口蹄疫懸浮滅活疫苗質(zhì)量控制的意義及方案

摘要：該文主要結(jié)合實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，分析了口蹄疫懸浮滅活疫苗質(zhì)量控制的意義以及質(zhì)量控制方案。

關(guān)鍵詞：口蹄疫;疫苗質(zhì)量;方案

中圖分類(lèi)號(hào)：S851.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.049

0引言

目前在口蹄疫懸浮劑滅活疫苗生產(chǎn)中主要利用BKH2，傳代細(xì)胞培養(yǎng)復(fù)制病毒，然后將得到的培養(yǎng)物直接滅活后制成相關(guān)產(chǎn)品。在該生產(chǎn)流程中，BKH21傳代細(xì)胞制備的質(zhì)量、病毒增殖復(fù)制的長(zhǎng)度、培養(yǎng)物的濃度以及滅火及其產(chǎn)品的均質(zhì)、乳化等過(guò)程是質(zhì)量控制的難點(diǎn)和要點(diǎn)。而決定BKH21傳代細(xì)胞質(zhì)量的2個(gè)關(guān)鍵因素是細(xì)胞的密度和活力。目前在大多數(shù)口蹄疫懸浮劑疫苗生產(chǎn)廠家內(nèi)部使用的配方相對(duì)比較完善，培養(yǎng)基并不是主要影響因素，因此在疫苗質(zhì)量控制中關(guān)鍵是原材料。

1意義

1.1國(guó)家強(qiáng)制要求

口蹄疫病毒是危害偶蹄類(lèi)動(dòng)物的一種重特大傳染性疾病，該種疾病的傳播流行會(huì)給養(yǎng)殖戶(hù)造成不可挽回的經(jīng)濟(jì)損失。進(jìn)入2l世紀(jì)，隨著國(guó)家對(duì)口蹄疫防控重視程度和疫苗生產(chǎn)時(shí)間的延長(zhǎng)，口蹄疫疫苗的監(jiān)管制度逐漸完善，相關(guān)管理體系已基本形成。國(guó)家連續(xù)出臺(tái)了《新獸藥研制管理辦法》、《獸藥注冊(cè)辦法》等一系列獸藥管理辦法，在獸藥研制注冊(cè)生產(chǎn)、質(zhì)量管理、流通環(huán)節(jié)、管理監(jiān)督管理環(huán)節(jié)都有相關(guān)法律法規(guī)依據(jù)，切實(shí)提高了疫苗研制和生產(chǎn)的質(zhì)量，保證生產(chǎn)環(huán)節(jié)安全可靠。確保疫苗質(zhì)量，農(nóng)業(yè)部還采取了駐廠監(jiān)督、飛行檢查、批簽發(fā)等多種日常監(jiān)督管理模式[1]。

1.2企業(yè)自身需要

疫苗作為一種特殊的商品，企業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量是衡量企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)能力的主要方向，它是企業(yè)一切工作的基礎(chǔ)，更是鞏固和擴(kuò)大市場(chǎng)份額的前提，關(guān)系到企業(yè)未來(lái)的生存和發(fā)展。企業(yè)在追求經(jīng)濟(jì)效益最大化的同時(shí)，企業(yè)也需要承擔(dān)相應(yīng)的社會(huì)責(zé)任，通過(guò)勇于承擔(dān)社會(huì)責(zé)任，塑造企業(yè)形象，打造企業(yè)品牌價(jià)值，進(jìn)而獲得長(zhǎng)遠(yuǎn)經(jīng)濟(jì)效益。因此要求口蹄疫懸浮劑滅活疫苗生產(chǎn)企業(yè)要嚴(yán)格質(zhì)量控制，構(gòu)建完善的質(zhì)量控制方案，強(qiáng)化疫苗生產(chǎn)研發(fā)各個(gè)環(huán)節(jié)的控制管理，保證生產(chǎn)出來(lái)的疫苗符合相關(guān)要求，質(zhì)量過(guò)硬。

