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    P-JAK2/P-STAT3與突變型p53蛋白在宮頸病變中的表達(dá)及臨床意義

    2016-05-31 00:51:44馬慧尹利榮王芳李洪林單舒
    天津醫(yī)藥 2016年2期
    關(guān)鍵詞:突變型內(nèi)瘤鱗癌

    馬慧,尹利榮△,王芳,李洪林,單舒

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    P-JAK2/P-STAT3與突變型p53蛋白在宮頸病變中的表達(dá)及臨床意義

    馬慧1,尹利榮1△,王芳2,李洪林2,單舒2

    摘要:目的探討宮頸病變中磷酸化JAK激酶2(P-JAK2)、磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄因子3(P-STAT3)及突變型p53蛋白的表達(dá)及其臨床意義。方法選取我科收治的宮頸鱗癌(SCC組)57例、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變(LSIL組)36例、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變(HSIL組)30例和正常宮頸(NC組) 30例為研究對(duì)象,檢測(cè)各組高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)感染情況,行HE染色、免疫組化檢測(cè)P-JAK2、P-STAT3及突變型p53蛋白表達(dá)情況。結(jié)果(1)SCC組的HRHPV感染率、P-JAK2陽(yáng)性表達(dá)率高于HSIL組、LSIL組及NC組(P<0.05 )。(2)SCC組的P-STAT3、突變型p53陽(yáng)性表達(dá)率高于LSIL組、NC組(P<0.05 ),與HSIL組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)SCC組的P-JAK2和P-STAT3的陽(yáng)性表達(dá)率在不同的FIGO分期、組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HR-HPV感染亞組中有明顯差異(均P<0.05);突變型p53的陽(yáng)性表達(dá)率在不同的FIGO分期、HR-HPV感染亞組中具有顯著差異(P<0.05)。(4)SCC組中P-JAK2與P-STAT3、突變型p53的陽(yáng)性表達(dá)率、HR-HPV感染率均呈正相關(guān)(P<0.05),P-STAT3與突變型p53的表達(dá)率、HR-HPV感染率呈正相關(guān)(P<0.05);突變型p53表達(dá)與HR-HPV感染呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論P(yáng)-JAK2、P-STAT3與突變型p53蛋白在SCC組中的表達(dá)水平高于正常組及上皮內(nèi)瘤變組,三者可能與HR-HPV感染、宮頸鱗癌發(fā)生、進(jìn)展有關(guān)。

    關(guān)鍵詞:磷酸化JAK激酶2;磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄因子3;突變型p53;宮頸鱗癌;高危型人乳頭瘤病毒;宮頸上皮內(nèi)瘤變;免疫組織化學(xué)

    △通訊作者E-mail:yinlirongfk@sina.com

    宮頸癌(cervical carcinoma, CC)是女性常見的惡性腫瘤之一,近年來(lái)發(fā)病呈年輕化趨勢(shì)。世界范圍內(nèi),宮頸癌在女性惡性腫瘤發(fā)病率中位居第二位,其中以鱗癌為主,約占75%~80%,其致病因素包括人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染、癌基因激活、抑癌基因失活、錯(cuò)配修復(fù)基因突變、端粒酶基因的異常表達(dá)及不良生活方式等[1]。JAK激酶2(JAK2)是一種非受體酪氨酸激酶,細(xì)胞信號(hào)可刺激其磷酸化,作用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄因子3 (STAT3);STAT3磷酸化后結(jié)合于細(xì)胞核內(nèi)特異的DNA位點(diǎn),作為一種轉(zhuǎn)錄激活因子調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá),繼而調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和凋亡,與腫瘤發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)[2]。野生型p53是一種與細(xì)胞增殖、分化有關(guān)的抑癌基因,在修復(fù)基因突變、調(diào)控細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等方面具有重要作用,多種癌變組織中存在p53突變[3]。已有研究表明宮頸癌中磷酸化JAK2(P-JAK2)、磷酸化STAT3(P-STAT3)、野生型p53表達(dá)及HPV感染之間存在關(guān)聯(lián)[4],但是宮頸癌組織中大多數(shù)的野生型p53存在突變,目前關(guān)于P-JAK2、P-STAT3、突變型p53及高危型HPV(HRHPV)在宮頸病變組織中表達(dá)情況的研究較少。本研究通過檢測(cè)宮頸病變組織及正常組織中P-JAK2、P-STAT3與突變型p53蛋白的表達(dá)及HR-HPV感染情況,以期探討四者與宮頸鱗癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及臨床意義。

