• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    廣西部分地區(qū)野生茶樹遺傳關(guān)系EST-SSR標(biāo)記分析

    2019-09-10 07:22:44黃壽輝溫立香彭靜茹張芬
    廣西植物 2019年6期
    關(guān)鍵詞:遺傳多樣性種質(zhì)資源廣西

    黃壽輝 溫立香 彭靜茹 張芬

    摘 要:為了明確廣西野生茶樹種質(zhì)資源的遺傳背景,該研究從廣西的寧明縣、金秀縣、蒼梧縣收集到14份地方野生茶樹種質(zhì)資源,以17個(gè)國家級(jí)茶樹良種作為參照,采用EST-SSR分子標(biāo)記技術(shù),探討了廣西這三個(gè)地方野生茶樹與國家級(jí)茶樹良種間的親緣關(guān)系以及廣西地方茶樹自身的遺傳多樣性。結(jié)果表明:15對(duì)EST-SSR引物共檢測到68個(gè)等位基因,平均每個(gè)引物可擴(kuò)增出4.53個(gè),其中多態(tài)性位點(diǎn)為60個(gè),多態(tài)性比率達(dá)88.2%。平均觀測雜合度、平均期望雜合度、平均Shannon信息指數(shù)分別為0.42、0.55和0.97。PIC值在0.23~0.74之間,平均為0.52,多態(tài)性較好。遺傳相似系數(shù)在0.53~0.9之間,平均值為0.71,31份供試材料在遺傳相似系數(shù)為0.71分為5組群,76%參照品種聚在A組群,而廣西本地的野生茶樹資源則主要分布在B、C、D、E組群。利用該研究中的4對(duì)核心引物即可將31份供試材料全部區(qū)分開,挑選其中10個(gè)多態(tài)性較好的等位位點(diǎn)進(jìn)行編碼,構(gòu)建31份供試種質(zhì)的DNA分子指紋圖譜。這表明廣西野生茶樹資源與國家級(jí)茶樹良種間遺傳差異較大、親緣關(guān)系較遠(yuǎn)、遺傳基礎(chǔ)寬、多樣性非常豐富,可作為茶樹育種的親本或開展茶樹功能基因研究的材料。

    關(guān)鍵詞:野生茶樹, 種質(zhì)資源, EST-SSR, 遺傳多樣性, DNA分子指紋圖譜, 廣西

    中圖分類號(hào):Q941, S571.1

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):1000-3142(2019)06-0821-10

    Abstract:In order to clarify the genetic background of wild tea tree germplasm resources in Guangxi, fourteen local wild tea tree germplasm resources were collected from Ningming County, Jinxiu County and Cangwu County, Guangxi. Taking seventeen state-level tea cultivars as reference, and adopting EST-SSR molecular marker technology, the research focused on the genetic relationship between these wild tea trees and the state-level tea cultivars in three places of Guangxi and the genetic diversity of local tea trees in Guangxi. The experiment results showed that a total of 68 alleles were detected in fifteen pairs of SSR primers, and each primer could amplify 4.53 by average, of which polymorphic site were 60, and the polymorphic ratio was 88.2%. The average observed heterozygosity, average expected heterozygosity, and average Shannon information index were 0.42, 0.55, and 0.97 respectively. The PIC value was between 0.23-0.74 with an average of 0.52, and the polymorphism was good. The genetic similarity coefficient was between 0.53 and 0.9, with an average value of 0.71. The test materials were divided into five groups at genetic similarity coefficient of 0.71, among which 76% reference warietics were clustered in Group A, while the local wild tea tree resources in Guangxi were mainly distributed in B, C, D and E groups. By using the four pairs of core primers in this study, 31 test materials could be completely distinguished. Ten allelic sites with good polymorphisms were selected for coding, and 31 DNA fingerprints of the tested germplasm were constructed. The study indicates that there is a great genetic difference between the wild tea trees in Guangxi and the state-level tea cultivars. The wild tea tree resources in Guangxi has distant genetic relationship, wide genetic basis and rich diversity, and can be used as the parent for tea tree breeding or materials for studying tea tree functional genes.

