• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛mtDNA Cytb遺傳多樣性及系統(tǒng)發(fā)育分析

    2019-10-14 02:25:44韓建林王玉濤
    生物技術(shù)進(jìn)展 2019年5期
    關(guān)鍵詞:喀喇昆侖野牦牛帕米爾

    李 靜, 王 莉, 道 敏, 胡 平, 肖 逸, 韓建林, 王玉濤*

    1.喀什大學(xué)生命與地理科學(xué)學(xué)院, 新疆維吾爾自治區(qū)葉爾羌綠洲生態(tài)與生物資源研究高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 新疆 喀什 844000;2.新疆維吾爾自治區(qū)塔什庫(kù)爾干縣畜牧獸醫(yī)局, 新疆 塔什庫(kù)爾干縣 845250

    牦牛(Bosgrunniens),屬哺乳綱(Mammalia),偶蹄目(Artiodactyla),反芻亞目(Ruminantia),???Bovidae)[1],主要分布在中國(guó)青藏高原以及與其相鄰近的亞高原地區(qū)[2~4],中國(guó)牦牛是世界牦牛數(shù)量最多[5~7]、品種資源最豐富的國(guó)家[8,9],中國(guó)牛品種志收錄的地方牦牛品種有5個(gè)[10],現(xiàn)國(guó)家鑒定的牦牛品種(類群)18個(gè),西藏藏族自治區(qū)主要的牦牛品種為帕里牦牛、嘉黎牦牛和斯布牦牛,青海省主要分布環(huán)湖牦牛和高原牦牛,四川省主要牦牛品種為九龍牦牛和麥洼牦牛,甘肅省主要牦牛品種為天祝牦牛和甘南牦牛,云南省牦牛品種為中甸牦牛,新疆維吾爾自治區(qū)已鑒定的牦牛品種為巴州牦牛,2014年后又陸續(xù)鑒定出四川省木里牦牛、金川牦牛、西藏藏族自治區(qū)類烏齊牦牛、青海省雪多牦牛、四川省昌臺(tái)牦牛;培育品種兩個(gè):包括青海省大通牦牛[11]和阿什旦牦牛[12~14],而以上品種資源均未涵蓋分布于新疆喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)的牦牛群體,是地方牦牛品種資源認(rèn)定分布上未涉及的種群。

    牦牛幾乎是集各種家畜產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)[15]、性能于一身的多功能動(dòng)物[16~18],是我國(guó)高寒地區(qū)的主要畜種和重要的生產(chǎn)資料[9,19,21]。對(duì)牦牛遺傳多樣性的研究有助于了解牦牛的分類地位及其品種的遺傳多樣性,本文對(duì)牦牛地方種群現(xiàn)狀進(jìn)行了分子遺傳學(xué)分析,對(duì)牦牛資源的合理保護(hù)與科學(xué)利用具有重要意義。

    在研究動(dòng)物遺傳多樣性分子標(biāo)記中,哺乳動(dòng)物線粒體細(xì)胞色素b(Cytb)基因是線粒體DNA中重要的蛋白編碼基因,它包含從種內(nèi)到種間乃至到科間的進(jìn)化遺傳信息[21],因而被廣泛地用來(lái)進(jìn)行脊椎動(dòng)物種上和種下系統(tǒng)進(jìn)化研究[22],被認(rèn)為是解決系統(tǒng)發(fā)育問(wèn)題最可信的線粒體DNA標(biāo)記之一。常國(guó)斌[23]對(duì)20頭巴州牦牛進(jìn)行研究分析發(fā)現(xiàn),巴州牦牛核苷酸多樣性相對(duì)貧乏,單倍型多樣性相對(duì)較豐富,推測(cè)巴州牦??赡艽嬖诓煌哪赶灯鹪?。王蘭萍等[24]在分析巴州牦牛時(shí)發(fā)現(xiàn),一部分巴州牦牛含野牦牛血統(tǒng),推測(cè)可能由于這部分牦牛與野牦牛有共同祖先,在漫長(zhǎng)進(jìn)化過(guò)程中仍保留相似序列。涂世英等[25]研究中甸牦牛發(fā)現(xiàn),中甸牦牛核苷酸多樣性較貧乏,而單倍型多樣性較豐富,推測(cè)中甸牦??赡艽嬖诓煌哪赶灯鹪矗到y(tǒng)發(fā)育樹(shù)結(jié)果表明中甸牦牛與野牦牛親緣關(guān)系較近,其次是美洲野牛,推測(cè)中甸牦牛在發(fā)展的過(guò)程中與野牦牛發(fā)生了基因交流,作者支持牦牛屬于牛亞科牦牛屬的觀點(diǎn)。胡丹[26]對(duì)新疆塔什庫(kù)爾干縣牦牛10個(gè)個(gè)體的mtDNA D-loop序列和mtDNACytb進(jìn)行分析,表明塔什庫(kù)爾干縣牦牛具有豐富的遺傳多樣性,支持牦牛和野牦牛劃分為牛亞科牦牛屬的觀點(diǎn),但該研究采集樣本少且地理覆蓋率低。以上研究均未對(duì)分布在喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)的牦牛群體進(jìn)行深入研究,因此該地區(qū)牦牛遺傳多樣性、遺傳分化及系統(tǒng)地位尚不清楚。