    1 資料與方法

    1.1標(biāo)本來(lái)源選取我院婦科2013年12月—2015年6月收治的宮頸鱗癌患者57例(SCC組)、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變(HSIL)患者30例(HSIL組)、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變(LSIL)患者36例(LSIL組),因子宮良性病變行全子宮切除的正常宮頸(NC組)30例為對(duì)照。入組患者年齡28~72歲,平均(46.15±3.24)歲,宮頸取材前均未進(jìn)行放療、化療,無(wú)免疫系統(tǒng)疾病、先天性遺傳病、嚴(yán)重內(nèi)科疾病及其他惡性疾病。所有研究對(duì)象的臨床及病理資料完整。

    1.2試劑HR-HPV基因芯片法檢測(cè)試劑盒、鏈霉親和素-過氧化物酶(SP)免疫組化試劑盒、DAB顯色試劑盒、鼠抗人單克隆抗體p53(突變型,克隆號(hào)Do7)購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,兔抗單克隆抗體P-JAK2(p-Tyr1007/ Tyr1008)購(gòu)自abcam公司,兔抗人單克隆抗體P-STAT3 (Tyr705 D3A7)購(gòu)自CST公司。

    1.3方法

    1.3.1標(biāo)本收集刷取宮頸上皮脫落細(xì)胞,用于檢測(cè)HRHPV。鉗取患者宮頸組織,置入有10%福爾馬林溶液的EP管中,石蠟包埋并切片,厚度為4 μm。

    1.3.2基因芯片法檢測(cè)HR-HPV按照試劑盒操作步驟,提取脫落細(xì)胞DNA,PCR擴(kuò)增目的片段,基因芯片檢測(cè)并讀取結(jié)果。應(yīng)用HR-HPV病毒感染分析報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)HR-HPV各型別,信號(hào)位置灰度值與背景灰度值差大于4代表存在該型別HPV感染。

    1.3.3HE染色宮頸組織石蠟包塊脫蠟,蘇木素伊紅(HE)染色,脫水、封片。

    1.3.4免疫組化按照免疫組化常規(guī)方法脫蠟與水化。PBS液沖洗,加3%H2O2去離子水孵育,PBS沖洗,抗原修復(fù),PBS沖洗,正常山羊血清封閉。滴加兔抗單克隆抗體P-JAK2(p-Tyr1007/Tyr1008)、兔抗人單克隆抗體P-STAT3(Tyr705 D3A7)、鼠抗人單克隆抗體p53(突變型,克隆號(hào)Do7),4℃過夜。PBS沖洗,滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的免疫組化二抗,室溫條件孵育,PBS沖洗,滴加SP。室溫條件孵育,PBS沖洗。加DAB顯色液,自來(lái)水沖洗,蘇木素復(fù)染,自來(lái)水沖洗。常規(guī)脫水、透明、中性樹膠封片,光學(xué)顯微鏡下觀察。陰性對(duì)照用0.01 mol/L PBS(pH 7.5)代替一抗。

    1.3.5免疫組化結(jié)果判讀P-JAK2以胞漿中出現(xiàn)背景清晰的棕黃或棕褐色顆粒為陽(yáng)性,P-STAT3以細(xì)胞核或胞漿中出現(xiàn)背景清晰的棕黃或棕褐色顆粒為陽(yáng)性,突變型p53以細(xì)胞核中出現(xiàn)背景清晰的棕黃或棕褐色顆粒為陽(yáng)性。由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)生雙盲獨(dú)立判定結(jié)果,若初步診斷不一致,經(jīng)兩者共同討論決定,若仍未能達(dá)成一致意見,則請(qǐng)第3名醫(yī)師參與,討論得出一致結(jié)論。每例切片選取任意10個(gè)400倍視野進(jìn)行觀察,按染色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比綜合計(jì)分。染色強(qiáng)度:不著色計(jì)0分,淡黃色1分,棕黃色計(jì)為2分,棕褐色計(jì)3分;陽(yáng)性細(xì)胞百分比:0~5%計(jì)0分,6%~20%計(jì)1分,21%~50%計(jì)2分,50%以上計(jì)3分。將染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞百分比得分相乘,0分為陰性(-),1~3分為弱陽(yáng)性(+), 4~5分為中度陽(yáng)性(++),≥6分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以x ±s表示,組間比較用F檢驗(yàn),組間多重比較用SNK-q檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用例(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,χ2檢驗(yàn)兩兩比較時(shí)采用卡方分割法,并相應(yīng)校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

