不同濃度6-BA對(duì)白芨叢芽誘導(dǎo)的影響

李云?！『谟刑m　陳麗華

摘要? ? 試驗(yàn)采用MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，在添加0.5 mg/L NAA的情況下，分別添加不同濃度梯度的6-BA（0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L），研究不同濃度6-BA對(duì)白芨叢芽誘導(dǎo)增殖的影響。結(jié)果表明，6-BA濃度變化對(duì)白芨叢芽的誘導(dǎo)增殖具有顯著的影響，在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，白芨試管苗叢芽增殖數(shù)與6-BA濃度成正相關(guān)，而增殖叢芽的平均株高和平均葉寬則與6-BA濃度成負(fù)相關(guān);當(dāng)6-BA濃度為2.0 mg/L時(shí)，對(duì)白芨試管苗叢芽誘導(dǎo)增殖的效果最好，具體表現(xiàn)為試管苗叢芽的增殖數(shù)量多且較健壯。

關(guān)鍵詞? ? 白芨;6-BA濃度;組織培養(yǎng);叢芽誘導(dǎo)

中圖分類號(hào)? ? S567.239? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼? ? A

文章編號(hào)? ?1007-5739（2019）15-0077-01

白芨（Bletilla striata（Thunb）Reichb. f.）是一種多年生蘭科草本植物，又名明白芨、紫蘭根、甘根、白給等[1]。我國(guó)白芨資源主要分布在陜西、河南、四川、云南等地，有研究認(rèn)為，產(chǎn)于云南、四川的白芨質(zhì)量最好[2]。白芨是一種傳統(tǒng)的中藥，其地下假鱗莖是白芨的主要藥用部位，一般將白芨假鱗莖進(jìn)行干燥后入藥，主要藥用功效是治療各類外傷、腫瘤等，其含有的黏質(zhì)多糖具有一定的抗癌作用[3]。另外，白芨假鱗莖具有很好的黏性，在工業(yè)上也可用作糊料[4]。

近年來，由于人們對(duì)野生白芨的過度采挖，導(dǎo)致野生白芨資源數(shù)量急劇下降。為了滿足生產(chǎn)和市場(chǎng)需求，目前多采用組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行白芨種苗的快速繁育。魯光耀等[5]對(duì)白芨組織培養(yǎng)快速繁殖體系進(jìn)行了研究，采用MS液體懸浮培養(yǎng)的方式對(duì)白芨種苗進(jìn)行快速繁殖。葉? 靜等[6]在白芨種子無(wú)菌萌發(fā)及組織培養(yǎng)試管快繁體系建立研究中認(rèn)為，MS+1.0 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA培養(yǎng)基適合白芨叢芽的增殖。李慧敏等[7]則在試驗(yàn)研究后得出了MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA+有機(jī)附加物適合白芨假鱗莖誘導(dǎo)的結(jié)論。

本試驗(yàn)在MS+0.5 mg/L NAA培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，探究不同濃度6-BA（0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L）對(duì)白芨叢芽誘導(dǎo)增殖效果的影響，以期從中篩選出與該濃度NAA協(xié)同配合效果較好的6-BA濃度。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 試驗(yàn)材料

供試材料為實(shí)驗(yàn)室保存的白芨基礎(chǔ)苗。

1.2? ? 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在MS+NAA 0.5 mg/L培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，根據(jù)添加6-BA濃度的不同設(shè)4個(gè)處理，分別為添加6-BA 0.5 mg/L（B1）、1.0 mg/L（B2）、1.5 mg/L（B3）和2.0 mg/L（B4）。將實(shí)驗(yàn)室保存的白芨基礎(chǔ)苗均勻切分成每叢5苗的小叢，接種至4個(gè)不同濃度6-BA處理的培養(yǎng)基中，每處理接種5瓶（即5次重復(fù)），每瓶接入5小叢。把接種好的培養(yǎng)瓶置于溫度21～23 ℃、光照強(qiáng)度1 500～2 000 lx、光照時(shí)間12 h/d的培養(yǎng)室中培養(yǎng)。

1.3? ? 調(diào)查統(tǒng)計(jì)

培養(yǎng)過程中，每周觀察白芨叢芽生長(zhǎng)情況。培養(yǎng)至第45天時(shí)，統(tǒng)計(jì)每個(gè)處理5瓶試管苗叢芽的增殖和生長(zhǎng)情況（增殖芽數(shù)、平均株高、平均葉寬等），并進(jìn)行生物統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2? ? 結(jié)果與分析