    牦牛在牛亞科中的分類地位一直是牛亞科動(dòng)物遺傳發(fā)育領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題,牦牛是隸屬于牛亞科中獨(dú)立的牦牛屬,還是與北美野牛隸屬于野牛屬,或是作為牛亞科牛屬牦牛亞屬仍存在熱議,到目前為止仍沒(méi)有確定的結(jié)論。姬秋梅[27]、李齊發(fā)[28]構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)發(fā)現(xiàn),牦牛與野牦牛、美洲野牛親緣關(guān)系較近,與牛屬關(guān)系較遠(yuǎn),李齊發(fā)[28]推測(cè)家牦牛與野牦牛的分化時(shí)間約為55萬(wàn)年前。楊萬(wàn)遠(yuǎn)[29]對(duì)野牦牛分析發(fā)現(xiàn),野牦牛具有豐富的遺傳多樣性,支持將牦牛劃分為牛亞科中一個(gè)獨(dú)立的牦牛屬,李齊發(fā)[28]也認(rèn)為家牦牛和野牦牛應(yīng)劃分為牛亞科獨(dú)立的牦牛屬。但常國(guó)斌[23]、錢(qián)建新[30]基于水牛屬的系統(tǒng)發(fā)育地位,認(rèn)為牦牛應(yīng)歸為牛屬中牦牛亞屬更合理。耿榮慶[31]牛亞科動(dòng)物親緣關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn),大額牛與瘤牛之間可能有共同的母系起源;家牛與準(zhǔn)野牛屬親緣關(guān)系相近、其次是牦牛屬,認(rèn)為牛亞科動(dòng)物應(yīng)劃分為4個(gè)屬,包括家牛屬、準(zhǔn)野牛屬、牦牛屬和亞洲水牛屬。

    喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)海拔高、常年積雪、氣候干旱、地勢(shì)險(xiǎn)峻,這里形成了天然的地理隔離帶[32,33],從而造成牦牛之間基因交流少,群體退化較為嚴(yán)重,物種資源保護(hù)與利用亟待解決。為進(jìn)一步明確喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛遺傳多樣性水平、遺傳分化和系統(tǒng)進(jìn)化地位,本文以分布在該區(qū)域的牦牛為研究對(duì)象,選擇mtDNACytb遺傳標(biāo)記,利用PCR直接測(cè)序和生物信息學(xué)方法,研究喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛mtDNACytb序列特征和遺傳多樣性水平,選擇GenBank中已提交的野牦牛及不同品種家牦牛序列,利用最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù),這將為該區(qū)域牦牛遺傳資源保護(hù)和利用提供理論依據(jù);利用牛亞科代表物種序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析,研究牦牛在牛亞科中的分類地位。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    本實(shí)驗(yàn)采集覆蓋疆喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)5個(gè)地方(塔什庫(kù)爾干縣、烏恰縣、阿克陶縣、阿合奇縣、葉城縣)牦牛群體血樣或肌肉組織樣本共計(jì)110個(gè)(表1)。血液樣本采取頸靜脈采血,ACD抗凝劑抗凝,-80℃超低溫保存;肌肉組織樣品取屠宰廠牦牛背最長(zhǎng)肌,編號(hào)后冷凍保存,運(yùn)輸途中保持低溫,儲(chǔ)存于喀什大學(xué)葉爾羌綠洲生態(tài)與生物資源研究高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-80℃冰箱,取部分樣品在100%乙醇中固定,分樣保存。

    1.2 基因組DNA提取

    血液和肌肉組織DNA提取方法參考經(jīng)典的苯酚-氯仿抽提法,在此基礎(chǔ)上,由于血液、肌肉組織中蛋白質(zhì)含量較多,本實(shí)驗(yàn)中對(duì)飽和酚、氯仿-異戊醇處理步驟適當(dāng)重復(fù)及處理時(shí)間適當(dāng)增加。

    表1 牦牛樣本采集的樣品信息Table 1 Sample information collected in this study.

