梗阻性急性腎損傷患者血清HO-1水平變化及意義

張坤英，李榮欣，秦麗麗，張艷，尹芳，孫靜姝，陸萍，王健英，趙軍

(1濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041；2濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院)

急性腎損傷(AKI)是臨床危重癥患者常見(jiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥，其治療的關(guān)鍵是早期診斷。目前臨床診斷仍主要借助于血清肌酐或尿素氮，但上述指標(biāo)并非腎臟損傷的早期敏感指標(biāo)。腎后梗阻性因素是引起腎臟損傷的常見(jiàn)病因之一。雖然影像學(xué)檢查可迅速判斷梗阻性因素，卻難以判斷是AKI還是慢性腎損傷。因此，尋找梗阻性腎病引起AKI的生物標(biāo)志物，對(duì)早期診斷和治療尤為重要。血紅素加氧酶1(HO-1)是氧化降解血紅素的起始酶和限速酶，具有抗氧化、抗炎、增加移植器官血流灌注等作用。本研究觀察腎后梗阻性因素所致AKI患者血清HO-1水平變化，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2017年6月～2018年10月濰坊市人民醫(yī)院收治的梗阻性因素導(dǎo)致的AKI患者33例(AKI組)，均符合AKI診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，男17例、女16例，年齡(54.21±10.81)歲，有吸煙史5例，BMI(24.23±2.73)kg/m2，原發(fā)?。耗蚵方Y(jié)石22例、前列腺增生6例、神經(jīng)源性膀胱5例，改善全球腎臟病預(yù)后組織分級(jí)[2]：1級(jí)17例、2級(jí)2例、3級(jí)14例，梗阻程度：輕度3例、中度19例、重度11例。入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～80歲；入院后經(jīng)B超、腹部CT等檢查診斷為梗阻性因素所致AKI。排除標(biāo)準(zhǔn)：終末期腎臟病已開始血液透析或腹膜透析；腎移植。同時(shí)從本院健康管理中心選擇性別、年齡匹配的30例體檢健康者作為健康對(duì)照組，男14例、女16例，年齡(52.51±9.75)歲，有吸煙史2例，BMI(23.37±2.94)kg/m2。兩組性別、年齡、吸煙史及BMI有可比性。兩組均簽署知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 血壓、血清HO-1及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè) AKI組于確診當(dāng)天、健康對(duì)照組于體檢當(dāng)天收集血、尿標(biāo)本?；颊哂跈z查當(dāng)日檢測(cè)血壓，由同一位醫(yī)生用矯正的汞柱式水銀血壓計(jì)測(cè)量左上肢平心臟位置的坐位血壓3次，取其平均值，測(cè)前至少休息15 min。抽取空腹靜脈血，2 000 g離心20 min，取血清于-80 ℃冰箱保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清HO-1(試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供)、腎損傷因子(KIM-1，試劑盒由上海將來(lái)實(shí)業(yè)股份有限公司提供)。用日本日立7170S+ISE全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血肌酐、尿素氮、白蛋白等指標(biāo)，用日本MEK-8222K電子血球計(jì)數(shù)儀檢測(cè)血紅蛋白。檢查當(dāng)日持續(xù)留取6 h尿液，計(jì)算每小時(shí)尿量。

2 結(jié)果

2.1 兩組血壓及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 兩組收縮壓比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，其他指標(biāo)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血壓及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.2 兩組血清HO-1、KIM-1水平比較及其相關(guān)性 AKI組血清HO-1、KIM-1水平分別為2.0(1.1，2.7)pg/mL、7.0(4.4，9.1)ng/L，健康對(duì)照組分別為0.2(0.1，0.5)pg/mL、1.7(0.5，3.4)ng/L。AKI組血清HO-1、KIM-1水平高于健康對(duì)照組(P均<0.01)。AKI組血清HO-1水平與血清KIM-1水平呈正相關(guān)(r=0.596，P<0.01)。

2.3 血清HO-1對(duì)梗阻性AKI的診斷價(jià)值 繪制血清HO-1診斷梗阻性AKI的ROC曲線，HO-1對(duì)AKI的診斷界值為0.60 pg/mL，其ROC曲線下面積為0.869，敏感度和特異度分別為81.8%、77.8%。

2.4 梗阻性AKI發(fā)生的影響因素 以是否患有梗阻性AKI為因變量，以性別、年齡、KIM-1、HO-1、尿素氮/肌酐為自變量進(jìn)行二分類Logistic回歸分析，回歸方程為logit(P)=-3.047+2.997×HO-1+0.611×KIM-1-0.580×尿素氮/肌酐。結(jié)果顯示血清HO-1、KIM-1水平升高是梗阻性AKI發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

