臨床實(shí)驗(yàn)室干式生化檢測項(xiàng)目測量不確定度的評(píng)估與分析 *

毛 瑞，曹三成，王 娟，王 斌，陳建梅，史劍飛

(西安市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，西安 710003)

測量不確定度是表征合理的賦予被測量之值的分散性，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)[1-2]。即處于重現(xiàn)性條件下某一概率可能得到的測量結(jié)果。不確定度首先在計(jì)量學(xué)領(lǐng)域普遍采用，近年來被引入臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[3]。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可要求中明確規(guī)定，臨床實(shí)驗(yàn)室“必要且可能時(shí)”應(yīng)確定檢驗(yàn)結(jié)果的測量不確定度[3]。

本研究依據(jù)北歐測試合作組織(Nordtest)準(zhǔn)則，利用實(shí)驗(yàn)室半年的室內(nèi)質(zhì)控和三年的室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)評(píng)估兒童醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室干式生化檢測項(xiàng)目的不確定度，以探討此法的實(shí)用性，為測量不確定度在兒童醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用提供實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集西安市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科2018年6～12月的干式生化檢測項(xiàng)目的兩個(gè)水平度室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)和國家衛(wèi)生健康委員會(huì)臨檢中心2017～2019年間連續(xù)7次干式化學(xué)室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.2 試劑和儀器

1.2.1 試劑：干式生化檢測項(xiàng)目葡萄糖(Glu)、尿素(BUN)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)、總蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、總膽紅素(TBIL)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)試劑均為美國強(qiáng)生公司。質(zhì)控品：強(qiáng)生配套質(zhì)控，批號(hào)為W5903(生理水平)和X5905(病理水平)。

1.2.2 儀器：美國強(qiáng)生vitros4600全自動(dòng)干式生化分析儀。

1.3 方法 嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作，室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)測定同患兒標(biāo)本。利用實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(LIS)收集檢測數(shù)據(jù)，分別計(jì)算不精密度和偏移帶來的相對(duì)不確定度，兩種不確定度相對(duì)應(yīng)的濃度應(yīng)在彼此接近的水平中進(jìn)行計(jì)算。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

1.4.3 合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：ucrel2=urel(RW)2+urel(bias)2

1.4.4 擴(kuò)展相對(duì)不確定度U=ucrel×K，K=2(95%可信區(qū)間)。

2 結(jié)果

2.1 與精密度相關(guān)的不確定度分量 見表1。檢測項(xiàng)目的長期室內(nèi)質(zhì)控是由不同的檢測人員，使用不同批號(hào)的干式試劑進(jìn)行檢測得出的數(shù)據(jù)。其相對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測量復(fù)現(xiàn)性(CVw%)，為與室內(nèi)不精密度相關(guān)的不確定度分量。

表1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測量復(fù)現(xiàn)性引入的相對(duì)測量不確定度分量

其中，GGT生理水平的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測量復(fù)現(xiàn)性引入的相對(duì)測量不確定度最低，ALT生理水平的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測量復(fù)現(xiàn)性引入的相對(duì)測量不確定度最高。

2.2 與偏移相關(guān)的不確定度分量 室間質(zhì)評(píng)的測定結(jié)果與回報(bào)靶值的偏移有正負(fù)之分，本研究采用絕對(duì)值平方后根據(jù)公式計(jì)算出實(shí)驗(yàn)室方法的相對(duì)偏移RMSbias%。室間質(zhì)評(píng)回報(bào)靶值的相對(duì)測量不確定度結(jié)果見表2。

2.3 合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度與擴(kuò)展相對(duì)不確定度 室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)和室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)計(jì)算得到的相對(duì)不確定度分量已分別算出，最后根據(jù)公式計(jì)算實(shí)驗(yàn)室干式生化項(xiàng)目的合成不確定度(ucrel)和擴(kuò)展不確定度(urel)，見表2。

表2 13項(xiàng)檢測項(xiàng)目偏移的相對(duì)測量不確定度分量及合成不確定度(%)

3 討論

臨床實(shí)驗(yàn)室的定量檢測項(xiàng)目較多，是臨床醫(yī)生做出診斷與治療決定的重要依據(jù)，尤其干式生化項(xiàng)目被臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛用于急診檢驗(yàn)，故向臨床醫(yī)生提供及時(shí)準(zhǔn)確的檢測結(jié)果十分重要。不確定度評(píng)定是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的要求，也是臨床實(shí)驗(yàn)室持續(xù)質(zhì)量改進(jìn)的需要。測量不確定度表述指南(guide to the expression of uncertainty in measurement，GUM)推薦的”模式辦法”是提出測量的數(shù)學(xué)模型，然后從下往上盡可能找出不確定度的來源的所有分組，計(jì)算每一組分的標(biāo)準(zhǔn)不確定度，然后綜合為合成不確定度。此方法操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且不同實(shí)驗(yàn)室測量結(jié)果很難達(dá)到一致，臨床實(shí)驗(yàn)室中難以實(shí)現(xiàn)[4]。Nordtest準(zhǔn)則提出用經(jīng)驗(yàn)辦法來代替模式辦法，包含盡可能多的測量不確定度來源。此方法所用的典型數(shù)據(jù)為偏移和精密度，而這些數(shù)據(jù)來自室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)，易于獲得，可以在臨床實(shí)驗(yàn)室中開展評(píng)定[5]。臨床實(shí)驗(yàn)室難以定量分析操作人員、儀器、方法、試劑等不確定度分量，這些因素能從長期的室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果中反映出來，因此可以用常規(guī)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)估計(jì)不確定度的一個(gè)分量。室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)反映了臨床實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度，多次的室間質(zhì)評(píng)結(jié)果能有效的顯示檢測質(zhì)量，也可作為評(píng)估實(shí)驗(yàn)室與方法偏移帶來的不確定度的一個(gè)分量[5-9]。在ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可中不確定度評(píng)定是必要的，而本研究選擇對(duì)13個(gè)干式生化項(xiàng)目進(jìn)行評(píng)價(jià)，具有更好的指導(dǎo)意義。

本研究中BUN的生理水平和TC的病理水平的擴(kuò)展相對(duì)不確定度不符合實(shí)驗(yàn)室目標(biāo)不確定度10.93%(9%)和10.76%(10%)，高于包安裕等[5]的研究9.66%，4.78%，這可能與我們的室間質(zhì)評(píng)中參與實(shí)驗(yàn)室數(shù)量較少有關(guān)，導(dǎo)致偏移的測量不確定度較大，合成后的擴(kuò)展不確定度較大。ALT的生理水平擴(kuò)展相對(duì)不確定度為17.41%(20%)，雖然符合本室的目標(biāo)不確定度，但由于與精密度相關(guān)的相對(duì)不確定度為7.94%較大[5，8-9]，提示應(yīng)從檢測人員、儀器、試劑和方法、所使用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品、環(huán)境溫濕度條件等方面入手，加強(qiáng)人員培訓(xùn)，逐步改進(jìn)檢驗(yàn)質(zhì)量從而縮小測量不確定度。

本方法未包括與分析前和分析后階段相關(guān)的測量不確定度分量，也未包括由于人群生物學(xué)變異而產(chǎn)生的測量不確定度[6]；張曉紅等[4]認(rèn)為在不確定度評(píng)定過程中應(yīng)注意不能忽略校準(zhǔn)品不確定度的影響，故如何量化檢驗(yàn)過程中的不確定來源，以更可靠的計(jì)算和表示測量不確定度，為臨床醫(yī)生提供重要參考，還需我們不斷探索。