1.3生物品特殊要求

由于口蹄疫疫苗本身的生物特性以及安全防護(hù)方面存在諸多漏洞，在生物安全方面，如果不能?chē)?yán)格做好質(zhì)量控制工作，很容易對(duì)周?chē)祟?lèi)、生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重危害。由于口蹄疫屬于國(guó)家一類(lèi)重特大疫病，病毒培養(yǎng)、病毒滅活、疫苗制備等各個(gè)環(huán)節(jié)都存在生物安全方面的風(fēng)險(xiǎn)因素?？谔阋叩纳锇踩珕?wèn)題直接影響人類(lèi)的生命健康，做好質(zhì)量防控能有效降低病毒的傳播可能，它不僅是提高和保障動(dòng)物健康的基礎(chǔ)，更是提高和保障人類(lèi)生命健康，促進(jìn)社會(huì)穩(wěn)定發(fā)展的前提[2]。

2控制方案

2.1原材料質(zhì)量控制

由于口蹄疫懸浮滅活疫苗在制備過(guò)程中常需要很多生物原料，如血清、動(dòng)物性水解乳蛋白等，所以在整個(gè)生產(chǎn)中必須對(duì)這些原材料進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，要求原材料供貨商提供外源病毒檢測(cè)報(bào)告，要在檢測(cè)報(bào)告中明確原材料中是否含有牛海綿狀腦病病毒。在免疫接種口蹄疫懸浮滅活疫苗后產(chǎn)生的一系列不良反應(yīng)中，有相當(dāng)一部分是由于在疫苗生產(chǎn)中輔料質(zhì)量不過(guò)關(guān)所致。因此需要根據(jù)相應(yīng)的疫苗生產(chǎn)流程和生產(chǎn)工藝，加強(qiáng)對(duì)輔料質(zhì)量的檢測(cè)，嚴(yán)格控制輔料中的微生物限度，進(jìn)行嚴(yán)格的熱源檢查、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，確保各個(gè)輔料使用的安全性和合理性。在疫苗生產(chǎn)制備過(guò)程中，不應(yīng)將輔料看作成沒(méi)有活性的生產(chǎn)材料。只有確保各個(gè)輔料的理化性質(zhì)穩(wěn)定安全可靠，才能確保疫苗進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體后不會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的副作用和副反應(yīng)，疫苗安全性和有效性較高。

2.2病毒培養(yǎng)過(guò)程中質(zhì)量控制

相對(duì)于傳統(tǒng)的病毒培養(yǎng)模式，口蹄疫懸浮滅活疫苗在制備中對(duì)培養(yǎng)工藝進(jìn)行了有效革新和發(fā)展，因此在病毒培養(yǎng)中需要轉(zhuǎn)變理念，強(qiáng)化對(duì)病毒培養(yǎng)過(guò)程中各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。病毒分離培養(yǎng)中應(yīng)優(yōu)選培養(yǎng)基。在全新生產(chǎn)工藝上，細(xì)胞培養(yǎng)逐漸由貼壁生長(zhǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)閼腋∩a(chǎn)，需要對(duì)培養(yǎng)基的類(lèi)型進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，滿(mǎn)足整個(gè)病毒培養(yǎng)的生產(chǎn)需求，并不斷對(duì)原有的細(xì)胞進(jìn)行純化馴化培養(yǎng)后，逐步實(shí)現(xiàn)病毒細(xì)胞的繁殖增長(zhǎng)。另外，應(yīng)進(jìn)一步優(yōu)化懸浮液質(zhì)量。在病毒培養(yǎng)中應(yīng)嚴(yán)格控制好懸浮液培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速、溫度、溶解氧濃度、pH值、接種密度、細(xì)胞活力等指標(biāo)，通過(guò)對(duì)細(xì)胞增殖時(shí)間、細(xì)胞增殖數(shù)量，來(lái)評(píng)估整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量。還應(yīng)對(duì)整個(gè)病毒繁殖培養(yǎng)的反應(yīng)器進(jìn)行優(yōu)化。目前反應(yīng)器能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和控制的項(xiàng)目，主要包括反應(yīng)溫度、攪拌速度、溶解氧濃度、pH值，而對(duì)于病毒分離培養(yǎng)過(guò)程中的在線滅菌系統(tǒng)自動(dòng)滅菌與定位清洗的全自動(dòng)化生物反應(yīng)器、生物反應(yīng)器、自動(dòng)取樣和分析系統(tǒng)還有待進(jìn)一步優(yōu)化。在病毒分離培養(yǎng)過(guò)程中，氧氣供給方式、攪拌速度、攪拌方式、熱傳遞等指標(biāo)也需要進(jìn)一步探索研究[3]。 2.3病毒純化工藝質(zhì)量控制