3 討論

血紅素加氧酶(HO)是哺乳動(dòng)物微粒體內(nèi)的限速酶，其中HO-1為誘導(dǎo)型HO，是一種敏感的抗炎癥蛋白。刺激腎小管誘導(dǎo)HO-1表達(dá)，可明顯降低細(xì)胞的氧化損傷，減少氧化應(yīng)激標(biāo)志物的表達(dá)[2～4]。目前對(duì)HO-1腎臟保護(hù)作用機(jī)制的研究主要源于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。孫靜姝等[5]也發(fā)現(xiàn)，單側(cè)輸尿管梗阻大鼠模型在造模后第3天，腎小管間質(zhì)中HO-1的表達(dá)較假手術(shù)組高。在順鉑腎毒性所致的AKI鼠模型中，腎臟損傷后約4 h血尿標(biāo)本中的HO-1水平升高，且血清HO-1水平與血肌酐水平呈負(fù)相關(guān)，是血清肌酐改善的獨(dú)立保護(hù)性因素[6]。提示AKI早期，HO-1表達(dá)即增加。鼠輸尿管梗阻模型注射HO-1誘導(dǎo)劑，可減輕其腎間質(zhì)纖維化，保護(hù)腎功能；而給予HO-1抑制劑，則可阻斷該作用[7]。在AKI大鼠模型中，高濃度同型半胱氨酸可通過(guò)下調(diào)HO-1表達(dá)加速AKI向慢性腎臟病的進(jìn)程[8]。

在人體內(nèi)，HO-1可拮抗氧化應(yīng)激作用。正常情況下，HO-1在組織中低表達(dá)，但在缺血、炎癥、氧化應(yīng)激等因素的刺激下，可作為保護(hù)性蛋白被誘導(dǎo)表達(dá)。急性脊髓損傷、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清HO-1水平較正常人高，且其水平與疾病活動(dòng)度有關(guān)[9,10]。冠狀動(dòng)脈旁路搭橋患者的心肌組織中HO-1水平較正常人低，并與炎癥指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)，可能機(jī)制為該類患者體內(nèi)的某些物質(zhì)缺乏，如一氧化氮和脂聯(lián)素等導(dǎo)致HO-1產(chǎn)生減少[11]。在AKI患者中氧化應(yīng)激可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)血紅素蛋白不穩(wěn)定、細(xì)胞器損傷和細(xì)胞死亡[12]，誘導(dǎo)HO-1高表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)，梗阻性AKI患者血清HO-1水平較健康對(duì)照組高。通過(guò)各種機(jī)制上調(diào)HO-1的表達(dá)可減輕病毒、急性肺損傷、免疫風(fēng)濕性疾病等對(duì)機(jī)體的損害[13,14]；但也有研究發(fā)現(xiàn)，過(guò)度表達(dá)的HO-1會(huì)促進(jìn)某些疾病惡化[15]，提示HO-1的作用具有雙面性。

KIM-1是一種跨膜蛋白，主要存在于CD4+T細(xì)胞和腎近端小管上皮細(xì)胞，生理狀態(tài)下表達(dá)較低。梗阻性腎病患者出現(xiàn)腎缺血和腎毒性損傷時(shí)，近端小管KIM-1分泌可明顯升高[16,17]。目前KIM-1已被作為反映AKI早期腎功能受損的敏感標(biāo)志物之一。本研究結(jié)果顯示，梗阻性AKI患者血清KIM-1水平較健康對(duì)照組高，且血清HO-1、KIM-1水平呈正相關(guān)。提示HO-1與KIM-1同樣對(duì)診斷梗阻性AKI具有重要的臨床價(jià)值。

ROC曲線分析顯示，血清HO-1診斷斷梗阻性AKI的曲線下面積為0.869，靈敏度、特異度分別為81.8%和77.8%，其診斷效能與KIM-1相當(dāng)。Logistic回歸分析顯示，血清HO-1水平升高是梗阻性AKI發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

綜上所述，梗阻性AKI患者血清HO-1水平升高，其診斷梗阻性AKI的靈敏度和特異度較好，HO-1水平升高是梗阻性AKI發(fā)生的危險(xiǎn)因素，提示HO-1可作為診斷梗阻性AKI的敏感指標(biāo)。本研究也存在不足之處，由于本研究結(jié)果為單中心數(shù)據(jù)分析，且樣本量較小，研究結(jié)果可能存在偏倚。因此，需要大規(guī)模臨床研究證實(shí)HO-1在梗阻性AKI診斷中的價(jià)值。