    2 結(jié)果

    2.1HR-HPV感染檢測(cè)結(jié)果測(cè)得HR-HPV基因型主要有:HPV16、18、31、33、35、39、45、52、56、58、68、73、82型。SCC組的HR-HPV感染率高于其他3組,HSIL組高于LSIL組和NC組(P<0.008 3),LSIL組與NC組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表1。

    2.2P-JAK2蛋白在各組中的表達(dá)及其與SCC臨床病理特征的關(guān)系SCC組的P-JAK2陽(yáng)性表達(dá)率高于其他3組,HSIL組、LSIL組高于NC組,HSIL組與LSIL組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表1。P-JAK2蛋白在SCC組中的表達(dá)情況:臨床分期Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期,組織學(xué)分級(jí)Ⅱ、Ⅲ級(jí)高于Ⅰ級(jí),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,有HR-HPV感染者高于無(wú)HRHPV感染者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見圖1、表2。

    Tab. 1 Comparison of P-JAK2, P-STAT3 and mutant p53 expression and HR-HPV infection between four groups表1 各組P-JAK2、P-STAT3、突變型p53及HR-HPV感染比較 例(%)

    Fig. 1 Expression of P-JAK2 in cervical tissue in four groups (SP,×400)圖1 各組宮頸組織中P-JAK2表達(dá)情況(SP,×400)

    2.3P-STAT3蛋白在各組中的表達(dá)及其與SCC臨床病理特征的關(guān)系SCC組的P-STAT3陽(yáng)性表達(dá)率高于LSIL組及NC組,與HSIL組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HSIL組高于NC組,LSIL組高于NC組,HSIL組與LSIL組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表1。P-STAT3蛋白在SCC組中的表達(dá)情況:臨床分期Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期,組織學(xué)分級(jí)Ⅲ級(jí)高于Ⅰ級(jí);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,有HR-HPV感染者高于無(wú)HR-HPV感染者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表2、圖2。

    2.4突變型p53在各組中的表達(dá)及其與SCC臨床病理特征的關(guān)系SCC組、HSIL組的突變型p53陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于LSIL組、NC組,HSIL組與SCC組、LSIL組與NC組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。突變型p53蛋白在SCC組中的表達(dá)情況:臨床分期Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,有HR-HPV感染者高于無(wú)HR-HPV感染者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表2、圖3。

    Tab. 2 Relationship between P-JAK2,P-STAT3, mutant p53 expression and different clinical-pathological characteristics of squamous carcinoma of the cervix表2 不同臨床病理資料宮頸鱗癌患者的P-JAK2、P-STAT3、突變型p53表達(dá)情況比較

    Fig. 2 Expression of P-STAT3 in cervical tissue in four groups (SP,×400)圖2 各組宮頸組織中P-STAT3表達(dá)情況(SP,×400)

    2.5SCC組P-JAK2、P-STAT3、突變型p53蛋白表達(dá)及HR-HPV感染之間的相關(guān)性P-JAK2與PSTAT3、突變型p53及HR-HPV感染均呈正相關(guān),見表3。P-STAT3蛋白與突變型p53蛋白、HR-HPV感染呈正相關(guān),見表4。突變型p53蛋白表HR-HPV感染呈正相關(guān),見表5。

    Fig. 3 Expression of mutant p53 in cervical tissue in four groups (SP,×400)圖3 各組宮頸組織中突變型p53表達(dá)(SP,×400)

    Tab. 3 The association of P-JAK2 expression with the expression of P-STAT3,mutant p53 and HR-HPV infection in SCC group表3 P-JAK2與P-STAT3、突變型p53、HR-HPV 在SCC組中表達(dá)的相關(guān)性

    Tab. 4 The association of P-STAT3 expression with the expression of mutant p53 and HR-HPV infection in SCC group表4 P-STAT3與突變型p53、HR-HPV在SCC組中表達(dá)的相關(guān)性

    Tab. 5 The association of mutant p53 expression with the HR-HPV infection in SCC group表5 突變型p53與HR-HPV感染在SCC組表達(dá)的相關(guān)性

