肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒血清超敏C反應(yīng)蛋白、TNF-α、IL-6以及免疫球蛋白水平研究

楊力夫，蔡晶娟，周曉玲，羅 艷，余春麗

肺炎鏈球菌是導(dǎo)致肺炎、菌血癥、中耳炎等侵襲性及非侵襲性疾病的主要致病菌之一，又是整個(gè)兒童時(shí)期引起小兒呼吸道感染的首要病原菌。肺炎鏈球菌重癥肺炎的一般臨床癥狀為高熱、寒戰(zhàn)、咳嗽、血痰及胸痛等。中國(guó)小兒肺炎鏈球菌重癥肺炎發(fā)病率及病死率近年來(lái)逐步增加，給臨床早期診斷和治療帶來(lái)一定難度[1-2]。肺炎鏈球菌感染的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體免疫防御機(jī)制的過度激活、炎性細(xì)胞因子過度表達(dá)有關(guān)。CRP是人體血漿中的一種正常蛋白組分，含量甚微。當(dāng)組織損傷或炎癥發(fā)生時(shí)，CRP在肝臟的合成和分解率增加，血清中的CRP濃度會(huì)顯著上升，是一種急性時(shí)相的反應(yīng)物。在臨床上，CRP濃度的測(cè)定非常有助于炎癥和感染的檢測(cè)，是最敏感的炎癥指標(biāo)之一。超敏C反應(yīng)蛋白（hypersensitivity C-reactive protein, hs-CRP）是臨床實(shí)驗(yàn)室采用了超敏感檢測(cè)技術(shù)，能準(zhǔn)確的檢測(cè)低濃度CRP，提高試驗(yàn)的靈敏度和準(zhǔn)確度，是區(qū)分低水平炎癥狀態(tài)的靈敏指標(biāo)。TNF-α與IL-6是肺炎鏈球菌重癥肺炎時(shí)炎癥細(xì)胞早期釋放的因子，也是患兒機(jī)體維持內(nèi)部穩(wěn)態(tài)、抵御各種病原體的重要免疫調(diào)節(jié)因子，可誘發(fā)微循環(huán)與血管內(nèi)皮等發(fā)生一系列病理改變[3]。此外，T淋巴細(xì)胞不僅是機(jī)體免疫反應(yīng)細(xì)胞，還是重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞，可根據(jù)其分泌的免疫球蛋白水平來(lái)判斷患兒的病情[4]。本文旨在探討肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、免疫球蛋白表達(dá)變化及其臨床意義?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選擇2017年3月—2019年3月成都兒童?？漆t(yī)院收治的39例肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒（肺炎組）為研究對(duì)象，選擇同期35例健康體檢兒童為對(duì)照組。39例肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒均符合《兒童肺炎鏈球菌性疾病防治技術(shù)指南（2009年版）》[5]中診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病原學(xué)檢查證實(shí)為肺炎鏈球菌感染。其中肺炎組男21例，女18例；年齡7個(gè)月～5歲，平均（3.29±0.46）歲，病程3～6 d，平均（4.13±0.58） d；對(duì)照組男19例，女16例；年齡6個(gè)月～6歲，平均（3.59±0.48）歲。2組性別、年齡均衡。所有兒童監(jiān)護(hù)人同意并簽署知情同意書，本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 觀察指標(biāo) 抽取肺炎組患兒入院當(dāng)天（急性期）的靜脈血4 ml及治療10～15 d后（恢復(fù)期）的靜脈血4 ml，取體檢時(shí)健康兒童的靜脈血4 ml，經(jīng)離心處理后，置于-10 ℃環(huán)境中待檢。

1.3 儀器 采用美國(guó)Dade-beh-ring公司提供的BN100型自動(dòng)特定蛋白分析儀檢測(cè)入組受試兒童IgM、IgA及IgG水平；采用ELISA法檢測(cè)血清hs-CRP、TNF-α及IL-6等水平，試劑盒均購(gòu)于上海天呈科技有限公司，檢測(cè)過程嚴(yán)格按照試劑盒使用說明進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料呈正態(tài)分布，用±s表示，2組間比較采用成組t檢驗(yàn)（組間方差齊），組內(nèi)比較采用自身配對(duì)t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平比較 肺炎組hs-CRP、TNF-α及IL-6水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），見表1。

表1 2組血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum hs-CRP, TNF-α and IL-6 levels between 2 groups(±s)

表1 2組血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum hs-CRP, TNF-α and IL-6 levels between 2 groups(±s)

組別 n hs-CRP(μg/L) TNF-α(pg/ml) IL-6(pg/ml)肺炎組 39 16.38±2.71 26.19±3.52 97.78±10.26對(duì)照組 35 1.03±0.25 7.72±0.86 9.87±1.42 t值 35.234 30.224 50.226 P值 0.000 0.000 0.000

2.2 2組免疫球蛋白水平比較 肺炎組與對(duì)照組IgM水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而IgA及IgG水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），見表2。

2.3 肺炎組在不同病期血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平變化 肺炎組恢復(fù)期hs-CRP、TNF-α及IL-6水平均明顯低于急性期，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），見表3。