    Key words:wild tea tree, germplasm resources, EST-SSR, genetic diversity, DNA molecular fingerprint, Guangxi

    茶樹種質(zhì)資源是開展茶樹種質(zhì)創(chuàng)新、新品種選育、功能基因挖掘等研究的的物質(zhì)基礎(chǔ)和基本條件,種質(zhì)資源豐富與否與新品種選育成功率有著緊密的聯(lián)系(周萌等,2013)。研究表明,茶樹起源于我國云南、四川、貴州交界地區(qū)(虞富蓮,1986),而廣西與貴州、云南、四川接壤,是茶樹次生起源地(覃秀菊等,2006),常年水熱資源豐富,自然條件優(yōu)越,孕育著豐富的野生、半野生茶樹種質(zhì)資源。經(jīng)過長期自然選擇和自身進(jìn)化,廣西各地野生茶樹資源在表型、農(nóng)藝性狀、內(nèi)含物含量上具有豐富的差異性(覃秀菊等,2006;彭靖茹等,2019)。但對(duì)于廣西野生茶樹種質(zhì)資源的研究多數(shù)僅限于調(diào)查、收集和簡單分布地理位置和形態(tài)的描述,對(duì)于其遺傳特性的研究鮮見報(bào)道。

    用于茶樹種質(zhì)資源遺傳分析與評(píng)價(jià)的方法主要有形態(tài)學(xué)標(biāo)記法、生化標(biāo)記法和DNA分子標(biāo)記法三種,由于形態(tài)學(xué)標(biāo)記法過多依賴鑒定者的經(jīng)驗(yàn),且鑒定結(jié)果易受生產(chǎn)方式和環(huán)境影響(劉本英,2009),故其鑒定的可靠程度不高。生化標(biāo)記法由于受限于蛋白質(zhì)種類偏少,因此其檢測位點(diǎn)較少,多態(tài)性不夠豐富,不能有效區(qū)分親緣關(guān)系非常密切的茶樹資源(喬婷婷,2010)。DNA分子標(biāo)記直接反映基因組DNA水平遺傳變異,多態(tài)性豐富、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好,且不隨發(fā)育時(shí)期而變化,不受環(huán)境影響,鑒于此,DNA分了標(biāo)記技術(shù)已被廣泛應(yīng)用在包括茶樹在內(nèi)的各類作物種質(zhì)資源遺傳分析和鑒定上(姚明哲,2009)。目前,應(yīng)用于茶樹遺傳分析的分子標(biāo)記主要有RAPD、AFLP、ISSR和EST-SSR標(biāo)記(王麗鴛等,2004;姚明哲和陳亮,2003;粱慧玲和梁月榮,2003),其中EST-SSR相對(duì)其他標(biāo)記具有等位點(diǎn)多、共顯性、重復(fù)性好、多態(tài)性高、數(shù)量豐富等優(yōu)勢(Powell et al., 1996),且可直接從EST數(shù)據(jù)庫中篩選獲得SSR,開發(fā)成本相對(duì)較低(Varshney et al., 2005),另外EST-SSR序列為基因組的表達(dá)序列,其差異性直接反映出基因表達(dá)的差異(Saha et al., 2005; Gao et al., 2004)。EST-SSR應(yīng)用于茶樹遺傳分析屢見報(bào)道:如金基強(qiáng)等(2007)首次基于EST-SSR引物對(duì)浙江、福建等地的優(yōu)良茶樹品種資源進(jìn)行了分析,結(jié)果充分說明EST-SSR標(biāo)記可有效分析茶樹種質(zhì)資源,能真實(shí)反映不同品種間的遺傳差異;劉振等(2008)利用EST-SSR標(biāo)記對(duì)60份中國西南茶區(qū)的茶樹資源進(jìn)行了遺傳多樣性和親緣關(guān)系分析,研究結(jié)果表明EST-SSR標(biāo)記非常適用于茶樹遺傳多樣性和親緣關(guān)系的研究,同時(shí)結(jié)果也顯示我國西南茶區(qū)的茶樹種質(zhì)資源多樣性非常豐富,值得深入開發(fā)研究。姚明哲等(2009)通過EST-SSR標(biāo)記對(duì)45份江北茶區(qū)的茶樹初級(jí)核心種質(zhì)的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)分析,提出可進(jìn)一步對(duì)初級(jí)核心種質(zhì)進(jìn)行篩選,選擇更有遺傳代表性的資源,構(gòu)建江北茶區(qū)的核心種質(zhì),從而提高江北茶區(qū)優(yōu)異資源發(fā)掘和利用的效率。陳熙等(2016)基于EST-SSR分子標(biāo)記對(duì)陜西茶樹資源遺傳多樣性進(jìn)行分析,指出陜西茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性處于較高水平,從群體種選育良種是可行的。