    1.3 引物設(shè)計(jì)和PCR擴(kuò)增

    引物設(shè)計(jì)與合成:以GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中已提交的家牦牛的mtDNA序列(GenBank登陸號(hào):GQ464270.1、JQ692071.1)為參考序列,利用Primer Premier 5.0軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì),引物序列為:YAK mtDNAcytb-F:5′-GTTCCGTAGCCATAGCCG-3′, YAK mtDNAcytb-R: 5′-TTGAGTCTTAGGGAGGTT-3′。PCR目的產(chǎn)物的大小約為1 520 bp,引物由蘇州金唯智生物科技有限公司合成。

    PCR反應(yīng)體系:總體積50 μL,其中2×TaqPCR Mix 26 μL,上、下游引物(10 pmol/μL)各1 μL,DNA模板(100 ng/μL) 2 μL,ddH2O 20 μL。擴(kuò)增反應(yīng)條件:95℃預(yù)變性5 min;94℃變性30 s,51.5℃退火30 s,72℃延伸80 s,40個(gè)循環(huán);72℃延伸10 min,4℃保存。PCR產(chǎn)物經(jīng)2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),擴(kuò)增產(chǎn)物送蘇州金唯智生物科技有限公司測(cè)序。

    1.4 序列分析

    通過(guò)Chromasversion 2.6.6原始序列峰圖數(shù)據(jù)進(jìn)行人工校對(duì)。利用Clustal X軟件對(duì)所測(cè)定的mtDNACytb序列進(jìn)行同源序列比對(duì),用MEGA 5.2、MEGA 6.06統(tǒng)計(jì)序列堿基組成分析,用DNASP 5.10.01軟件進(jìn)行單倍型的推導(dǎo),并開(kāi)展遺傳多樣性的分析;最后將獲得的單倍型數(shù)據(jù)用MEGA 6.06軟件進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析,采用軟件NETWORK 4.1.0.9進(jìn)行單倍型的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和頻率分布分析。從GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)下載已提交的野牦牛及中國(guó)不同品種牦牛mtDNACytb的同源序列共82條,這些序列的來(lái)源信息見(jiàn)表2,同時(shí)下載42條牛亞科代表物種及綿羊、犀牛序列,序列的來(lái)源信息見(jiàn)表3,將GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中下載的序列進(jìn)行比對(duì)剪切為1 400 bp,便于后續(xù)數(shù)據(jù)分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 PCR擴(kuò)增

    對(duì)110個(gè)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛mtDNACytb區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增,用2.0%的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)(圖1)。擴(kuò)增產(chǎn)物條帶質(zhì)量較好,條帶清晰、明亮、單一,無(wú)非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,符合后續(xù)的PCR產(chǎn)物測(cè)序要求。

    2.2 牦牛mtDNA Cytb序列分析

    2.2.1牦牛mtDNACytb核苷酸組成 測(cè)序結(jié)果與參照序列GQ464270.1進(jìn)行比對(duì)、人工矯正后,將測(cè)序獲得的1 150 bp序列與參照序列GQ464270.1、JQ692071.1進(jìn)行對(duì)比和校對(duì)后,最后獲得長(zhǎng)約1 140 bp的核苷酸序列用于進(jìn)一步分析。

    表2 從GenBank 下載的牦牛mtDNA Cytb 序列信息Table 2 Information of mtDNA Cytb sequences in yak retrieved from GenBank.

    表3 從GenBank 下載的牛亞科代表物種mtDNA Cytb 序列信息Table 3 Information of mtDNA Cytb sequences of bovine subfamily representative species from GenBank.

    圖1 mtDNA Cytb全長(zhǎng)擴(kuò)增結(jié)果Fig.1 Results of full length amplification of mitochondrial mtDNA Cytb.

    利用Clustal X 軟件對(duì)所測(cè)定的mtDNACytb序列進(jìn)行同源序列比對(duì)后,通過(guò)MEGA5.2對(duì)mtDNACytb全序列長(zhǎng)度和堿基組成進(jìn)行分析(表4)。由表中可以看出這6個(gè)牦牛群體mtDNACytb中T、C、A和G 4種堿基的平均比例分別為26.2%(26.1%~26.2%)、29.0%(28.0%~29.1%)、31.7%和13.1%,在不同種群之間,mtDNACytb序列堿基差異不明顯。

    表4 5個(gè)牦牛群體mtDNA Cytb序列(1 140 bp)的堿基組成Table 4 Nucleotide composition in the mtDNA Cytb sequences (1 140bp) of five populations of yak

