長白山珍稀藥材山蘭的研究進展

張命軍 劉學芝 劉丹 陳翠楠 梁春祥 徐賢平

摘 要：山蘭為多年生草本植物藥用植物，假鱗莖干燥后入藥，分布于吉林市、白山市、通化市、本溪市。該植物含有多糖類、甾醇類、酯類、脂肪酸類化合物，具有抑菌活性、抗氧化活性、抗癌活性以及免疫調節(jié)等作用，具有治療多種疾病的潛在藥用價值和良好的開發(fā)前景。

關鍵詞：山蘭;山慈菇;栽培繁殖;化學成分

中圖分類號：S759.82文獻標識碼：ADOI：10.19754/j.nyyjs.20191030025

基金項目：白山市科技發(fā)展計劃項目“山蘭種質資源保護與馴化研究”（項目編號：201808）

山蘭（Oreorchis patens）為蘭科山蘭屬多年生草本植物，野生分布于東三省、西北地區(qū)（甘肅）、華中地區(qū)（江西、湖南）、西南地區(qū)（四川、貴州和云南北部）以及臺灣。多生于林下、林緣、灌叢中、草地上或溝谷旁，海拔1000～3000m[1]。假鱗莖干燥后入藥，葉通常1～2枚，狹披針形，6月下旬葉子開始枯萎，7月下旬又長出新葉。性寒、甘、辛，有小毒。具有解毒清熱、消癰、清肺散結、止咳化痰的功效，用于癰疳瘡腫、瘰疬、無名腫毒、蛇蟲咬傷[2]。

民間將山蘭作為山慈菇的入藥，習稱“山芋頭”。山慈菇作為傳統(tǒng)常用藥材有著悠久的應用歷史，《中國藥典》收載其植物來源為杜鵑蘭（Cremastra appendiculata）、獨蒜蘭（Pleionebulbocodioides）、云南獨蒜蘭（Pleioneyunnanensis），前者習稱“毛慈姑”，后二者習稱“冰球子”。《中藥大辭典》和《中華本草》中認為山蘭屬植物冰球子、山蘭（Oreorchispatens）、獨葉山蘭（Oreorchisfoliosa）等的假球莖，亦作山慈姑入藥[3，4]。

1 山蘭資源現(xiàn)狀

山慈菇3種原生植物，因資源儲量和繁殖技術上的限制[5-6]，導致近年山慈菇藥材供不應求，具有很強的市場需求。加之隨著深入的研究，山慈菇在抗菌作用、阻斷M3受體作用、降壓作用、抗腫瘤作用等方面的發(fā)現(xiàn)[7]，使山慈菇在中藥市場受到了青睞。再加上無節(jié)制的采挖以及蘭科植物自身種子繁殖困難的特性，山慈菇野生資源儲量受到了極大的影響，資源儲量下降，市場需求旺盛，導致了價格的急劇上漲[8]。

近年來，在我國東北地區(qū)山蘭被大量高價收購，山蘭用量增加，價格上升，導致長白山區(qū)的山蘭野生資源儲量急劇下降。山蘭種苗資源成為保護山蘭種質資源、滿足市場需求量。發(fā)展地道中草藥的關鍵。