制備的口蹄疫懸浮滅活疫苗進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體后，要產(chǎn)生很好的免疫應(yīng)答反應(yīng)，需確保疫苗中有較高含量的抗原。而如果滅活疫苗中含有大量非病毒蛋白，在疫苗免疫接種后很容易引起副反應(yīng)。另外，病毒增殖中產(chǎn)生的病毒非結(jié)構(gòu)性蛋白對(duì)于感染動(dòng)物的甄別困難較大。因此在進(jìn)行口蹄疫疫苗免疫接種中，尤其是在多家疫苗免疫接種過(guò)程中，為確保動(dòng)物產(chǎn)生很好的免疫抗體，同時(shí)降低疫苗使用過(guò)程中產(chǎn)生的副反應(yīng)，減少疫苗使用量，方便病毒抗原的儲(chǔ)存，便于對(duì)免疫和感染情況進(jìn)行有效鑒別，應(yīng)進(jìn)行病毒純化培養(yǎng)。目前在大型疫苗生產(chǎn)企業(yè)內(nèi)所使用的濃縮純化技術(shù)主要包括超濾和沉淀2種方法。在疫苗純化培養(yǎng)中通過(guò)利用聚乙二醇或者聚環(huán)氧乙烷既能實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒濃度的有效濃縮和純化培養(yǎng)，而且還能極大降低抗原收獲物中非病毒蛋白的含量和成分。

2.4生產(chǎn)過(guò)程中質(zhì)量監(jiān)督

疫苗質(zhì)量控制貫穿于疫苗生產(chǎn)的全過(guò)程，這才能得到符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的滅活疫苗產(chǎn)品?？谔阋咭呙鐝脑系倪M(jìn)廠到生產(chǎn)后檢驗(yàn)合格涉及到諸多環(huán)節(jié)和許多程序，每個(gè)環(huán)節(jié)都應(yīng)嚴(yán)格把控質(zhì)量，不能忽視任何一個(gè)環(huán)節(jié)，否則很容易導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量不合格。因此，口蹄疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)結(jié)合自身產(chǎn)品的實(shí)際特點(diǎn)，選擇合理的生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)技術(shù)，對(duì)生產(chǎn)全過(guò)程進(jìn)行有效的質(zhì)量監(jiān)督管理，控制疫苗質(zhì)量。

3結(jié)束語(yǔ)

疫苗生產(chǎn)廠家不僅需要對(duì)疫苗的理化性質(zhì)、無(wú)菌性、安全性、免疫效果等多方面進(jìn)行嚴(yán)格檢查，而且官方獸醫(yī)還應(yīng)不定期隨機(jī)抽檢廠家的口蹄疫疫苗，重點(diǎn)對(duì)成品的疫苗進(jìn)行無(wú)菌檢查、安全性檢查和免疫效力檢查，評(píng)價(jià)疫苗質(zhì)量，確保疫苗生產(chǎn)企業(yè)能生產(chǎn)出質(zhì)量過(guò)硬的疫苗產(chǎn)品。

參考文獻(xiàn)

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作者簡(jiǎn)介：王發(fā)信（1977-），男，甘肅定西人，漢族，本科，主要從事疫曲生產(chǎn)工作。