表2 2組免疫球蛋白水平比較（±s，g/L）Table 2 Comparison of immunoglobulin levels between 2 groups(±s, g/L)

表2 2組免疫球蛋白水平比較（±s，g/L）Table 2 Comparison of immunoglobulin levels between 2 groups(±s, g/L)

組別 n IgA IgG IgM肺炎組 39 1.26±0.24 9.79±1.36 1.35±0.26對(duì)照組 35 0.57±0.06 6.59±0.75 1.31±0.30 t值 16.540 12.333 0.614 P值 0.000 0.000 0.541

表3 肺炎組在不同病期血清hs-CRP，TNF-α及IL-6水平變化（±s）Table 3 Changes of serum hs-CRP, TNF-α and IL-6 levels in children with severe pneumonia at different stages(±s)

表3 肺炎組在不同病期血清hs-CRP，TNF-α及IL-6水平變化（±s）Table 3 Changes of serum hs-CRP, TNF-α and IL-6 levels in children with severe pneumonia at different stages(±s)

組別 n hs-CRP(μg/L) TNF-α(pg/ml) IL-6(pg/ml)急性期 39 16.38±2.71 26.19±3.52 97.78±10.26恢復(fù)期 39 5.28±0.67 9.34±1.92 14.24±2.15差值 d 11.10±2.04 16.85±1.60 83.54±8.11 t值 23.579 25.150 47.218 P值 0.000 0.000 0.000

3 討 論

肺炎鏈球菌是患兒體內(nèi)鼻咽部的一種機(jī)會(huì)性致病菌，在患兒體內(nèi)處于免疫力低或不合理應(yīng)用抗菌藥物的狀況下，通過突破機(jī)體保護(hù)屏障，侵入患兒呼吸道，最終導(dǎo)致肺炎鏈球菌重癥肺炎?；純汉粑到y(tǒng)生理解剖特點(diǎn)及免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，從而造成肺炎鏈球菌重癥肺炎的發(fā)生[6]。發(fā)生重癥肺炎時(shí)又常伴有嚴(yán)重并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患兒的身體健康及生命安全。

本研究發(fā)現(xiàn)，肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平均明顯高于健康兒童，同時(shí)在恢復(fù)期hs-CRP，TNF-α及IL-6水平均明顯低于急性期。這是由于各種炎癥細(xì)胞被大量激活，促進(jìn)了炎癥細(xì)胞因子相互作用從而導(dǎo)致了患兒病情加重[7]。TNF-α是機(jī)體內(nèi)炎癥介質(zhì)的合成及釋放的一種重要促炎性細(xì)胞因子，具有廣泛生物學(xué)活性，通過中性粒細(xì)胞在肺內(nèi)的聚集，與機(jī)體內(nèi)多種生理反應(yīng)密切相關(guān)，在肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒檢測(cè)中具有重要的診斷意義[8]。IL-6與TNF-α相同，都具有免疫調(diào)節(jié)等廣泛的生物學(xué)活性，且還具有催化以及放大炎癥反應(yīng)的作用，它是由活化的T細(xì)胞及纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一種關(guān)鍵細(xì)胞因子，IL-6在機(jī)體內(nèi)表達(dá)水平高低可反映組織細(xì)胞發(fā)生受損的嚴(yán)重程度，是檢測(cè)肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒的有效指標(biāo)[9]。hs-CRP是由肝細(xì)胞合成，可與體內(nèi)多種細(xì)胞結(jié)合，還可作用于鈣離子與核酸結(jié)合[10]，由此聚合激活補(bǔ)體系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)和吞噬作用，從而引起患兒體內(nèi)發(fā)生炎癥反應(yīng)。故在患兒受到創(chuàng)傷、感染、手術(shù)、腫瘤等情況下，其水平迅速升高[10-11]。因此，hs-CRP可作為檢測(cè)肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒的靈敏檢測(cè)指標(biāo)，血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平為臨床治療肺炎鏈球菌重癥肺炎提供了診斷思路。

免疫球蛋白是介導(dǎo)機(jī)體體液免疫的主要抗體，血清IgA、IgG、IgM水平可反映機(jī)體抵抗能力[11]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比健康體檢者而言，肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒IgA及IgG水平均顯著升高。IgG針對(duì)蛋白質(zhì)多肽抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，因此當(dāng)IgG缺陷時(shí)則會(huì)使患兒呼吸道發(fā)生病毒、肺炎鏈球菌等感染。IgA主要對(duì)多糖抗原應(yīng)答[13]，產(chǎn)生抗菌莢膜多糖抗體[12]。本研究結(jié)果顯示，肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒IgA及IgG水平均明顯高于健康兒童，證明可通過IgA及IgG水平高低來(lái)判斷肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒發(fā)病情況以及病情。

綜上所述，從本組資料觀察到肺炎鏈球菌重癥肺炎患兒血清hs-CRP、TNF-α及IL-6水平和IgA及IgG水平明顯升高，以上指標(biāo)為評(píng)估肺炎鏈球菌重癥肺炎嚴(yán)重程度提供了參考指標(biāo)和診斷的方向。