吳鎖連,康懷彬,李冬姣
摘要:水產(chǎn)品營養(yǎng)價值高,深受消費者青睞,但是內源酶活性強,攜有大量微生物,易腐敗變質,影響水產(chǎn)品的貯藏、流通及營銷各環(huán)節(jié),因此水產(chǎn)品保鮮技術的研究就顯得非常迫切。本文從物理、化學及生物保鮮三個角度分析水產(chǎn)品保鮮技術的研究現(xiàn)狀及進展,指出其中存在的一些問題及未來發(fā)展趨勢。
關鍵詞:水產(chǎn)品;保鮮;品質
中圖分類號:S983 ? ?文獻標識碼:A
中國水產(chǎn)資源豐富,是全球最大的水產(chǎn)品養(yǎng)殖與出口國。水產(chǎn)品水分含量高,蛋白質和不飽和脂肪酸穩(wěn)定性較差,易引起品質劣變,降低食用品質和商業(yè)價值。中國每年水產(chǎn)品損失率高達15%左右,而歐美等發(fā)達國家平均損失率僅為2%~5%[1],由此可見,水產(chǎn)品保鮮技術已經(jīng)制約了中國水產(chǎn)行業(yè)的健康發(fā)展。而先進的保鮮技術有利于水產(chǎn)品遠距離運輸、貯藏和反季銷售,提高市場競爭力。因此選擇和優(yōu)化水產(chǎn)品保鮮技術,延長貨架期,一直是國內外學者關注的焦點。
1 ?水產(chǎn)品品質變化原理
水產(chǎn)品通過糖酵解反應降低pH值,ATP分解升高體溫,導致蛋白質變性和肌原纖維收縮進入僵直期。隨后內源酶水解蛋白質,肌肉松弛軟化進入解僵和自溶期。蛋白質水解生成的代謝物又為微生物的生長提供營養(yǎng),加速魚體腐敗變質。不飽和脂肪酸氧化分解生成的有機物,與蛋白質、磷脂等反應生成色素和熒光產(chǎn)物,引起水產(chǎn)品風味和感官品質變化。
2 ?水產(chǎn)品保鮮技術
為提高水產(chǎn)品鮮度,釆用物理、化學或生物技術抑制內源酶和微生物,延長保質期。
2.1 ?物理保鮮
采用物理方法抑制或殺滅水產(chǎn)品中微生物,分為低溫保鮮與冷殺菌保鮮。
2.1.1 ?低溫保鮮
采用低溫抑制水產(chǎn)品微生物生長及內源酶活性,延長貨架期。低溫保鮮主要為冰藏、冰溫、微凍、凍結等保鮮技術。
2.1.1.1 ?冰藏保鮮
冰藏保鮮以冰為介質,將魚體溫度下降到貼近冰點,但不凍結的保鮮方式,溫度為0℃~4℃。冰藏保鮮有兩種方式,即干冰法與水冰法。干冰法是把碎冰撒在魚層上面,層冰層魚方式保鮮或者把碎冰和魚混拌。融化后的冰水能清洗魚體表面,防止氧化及干燥,但也存在魚與冰接觸不良、下層魚易壓爛等缺點,適合漁船運輸中暫時貯藏。水冰法是將新鮮的魚體浸漬于淡水0℃(海水-1℃)左右的冰水混合物中冷卻保鮮,適用于死后僵直快或漁獲量集中、品種相對單一的圍網(wǎng)捕撈漁船,魚與水的比例為7∶3。水冰法降溫快,但長時間浸泡會使水產(chǎn)品膨脹增重,含鹽量增加,冷卻到0℃時可取出,改干冰法冷藏。有學者將抑菌氣體聯(lián)合冷海水保鮮,劉書來等[2]采用CO2冷海水浸泡南美白對蝦,實驗顯示貯藏8d,蝦的TVB-N為19.5 mg/100g,K值為20.3%,同時延緩蝦體褐變。
2.1.1.2 ?冰溫保鮮