    2.2.2喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛mtDNACytb多態(tài)位點(diǎn)分析 用DNASP 5.10.01軟件對(duì)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)5個(gè)牦牛種群的110個(gè)樣品的mtDNACytb全序列分析共檢測(cè)出多態(tài)位點(diǎn)10個(gè),界定出單倍型5個(gè)(表5,圖2)。其中H1、H4為特有單倍型,單倍型H1為阿合奇縣牦牛特有單倍型包含4個(gè)個(gè)體;單倍型H4為烏恰縣牦牛特有單倍型僅有2個(gè)個(gè)體;單倍型H2、單倍型H5為優(yōu)勢(shì)單倍型,5個(gè)牦牛群體均包含單倍型H2,共35個(gè)個(gè)體,單倍型頻率為31.82%;5個(gè)牦牛群體也均含有單倍型H5,共65個(gè)個(gè)體,單倍型頻率為59.09%;單倍型H3為3個(gè)牦牛群體共享單倍型,共有6個(gè)個(gè)體含1個(gè)阿克陶縣牦牛、1個(gè)烏恰縣牦牛、4個(gè)塔什庫(kù)爾干縣牦牛。

    表5 5個(gè)牦牛群體中5個(gè)線粒體mtDNA Cytb單倍型(1 140 bp )在各群體中的分布Table 5 Distribution of five mitochondrial mtDNA Cytb haplotypes (1 140 bp) in five yak populations.

    圖2 5個(gè)牦牛群體5個(gè)線粒體mtDNA Cytb單倍型(1 140 bp )中10個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的分布Fig.2 Distribution of 10 polymorphic loci in 5 mitochondrial mtDNA Cytb haplotypes (1 140 bp) in 5 yak populations.

    2.2.3喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)mtDNACytb核苷酸多樣性和單倍型多樣性分析 用DNASP5.10.01軟件對(duì)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛5個(gè)牦牛群體的110個(gè)個(gè)體的單倍型多樣性和核苷酸多樣性進(jìn)行系統(tǒng)分析(表6),發(fā)現(xiàn)總的平均單倍型多樣性(Hd)為0.566±0.001 23,平均核苷酸多樣性(π)為0.002 95,平均核苷酸差異性(K)為3.363。

    2.2.4基于mtDNACytb序列分析牦牛在牛亞科中的分類地位 為了揭示喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛群體與中國(guó)地方牦牛品種的差異情況和遺傳

    表6 5個(gè)牦牛群體mtDNA Cytb 序列遺傳多樣性相關(guān)參數(shù)的分析結(jié)果Table 6 Results of genetic diversity parameters of mtDNA Cytb in the five populations of yak.

    關(guān)系,為喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛的品種鑒定提供理論基礎(chǔ),我們進(jìn)一步對(duì)提交到GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的不同地區(qū)牦牛品種的mtDNACytb序列進(jìn)行比對(duì)分析和聚類分析(圖3,表7,圖4)。

    通過(guò)DNASP 5.10.01軟件對(duì)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛與野牦牛及中國(guó)10個(gè)牦牛品種和西藏地區(qū)牦牛mtDNACytb(1140 bp)共82條序列檢測(cè)出35個(gè)多態(tài)位點(diǎn),共獲得24個(gè)單倍型(表7,圖4)。單倍型H2、H3、H4、H5為優(yōu)勢(shì)單倍型,其中單倍型H2含有97個(gè)個(gè)體,占個(gè)體總數(shù)的50%;每個(gè)家牦牛品種中均含有1個(gè)特有單倍型,野牦牛含有7個(gè)特有單倍型;基于各種群間的遺傳距離構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)顯示喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛與野牦牛親緣關(guān)系較近,與巴州牦牛親緣關(guān)系較遠(yuǎn)(圖3)。

    2.2.5基于mtDNACytb序列分析牦牛在牛亞科中的分類地位 為了明確牦牛在牛亞科中的分類地位,我們進(jìn)一步對(duì)提交到GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的牦牛mtDNACytb序列進(jìn)行了比對(duì),建樹(shù)分析牦牛的分類地位,將110個(gè)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛和下載的82條牦牛序列進(jìn)行單倍型分析后,將牦牛形成的24個(gè)單倍型與牛亞科代表物種42個(gè)序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)(圖5),結(jié)果表明:牦牛首先和美洲野牛聚類,形成的分支與歐洲野牛聚類,再與印度野牛、大額牛、林牛、爪哇野牛及普通牛與原牛、瘤牛形成的分支聚為一類,最后和水牛屬相聚。