    利用DNA分子標(biāo)記技術(shù)開展廣西野生茶樹資源的遺傳多樣性和親緣關(guān)系分析,可充分認(rèn)識(shí)廣西野生茶樹種質(zhì)資源的遺傳特性,對(duì)廣西茶樹資源的分子鑒定、品種遺傳改良、種質(zhì)保護(hù)、核心種質(zhì)的構(gòu)建、重要農(nóng)藝性狀基因定位以及分子標(biāo)記輔助育種都具有重要的參考價(jià)值和理論指導(dǎo)意義。該研究利用EST-SSR技術(shù)對(duì)廣西部分野生茶樹資源進(jìn)行遺傳特性研究,旨在揭示廣西野生茶樹種質(zhì)資源的遺傳基礎(chǔ),為今后核心種質(zhì)資源收集利用提供理論支撐。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試的31份茶樹種質(zhì)資源(表1),14份取自分布在廣西金秀、寧明、六堡鎮(zhèn)的野生茶,另外17份為國家級(jí)優(yōu)良品種。于2018年春季采摘一芽二葉新梢,液氮迅速冷凍,然后置于-70 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2 DNA提取

    采用改進(jìn)的CTAB法(陳盛相,2009)提取茶葉DNA,使用分光光度計(jì)和1%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的質(zhì)量和濃度。然后稀釋DNA原液至50 ng·μL-1,于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3 EST-SSR標(biāo)記

    參照姚明哲(2009)報(bào)道的EST-SSR標(biāo)記,經(jīng)過材料篩選,選出15對(duì)多態(tài)性高、帶型清晰的引物,引物信息如表2所示,委托華大基因科技有限公司合成。

    1.4 PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物檢測

    按(表3)配制EST-SSR反應(yīng)體系,進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增各個(gè)循環(huán)參數(shù):先94 ℃預(yù)變性5 min,94 ℃變性1 min,對(duì)應(yīng)溫度退火30 s(各引物退火溫度見表2),72 ℃延伸2 min,35個(gè)循環(huán);然后72 ℃延伸5 min,4 ℃保存。參照黃壽輝(2013)方法進(jìn)行PCR產(chǎn)物聚丙烯酰胺凝膠檢測、銀染顯色和拍照記錄。

    1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    每對(duì)SSR引物檢測一個(gè)位點(diǎn),每條多態(tài)性條帶視為一個(gè)等位變異,采用人工讀帶方法,將電泳圖上清晰的條帶記為“1”,同一位置無帶或不易分辨的弱帶計(jì)為“0”,建立“0-1”原始數(shù)據(jù)矩陣。使用軟件Popgene32(Yeh et al., 1999)統(tǒng)計(jì)每個(gè)引物在31份材料中擴(kuò)增的等位基因數(shù)(Na),觀測雜合度(Ho)、期望雜合度(He),Shannon信息指數(shù)(I)。根據(jù)公式PIC=1-∑(Pi)2計(jì)算每個(gè)引物的多態(tài)性信息量(PIC),其中Pi是帶有第i個(gè)等位基因群體的比例。根據(jù)公式DICE=2a/(2a+b+c)計(jì)算品種間的DICE遺傳相似性系數(shù),其中a為品種i與品種j共有帶型數(shù)目,b為品種i特有帶型數(shù)目,c為品種j特有帶型數(shù)目。用NTSYS-pc2.1(Rohlf,2000)軟件進(jìn)行品種間多態(tài)性和相似系數(shù)分析,通過非加權(quán)配對(duì)算術(shù)平均法(UPUMA)進(jìn)行聚類分析,建立親緣關(guān)系樹狀圖。結(jié)合供試材料的形態(tài)學(xué)特征,對(duì)聚類分析結(jié)果進(jìn)行分析討論。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 EST-SSR擴(kuò)增結(jié)果及多態(tài)性分析