冰溫保鮮采用0℃到魚體冰點之間的溫度進行保鮮的方式,溫度為0℃~2℃,適用于成熟度較高及冰點較低的魚體。冰溫保鮮能維持魚體活體性質,但是極小的溫度波動也會生成較大、不均勻的冰晶,損傷肌原纖維,精確控溫是其技術難點。日本上世紀就研發(fā)出冰溫保鮮冰箱和以蓄冷壁為核心的冰溫庫,±0.5℃波動。冰點調節(jié)劑能下調魚體冰點,拓展冰溫帶。米紅波[3]研究低溫條件下,5%NaCl、+5%CaCl2、+2.5%山梨醇復配的化學冰點調節(jié)劑對中國對蝦的保鮮效果,實驗顯示:冰溫貯藏8 d,TVC、TVB-N、TMA-N值與感官指標均在可接受范疇內,肌肉微觀結構接近于新鮮。冰溫和其他保鮮方法聯(lián)用,提高產(chǎn)品品質。龔婷[4]在冰溫條件下,以3%食鹽+0.6%蔗糖為冰點調節(jié)劑,3%檸檬酸減菌處理后,采用70%CO2+30%N2氣調包裝,能抑制草魚片中微生物生長及質量劣變,保鮮期延長至40 d。
2.1.1.3 ?微凍保鮮
微凍保鮮采用略低于魚體凍結點以下的一種輕度凍結保鮮技術,溫度為-2℃~-3℃。與冷藏和冰溫相比,微凍克服了高溫冷藏中組織代謝老化,高志立等[5]研究低溫條件下帶魚的保鮮效果,實驗表明:冷藏、冰溫和微凍條件下,帶魚保鮮期分別為5 d、7 d、18 d,微凍保鮮期是冰溫的2.6倍、冷藏的3.6倍。相對于冷凍,微凍避免了低溫冷凍中冰晶損傷組織結構,劉美華[6]切片觀察低溫貯藏30天的大黃魚,發(fā)現(xiàn)溫度越低魚體組織損壞越大,魚肉凍結率越高(-3℃、-6℃、-20℃凍結率分別為30%、65%、90%),生成的冰晶面積越大。魚體因凍結膨脹產(chǎn)生的內壓擠壓肌肉組織,導致肌原纖維失水收縮產(chǎn)生空洞;微凍魚體冰晶細小均勻,組織損傷較低。微凍與其他保鮮法聯(lián)合,利用柵欄因子效應的保鮮效果更好,范文教等[7]在4℃條件下,0.1%茶多酚浸漬鰱魚90 min后,置于-3℃貯藏,實驗表明:魚體感官指標下降緩慢,TVC、pH、TVB-N、TBA、K值等指標均低于對照組。
2.1.1.4 ?冷凍保鮮
冷凍保鮮指將魚體中心溫度降至-15℃,再置于-18℃冷庫中貯藏的保鮮技術,適用于長期保鮮。魚體凍藏質量及凍結速率和溫度相關。采用液氮或干冰速凍,能較快的通過最大冰晶生長帶,生成分布均勻,數(shù)量多的細小冰晶,但成本較高,主要用于名貴水產(chǎn)品保鮮。緩慢凍結生成的冰晶體積大、不規(guī)則且分布散亂,解凍時汁液流失較大??箖鰟┠軌蛉芙夂鸵种票L,馬曉斌[8]在-18℃條件下,4%海藻糖+6%聚葡萄糖+5%乳酸鈉復配抗凍劑,分析采用抗凍劑的速凍脆肉鯇品質變化,實驗表明:凍藏180 d后,魚體保水性、抗氧化性和蛋白質性能均保持較好。低溫與復合保鮮劑的協(xié)同作用效果更好,Alparslan等[9]研究含有2%橙皮精油的殼聚糖薄膜(CH+OPEO)對深水粉紅蝦的保鮮效果,實驗表明:-18℃凍藏,CH+OPEO組,殼聚糖組和對照組貨架期分別為15 d、10 d、7 d。
2.1.2 ?冷殺菌保鮮
冷殺菌是指在恒溫或小幅升溫條件下,利用其他滅菌原理殺菌,主要有氣調保鮮、輻照保鮮等。
2.1.2.1 ?氣調保鮮