    3 討論

    本研究測(cè)定mtDNACytb基因全長(zhǎng)為1 140 bp,牦牛mtDNACytb基因不存在長(zhǎng)度變異;T、C、A和G堿基的平均含量分別為26.2%、29.0%、31.7%、13.1%,其中A+T堿基含量(57.9%)大于C+G堿基的含量(42.1%),表現(xiàn)出了堿基的偏倚性;共發(fā)現(xiàn)10個(gè)多態(tài)位點(diǎn):均為轉(zhuǎn)換,與胡丹[26]研究10頭塔什庫(kù)爾干縣牦牛分析共得到3個(gè)SNP 位點(diǎn)變異類型結(jié)果一致,而與涂世英[25]分析中甸牦牛mtDNACytb基因發(fā)現(xiàn)3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)及楊萬(wàn)遠(yuǎn)[29]對(duì) 6頭野牦牛 mtDNACytb基因研究發(fā)現(xiàn) 13 處變異位點(diǎn)的變異類型(轉(zhuǎn)換、顛換)存在差異;表明喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛mtDNACytb基因SNP 位點(diǎn)較豐富,不同牦牛品種的SNP位點(diǎn)變異類型存在差異。

    表7 12個(gè)牦牛群體24個(gè)mtDNA Cytb 單倍型(1 140 bp )在各群體中的分布Table 7 Distribution of 24 mtDNA Cytb haplotypes (1 140 bp) from 12 yak populations in each population.

    圖4 12個(gè)牦牛群體24個(gè)線粒體mtDNA Cytb單倍型(1 140 bp )中35個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的分布Fig.4 Distribution of 35 polymorphic loci in 24 mitochondrial mtDNA Cytb haplotypes (1 140 bp) from 12 yak populations.

    圖5 牛亞科代表物種間mtDNA Cytb序列系統(tǒng)進(jìn)化發(fā)育聚類圖Fig.5 Clustering gram of development and evolution between species of bovine subfamily based on mtDNA Cytb sequence.

    本研究喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)110個(gè)牦牛中共界定出5個(gè)單倍型,平均單倍型多樣性(Hd)為0.566±0.001 23,平均核苷酸多樣性(π)為0.002 95,平均核苷酸差異性(K)為3.363。與涂世英[25]研究的中甸牦牛、常洪等[24]分析的巴州牦牛、胡丹[26]塔什庫(kù)爾干縣牦牛mtDNACytb的研究結(jié)果相比,平均單倍型多樣性(Hd)、平均核苷酸多樣性(π)均較高;但與姬秋梅[27]研究測(cè)定的西藏牦牛mtDNACytb基因相比平均單倍型多樣性(Hd)、平均核苷酸多樣性(π)均較低。說(shuō)明西藏牦牛遺傳多樣性最為豐富,喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛遺傳多樣性較為豐富,而中甸牦牛、巴州牦牛遺傳多樣性較弱;西藏牦牛豐富的遺傳多樣性與西藏是牦牛起源的觀點(diǎn)相符;喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛遺傳多樣性較為豐富,但基于喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)為天然的地理隔離帶,推測(cè)可能是由于最初遷徙至喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)的牦牛含不同起源有關(guān)。

    本研究中牦牛與美洲野牛親緣關(guān)系較近,與普通牛、原牛及瘤牛親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。前期基于mtDNA D-loop區(qū)序列研究,郭松長(zhǎng)[34]認(rèn)為牦牛應(yīng)與草原野牛、美洲野牛合為一個(gè)屬,而不是獨(dú)立為牦牛屬;李齊發(fā)[1]、鐘金城[35]支持將牦牛、野牦牛劃分為牛亞科中牦牛屬的觀點(diǎn);基于野牦牛線粒體全基因組研究,鐘金城[36]認(rèn)為牦牛屬應(yīng)為牛亞科中的一個(gè)獨(dú)立屬;基于mtDNACytb區(qū)序列研究,李齊發(fā)[26]也認(rèn)為家牦牛和野牦牛應(yīng)劃分為牛亞科獨(dú)立的牦牛屬;常國(guó)斌[23]、錢(qián)建新[30]基于水牛屬的系統(tǒng)發(fā)育地位,認(rèn)為牦牛應(yīng)歸為牛屬中牦牛亞屬更合理。本研究認(rèn)為牦牛應(yīng)屬于牛亞科中獨(dú)立的牦牛亞屬。

    本研究首次以喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛為研究對(duì)象,對(duì)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛110個(gè)個(gè)體的mtDNACytb基因進(jìn)行了測(cè)序,序列長(zhǎng)均為1 140 bp,形成5種單倍型,含10個(gè)多態(tài)位點(diǎn),核苷酸變異類型僅為轉(zhuǎn)換,平均單倍型多樣性(Hd)、平均核苷酸多樣性(π)較高,其群體變異程度高,遺傳多樣性較為豐富,系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)表明與野牦牛親緣關(guān)系較近,與其他地方品種牦牛親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。

    喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛遺傳背景獨(dú)特,具有作為我國(guó)優(yōu)良地方牦牛品種的遺傳資源的潛質(zhì),應(yīng)加大對(duì)喀喇昆侖-帕米爾地區(qū)牦牛品種優(yōu)良資源的保護(hù)。

