糞便Hp抗原檢測(cè)對(duì)慢性萎縮性胃炎輔助診斷及病情評(píng)估的價(jià)值 *

肖蓉蓉，孫建斌

(武漢市第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430000)

慢性萎縮性胃炎(CAG)是胃鏡下以胃黏膜上皮、腺體萎縮/數(shù)目減少，可伴有幽門腺化生、腸腺化生的一種慢性胃部炎癥性疾病，患者是以腹部隱痛、噯氣、腹?jié)M等癥狀為主要臨床表現(xiàn)[1-2]。目前我國(guó)CAG發(fā)病率逐年遞增且呈年輕化趨勢(shì)，若不及時(shí)確診并對(duì)其進(jìn)行治療，可導(dǎo)致胃部病變進(jìn)展甚至誘發(fā)癌變。幽門螺桿菌(Hp)是在胃黏膜表面定植的一類細(xì)菌，在慢性淺表性胃炎向CAG轉(zhuǎn)變過(guò)程中Hp發(fā)揮直接作用[3]，故有學(xué)者認(rèn)為可將Hp感染作為CAG診斷的輔助指標(biāo)，對(duì)并發(fā)胃部不適及Hp陽(yáng)性的患者應(yīng)高度懷疑CAG存在。糞便Hp抗原(HpSA)檢測(cè)是一種非侵入性的Hp現(xiàn)癥感染診斷方法[4]，文中對(duì)比CAG患者及胃黏膜正常的健康志愿者糞便HpSA陽(yáng)性檢出率，評(píng)估HpSA陽(yáng)性對(duì)CAG病情的影響，以期明確糞便HpSA檢測(cè)在CAG輔助診斷及病情判斷中的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2015年9月～2018年1月間就診的患者118例經(jīng)胃鏡及組織病理檢查確診為慢性萎縮性胃炎，將其納入CAG組，同期進(jìn)行常規(guī)胃鏡體檢并確診健康的志愿者100例作為正常對(duì)照組。CAG組中男性63例，女性55例，年齡39～77周歲，平均年齡54.83±12.97周歲，正常對(duì)照組中男性51例，女性49例，年齡37～76周歲，平均年齡55.17±11.53周歲。兩組研究對(duì)象上述基線資料分布具有可比性(P>0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①胃鏡組織病理檢查確診是否并發(fā)胃部病變以及具體類型；②胃鏡檢查前3月未服用抗生素；③胃鏡檢查前1月內(nèi)未服用抑酸劑、胃黏膜保護(hù)劑等可能影響檢查結(jié)果的藥物；④本人簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①并發(fā)嚴(yán)重心肝腎不全，與無(wú)法耐受胃鏡的侵入性操作；②并發(fā)嚴(yán)重高血壓，嗜鉻細(xì)胞瘤等可能增加術(shù)中心血管意外發(fā)生者；③并發(fā)全身感染性疾?。虎懿l(fā)胃潰瘍、胃癌等其他胃部病變；⑤妊娠或者哺乳期女性。

1.2 試劑及儀器 HpSA免疫快檢卡試劑盒購(gòu)自北京九強(qiáng)生物科技公司(批號(hào)20160119)，免疫放射試劑盒購(gòu)自上海信裕生物科技有限公司(批號(hào)20170214)，酶聯(lián)免疫試劑盒購(gòu)自南京金益柏生物科技有限公司(批號(hào)20161218)。

1.3 方法

1.3.1 糞便Hp抗原檢測(cè)：留取兩組研究對(duì)象的糞便標(biāo)本，采用HpSA免疫快檢卡試劑盒測(cè)定其中Hp抗原表達(dá)情況。結(jié)果判定如下：陽(yáng)性(除質(zhì)控線粉色條帶，在檢測(cè)區(qū)出現(xiàn)粉色條帶)，陰性(只有質(zhì)控區(qū)有粉色條帶，檢測(cè)區(qū)無(wú)有色條帶出現(xiàn))，無(wú)效(質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)均無(wú)有色條帶)。

1.3.2 CAG病情相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)：抽取受檢者的空腹外周血標(biāo)本若干，分離血清后迅速凍存?zhèn)溆?。參照免疫放射試劑盒操作要求測(cè)定血清中胃腸激素：胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及胃泌素-17(G-17)的含量；參照酶聯(lián)免疫試劑盒操作說(shuō)明測(cè)定血清中炎癥因子：白介素-8(IL-8)、白介素-11(IL-11)、白介素-32(IL-32)及腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量。

