，用消毒劑對親參體表的細菌和猛水蚤進行殺除。將處理后的親參放入產(chǎn)卵池中進行產(chǎn)卵，產(chǎn)卵前一般采用陰干刺激的方式誘導(dǎo)精卵排放。

一般雄性先爬到池壁進行排精，呈白色煙霧狀，雄性排精后雌性開始排卵，精卵在養(yǎng)殖池中自然受精。產(chǎn)卵結(jié)束后，停止充氣，將親參從產(chǎn)卵池中撈出，待受精卵沉于池底后，采用虹吸的方法用260目的網(wǎng)箱過濾，將上層池水排出1/2～3/4，然后再加滿海水，待受精卵沉底后，再用上述方法進行洗卵，一般重復(fù)3次～4次。洗卵結(jié)束后，持續(xù)充氣，直至浮游幼體孵出。然后，利用拖網(wǎng)選擇法或虹吸法進行選優(yōu)，將收集的健康浮游幼體進行布池。

（三）苗種培育

1.浮游幼體培育

（1）培育密度：一般浮游幼體的布池密度為0.2個/mL～0.5個/mL。

（2）投餌：受精卵發(fā)育至耳狀幼體后，即可投喂，主要以鹽藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻、骨條藻等單胞藻類2種～3種混合液為主，輔以海洋酵母、面包酵母、藻粉等代用餌料。

（3）換水：優(yōu)選分池后可在培育池加入60cm的水，前3天內(nèi)逐漸把水加滿，然后每日用200目網(wǎng)箱換水1次～2次，每次換水量1/5～1/3。隨著幼體的發(fā)育成長和投餌量的增加，換水量逐步加大。

（4）日常監(jiān)測：及時、定時地檢測幼體發(fā)育、攝食情況和水質(zhì)狀況，每天鏡檢2次以上，記錄幼體形態(tài)變化、活動力、攝食、生長發(fā)育及健康等情況。

（5）附苗板投放：刺參幼體發(fā)育到大耳后期，水體中出現(xiàn)10%～20%的樽形幼體時投放附苗板。附苗板以聚乙烯波紋板組合筐為主。

2.稚幼參培育

（1）密度：稚參培育密度一般不高于0.2頭/cm2。

（2）餌料種類：餌料以底棲硅藻、鼠尾藻濾液、海參粉末飼料和海泥為主。

（3）餌料投喂量：餌料投喂量根據(jù)稚參的攝食情況而定。通過肉眼觀察附苗板上餌料的剩余量和攝食半徑以及通過顯微鏡觀察稚參消化道內(nèi)餌料的充盈度來判斷投餌量是否適宜。

（4）餌料投喂：一般投喂2次/天，早、晚各一次。

（5）換水：每日換水1/4～1/2。

（6）倒池：投放附苗板10d～20d后，需要進行倒池一次。具體倒池時間根據(jù)附苗板上清潔程度、參苗狀態(tài)和敵害生物數(shù)量來確定。

三、健康養(yǎng)殖技術(shù)

（一）養(yǎng)殖模式和配套技術(shù)

養(yǎng)殖海區(qū)選擇在水質(zhì)良好、無污染、無淡水注入的海域。適宜的水溫為5℃～25℃，適宜的鹽度為20～33，溶解氧≥5mg/L，pH7.8～8.4。主要養(yǎng)殖模式為池塘養(yǎng)殖和南方吊籠養(yǎng)殖。

1.池塘養(yǎng)殖

（1）池塘整理：新建池塘應(yīng)對池底和池壩進行平整，通過自然納潮或者泵取海水浸泡2次，每次3d～5d，沉實池底土壤，之后將水排盡，曝曬一周。舊池塘在參苗放養(yǎng)前要將原池水放干，徹底清淤、平整，修護池壩，對池底和石塊、瓦片等參礁反復(fù)沖洗，并封閘暴曬至池底干裂。

（2）池塘消毒：在放苗前30d～45d，池塘進水淹沒池底和參礁，準備消毒處理，消毒劑選擇生石灰900kg/hm2～1800kg/hm2或者漂白粉（含有效氯30%）15g/m3～30g/m3，全池潑灑，浸泡池塘2d～3d后排干池水，再進入海水浸泡2d～3d，將水排出，重復(fù)進排水1次～2次。

（3）參礁設(shè)置：池塘要投放一定數(shù)量的參礁，參礁以瓦片等硬質(zhì)附著基為主。

（4）苗種投放：放苗分為春、秋兩季，秋季放養(yǎng)當年3月份繁育的8月齡刺參，春季放養(yǎng)經(jīng)過冬季車間養(yǎng)殖的大規(guī)格12月齡刺參。水溫在10℃～17℃時投放較為適宜，鹽度25～34，溶氧≥5.0mg/L，水溫差要小于2℃，鹽度差要小于2。放苗應(yīng)選擇風浪較小的天氣，陰天可以放苗，雨天則不應(yīng)放苗。苗種的投放密度由環(huán)境條件、苗種規(guī)格、參礁數(shù)量、換水頻度、是否投餌、計劃產(chǎn)量等因素決定，秋季11月份首次投放同一規(guī)格苗種（500頭/kg～800頭/kg）6000頭/畝，春季4月份首次投放同一規(guī)格苗種（100頭/kg～150頭/kg）4000頭/畝。養(yǎng)殖后期根據(jù)池塘刺參存量進行苗種的補放。