    猜你喜歡
    喀喇昆侖野牦牛帕米爾
    帕米爾的哨兵
    帕米爾風(fēng)情
    帕米爾之夢(mèng)
    致喀喇昆侖戍邊衛(wèi)士
    英雄雖已離去,精神永駐邊關(guān)!
    帕米爾女郎
    喀喇昆侖中生代鉛鋅礦控礦因素 及成礦演化模式分析
    瀕危野牦牛的分布、種群、致危因素及保育
    野牦牛 可可西里的最后守望者
    野牦牛 荒原的沉默者
    赤兔流量卡办理| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 成年av动漫网址| 晚上一个人看的免费电影| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 9191精品国产免费久久| 国产片内射在线| 成人国语在线视频| av免费观看日本| 国产熟女午夜一区二区三区| 五月伊人婷婷丁香| 欧美xxⅹ黑人| 九草在线视频观看| 人体艺术视频欧美日本| 久久女婷五月综合色啪小说| 女人久久www免费人成看片| 超色免费av| 97在线视频观看| 国产av国产精品国产| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲第一青青草原| 999精品在线视频| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲人成电影观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 日本wwww免费看| 精品一区二区免费观看| 黑人猛操日本美女一级片| 精品少妇内射三级| 一二三四在线观看免费中文在| 一级爰片在线观看| 丝袜美腿诱惑在线| 国产男人的电影天堂91| 一二三四在线观看免费中文在| 精品一品国产午夜福利视频| 久久久亚洲精品成人影院| 一级片'在线观看视频| av不卡在线播放| 在线观看人妻少妇| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久久久视频综合| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 老女人水多毛片| 免费高清在线观看日韩| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 午夜久久久在线观看| 午夜日韩欧美国产| 亚洲精品国产av成人精品| 免费黄色在线免费观看| 国产精品蜜桃在线观看| 乱人伦中国视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久鲁丝午夜福利片| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 999久久久国产精品视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 国产毛片在线视频| 成年美女黄网站色视频大全免费| 永久网站在线| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 人成视频在线观看免费观看| freevideosex欧美| 中文欧美无线码| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲成国产人片在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲 欧美一区二区三区| av国产久精品久网站免费入址| 一本久久精品| 2021少妇久久久久久久久久久| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久精品久久久久久久性| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产免费又黄又爽又色| 最新的欧美精品一区二区| 中文字幕最新亚洲高清| 成年av动漫网址| 久久国产精品大桥未久av| 99久久中文字幕三级久久日本| 又黄又粗又硬又大视频| 蜜桃在线观看..| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产成人免费无遮挡视频| 久久久久久人妻| 久久女婷五月综合色啪小说| www.精华液| 一级a爱视频在线免费观看| 1024香蕉在线观看| 免费在线观看黄色视频的| av卡一久久| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 一级片免费观看大全| 又大又黄又爽视频免费| 午夜日韩欧美国产| 日韩精品免费视频一区二区三区| 91国产中文字幕| 91在线精品国自产拍蜜月| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲av电影在线进入| 一本色道久久久久久精品综合| 五月天丁香电影| 午夜免费观看性视频| 丝袜人妻中文字幕| av国产精品久久久久影院| 国产在线一区二区三区精| av.在线天堂| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产精品av久久久久免费| 各种免费的搞黄视频| 成年人午夜在线观看视频| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲av成人精品一二三区| 91在线精品国自产拍蜜月| 乱人伦中国视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 91精品三级在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 成人毛片60女人毛片免费| 最近2019中文字幕mv第一页| 三级国产精品片| 九九爱精品视频在线观看| 美女中出高潮动态图| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 桃花免费在线播放| 色婷婷av一区二区三区视频| 搡老乐熟女国产| 亚洲成人手机| 九色亚洲精品在线播放| 老汉色∧v一级毛片| h视频一区二区三区| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 精品少妇久久久久久888优播| 久久综合国产亚洲精品| 女性生殖器流出的白浆| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日本免费在线观看一区| 日本午夜av视频| 欧美中文综合在线视频| 久久精品久久精品一区二区三区| av女优亚洲男人天堂| 久久精品国产a三级三级三级| 91精品三级在线观看| 午夜日本视频在线| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 曰老女人黄片| av线在线观看网站| kizo精华| 日本免费在线观看一区| 香蕉国产在线看| 一级毛片 在线播放| 综合色丁香网| 高清不卡的av网站| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产 精品1| 一个人免费看片子| 99国产精品免费福利视频| av网站免费在线观看视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 日韩中字成人| 国产高清国产精品国产三级| av不卡在线播放| 秋霞在线观看毛片| 黄色 视频免费看| 免费在线观看完整版高清| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲一区中文字幕在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 日本91视频免费播放| www.av在线官网国产| 香蕉国产在线看| 天堂8中文在线网| 国产成人aa在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 一区二区三区四区激情视频| 妹子高潮喷水视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 黄片无遮挡物在线观看| 97在线视频观看| 亚洲四区av| 十八禁高潮呻吟视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美最新免费一区二区三区| 18在线观看网站| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| av电影中文网址| 高清在线视频一区二区三区| 不卡视频在线观看欧美| 青草久久国产| 