氣調保鮮(MAP)指在一定溫度條件下,利用混合氣體置換包裝內的氣體,減緩產(chǎn)品氧化速度,保持原有品質。MAP內氣體的組成和配比、包裝材料(PVC、PET、PE、PP等)、冷鏈溫度等對水產(chǎn)品質量影響較大,其中氣體的組成和配比是關鍵因素。MAP一般由CO2、N2、O2組成,CO2抑制大多數(shù)需氧菌和霉菌生長,但對某些發(fā)酵食品保鮮作用欠佳,對PVC透氣性較高。O2抑制大多數(shù)厭氧菌生長及低脂魚的氧化,穩(wěn)定色澤。N2常作為平衡氣體,對PVC透氣率低,防止因CO2逸出導致包裝塌陷。MAP與其他技術聯(lián)用成為水產(chǎn)品保鮮的新研究方向,張曉麗等[10]發(fā)現(xiàn)冷藏條件下,0.1 g/100 mL AOB聯(lián)合70% CO2+30% N2的MAP處理羅非魚片,能降低TVC、TBA及TVB-N值,貨架期為18 d。
2.1.2.3 ?輻照保鮮
輻照保鮮是利用60Co發(fā)出的γ射線、137Cs的X射線(能量≤50MeV)或電子加速器產(chǎn)生的電子束(能量≤10MeV)破壞細菌細胞膜及遺傳物質等,干擾正常代謝,達到保鮮目的。輻照處理能殺死大多數(shù)腐敗微生物,特別是腸道致病菌,且無殘留、穿透力強,防止二次污染,但是投入大,易引起蛋白質變性。輻照保鮮作用和輻照劑量、介質和狀態(tài)、溫度及細菌種群等要素相關,輻照劑量又影響水產(chǎn)品安全,1-6kGy輻照劑量對水產(chǎn)品感官影響不明顯。Yang等[11]采用10MeV電子束輻射處理低溫真空包裝三文魚,實驗顯示:4℃條件下,0.5kGy輻照保鮮,保質期為12 d,其中SSP、TVB、a*值、TBA、TVC對輻照劑量影響顯著(p<0.05)。
2.2 ?化學保鮮
化學保鮮采用化學添加劑維持水產(chǎn)品鮮度的方法,主要有臭氧殺菌、化學保鮮等方法。
2.2.1 ?臭氧殺菌
臭氧殺菌是通過損傷微生物細胞膜,滲透損壞膜內細胞,引起代謝障礙,導致死亡。臭氧水具有抑菌和穩(wěn)定色澤作用,郭姍姍等[12]采用2 mg/L臭氧水、流速150 mL/min、淋洗脆肉鯇魚10 min,實驗表明:冰溫條件下,魚體貨架期為14 d。臭氧冰通過融化緩慢釋放出活性臭氧殺菌,刁石強等[13]研究5 mg/kg臭氧冰對羅非魚片的保鮮效果,實驗顯示:臭氧冰能降低TVB-N,TVC減少82%~97%,延長貨架期3~4 d。臭氧和氣調包裝結合能有效延長保質期,陳麗嬌等[14]采用臭氧處理鱘魚片20 min,50% CO2+10% O2+40% N2的MAP,實驗表明:鱘魚片貯藏至28 d,TVB-N為17.57 mg/100g,比對照組貨架期延長3~5 d。
2.2.2 ?化學保鮮技術
化學保鮮是在魚體中添加對個體無害的化學添加劑,抑制或殺滅細菌,提高貯藏特性的保鮮技術?;瘜W保鮮操作簡單,效果好,但存在抗菌素殘留和細菌耐藥性等不足,引起消費者擔憂。化學和生物保鮮劑混合使用,以降低化學保鮮劑使用量是水產(chǎn)品保鮮技術的發(fā)展方向。姚麗麗等[15]研究1%殼聚糖+0.06%脫氧醋酸鈉+8%丙二醇復配保鮮劑對鯽魚的保鮮效果,實驗表明:鯽魚在4℃貯藏9 d,仍保持二級鮮度。近年來,納米技術為水產(chǎn)品保鮮提供了新的研究趨勢,劉永[16]研究海藻酸鈉/納米SiO2涂膜對鯇魚魚肉的保鮮效果,實驗表明:4℃條件下,該涂膜能有效抑制丙二醛、TVB-N、pH值和TVC,延長保鮮期。
2.3 ?生物保鮮法
生物保鮮劑指從動植物、微生物中提制或經(jīng)生物技術改良后獲取的化合物。按來源分為:動物源保鮮劑、植物源保鮮劑、酶類保鮮劑與微生物源保鮮劑。