2 山蘭性狀鑒定

山蘭的研究最早是2002年王玨等對山蘭、杜鵑蘭和獨蒜蘭的性狀及紫外光譜特征峰進行了鑒別，發(fā)現(xiàn)山蘭在形狀上類似于杜鵑蘭，假鱗莖表面較粗糙，多留糙皮，中央環(huán)節(jié)微凹入;紫外光譜吸收峰有所差異，杜鵑蘭和獨蒜蘭一般在 274nm 以上，山蘭在 273nm 以下。2005年干國平等對山蘭與杜鵑蘭假鱗莖的顯微特征進行了比較，發(fā)現(xiàn)山蘭表皮細胞內側無厚壁細胞;維管束外側有纖維束;表皮細胞頂面觀垂周壁波狀彎曲，可見紋孔（而山慈菇表皮細胞頂面觀呈六邊形， 垂周壁平直）;草酸鈣針晶束較短， 長23～55μm;纖維成束，含硅質塊的細胞縱行排列其周圍。2009年劉苗等對杜鵑蘭、獨蒜蘭、麗江山慈菇、金果欖、白芨、山蘭藥品進行了蛋白質凝膠電泳鑒別，發(fā)現(xiàn)杜鵑蘭與獨蒜蘭有3條相似譜帶，其他4種植物蛋白質譜帶與它倆有差異。2009年趙旭對山蘭、山慈菇3種原植物及光慈菇、金果欖、麗江山慈菇在本草考證及性狀鑒別方面進行了總結，《本草拾遺》中記載只有杜鵑蘭被認為是山慈菇的植物來源，獨蒜蘭或云南獨蒜蘭并沒有被認為是山慈菇的原植物，后來在1990版《中國藥典》才認為獨蒜蘭和云南獨蒜蘭是山慈菇的植物來源。

3 山蘭栽培和繁殖技術研究

2010年張正海等首次對野生山蘭進行栽培馴化，對吉林省山區(qū)山蘭的物候期、繁殖方式等進行了研究，認為山蘭栽培底肥為豬糞、株距7cm、行距10cm較適宜。2012年王平平等對山蘭菌根真菌離體培養(yǎng)條件進行了研究，最適溫度為20℃;適宜光照為12h光照、12h黑暗;適宜pH5.0～6.0;最適碳源為葡萄糖;最適氮源為甘氨酸。2015年田新新等對山蘭的假鱗莖、葉片、花芽中的DNA質量進行研究，花芽提取的DNA 濃度最高，葉片次之，假鱗莖最低，葉片相對容易取材，應多采用葉片為實驗材料。2017年張正海等對山蘭種子無菌萌發(fā)及形態(tài)變化進行研究，認為山蘭種子在黑暗條件下萌發(fā)數最高，適宜萌發(fā)的培養(yǎng)基為MS+NAA0.5mg/L+6-BA 2.0mg/L。

4 山蘭化學成分研究

4.1 山蘭與杜鵑蘭、獨蒜蘭化學成分比較

有研究表明山蘭與獨蒜蘭有17 種共有成分，占山蘭化學成分的 32.7%，有9種山蘭高于獨蒜蘭;山蘭與杜鵑蘭有 12個共有成分，占山蘭化學成分總數的23.1%，有9種山蘭高于杜鵑蘭;山蘭、獨蒜蘭、杜鵑蘭三者共有10個共有成分，占山蘭化學成分總數的 19.2%，有6種山蘭高于獨蒜蘭和杜鵑蘭。

4.2 山蘭藥材的化學成分分析

山蘭藥材用石油醚、乙酸乙酯依次萃取分離出7種化合物，解析出5種單質，這5種物質在山慈菇原植物中也包含。山蘭多糖含量較高，對免疫低下小鼠有增強免疫作用。2017年甘甜等對山蘭化學物質進行分析，經萃取、分離、純化出21種化合物，最終鑒定出18種單體化合物，山蘭和山慈菇原植物共有成分為9種，其中卷瓣蘭蒽（cirrhopetalanthin）作為山慈菇主要的抗癌活性成分，在山蘭中也可分離得到，說明山蘭入藥具有治療多種疾病的潛在藥用價值，在一些藥理活性上具有作為山慈菇入藥的可行性。