2.1? ? 不同濃度6-BA對(duì)白芨叢芽增殖的影響

由表1可知，隨著6-BA濃度的升高，白芨試管苗叢芽增殖倍數(shù)逐漸增大，當(dāng)6-BA濃度為2.0 mg/L時(shí)，白芨試管苗叢芽增殖倍數(shù)達(dá)到最大，為7.12倍。經(jīng)方差分析得出，處理B4與處理B1、B2、B3之間芽數(shù)差異達(dá)到極顯著水平，處理B3與處理B2、B1之間芽數(shù)差異也達(dá)到極顯著水平，處理B2和處理B1之間芽數(shù)差異不顯著。說明在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，白芨試管苗叢芽的增殖數(shù)與6-BA濃度成顯著正相關(guān)。當(dāng)6-BA濃度為2.0 mg/L時(shí)，白芨試管苗叢芽增殖最多，而且此時(shí)的試管苗叢芽仍較健壯。因此，就白芨叢芽增殖這一指標(biāo)而言，與NAA 0.5 mg/L配合的適宜6-BA濃度為2.0 mg/L。

2.2? ? 不同濃度6-BA對(duì)白芨叢芽株高的影響

由表2可知，隨著6-BA濃度的升高，白芨試管苗叢芽的平均株高逐漸降低。經(jīng)方差分析可知，不同濃度6-BA處理對(duì)白芨試管苗叢芽株高的影響差異顯著。進(jìn)行多重比較發(fā)現(xiàn)，處理B1與處理B3、B4之間差異極顯著，與處理B2之間差異顯著;處理B2與處理B4之間差異極顯著，與處理B3之間差異不顯著;處理B3與處理B4之間差異不顯著。說明處理B4（6-BA濃度為2.0 mg/L）白芨試管苗叢芽較矮壯，沒有出現(xiàn)徒長(zhǎng)等現(xiàn)象。

2.3? ? 不同濃度6-BA對(duì)白芨叢芽葉寬的影響

由表3可知，白芨試管苗叢芽平均葉寬與試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)6-BA的濃度成負(fù)相關(guān)，即隨著6-BA濃度的升高，白芨試管苗的平均葉寬逐漸變窄。經(jīng)過方差分析可得出，各處理間白芨試管苗平均葉寬差異顯著。經(jīng)多重比較后可得出，處理B1與處理B2、B3、B4之間有極顯著差異;處理B2與（下轉(zhuǎn)第80頁(yè)）

處理B4、處理B3與處理B4之間有極顯著差異;處理B2與處理B3之間差異不顯著。說明當(dāng)6-BA濃度為2.0 mg/L時(shí)，試管苗的葉片會(huì)變得較窄，但觀察發(fā)現(xiàn)，其葉片仍較嫩綠，未出現(xiàn)弱化或玻璃化等現(xiàn)象。

3? ? 結(jié)論與討論

在植物組織培養(yǎng)快速繁殖過程中，細(xì)胞分裂素6-BA的作用主要是促進(jìn)芽的形成和生長(zhǎng)，生長(zhǎng)素NAA的作用則主要是促進(jìn)試管苗的生長(zhǎng)、壯苗和生根等。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在MS培養(yǎng)基添加0.5 mg/L NAA的情況下，6-BA濃度的變化對(duì)白芨叢芽的誘導(dǎo)增殖具有顯著影響;而且在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)（0.5～2.0 mg/L），白芨試管苗叢芽增殖數(shù)與6-BA濃度成正相關(guān)，增殖叢芽的平均株高和平均葉寬與6-BA濃度成負(fù)相關(guān)。當(dāng)6-BA濃度達(dá)到2.0 mg/L時(shí)，叢芽的增殖倍數(shù)達(dá)到最大，為7.12倍，誘導(dǎo)芽增殖的效果最好;而且觀察發(fā)現(xiàn)，此時(shí)的試管苗叢芽仍較健壯，沒有出現(xiàn)徒長(zhǎng)、弱化或玻璃化等現(xiàn)象。因此，可以認(rèn)為，與0.5 mg/L NAA協(xié)同配合使用誘導(dǎo)白芨試管苗叢芽健壯增殖的適宜6-BA濃度為2.0 mg/L，既能保障白芨試管苗叢芽的快速增殖，又能使試管苗叢芽健壯生長(zhǎng)而不出現(xiàn)徒長(zhǎng)、弱化或玻璃化等情況。

4? ? 參考文獻(xiàn)

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