    利用15對(duì)EST-SSR引物對(duì)31份實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行多態(tài)性檢測,部分引物擴(kuò)增結(jié)果見圖1。如表4所示,共檢測到68個(gè)等位位點(diǎn)。擴(kuò)出等位位點(diǎn)數(shù)最多的引物為T395和T588,分別可以擴(kuò)出6個(gè)等位位點(diǎn),其次是T6、T8、T185、T685、T802、T1110,均可擴(kuò)出5個(gè),T12、T21、T228、T641、T687可擴(kuò)出4個(gè),T663、T113為3個(gè),T13擴(kuò)出的等位位點(diǎn)最少,為2個(gè),平均每個(gè)引物可擴(kuò)出的等位位點(diǎn)數(shù)為4.47個(gè)。在擴(kuò)增到的68個(gè)等位基因中有14個(gè)特異等位基因,主要分布在寧明2號(hào)、寧明4號(hào)、六堡1號(hào)和金秀5號(hào)中,表明這幾個(gè)種質(zhì)在某些位點(diǎn)與其他種質(zhì)有著很大差異,是研究等位基因功能差異的良好材料。對(duì)于整個(gè)群體而言,群體的觀測雜合度(Ho)變化范圍為0.18(T113)~0.63(T1110),

    平均為0.42;期望雜合度(He)的變化范圍為0.23(T113)~0.74(T588),平均為0.55。Shannon信息指數(shù)(I)變幅在0.35~1.53之間,平均0.97。多態(tài)性信息含量(PIC值)是衡量引物擴(kuò)增位點(diǎn)多態(tài)性的重要指標(biāo)。當(dāng)PIC>0.5時(shí),表明擴(kuò)增位點(diǎn)具高度多態(tài)性,0.25<PIC<0.5時(shí),為中度多態(tài)性,PIC<0.25時(shí)為低度多態(tài)性(Botstein et al., 1980)。該研究選用的15個(gè)引物的PIC值在0.23~0.74之間,平均為0.52,標(biāo)記T13(PIC=0.23)為低度多態(tài)位點(diǎn),4個(gè)標(biāo)記T687(PIC=0.43)、T663(PIC=0.28)、T21(PIC=0.21)、T641(PIC=0.26)為中度多態(tài)位點(diǎn),其它10個(gè)為高度多態(tài)位點(diǎn),PIC值變化范圍為0.51~0.74,表明所選用EST-SSR引物在茶樹上具有較高水平的擴(kuò)增位點(diǎn)多態(tài)性,不同EST-SSR位點(diǎn)的多態(tài)性有明顯差異,同時(shí)也說明廣西野生茶樹與國家級(jí)茶樹良種間遺傳差異大,具有較高的遺傳多樣性。