2 結(jié)果

2.1 兩組HpSA陽(yáng)性檢出率比較 CAG組、正常對(duì)照組糞便標(biāo)本中HpSA陽(yáng)性率分別為82.20%(97/118)，8.0%(8/100)。CAG組患者糞便標(biāo)本中HpSA陽(yáng)性率顯著高于正常對(duì)照組，組間HpSA陽(yáng)性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=119.376，P=0.000)。

2.2 兩組胃腸激素與炎癥因子檢驗(yàn)結(jié)果比較 見表1。CAG組患者血清中PGⅠ的含量低于正常對(duì)照組，G-17水平高于正常對(duì)照組，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。CAG組與正常對(duì)照組間PGⅡ含量的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。CAG組患者血清中炎癥因子IL-8，IL-11，IL-32，TNF-α的含量高于正常對(duì)照組，組間炎癥因子含量的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表1 兩組胃腸激素與炎癥因子檢驗(yàn)結(jié)果比較

2.3 CAG組不同HpSA表達(dá)患者血清胃腸激素與炎癥因子含量結(jié)果比較 見表2。CAG組中HpSA陽(yáng)性患者血清中PGⅠ的含量低于HpSA陰性患者，G-17水平HpSA陽(yáng)性患者高于HpSA陰性患者，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CAG組中HpSA陽(yáng)性與HpSA陰性患者之間PGⅡ含量的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。CAG組中HpSA陽(yáng)性患者血清中IL-8，IL-11，IL-32和TNF-α的含量高于HpSA陰性患者，HpSA陽(yáng)性與HpSA陰性患者之間炎癥因子含量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表2 CAG組不同HpSA表達(dá)患者血清胃腸激素與炎癥因子含量結(jié)果比較

3 討論

CAG是臨床中最常見的癌前病變，目前胃鏡受檢者中CAG檢出率為7.5%～13.8%，而部分患者未經(jīng)胃鏡檢查，無(wú)法對(duì)其進(jìn)行明確診斷。提高CAG檢出率并采取積極的早期干預(yù)，是優(yōu)化患者病情與避免細(xì)胞癌變的最可靠方法。CAG發(fā)生的原因較多，其中Hp感染是最為重要的致病因素之一，JEONG等[5]的研究指出：根除Hp可有效減輕CAG患者的腸化生甚至消退胃癌前病變狀態(tài)，間接說(shuō)明Hp感染在CAG發(fā)生發(fā)展中扮演的重要角色。人胃上皮細(xì)胞間隔1～3天更新一次，脫落細(xì)胞及其表面定植的Hp隨糞便排出體外，故可檢測(cè)糞便HpSA以判斷患者胃黏膜中是否存在Hp定植[6-7]。文中CAG患者的糞便HpSA陽(yáng)性率高達(dá)82.20%，顯著高于正常對(duì)照組的8.0%，說(shuō)明CAG患者中絕大多數(shù)存在Hp感染。健康人群中存在8.0%的Hp感染，部分屬于Hp新近感染，尚未出現(xiàn)胃黏膜病變；還有一部分雖然是Hp感染但是因自身抵抗力較強(qiáng)，故胃鏡下胃黏膜表現(xiàn)正常，患者也無(wú)任何胃部不適感。上述結(jié)果說(shuō)明，對(duì)糞便HpSA陽(yáng)性者若并發(fā)存在胃部不適，應(yīng)早期行胃鏡檢查明確是否存在CAG等胃部病變，糞便HpSA檢測(cè)作為一種無(wú)創(chuàng)Hp篩查手段可用于提示CAG存在的可能性并很大程度增加臨床CAG檢出率。