    3 討論

    3.1HR-HPV與宮頸病變的關(guān)系HR-HPV感染是引發(fā)宮頸病變的重要因素。女性初次感染HPV后,可在大約8個(gè)月內(nèi)通過自身免疫力清除,若持續(xù)感染HR-HPV超過1~2年,有進(jìn)展為癌前病變或浸潤(rùn)癌的風(fēng)險(xiǎn)[5]。An等[6]研究發(fā)現(xiàn),在正常宮頸、LSIL、HSIL、宮頸癌中,HR-HPV病毒的清除率分別是56.8%、14.8%、0.2%、0,說(shuō)明隨著宮頸病變的進(jìn)展,HPV感染患者清除病毒的能力顯著降低。李洪林等[1]研究發(fā)現(xiàn),正常宮頸組的HR-HPV感染率顯著低于CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)及宮頸癌組,與CINⅠ組無(wú)明顯差異,其認(rèn)為HR-HPV感染多存在于高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及癌變組織中,是促進(jìn)宮頸癌前病變向癌變發(fā)展的重要因素。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SCC中的HRHPV感染率顯著高于NC組、LSIL組及HSIL組,LSIL組與NC組之間無(wú)明顯差異,提示LSIL病變之前的病毒感染是可逆的,當(dāng)病毒的DNA整合入宿主基因組時(shí),會(huì)導(dǎo)致持續(xù)感染,從而促進(jìn)宮頸病變惡化。

    3.2P-JAK2、P-STAT3及突變型p53與宮頸病變的關(guān)系JAK-STAT是一條由細(xì)胞因子刺激的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡以及免疫調(diào)節(jié)等許多重要的生物學(xué)過程,JAK2及STAT3是這條通路上重要的成員[2,7]。JAK2激活后,酪氨酸殘基磷酸化,招募含有SH2結(jié)構(gòu)域的STAT3蛋白,STAT3 在Y705、Ser727、Lys685位點(diǎn)磷酸化,進(jìn)一步入核調(diào)控下游靶基因表達(dá),參與細(xì)胞凋亡、增殖、血管形成等過程,這在多種腫瘤研究中已經(jīng)得到證實(shí)[2,8-10]。Xu等[11]通過系統(tǒng)分析發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞型肺癌中PSTAT3表達(dá)與肺癌分期、分化、淋巴轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。Shukla等[12]發(fā)現(xiàn)宮頸癌中持續(xù)激活的STAT3表達(dá)明顯高于癌前病變,與宮頸癌的不良預(yù)后有關(guān)。Sobti等[13]發(fā)現(xiàn),宮頸癌組織中的STAT3 mRNA表達(dá)顯著高于正常宮頸組織及癌前病變組織,且癌組織中的STAT3 mRNA表達(dá)與臨床分期有關(guān),其認(rèn)為持續(xù)激活的STAT3可能通過調(diào)控Bcl-xL、Mcl-l、Bcl-2、Myc及細(xì)胞周期蛋白D1促進(jìn)細(xì)胞惡性增殖,參與腫瘤進(jìn)展。本研究結(jié)果顯示,P-JAK2在SCC中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于SIL組及NC組,且LSIL組及HSIL組均顯著高于NC組,表明P-JAK2表達(dá)發(fā)生于宮頸病變?cè)缙?。SCC中的P-STAT3陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于LSIL組及NC組,SCC組與HSIL組無(wú)明顯差異,表明與P-JAK2相比,P-STAT3發(fā)揮作用較晚,可能主要發(fā)生于宮頸高級(jí)別病變時(shí)期。大量研究證實(shí)HPV病毒編碼的早期癌蛋白E6/E7是病毒感染導(dǎo)致宮頸癌變的重要因素,兩者分別抑制抑癌基因p53及Rb基因表達(dá)。突變型p53基因在多種惡性腫瘤中異常表達(dá),可促使細(xì)胞惡性增殖[14]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)突變型p53蛋白在SCC組中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于LSIL組及NC組,P-JAK2/P-STAT3及突變型p53表達(dá)在FIGO晚期(Ⅲ~Ⅳ)及伴有HRHPV感染的SCC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率高于FIGO早期(Ⅰ~Ⅱ)及病毒感染陰性的SCC組織,提示PJAK2/P-STAT3及突變型p53可能促進(jìn)宮頸病變的進(jìn)展。