    2.2 31份供試種質(zhì)的親緣關(guān)系

    根據(jù)31份供試茶樹種質(zhì)資源擴(kuò)出的68個(gè)EST-SSR位點(diǎn)的譜帶數(shù)據(jù)組成原始矩陣,計(jì)算所有種質(zhì)之間的遺傳相似性系數(shù),繪制親緣關(guān)系聚類圖(圖2)。圖2結(jié)果表明,供試種質(zhì)間的遺傳相似系數(shù)為0.53~0.90,平均為0.71,當(dāng)遺傳相似系數(shù)等于0.82時(shí),70%種質(zhì)已經(jīng)完全分開,其中金秀1號(hào)和金秀3號(hào)的遺傳相似系數(shù)最高,達(dá)到0.90,寧明2號(hào)與湘波綠最低,僅為0.38, 表明廣西野生茶樹種質(zhì)資源間經(jīng)長期的自然選擇后,與當(dāng)前推廣的國家級(jí)良種間存在較大的遺傳差異,而廣西野生資源之間既表現(xiàn)一定的遺傳相似性,也存在著豐富的遺傳差異。從系統(tǒng)樹發(fā)現(xiàn),31份供試材料分類比較零散,沒有很明顯的大群組,在相似系數(shù)為0.71左右分為5組群:A、B、C、D和E,其中A組群包含19份材料,占到所有供試的61%,分別是黃金芽、黃金葉、玉麒麟、六堡2號(hào)、梅占、金觀音、黃觀音、福鼎大毫、黃玫瑰、桂香18號(hào)、六堡3號(hào)、六堡4號(hào)、堯山秀麗、桂綠1號(hào)、云南大葉種、金秀1號(hào)、金秀3號(hào)、金秀5號(hào);B組群有金秀2號(hào)、金秀4號(hào)、碧香早、湘波綠;C組群也有6個(gè)材料,分別是白玉1號(hào)、紫鵑、六堡1號(hào)、六堡5號(hào)、寧明1號(hào)、寧明3號(hào);D和E組群分別都只有1份材料,分別是寧明4號(hào)和寧明2號(hào)。以相似系數(shù)0.78為閾值,A組群又可分為7個(gè)亞群,B組群細(xì)分為3個(gè)亞群,C組群則分為4個(gè)亞群。從整個(gè)親緣關(guān)系看,大部分資源按照相同地域來源聚在一起,如A3亞組群中來自浙江安吉的黃金葉和黃金芽,來自廣西桂林的A4亞組群桂綠1號(hào)和堯山秀麗,來自湖南長沙的B3亞組群碧香早和湘波綠,還有A6亞組群金秀1號(hào)和金秀3號(hào),C3亞組群寧明1號(hào)和寧明3號(hào),兩份材料彼此間的遺傳相關(guān)系數(shù)相對(duì)較小,說明較近的地理關(guān)系表現(xiàn)出較近的親緣關(guān)系;A1組群中,金牡丹、金觀音、黃觀音均由鐵觀音與黃金桂雜交而得,而黃玫瑰又是由黃金桂與黃觀音回交一個(gè)世代獲得,顯然他們之間的遺傳相似系數(shù)相對(duì)要高,聚到一起也是情理之中;另外C2亞組群中的紫鵑和六堡1號(hào),兩者雖然不是來自同一地區(qū),但兩份材料均為紫芽材料,也聚到了同一個(gè)分支上,較相近的形態(tài)學(xué)特征也表現(xiàn)出較近的親緣關(guān)系,說明該研究所選用的引物可對(duì)供試材料的遺傳差異性進(jìn)行比較客觀科學(xué)的分析。

    2.3 供試種質(zhì)的DNA指紋圖譜

    使用15對(duì)EST-SSR引物,其中的T8、T21、T588、T1110共4對(duì)引物即可鑒定供試的31份種質(zhì),基于這4對(duì)引物對(duì)每份茶樹資源的等位基因帶型,挑選其中10個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行組合編碼,構(gòu)建了31份供試種質(zhì)的DNA分子指紋圖譜(圖3),并獲得10位數(shù)DNA分子身份證編碼(表5)。表5結(jié)果表明每份材料都對(duì)應(yīng)唯一的身份證編碼,這4對(duì)EST-SSR引物可作為鑒別茶樹品種參考引物。