2.3.1 ?動物源保鮮劑
當前水產(chǎn)品保鮮技術的動物源保鮮劑主要為殼聚糖、抗菌肽等。
2.3.1.1 ?殼聚糖
殼聚糖指從節(jié)肢動物外殼中的甲殼素脫離55%以上的N-乙?;苌傻囊活愄烊话被嗵穷愇镔|,因其高效的抗菌性、良好的通透性及成膜性而廣泛的應用于水產(chǎn)品保鮮。殼聚糖涂膜效率低、干燥困難、強度差、抑菌有限,自身澀味也限制了應用范圍,添加增塑劑、表面活化劑和抗菌劑等形成復合膜能有效改善膜的強度和抗菌效果。殼聚糖水溶性較差,可采用?;?、羧甲基化等方法改善溶解性。吳春華[17]把沒食子酸嵌入殼聚糖中構造殼聚糖-沒食子酸衍生物(CG),并涂膜于銀鯧魚。實驗顯示:CG處理能抑制細菌生長,延緩脂質氧化,其持水性和感官評價更佳,保質期延長3~6 d。
2.3.1.2 ?抗菌肽
抗菌肽是細胞內特定基因經(jīng)誘導后編碼而成的由20~60個氨基酸構成的一種堿性多肽類化合物。帶正電荷的抗菌肽和細胞膜之間通過靜電或受體作用相結合,在膜上組成動態(tài)的環(huán)形孔,且滲入細胞內并干擾代謝,引起細菌死亡。抗菌肽的種類多,目前有2000多種抗菌肽被分離鑒定出來,吳燕燕[18]研究甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌F35抗菌肽對羅非魚片的保鮮作用,實驗優(yōu)化表明:1.5%~2.0%抗菌肽抑菌效果最佳,貯藏期延長4 d以上。
2.3.2 ?植物源保鮮劑
植物源保鮮劑的來源豐富,安全價廉,消費者接受度高,主要有迷迭香、茶多酚等。
2.3.2.1 ?迷迭香提取物
迷迭香是木蘭綱唇形科植物,迷迭香提取物包括迷迭香酚、鼠尾草酚和鼠尾草酸等。迷迭香提取物是天然抗氧化物,避免合成抗氧化物的毒副效應與高溫分解的弊端,還有抗氧化及抑菌等特性,Tironi 等[19]探討迷迭香對凍藏三文魚的保鮮作用,實驗表明,200 mg/kg迭香提提取物可降低脂肪氧化,在-11℃條件下,貯藏3個月,肌肉中脂肪為5.3 g/kg,魚肉的色澤、質地等感官評價良好。
2.3.2.2 ?茶多酚提取物
茶多酚是從茶葉中提取的三十多種多酚類化合物的總稱,主要為兒茶素、黃酮、花青素、酚酸。茶多酚通過損傷細胞膜、凝固細菌蛋白、結合遺傳物質等,干擾微生物代謝。茶多酚抑菌譜廣,抑菌強,IFan等[20]發(fā)現(xiàn)在-3℃條件下,0.2%茶多酚處理的鰱魚,其TVC、pH、TVB-N、TBA和K值比對照組低,貨架期可達35 d。復合保鮮劑能延長保鮮期,郭曉偉[21]研究冰溫條件下,1.0%茶多酚+0.025%溶菌酶對牡蠣保鮮作用,實驗顯示:復合保鮮劑使其優(yōu)勢菌(Psuedomonas)下降38.1%,減緩不飽和脂肪的損失,貨架期為16 d。
2.3.3 ?酶類保鮮劑
酶類保鮮劑利用酶對蛋白質和氨基酸的催化能力,避免或清除外界的不良影響,維持水產(chǎn)品鮮度,常用有溶菌酶、葡萄糖氧化酶等。
2.3.3.1 ?溶菌酶
溶菌酶是從禽類蛋清內提取的一種堿性酶類。通過水解損傷細胞壁,內容物外逸導致微生物死亡。溶菌酶專門水解G+細胞壁,對G-、霉菌及酵母菌等無效。溶菌酶可降解成氨基酸,具有安全高效、營養(yǎng)和藥理功效。溶菌酶與其它保鮮劑復配使用,李靜雪[22]發(fā)現(xiàn)在-1℃條件下,0.97%殼聚糖+0.48%溶菌酶+0.41%Vc復配保鮮劑能將鯉魚貨架期延長至2~24 d。溶菌酶貯藏過久或環(huán)境不適宜,活性會降低,使用時需適當?shù)脑黾邮褂昧俊?/p>