    3.3P-JAK2/P-STAT3、突變型p53與HR-HPV的關(guān)系JAK2磷酸化后,作用于STAT3,已在多種腫瘤中證實(shí)。Shukla等[12]發(fā)現(xiàn)P-STAT3蛋白表達(dá)與HPV感染有關(guān),在HPV+細(xì)胞系中,P-STAT3表達(dá)顯著高于HPV-細(xì)胞系,認(rèn)為STAT3表達(dá)及磷酸化可能與HPV感染形成及持續(xù)感染有關(guān)。Shukla等[4]研究發(fā)現(xiàn),STAT3與HPV E6癌基因表達(dá)呈正相關(guān),與野生型p53表達(dá)呈負(fù)相關(guān),他們利用siRNA或AG490(阻滯STAT3的酪氨酸磷酸化)測(cè)得野生型p53的表達(dá)呈現(xiàn)劑量依賴性增加、E6表達(dá)下降、癌細(xì)胞生存能力下降,這在HPV感染的細(xì)胞系中表現(xiàn)尤為明顯,認(rèn)為STAT3可以促進(jìn)HPV病毒的致癌基因表達(dá),促進(jìn)病毒導(dǎo)致的宮頸病變進(jìn)展,因此,抑制STAT3活化可能成為靶向治療宮頸癌的新方法。Niu等[10]在乳腺癌研究中得知,STAT3可抑制野生型p53表達(dá),兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān),然而突變后的p53失去STAT3的抑制位點(diǎn),突變型p53可促進(jìn)STAT3對(duì)細(xì)胞的惡性增殖作用。本研究顯示,隨著宮頸病變進(jìn)展,P-JAK2、P-STAT3及突變型p53表達(dá),HR-HPV感染率上調(diào),且兩兩之間的陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān),說(shuō)明這四者在宮頸鱗癌形成、進(jìn)展中可能有直接或間接的協(xié)同作用,檢測(cè)這4種因子可增加宮頸鱗癌診斷的準(zhǔn)確性,可作為判斷宮頸鱗癌預(yù)后的指標(biāo)。

    參考文獻(xiàn)

    [1] Li HL, Yin LR, Sun JJ. Association between HTERT gene amplifica?tion and high-risk HPV infection in cervical lesions[J]. Tianjin Med J, 2014, 42(2): 127-130. [李洪林,尹利榮,孫俊杰.宮頸病變中hTERT基因擴(kuò)增與高危型HPV感染的關(guān)系[J].天津醫(yī)藥,2014, 42(2):127-130].doi:10.3969/j.issn.0253-9896.2014.02.009.

    [2] Yang N, Han F, Cui H,et al. Matrine suppresses proliferation and in? duces apoptosis in human cholangiocarcinoma cells through sup?pression of JAK2/STAT3 signaling[J]. Pharmacol Rep,2015,67(2): 388-393. doi: 10.1016/j.pharep.2014.10.016.

    [3] Alexandrova EM, Marchenko ND. Mutant p53-heat shock response oncogenic cooperation: a new mechanism of cancer cell survival[J]. Front Endocrinol (Lausanne), 2015, 6:53. doi:10.3389/fendo.2015. 00053.

    [4] Shukla S, Mahata S, Shishodia G, et al.Functional Regulatory Role of STAT3 in HPV16-Mediated Cervical Carcinogenesis [J]. PLoS One,2013, 8(7): e67849. doi: 10.1371/journal.pone.0067849.

    [5] Goodman A. HPV testing as a screen for cervical cancer[J]. BMJ, 2015,350:h2372.doi:10.1136/bmj.h2372.

    [6] An HJ, Sung JM, Park AR, et al. Prospective evaluation of longitudi?nal changes in human papillomavirus genotype and phylogenetic clade associated with cervical disease progression[J]. Gynecol On?col, 2011, 120(2):284 -290.

    [7] Lee TL, Yeh J, Van Waes C, et al.Epigenetic modification of SOCS-1 differentially regulates STAT3 activation in response to interleu?kin- 6 receptor and epidermal growth factor receptor signaling through JAK and/or MEK in head and neck squamous cell carcino?mas[J]. Mol Cancer Ther, 2006, 5(1): 8-19.

    [8] Germain D, Frank DA. Targeting the cytoplasmic and nuclear func?tions of signal transducers and activators of transcription 3 for can?cer therapy[J]. Clin Cancer Res,2007,13(19):5665-5669.

    [9] Li G, Xu J, Wang Z, et al. Low expression of SOCS1 and SOCS3 is a poor prognostic indicator for gastric cancer patients[J]. J Cancer Res Clin Oncol, 2014, 141 (3):443-452. doi: 10.1007/s00432-014-1838-5.

