銀杏葉提取物的抑菌活性研究

莫曉寧　潘海燕　李艾　黃澤強　蔡錦源　周業(yè)生

[摘要]銀杏提取物具有良好的抑菌活性，本文概述了銀杏葉提取物的主要抑菌成分，從植物病原真菌、動物常見病原細菌和牙齦卟啉單胞菌3個方面綜述了銀杏葉的抑菌活性研究進展，比較了不同方法制備的銀杏葉提取物的抑菌效果，對銀杏葉提取物的抑菌活性研究進行展望。

[關(guān)鍵詞]銀杏提取物;抑菌活性;研究進展

中圖分類號：TQ281

文獻標識碼：A

DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.20190423

銀杏又稱白果，屬我國的特產(chǎn)資源，擁有量占全世界總量的70%以上。銀杏是我國重點一級保護植物，是世界上古老的于遺植物之一。有研究表明，銀杏葉及其提取物（GBE）含有黃酮類、內(nèi)酯類、酚類、萜類、多糖等多種活性物質(zhì)，具有抗氧化、抑菌、提高免疫、抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂、抗腫瘤和抗癌等多種生物活性。其中黃酮類化合物種類多達40種，是銀杏中活性較高的有效成分之一，廣泛應(yīng)用于食品、藥品、保健品、化妝品等領(lǐng)域。有關(guān)銀杏提取物的提取工藝及其生，物活性研究是當前研究的熱點，其中有關(guān)銀杏提取物（GBE）的抑菌性研究近年來備受關(guān)注。本文就近年來銀杏提取物的抑菌活性研究情況進行綜合分析，為銀杏提取物的抑菌活性研究提供參考依據(jù)。

1銀杏葉提取物的主要抑菌活性成分及機理

1.1多糖類化合物

多糖類化合物是銀杏中重要的功能因子之一，主要存在于銀杏葉中，有較強的抑菌、清除活性自由基以及抗脂質(zhì)氧化的功能。目前越來越多的研究趨向于用植物多糖替代化學(xué)防腐劑，促進人類健康、食品安全以及未來醫(yī)藥的發(fā)展，有研究表明多糖類化合物抑菌作用的機理主要是對細胞膜通透性、核酸形成、抑制蛋白質(zhì)合成、干擾細胞壁形成以及作為抗代謝物對能量代謝系統(tǒng)產(chǎn)生作用等多個方面實現(xiàn)抑菌作用。還有研究通過透射電鏡觀察來檢測細胞內(nèi)乳酸脫氫酶的釋放，探究山蒼子精油是否會對弧菌的細胞膜造成損傷作用，研究結(jié)果表明，山蒼子精油會破壞弧菌的細胞膜，這對銀杏多糖類化合物抑菌作用機理有一定的參考價值。

1.2黃酮類化合物

銀杏葉提取物中的主要有效成分為黃酮類化合物，大部分存在于葉部，約40種，主要包括單黃酮類、雙黃酮類以及兒茶素類，其中單黃酮類中的山柰素、槲皮素和異鼠李素含量最高，被認為是銀杏總黃酮中真正有活性的物質(zhì)。黃酮具有有效清除有毒過氧自由基、降低血脂、促進血液循環(huán)及腦循環(huán)的功能，胡筱等[131研究表明，黃酮類化合物具有良好的抑菌作用，且抑菌作用機理為黃酮類物質(zhì)，屬于多酚類化合物，pH值偏向酸性，可以讓菌類蛋白質(zhì)發(fā)生變性，或破壞細胞膜的完整性，從而使微生物產(chǎn)生功能性障礙，進而發(fā)揮了抑菌的作用。徐芳[141結(jié)合銀杏提取物中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和抗微生物的作用機制，推測GBE抑菌作用機制為黃酮類化合物與糖類結(jié)合成黃酮苷，進而水解細菌細胞壁中的糖苷鍵，破壞細菌細胞壁的結(jié)構(gòu)，從而造成菌體死亡。

1.3銀杏酚酸

銀杏酚酸樹漆酚類物質(zhì)廣泛存在于銀杏葉、種仁、外種皮中，大部分存在于銀杏的外種皮中，可分為3類：銀杏酸、銀杏酚、銀杏二酚。銀杏酚酸因具有致敏性、致突變性及免疫毒性被認為是銀杏中的有毒有害物質(zhì)，但有研究表明，銀杏也具有眾多藥理作用，如抗腫瘤、抑菌和殺菌、抗氧化和殺蟲等。研究發(fā)現(xiàn)其對9種植物病原真菌、10種動物病原細菌、2種細菌以及4種真菌均有抑菌作用。