4.3 山蘭抗氧化能力測定

山蘭具有極強的抗氧化能力和含有豐富的甾醇類化合物（具有降低人體膽固醇、消炎、抗?jié)儭⒎乐伟┌Y以及促進新陳代謝、抑制皮膚炎癥等作用）。山蘭正丁醇層、丙酮層、甲醇層提取物均具有較強的抗氧化活性，正丁醇層優(yōu)于丙酮層和甲醇層提取物的抗氧化活性，接近于Vc的表現(xiàn)。2018年張禹嫣研究了低溫對山蘭葉片結構及生理生化特性的影響，山蘭比其他植物的耐低溫能力強，過氧化氫酶可能是抗低溫過程起主要作用的抗氧化酶。山蘭較強的抗氧化能力，值得深入開發(fā)，可供天然抗氧化劑篩選提供選擇。

5 小結

山蘭植物分散分布，資源儲量銳減，繁殖困難。民間將山蘭入藥，具有治療多種疾病的潛在藥用價值，具有巨大的研究開發(fā)潛力。該植物具有特殊的生物學特性， 對其生長繁殖研究以及化學成分和藥理活性的分析，為進一步探索其生長規(guī)律、資源保護、藥用機制及其詳細機制研究提供可靠保證。由于山慈菇的3種原植物資源儲量減少，因此，合理的保護開發(fā)利用長白山區(qū)山蘭資源植物意義重大。

參考文獻

[1] 中國科學研中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學出版社，2004：564-566.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[3]國家中醫(yī)藥管理局.中華本草（第8卷）[M].上海：上海科學技術出版社，1999：744.

[4]江蘇醫(yī)學院.中藥大辭典（上冊）[M].上海：上?？茖W技術出版社，1986：202.

[5]黃成林，項艷，吳澤民，等.獨蒜蘭快繁技術的研究[J].安徽農業(yè)大學學報，2004，31（1）：100-103.

[6]廖婷婷.山慈菇（杜鵑蘭）快速繁殖技術的建立[D].成都：西南交通大學，2012.

[7]張正海，李愛民，魏盼盼.山慈菇應用現(xiàn)狀及研究方向[J].特產研究，2009（04）：74-77

[8]謝宗萬.中藥材品種論述（上冊）[M].第 2 版.上海：上?？茖W技術出版社，1990：376-383.

[9]玉玨，李永福，朱筱芳.山慈菇與其偽品山蘭的生藥學鑒定[J].中國藥業(yè)，2002，11（8）：64-65.

[10]干國平，劉焱文，段木盛.山慈菇偽品山蘭的顯微鑒別[J].中藥材，2005，28（8）：657-658.

[11]劉苗，杜森山，王海南，等.山慈菇及其偽品的蛋白質電泳鑒別[J].中藥材，2009，32（5）：698-699.

[12]趙旭.山慈菇的本草考證及偽品鑒別[J].中醫(yī)學報，2009，24（6）：40-41.

[13]張正海，李愛民，魏盼盼.野生山蘭馴化技術研究[J].中藥材，2010，33（7）：1045-1048.

[14]王平平，王玉嬌，陳旭輝，等.山蘭菌根真菌離體培養(yǎng)條件的研究[J].北方園藝，2012（09）：66-69.

[15]田新新，田義新，盛吉明，等.山蘭不同部位DNA提取的比較研究[J].人參研究，2015（04）：40-42.

[16]張正海，張悅，張亞玉，等.山蘭種子無菌萌發(fā)及形態(tài)變化研究[J].特產研究，2017（02）：5-8.

[17]魏偉.山蘭藥材的化學成分及其多糖免疫藥理活性研究[D].長春：吉林農業(yè)大學，2016.

[18]甘甜.山蘭化學成分及其體外抗氧化活性研究[D].長春：吉林農業(yè)大學，2017.

[19]甘甜，韓金秀，田義新.長白山珍稀藥材山蘭醋酸乙酯部位化學成分研究[J].中草藥，2017，48（15）：3051-3055.

[20]張禹嫣.低溫對東北地區(qū)瀕危植物山蘭（Oreorchis patens）葉片機構及生理生化特征的影響[D]. 沈陽：沈陽農業(yè)大學，2018.

作者簡介：

張命軍（1988-），男，工程師。研究方向：森林培育、中藥材栽培。