男女边吃奶边做爰视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产成人欧美| av视频免费观看在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 色吧在线观看| 色播在线永久视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 亚洲第一青青草原| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲国产av影院在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 飞空精品影院首页| 国产免费又黄又爽又色| 麻豆av在线久日| 国产男女内射视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 日韩精品免费视频一区二区三区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 欧美中文综合在线视频| 国产精品成人在线| 国产人伦9x9x在线观看 | 国产在线视频一区二区| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久韩国三级中文字幕| 91成人精品电影| 电影成人av| 校园人妻丝袜中文字幕| 十八禁高潮呻吟视频| 天天操日日干夜夜撸| 免费av中文字幕在线| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲第一青青草原| 精品福利永久在线观看| 综合色丁香网| 久久久久久人人人人人| 久久鲁丝午夜福利片| 久久久久久伊人网av| 人妻少妇偷人精品九色| 国产探花极品一区二区| 日韩大片免费观看网站| 老司机亚洲免费影院| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久99一区二区三区| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲伊人色综图| 边亲边吃奶的免费视频| 久久97久久精品| 久久精品国产亚洲av天美| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品人妻久久久影院| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产日韩欧美在线精品| 日本免费在线观看一区| √禁漫天堂资源中文www| 久久精品久久久久久久性| 最近中文字幕2019免费版| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久久 成人 亚洲| 成年女人在线观看亚洲视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 丰满乱子伦码专区| 最近2019中文字幕mv第一页| 免费看不卡的av| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 欧美精品亚洲一区二区| 五月开心婷婷网| 夫妻午夜视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| a级毛片在线看网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 天天影视国产精品| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 纯流量卡能插随身wifi吗| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产av国产精品国产| 成年动漫av网址| 国产黄频视频在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 青春草国产在线视频| videosex国产| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 女人久久www免费人成看片| 久久人妻熟女aⅴ| 国产97色在线日韩免费| 99久国产av精品国产电影| 欧美在线黄色| 老鸭窝网址在线观看| 久久99精品国语久久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 波野结衣二区三区在线| 中国三级夫妇交换| 亚洲成人一二三区av| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美精品国产亚洲| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品av久久久久免费| 国产高清国产精品国产三级| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产国语露脸激情在线看| 激情五月婷婷亚洲| 久久久久久免费高清国产稀缺| 欧美日韩综合久久久久久| 777米奇影视久久| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产老妇伦熟女老妇高清| av线在线观看网站| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产极品天堂在线| 亚洲精品国产色婷婷电影| 婷婷色综合www| 精品一区二区三卡| 成人免费观看视频高清| 亚洲欧洲国产日韩| 热re99久久精品国产66热6| 午夜日本视频在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | 天天操日日干夜夜撸| 久久国内精品自在自线图片| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲av电影在线进入| 午夜福利视频精品| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲欧美一区二区三区久久| 大陆偷拍与自拍| 亚洲国产欧美网| 成人免费观看视频高清| 久久午夜福利片| 黄色配什么色好看| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产在线视频一区二区| 国产成人免费无遮挡视频| www.av在线官网国产| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲在久久综合| 我的亚洲天堂| 国产成人精品福利久久| 久久韩国三级中文字幕| 黑丝袜美女国产一区| 91精品伊人久久大香线蕉| 黄色配什么色好看| 99久久综合免费| 亚洲中文av在线| 久久青草综合色| 不卡视频在线观看欧美| 卡戴珊不雅视频在线播放| 美女高潮到喷水免费观看| 黄色毛片三级朝国网站| 黑丝袜美女国产一区| 精品国产国语对白av| 性高湖久久久久久久久免费观看| 91精品国产国语对白视频| 美女高潮到喷水免费观看| 中文字幕av电影在线播放| 国产成人精品福利久久| 9191精品国产免费久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 不卡av一区二区三区| 亚洲av日韩在线播放| 99久国产av精品国产电影| 久久99一区二区三区| 亚洲国产色片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| a 毛片基地| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 少妇 在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 国产精品久久久久久精品古装| 成人手机av| 久热久热在线精品观看| 精品国产一区二区久久| 国产日韩欧美亚洲二区| 777米奇影视久久| 日韩电影二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | av天堂久久9| 国产毛片在线视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产一区二区激情短视频 | 在线看a的网站| 女性被躁到高潮视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 在现免费观看毛片| 久久久久久久久久久久大奶| 国产亚洲一区二区精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产97色在线日韩免费| 在线观看免费视频网站a站| 欧美另类一区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 午夜福利在线免费观看网站| av不卡在线播放| 精品福利永久在线观看| 青春草国产在线视频| 日本色播在线视频| 高清在线视频一区二区三区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 日韩一区二区视频免费看| 精品一区在线观看国产| 欧美人与善性xxx| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲国产日韩一区二区| 天堂8中文在线网| 少妇被粗大的猛进出69影院| 黄色怎么调成土黄色| 欧美黄色片欧美黄色片| www.