2銀杏葉提取物的抑菌作用

2.1銀杏葉提取物對植物病原真菌的抑菌作用

眾多研究表明，銀杏提取物對多種植物病原真菌（如柿角斑病菌、稻瘟病菌、梨銹病菌、玉米炭疽病菌、柑橘瘡痂病菌、柑橘青霉病菌等）有抑菌作用，且抑菌作用的大小因銀杏抑菌活性成分提取的方法的不同而不同，并且與銀杏提取液中抑菌活性，成分的濃度有關(guān)。林清洪16]在銀杏外種皮提取液室內(nèi)抑菌、殺蟲的初步研究中，做了室內(nèi)抑菌實驗，分離了多種植物的8種主要有害病菌（鶴望蘭炭疽病菌、葉班病菌、白菜黑斑病菌、白菜炭疽病菌、辣椒立枯病菌、辣椒炭疽病菌、茄子白絹病菌、甘藍黑斑病菌），配置了一定梯度濃度的銀杏外種皮培養(yǎng)基，對銀杏外種皮提取液的抑菌效果進行研究。結(jié)果表明，銀杏提取物對8種主要病菌具有抑菌作用，且原液以及5倍稀釋液濃度的銀杏外種皮提取液的抑菌效果為100%（8種病菌生長速度為0），對照組病菌生長正常。同時8種病菌在銀杏提取液稀釋濃度為10倍的培養(yǎng)基上，抑菌效果也達到了45%～84%，其中對鶴望蘭炭疽病菌的抑菌效果最佳，達到84%，對白菜炭疽病菌的抑菌效果最弱，為45%。

付強強等在對銀杏酚酸的提取分離方法、檢測方法、藥理作用及制劑的研究中，總結(jié)出銀杏酚酸共對9種植物病原菌有抑菌作用。孟昭禮等在對銀杏提取液對4種植物病原菌的抑菌作用的研究中，分別用銀杏根、莖、葉、果肉和果仁石油醚和丙酮提取液以及銀杏果實的乙醇提取液進行抑菌實驗，研究結(jié)果表明，銀杏各器官石油醚提取液以及丙酮提取液對玉米小葉斑病菌和蘋果輪紋病菌均有一定的抑菌作用，且葉部提取液的抑菌作用最強。銀杏果實的乙醇提取液對蘋果腐爛病菌的抑菌效果最明顯，10倍和25倍提取液抑菌效果分別達到100%和50%，其次是對蘋果干腐病菌的抑菌效果，10倍和25倍提取液抑菌效果分別達到68.5%和44.4%。這些研究都表明銀杏提取物對植物病原真菌具有抑菌作用，且抑菌作用與銀杏提取物濃度的高低有密切的關(guān)系：GBE的濃度越高，抑菌效果越明顯，濃度越低，抑菌作用越小。在銀杏葉對柑橘青霉病菌的抑菌作用的研究中，喻林華等發(fā)現(xiàn)銀杏葉提取物的抑菌作用隨濃度的升高而增大，但隨著時間的延長，抑菌作用降低。

2.2銀杏葉提取物對動物常見病原細菌的抑菌作用

目前，對銀杏提取物抑菌作用的研究大多集中于對動物常見病原細菌的抑菌作用，這是當前GBE抑菌作用研究的熱點，且大部分集中于研究對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、多殺性巴氏桿菌等細菌抑菌作用。多種研究表明，GBE對動物常見病原細菌具有良好的抑菌作用，其中銀杏葉提取物的抑菌作用是目前研究最多的。在對銀杏葉提取物抑菌效果的研究中，曲曉華等（20]認為銀杏葉提取物的活性物質(zhì)具有熱穩(wěn)定性，高溫短時間加熱并不影響其抗菌活性，在pH值為中性的條件下，抗菌活性是最強的。黃其春等則認為，在相同的作用時間內(nèi)，銀杏葉提取物的濃度越高，抑菌率越高;同濃度的銀杏葉提取物在一定的時間范圍內(nèi)，作用時間越長，抑菌率越高;根據(jù)提取成分以及提取方法的不同，抑菌效果也有所不同。徐艷等在銀杏葉提取物抑菌作用的研究中，就采用了二分法研究銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌的抑制作用，分別提取了銀杏葉的水溶性成分和脂溶性成分，進行抑菌實驗。結(jié)果表明，銀杏葉的脂溶性成分提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌有明顯的抑制作用，水溶性提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌沒有抑菌作用，說明了銀杏提取物的熱穩(wěn)定性較好，在高溫下提取并不會影響其對動物病原細菌的抑菌作用。