2.3.3.2 ?葡萄糖氧化酶
葡萄糖氧化酶是用黑曲霉、青霉等發(fā)酵后制取的一種需氧脫氫酶。葡萄糖氧化酶對β-D葡萄糖的專一性強,通過氧化葡萄糖產(chǎn)生葡萄糖酸,pH值下降,從而抑制微生物生長,可作為除葡萄糖劑和脫氧劑。馬清河等[23]探討低溫條件下,葡萄糖氧化酶對對蝦的保鮮作用,實驗表明:4℃冷藏貨架期為6 d,-18℃冷凍貨架期為1年,均可維持二級鮮度,表明葡萄糖氧化酶能抑制對蝦褐變和酸敗。
2.3.4 ?微生物源保鮮劑
微生物源保鮮劑指由細菌代謝生成的抑菌化合物,常見乳酸鏈球菌素(Nisin)、ε-聚賴氨酸(ε-PL)等。
2.3.4.1 ?Nisin
Nisin是由乳酸鏈球菌產(chǎn)生的細菌素類保鮮劑,可以改變細胞膜通透性,抑制細胞酶活性和核酸表達等,直至細菌裂解死亡。Nisin能抑制G+與產(chǎn)孢子的耐熱菌生長,對G-、霉菌和酵母菌的抑制性較差,但與加熱、冷凍或EDTA等表面活性劑聯(lián)用,能提高抑菌范圍。Nisin價格較高、抑菌譜較窄,可與其他抑菌手段或保鮮劑聯(lián)用,延長保鮮期。顧仁勇[24]在0℃條件下,將0.5%Nisin+ 0.3%溶菌酶+3.0%抗壞血酸的復配保鮮劑用于斑點叉尾鮰魚片中,乳酸調節(jié)pH為4.5,結合真空包裝,貨架期可達21d。
2.3.4.2 ?ε-聚賴氨酸
ε-PL指白色鏈霉菌以葡萄糖為原料發(fā)酵制得的一種由25~35個賴氨酸殘基組成的多聚體。ε-PL通過破壞細胞膜,影響蛋白質和核酸的合成,從而抑制細菌、霉菌、酵母菌及耐熱的芽孢桿菌生長繁殖。ε-PL抑菌譜廣,安全高效,能與乙醇、有機酸、甘油酯等添加劑復配使用,增強抑菌效果。謝晶等[25]研究4±1℃條件下,0.07%植酸+1.5%殼聚糖+0.1%ε-聚賴氨酸復配保鮮劑對南美白對蝦的保鮮效果,其貨架期為7~8 d。
3 ?水產(chǎn)品保鮮技術的研究進展
物理保鮮法能夠實現(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模保鮮的要求,但須考慮溫度波動及各種環(huán)境因素的影響?;瘜W保鮮法快捷高效,但存在化合物殘留隱患。生物保鮮技術安全高效,但是生物活性提取物結構和成分復雜多樣,純度不高,提純工藝較復雜,成本較高,還存在一定的氣味殘留和食品安全問題。由此可見,各種保鮮方法均存在不足,無法完全滿足水產(chǎn)品保鮮的需求。針對出現(xiàn)的問題和不足,可按照柵欄理論,將物理、化學和生物保鮮技術聯(lián)合起來,實施優(yōu)勢互補,提高水產(chǎn)品品質,保鮮技術將朝著安全高效,減少季節(jié)、地域等條件限定的方向發(fā)展。不斷研發(fā)新的保鮮技術,改進保鮮設備,創(chuàng)建完善的測量標準,實行規(guī)范化管理,實現(xiàn)技術創(chuàng)新與標準化結合,促進和轉化中國水產(chǎn)品保鮮技術的戰(zhàn)略目標調整和可持續(xù)發(fā)展。
參考文獻
[1] 勵建榮.生鮮食品保鮮技術研究進展[J].中國食品學報,2010,6(10):17-19.