（5）餌料投喂：將川蔓藻、鼠尾藻、海帶等加工成藻粉，制成配合餌料投喂，或直接使用海參專用人工配合飼料。刺參攝食季節(jié)（3月～6月、10月～12月），根據(jù)刺參的規(guī)格及攝食量確定餌料的投喂量，一般日投喂量為刺參體重的1%～2%，7d～10d投喂一次，避免過量投喂。海參夏眠或冬眠后，停止投喂餌料。

（6）日常管理

池塘透明度保持60cm～80cm，春、秋季水位在1.2m～1.5m，進入夏眠和冬眠后，應(yīng)保持水位在1.5m以上。汛期前在蓄水池內(nèi)注滿養(yǎng)殖用水，同時養(yǎng)殖池塘內(nèi)保持高水位；降水較多時及時排出表層淡水，嚴防池塘鹽度驟降。

堅持早、晚巡池，檢查堤壩、閘門、防逃網(wǎng)等設(shè)施設(shè)備的安全情況。定期觀察刺參的活動、攝食、生長及健康情況，定期監(jiān)測水溫、鹽度、溶解氧、水深、透明度等指標，并做好記錄。

2.南方吊籠養(yǎng)殖

（1）養(yǎng)殖設(shè)施：浮筏吊籠養(yǎng)殖系統(tǒng)由浮桶、筏架（木板）、竹竿、橛纜、橛子、吊繩、養(yǎng)殖籠等組成。橛纜和橛子固定整個筏架，養(yǎng)殖籠通過吊繩懸系在筏架的竹竿上，并通過浮桶浮力懸浮于水面之上。養(yǎng)殖籠通常由5層～6層養(yǎng)殖箱組成，養(yǎng)殖箱的規(guī)格為40cm×30cm×12cm；吊養(yǎng)水深2.5m～8m，籠間隔40cm～70cm，每畝水面懸掛養(yǎng)殖籠1500串～2500串。

（2）吊籠消毒：放到海域前5d～10d對養(yǎng)殖吊籠進行清洗，并利用漂白粉（含有效氯30%）15g/m3～30g/m3浸泡1d～2d，沖洗后再用海水浸泡2d～3d。

（3）苗種投放時間：放苗時間一般在11月上、中旬溫度適宜的時間進行。

（4）苗種投放規(guī)格和密度：苗種投放規(guī)格為20頭/kg～30頭/kg。放養(yǎng)密度為5頭/層～6頭/層，即每籠約30頭～36頭，根據(jù)刺參的生長速度、吊籠的附著物多少以及水質(zhì)情況等因素適當調(diào)整密度。

（5）餌料投喂：以海帶、鼠尾藻、江蘺為主要原料，將海帶等藻類經(jīng)發(fā)酵浸泡后直接投喂，也可投喂刺參吊籠專用飼料。投喂量和投喂次數(shù)根據(jù)實際攝食情況及時調(diào)整，一般2d～3d投喂一次。

（6）日常管理：堅持經(jīng)常巡視檢查，發(fā)現(xiàn)吊籠堵塞嚴重或破損時更換吊籠。刺參養(yǎng)殖1個～2個月后，根據(jù)刺參的生長情況進行分苗。定期觀察刺參的活動、攝食、生長及健康情況，定期監(jiān)測水溫、鹽度、溶解氧、pH、透明度等指標，并做好記錄。

（二）主要病害防治方法

1.腐皮綜合征

該病主要致病原為燦爛弧菌（Vibrio splendidus）等。稚參培育、保苗期幼參和養(yǎng)成期刺參均可被感染發(fā)病，初冬11月份到翌年4月初是該病的高發(fā)期。該病以預(yù)防為主，主要的預(yù)防措施包括：投放苗種的密度適宜，保持良好的水質(zhì)和底質(zhì)環(huán)境；采取“冬病秋治”策略，入冬前后定期施用底質(zhì)改良劑氧化池底有機物，改善刺參棲息環(huán)境；餌料中定期添加穿心蓮、金銀花、黃芩等中草藥進行預(yù)防處理；治療時建議使用頭孢噻肟鈉浸浴或口服治療。

2.腸炎病

該病是刺參育苗早期、保苗期、養(yǎng)成期較常見的疾病，其致病原為哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）等。主要防治措施包括：苗種培育密度不宜過高，定期倒池、分苗，并剔除不良個體。餌料不衛(wèi)生或蛋白含量過高是導(dǎo)致腸炎的重要原因，選擇優(yōu)質(zhì)餌料，進行有效發(fā)酵或臭氧消毒后進行投喂，蛋白含量在15%～17%之間為佳；餌料中定期添加有益菌劑或者添加黃芩、五倍子等中草藥，調(diào)控腸道菌群；經(jīng)常觀察刺參活動狀態(tài)、攝食與糞便情況、測量生長速度等指標，一旦發(fā)現(xiàn)早期癥狀，及時藥浴或口服投喂氟苯尼考治療。

四、育種和種苗供應(yīng)單位

（一）育種單位

1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所

地址和郵編：山東省青島市南京路106號，266071

聯(lián)系人：王印庚

電話：13969877169

2.青島瑞滋海珍品發(fā)展有限公司

地址和郵編：山東省青島市黃島西海岸新區(qū)瑯琊鎮(zhèn)劉家崖下村，266408

聯(lián)系人：范瑞用

電話：13791918333

（二）種苗供應(yīng)單位

青島瑞滋海珍品發(fā)展有限公司

地址和郵編：山東省青島市黃島西海岸新區(qū)瑯琊鎮(zhèn)劉家崖下村，266408

聯(lián)系人：范瑞用

電話：13791918333

（三）編寫人員名單

王印庚，廖梅杰，李彬，范瑞用，榮小軍，張正，陳貴平