    3 討論與結(jié)論

    3.1 EST-SSR標(biāo)記的多態(tài)性豐富,能對(duì)供試材料的遺傳多樣性進(jìn)行客觀分析隨著分子生物學(xué)、生物信息學(xué)、基因組學(xué)的快速發(fā)展,可供用于植物遺傳研究的分子標(biāo)記種類越來越豐富,除了傳統(tǒng)的RAPD、AFLP、ISSR、EST-SSR,近年來又出現(xiàn)了STS、SNP等分子標(biāo)記,但茶樹作為異花授粉的多倍體木本植物,基因組相對(duì)比較復(fù)雜,DNA分子標(biāo)記在茶樹遺傳研究起步較晚,目前多數(shù)標(biāo)記在茶樹上的研究基本處在初步階段。本研究用15對(duì)EST-SSR引物對(duì)14份廣西野生茶樹資源和17份國內(nèi)優(yōu)良茶樹品種進(jìn)行了遺傳多樣性和親緣關(guān)系的分析。15對(duì)EST-SSR引物各項(xiàng)數(shù)據(jù)均處于理想的范圍,說明所篩選獲得的標(biāo)記多態(tài)性較好。聚類圖中,相同來源、相同親本、相同形態(tài)特性的材料均聚到了一起,說明選用的引物能對(duì)材料的等位位點(diǎn)進(jìn)行有效擴(kuò)增,真實(shí)客觀反映出供試材料的遺傳多樣性。白玉1號(hào)、紫鵑和六堡1號(hào)表現(xiàn)出按葉色優(yōu)先聚類的趨勢,說明葉色的多樣性是分子標(biāo)記遺傳多樣性表現(xiàn)形式的一個(gè)方面,但這些EST-SSR標(biāo)記是否與茶樹葉色相關(guān)聯(lián)還需要進(jìn)一步研究。該研究中用四個(gè)引物即可將供試31種質(zhì)全部分開,經(jīng)過計(jì)算機(jī)處理,形成了每個(gè)種質(zhì)唯一的分子身份證編碼,說明所用引物等位位點(diǎn)非常豐富,具有很強(qiáng)的茶樹品種鑒別能力,這套引物可用于構(gòu)建茶樹品種分子指紋圖譜或作為茶樹品種鑒定的參考引物。

    3.2 廣西野生茶樹資源遺傳多樣性豐富本研究在聚類結(jié)果中,大部分資源能夠按照相同的地理來源或相似的形態(tài)學(xué)特性聚在同一類群,但也有部分材料例外,體現(xiàn)了茶樹復(fù)雜的親緣關(guān)系。在親緣關(guān)系圖中,供試的17份國家級(jí)良種中有13份都聚在A組群,占到總數(shù)的76%;而廣西本地的野生茶樹資源則分布在B、C、D、E組群,說明廣西野生茶樹資源與國家級(jí)茶樹良種遺傳差異較大。另外,廣西本地的野生茶樹中,來自同一地區(qū)的材料間或者來自不同地區(qū)的材料間,除了金秀1號(hào)和金秀3號(hào)遺傳相似系數(shù)達(dá)到0.9外,其他兩兩之間的遺傳相似系數(shù)均小于0.81,寧明2號(hào)和寧明4號(hào)甚至在相似系數(shù)為0.53和0.64時(shí)便單獨(dú)聚成一類。可見,廣西野生茶樹資源的遺傳多樣性非常豐富。這主要得益于廣西作為茶樹亞起源中心,自北向南分為中亞熱帶、南亞熱帶、北熱帶3個(gè)氣候帶,多樣的氣候環(huán)境也就孕育了多樣性十分豐富的野生茶樹資源,又由于廣西多山地,阻隔了各茶區(qū)之間的基因自然交流,這就使各個(gè)茶區(qū)形成了一個(gè)個(gè)相對(duì)獨(dú)立的資源庫。