[2] 劉書來,張莎莎,呂飛,等.CO2冷海水保鮮技術在南美白對蝦中的應用[J].農(nóng)業(yè)機械學報,,2012,43(12):158-164.
[3] 米紅波.鯽魚和中國對蝦的無水?;罴氨鶞乇ur技術研究[D].杭州:浙江大學,2014.
[4] 龔婷.生鮮草魚片冰溫氣調保鮮的研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學,2008.
[5] 高志立,謝晶,施建兵,等.不同貯藏條件下帶魚品質的變化[J].食品科學,2013,34(16): 311-315.
[6] 劉美華.大黃魚(Pseudosciaena crocea)微凍保鮮的研究[D].福州:福建農(nóng)林大學,2004.
[7] 范文教,孫俊秀,陳云川,等.茶多酚對鰱魚微凍冷藏保鮮的影響[J].農(nóng)業(yè)工程學報,2009,25(2):294-297.
[8] 馬曉斌.浸漬凍結對脆肉鯇品質影響的研究[D].湛江:廣東海洋大學,2015.
[9] Alparslan Y. Baygar T. Effect of chitosan film coating combined with orange peel essential oil on the shelf life of deep-water pink shrimp[J]. Food & Bioprocess Technology, 2017, 10 (5) :842-853.
[10] 張曉麗,馬海霞,楊賢慶,等.竹葉抗氧化物結合不同包裝方式對鮮羅非魚片保鮮效果的影響[J].食品科學,2016.
[11] Yang Z, Wang H, Wang W, et al. Effect of 10 Me V E-beam irradiation combined with vacuum-packaging on the shelf life of Atlantic salmon fillets during storage at 4℃[J]. Food Chemistry, 2014, 145: 535-541.
[12] 郭姍姍,榮建華,趙思明,等.臭氧水處理對冰溫保鮮脆肉鯇魚片品質的影響[J].食品科學,2009,30(24):469-473.
[13] 刁石強,吳燕燕,王劍河,等.臭氧冰在羅非魚片保鮮中的應用研究[J].食品科學,2007,28(8):501-504.
[14] 陳麗嬌,劉楊,程艷,等.氣調包裝結合臭氧預處理保鮮鱘魚片[J].福建水產(chǎn),2012,34(1):26-30.
[15] 姚麗麗,陳晶,熊曉輝,等.殼聚糖復配物在鯽魚低溫保鮮中的應用[J]食品工業(yè),2006,(4):43-44.
[16] 劉永,賴文鋒,林冰云,等.海藻酸鈉/納米SiO2涂膜對魚肉的保鮮效果[J].食品工業(yè),2015,(10):79-81.
[17] 吳春華.殼聚糖衍生物分子修飾機理及其在銀鯧魚保鮮中的應用研究[D].杭州:浙江大學,2017.
[18] 吳燕燕,張巖,李來好,等.甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌抗菌肽對羅非魚片保鮮效果的研究[J].食品工業(yè)科技,2013,34(2):315-318.
[19] Tironi V A, Tomas M C. Quality Loss during the Frozen Storage of Sea Salmon(Pseudopercis Semifasciata)Effect of Rosemary(Rosmarinus Officinalis)Extract[J]. Food Science and Technology, 2010, 43(2):263—272.
[20] Fan W J, Chi Y L, Zhang S. The use of a tea polyphenol dip to extend the shelf life of silver carp (Hypophthalmicthys molitrix) during storage in ice [J]. Food Chemisty, 2008, 108 (1):148- 153.
[21] 郭曉偉.牡蠣冰溫氣調保鮮技術研究[D].青島:中國海洋大學,2010.
[22] 李靜雪.天然保鮮劑對冰溫鯉魚魚肉保鮮效果的研究[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學,2014.
[23] 馬清河,胡常英,劉麗娜,等.葡萄糖氧化酶用于對蝦保鮮的實驗研究[J].食品工業(yè)科技,2005,26 (6):159-1641.
[24] 顧仁勇.Nisin、溶菌酶用于斑點叉尾鮰魚片保鮮的研究[J].食品科學,2010,32(14):305-308.
[25] 謝晶,侯偉峰,朱軍偉,等.復合生物保鮮劑在南美白對蝦防黑變中的應用[J].農(nóng)業(yè)工程學報,2012,28 (5):267-272.