熟女人妻精品国产| 成人午夜精彩视频在线观看| 黄片播放在线免费| 伦理电影大哥的女人| 美国免费a级毛片| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲熟女精品中文字幕| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 成年女人毛片免费观看观看9 | 日韩 亚洲 欧美在线| 一区二区三区精品91| 飞空精品影院首页| 99久久中文字幕三级久久日本| 日韩电影二区| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 五月开心婷婷网| 最近手机中文字幕大全| 1024视频免费在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲综合色惰| 成年女人在线观看亚洲视频| 亚洲人成电影观看| 亚洲精品在线美女| 亚洲美女视频黄频| 亚洲第一av免费看| 国产视频首页在线观看| 国产在线视频一区二区| 亚洲欧美一区二区三区久久| 交换朋友夫妻互换小说| 久久精品久久久久久久性| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产在线视频一区二区| 一区二区三区乱码不卡18| 伊人亚洲综合成人网| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲欧洲国产日韩| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲国产欧美网| 国产成人精品无人区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲第一av免费看| 丰满迷人的少妇在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| av免费在线看不卡| 另类亚洲欧美激情| 91在线精品国自产拍蜜月| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产成人aa在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 国产一区有黄有色的免费视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 人人澡人人妻人| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 丝袜人妻中文字幕| 丝瓜视频免费看黄片| 2018国产大陆天天弄谢| 午夜福利,免费看| av国产久精品久网站免费入址| 美女大奶头黄色视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 老鸭窝网址在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久欧美国产精品| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产一级毛片在线| 日韩三级伦理在线观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产成人免费无遮挡视频| 男女下面插进去视频免费观看| 蜜桃国产av成人99| 一级毛片 在线播放| 久久毛片免费看一区二区三区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 男女下面插进去视频免费观看| 婷婷成人精品国产| 中国三级夫妇交换| 久久av网站| av电影中文网址| 亚洲人成电影观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产精品一区二区在线不卡| 大陆偷拍与自拍| 韩国av在线不卡| 精品久久久久久电影网| 赤兔流量卡办理| 亚洲成人手机| 亚洲精品视频女| av线在线观看网站| 国产亚洲最大av| av有码第一页| 亚洲欧美一区二区三区国产| 一区二区av电影网| 久久久欧美国产精品| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲av国产av综合av卡| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 丰满乱子伦码专区| 成人亚洲欧美一区二区av| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲av成人精品一二三区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲精品自拍成人| 免费黄网站久久成人精品| 欧美国产精品一级二级三级| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产成人91sexporn| 午夜免费男女啪啪视频观看| 精品久久久精品久久久| 黄片无遮挡物在线观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 边亲边吃奶的免费视频| 自线自在国产av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 99国产综合亚洲精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 一级毛片 在线播放| 国产成人一区二区在线| 热99国产精品久久久久久7| 成人黄色视频免费在线看| 国产淫语在线视频| 啦啦啦在线免费观看视频4| 伊人亚洲综合成人网| av线在线观看网站| 精品第一国产精品| 男女免费视频国产| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产精品免费大片| 欧美最新免费一区二区三区| 韩国高清视频一区二区三区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产一区二区激情短视频 | 欧美日韩一级在线毛片| 精品人妻在线不人妻| 久久精品国产综合久久久| 一区二区三区精品91| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲av国产av综合av卡| 欧美av亚洲av综合av国产av | 男人舔女人的私密视频| 男女边吃奶边做爰视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲av综合色区一区| 高清av免费在线| 国产精品一区二区在线观看99| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 一本色道久久久久久精品综合| 成年人免费黄色播放视频| 久久精品夜色国产| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美激情极品国产一区二区三区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久久欧美国产精品| 久久国内精品自在自线图片| 免费在线观看黄色视频的| 国产不卡av网站在线观看| 99久国产av精品国产电影| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲,欧美精品.| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲欧洲国产日韩| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲国产色片| 美女国产视频在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 一级a爱视频在线免费观看| 日韩大片免费观看网站| 美女高潮到喷水免费观看|