    [10] Niu G,Wright KL, Ma Y, et al. Role of Stat3 in regulating p53 ex?pression and function[J]. Mol Cell Biol, 2005,25(17):7432-7440.

    [11] Xu YH, Lu S. A meta-analysis of STAT3 and phospho-STAT3 ex?pression and survival of patients with non-small-cell lung cancer[J]. Eur J Surg Oncol, 2014, 40(3):311- 317. doi: 10.1016/j.ejso. 2013.11.012.

    [12] Shukla S, Shishodia G, Mahata S, et al. Aberrant expression and constitutive activation of STAT3 in cervical carcinogenesis: implica?tions in high-risk human papillomavirus infection[J]. Mol Cancer, 2010, 27(9):282. doi: 10.1186/1476–4598-9-282.

    [13] Sobti RC, Singh N, Hussain S, et al. Overexpression of STAT3 in HPV-mediated cervical cancer in a North Indian population[J]. Mol Cell Biochem,2009,330:193- 199. doi:10.1007/s11010- 009- 013 3-2.

    [14] Kim CH,Lee HS,Park JH,et al.Prognostic role of p53 and Ki-67 im?munohistochemical expression in patients with surgically resected lung adenocarcinoma: a retrospective study[J]. J Thorac Dis, 2015,7 (5): 822-833. doi: 10. 3978 / j.issn. 2072-1439.

    (2015-08-03收稿2015-09-23修回)

    (本文編輯閆娟)

    作者單位:天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦科(郵編300211)

    Expression and clinicopathological significance of P-JAK2, P-STAT3 and mutant p53 proteins in cervical lesions

    MA Hui1,YIN Lirong1△,WANG Fang2,LI Honglin2,SHAN Shu2
    Department of Gynecology, The Second Hospital of Tianjin Medical University, Tianjin 300211, China
    △CorrespondingAuthor E-mail:yinlirongfk@sina.com

    Abstract:Objective To investigate the expression and prognostic significance of P-JAK2, P-STAT3 and mutant p53 in cervical lesions. Methods A total of 153 cervical biopsies of patients from Gynecology Department, The Second Hospital of Tianjin Medical University were recruited during December 2013 to June 2015. Fifty-seven cases of squamous carcinoma of cervix (SCC), 36 cases of low grade intraepithelial neoplasia (LSIL), 30 patients with high grade intraepithelial neoplasia (HSIL) and 30 cases of normal cervix (NC) were included in the study. Gene chip method was used to detect high-risk hu?man papillpmavirus(HR-HPV)infection. Hematoxylin-eosin staining was used to make pathological diagnosis. Immunohis?tochemical assay was used for the detection of P-JAK2, P-STAT3 and mutant type p53 protein expression in cervical le?sions. Results (1) HR-HPV infection rate and P-JAK2 expression were significantly higher in SCC group than those of HSIL group, LSIL group and NC group (P < 0.05). (2) The expression of P-STAT3 and mutant type p53 were significantly higher in SCC group than those of LSIL group and NC group (P<0.05). However, there was no significant difference between SCC group and HSIL group. (3) The positive expressions of P-JAK2 and P-STAT3 showed significant differences in different FIGO stages, histopathological grade, lymph node metastasis and HR-HPV infection in SCC group, respectively (P < 0.05). There were significant differences in the positive expression of mutant type p53 between different FIGO stages and HR-HPV infection (P<0.05). (4) There was positive correlation between P-JAK2, P-STAT3, positive expression of mutant type p53 and HR-HPV infection in SCC tissues (P<0.05). There was a positive correlation between P-STAT3, p53 expression and HR-HPV infection (P < 0.05). There was a positive correlation between mutant p53 expression and HR-HPV infection (P < 0.05). Conclusion P-JAK2, P-STAT3 and mutant p53 protein expression rates are high in SCC group than those of NC and SIL groups, which may be associated with HR-HPV infection, cervical cancer occurrence and progression.

    Key words:phosphorylated Janus kinase 2; phosphorylated signal transduction and transcription factor 3; mutant p53; squamous carcinoma of the cervix; high-risk human papillpmavirus; squamous intraepithelial lesion;immunohistochemistry

    中圖分類號(hào):R711.74

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    DOI:10.11958/20150047

    作者簡(jiǎn)介:馬慧(1989),女,碩士研究生在讀,主要專注宮頸癌發(fā)病機(jī)制研究

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