CAG患者胃黏膜發(fā)生病變可直接導(dǎo)致多種胃腸激素表達(dá)量發(fā)生改變，是患者各種臨床不適出現(xiàn)的直接原因，也是直觀反映其病情嚴(yán)重程度。方小鶴等[8]的研究指出CAG患者存在胃泌素含量增加(主要是G-17)，隨胃黏膜萎縮程度加重而呈上升趨勢(shì)。G細(xì)胞分泌的胃泌素具有刺激胃酸分泌，營(yíng)養(yǎng)胃腸道黏膜，加強(qiáng)胃黏膜屏障等多重功能，Hp感染后不影響G細(xì)胞數(shù)量，且可促進(jìn)其基因表達(dá)以及激素釋放[9-10]。胃蛋白酶原是參與胃內(nèi)容物消化的主要消化酶，其中PGⅠ由胃底的主細(xì)胞、黏液頸細(xì)胞分泌，CAG患者胃腺體萎縮可導(dǎo)致其分泌減少[11-12]；PGⅡ的來(lái)源除了主細(xì)胞，黏液頸細(xì)胞外還包括賁門腺、胃竇幽門腺、十二指腸上段等，故CAG的胃黏膜萎縮對(duì)PGⅡ的分泌總量影響不大[13-14]。文中CAG患者血清中PGⅠ含量較健康人群低，G-17含量較健康人群高，而PGⅡ含量與健康人群差異不顯著，與上文所述機(jī)制吻合。文中CAG糞便HpSA陽(yáng)性患者血清中PGⅠ含量較陰性者進(jìn)一步下降，G-17含量較陰性者進(jìn)一步上升，而PGⅡ含量的變化不顯著，說(shuō)明Hp感染可加劇CAG的病理改變并進(jìn)一步導(dǎo)致胃腸激素分泌變化，換言之，并發(fā)Hp感染的CAG患者病情進(jìn)展更快，病情嚴(yán)重程度加劇。這一結(jié)果的出現(xiàn)，主要與Hp與胃上皮細(xì)胞直接接觸并引發(fā)其細(xì)胞增殖分化異常相關(guān)[15]，糞便HpSA陽(yáng)性者一般CAG病情嚴(yán)重程度高于陰性者，更應(yīng)引起重視。

CAG患者存在典型胃局部以及全身炎癥反應(yīng)，持續(xù)過(guò)量分泌的炎癥因子參與胃黏膜細(xì)胞損傷，也參與后續(xù)胃潰瘍、胃癌的發(fā)生[16]。IL-8，IL-11，IL-32和TNF-α在不同研究中被報(bào)道與CAG患者的病情進(jìn)展相關(guān)，其中IL-8，IL-11可促進(jìn)肝臟釋放CRP并產(chǎn)生炎癥級(jí)聯(lián)作用[17]；IL-32通過(guò)誘導(dǎo)P38MARK磷酸化途徑而促進(jìn)機(jī)體炎癥進(jìn)展；TNF-α發(fā)揮典型炎癥放大作用，其持續(xù)分泌可擴(kuò)大胃內(nèi)炎癥反應(yīng)[18]。文中CAG患者血清中上述炎癥因子的含量均較健康志愿者高，這與疾病現(xiàn)狀吻合。CAG患者中糞便HpSA陽(yáng)性者血清中IL-8，IL-11，IL-32和TNF-α的含量較陰性者高，說(shuō)明Hp感染在CAG炎癥反應(yīng)中產(chǎn)生了正向作用。Hp入侵機(jī)體后可促進(jìn)胃黏膜巨噬細(xì)胞增殖，增加白介素等炎癥因子的局部表達(dá)，同時(shí)可導(dǎo)致胃黏膜發(fā)生強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答，進(jìn)一步誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞遷移，浸潤(rùn)至組織局部[19]。同時(shí)，Hp可經(jīng)氧自由基(ROS)途徑激活NLRP3炎癥復(fù)合體，進(jìn)一步誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分泌多種炎癥因子以擴(kuò)大局部炎癥反應(yīng)[20]。上述兩點(diǎn)是糞便HpSA陽(yáng)性的CAG患者炎癥反應(yīng)更嚴(yán)重的內(nèi)在機(jī)制。

綜上所述，糞便HpSA陽(yáng)性是提示患者CAG存在的重要輔助指標(biāo)，CAG合并糞便HpSA陽(yáng)性者胃部病變更為嚴(yán)重。早期檢測(cè)糞便HpSA可作為CAG輔助診斷及病情評(píng)估的可靠指標(biāo)之一，值得在日后臨床實(shí)踐中推廣。CAG作為患病人群基數(shù)巨大的一類疾病，文中納入病例數(shù)仍不多，可能對(duì)數(shù)據(jù)獲得產(chǎn)生一定偏倚，有待后續(xù)大樣本研究進(jìn)一步展開明確。