也有研究將銀杏葉提取物的抑菌效果與一些抑菌藥物相比較，來探究銀杏葉抑菌作用的大小。李焰等在對銀杏葉提取物體外抑菌效果的比較中，用超聲波細胞粉碎機粉碎銀杏葉，用65°C恒溫水浸提得到銀杏葉提取物，再用多種抗菌藥物與銀杏葉提取物進行抑菌效果的比較。結(jié)果表明，GBE對大腸桿菌的抑菌效果優(yōu)于慶大霉素、恩諾沙星、磺胺嘧啶、泰樂菌素，但不及鏈霉素和卡那霉素;GBE對多殺性巴氏桿菌的抑菌效果優(yōu)于環(huán)丙沙星、慶大霉素、磺胺嘧啶、泰樂菌素，但不及鏈霉素和卡那霉素;GBE對金黃色葡萄球菌的抑菌效果優(yōu)于卡那霉素，但不及鏈霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素、恩諾沙星、磺胺嘧啶、泰樂菌素。金黃色葡萄球菌對GBE表現(xiàn)為高敏，多殺性巴氏桿菌和大腸桿菌對GBE表現(xiàn)為中敏。李焰在對銀杏葉有效成分的提取和體外抑菌效果以及肉雞日糧中添加銀杏葉的研究中，證實了GBE具有抑菌效果，可以提高肉雞的免疫力作用，具有較好的開發(fā)應(yīng)用前景。

2.3銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌作用

研究銀杏提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌作用，可以為研究以治療牙周痛為目的的新型純中藥提供藥理學(xué)依據(jù)，但目前銀杏提取物抑菌活性成分對牙齦卟啉單胞菌的抑菌作用的研究還相對較少，這為以后銀杏葉提取物的開發(fā)應(yīng)用提供了良好的發(fā)展前景。有研究表明，同濃度的銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的抑菌效果大于對大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果，這說明研究銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的抑菌作用具有較大的可實行性。姜迎春等125）認為，銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌作用，大于銀杏葉片和銀杏葉軟膠囊的原液對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌作用，且抑菌作用的大小隨濃度的降低而減小。

3不同方法提取銀杏葉活性物質(zhì)抑菌效果的比較

采用不同方法提取銀杏葉活性物質(zhì)的抑菌效果有所不同，由于提取的方法不同，提取的銀杏葉有抑菌活性的有效成分以及濃度也會不一樣。比較不同方法提取的銀杏葉活性物質(zhì)的抑菌效果，可以為研究具有最佳抑菌效果的提取方法提供依據(jù)。曲曉華等126就采用了常壓煎煮、高壓煎煮、乙醇冷浸漬、微波提取4種方法來比較銀杏葉活性物質(zhì)的抑菌效果。結(jié)果表明，乙醇冷浸法提取的銀杏葉提取物抑菌效果最明顯，其次是微波提取法，最后是常壓煎煮法和高壓煎煮法。其中，高壓煎煮提取的銀杏葉提取物抑菌效果比常壓煎煮法提取物抑菌效果更明顯，這說明銀杏葉提取物的熱穩(wěn)定性好。徐齊云等[271用乙醇浸提、石油醚萃取、三氯甲烷萃取和水萃取4種方法來比較銀杏提取物對柑橘青霉病菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)石油醚萃取提取的銀杏葉提取物的抑菌作用最好，三氯甲烷萃取抑菌作用次之，水萃取物的抑菌效果最低。這些研究證明了探究出更好的提取方法可以有效提高銀杏提取物的抑菌效果。

4結(jié)論

銀杏是我國的特產(chǎn)植物，在我國資源豐富。研究銀杏提取物的抑菌活性可以為充分利用銀杏資源提供良好的方向。銀杏提取物的抑菌活性成分可以在種植中代替農(nóng)藥，以及應(yīng)用在可食用性動物中，實現(xiàn)真正的無農(nóng)藥、獸藥殘留，為人體健康提供保障。研究銀杏提取物的抑菌活性成分具有一定的藥用價值和經(jīng)濟價值，目前銀杏中很多抑菌活性成分還未被發(fā)現(xiàn)，其還有很多藥用價值等待被研究出來，銀杏提取物抑菌活性的研究具有較大的研究空間。但目前面臨的最主要的問題是銀杏提取物中抑菌活性物質(zhì)的純化，只有將活性物質(zhì)純化出來才能研究出相對應(yīng)的產(chǎn)品，實現(xiàn)資源利用最大化，也能為獲得更大的經(jīng)濟效益提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

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