    3.3 廣西野生茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性的利用和保護(hù)廣西野生茶樹種質(zhì)資源豐富,以往限于人力和技術(shù),很多資源并未得到很好的挖掘,基于廣西本地茶樹資源選育出的茶樹良種少之又少,隨著人們對(duì)種質(zhì)資源認(rèn)識(shí)的不斷深入和研究分析手段的不斷豐富,廣西野生茶樹資源正逐步引起重視并被加以研究利用。利用分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)廣西野生茶樹資源進(jìn)行遺傳多樣性分析,揭示育種材料之間的親緣關(guān)系。在農(nóng)藝性狀優(yōu)良的前提下,將親緣關(guān)系遠(yuǎn)的材料進(jìn)行雜交,可望獲得遺傳基礎(chǔ)豐富、變異類型多甚至超親的雜交后代。從本研究結(jié)果來看,材料寧明2號(hào)和寧明4號(hào)在遺傳相似系數(shù)分別等于0.53和0.63時(shí)單獨(dú)聚類,說明它們與其他供試材料間的遺傳差異較大,分別選擇寧明2號(hào)或者寧明4號(hào)與國家級(jí)良種進(jìn)行雜交育種,如:金牡丹(寧明2號(hào)與金牡丹遺傳相似系數(shù)為0.57)、湘波綠(寧明2號(hào)與湘波綠遺傳相似系數(shù)為0.58)、碧香早(寧明2號(hào)與碧香早遺傳相似系數(shù)為0.55),都有望獲得具有優(yōu)良性狀的雜交后代??梢?,遺傳多樣性分析可以為親本配置提供依據(jù),使所做的育種工作更加有針對(duì)性,提高優(yōu)良品系選育的效率。遺傳多樣性分析在種質(zhì)保護(hù)中同樣具有重要價(jià)值,在開展收集種質(zhì)資源工作時(shí),人們往往通過肉眼觀察,根據(jù)形態(tài)學(xué)特性、農(nóng)藝性狀來篩選種質(zhì),但對(duì)于一些形態(tài)特性相似種質(zhì)會(huì)難以做出選擇,從而會(huì)錯(cuò)過一些攜帶優(yōu)異基因的種質(zhì)材料,另外僅從形態(tài)學(xué)往往會(huì)過高估計(jì)(Bushakra et al.,1999),收集到重復(fù)材料,在實(shí)際收集工作中造成人力、物力、財(cái)力的浪費(fèi)。收集前先對(duì)野生材料進(jìn)行系統(tǒng)的遺傳多樣性分析,然后根據(jù)分析結(jié)果篩選收集種質(zhì),從而以最少數(shù)量的遺傳資源最大限度地保存整個(gè)資源群體的遺傳多樣性,起到事半功倍的效果。

    隨著茶樹基因組測序工作完成,茶樹分子標(biāo)記數(shù)量和種類將有大幅度增加,結(jié)合廣西野生茶樹資源豐富的優(yōu)勢,今后重點(diǎn)對(duì)我區(qū)野生茶樹資源的遺傳特性進(jìn)行分析、鑒定,挖掘茶樹功能基因并進(jìn)行QTL定位,開展茶樹遺傳圖譜繪制等,在為我區(qū)乃全國茶樹育種工作不斷提供新的種質(zhì)材料的同時(shí),可極大促進(jìn)茶樹分子標(biāo)記輔助育種的進(jìn)一步發(fā)展。

    參考文獻(xiàn):

    BOTSTEIN D, WHITE RL, SKOLNICK M, et al., 1980. Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms [J]. Am J Human Genet, 32:314-331.

    BUSHAKRA JM, HODGES SA, COOPER JB, et al., 1999. The extent of clonality and genetic diversity in the Santa Cruz Island ironwood Lyonothamnus floribundus [J]. Mol Ecol, 8:471-475.

    CHEN SX, 2009. A preliminary study on screening special tea plant germplasm resources with high caffeine and SSR markers related to high caffeine [D]. Chengdu:Sichuan Agriculture University:1-36.? [陳盛相, 2009. 高咖啡堿含量的茶樹特異種質(zhì)資源篩選及SSR標(biāo)記初步研究 [D]. 成都:四川農(nóng)業(yè)大學(xué):1-36.]

    CHEN X, LI J, ZHANG Y, et al., 2016. Genetic diversity analysis of tea in Shaanxi Province based on EST-SSR [J]. J Sichuan Agric Univ, 34(3):322-327.? [陳熙, 李佼, 張羽, 等, 2016. 基于EST-SSR的陜西茶樹資源遺傳多樣性分析 [J]. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 34(3):322-327.]

    GAO LF, JING RL, HUO NX, et al., 2004. One hundred and one new microsatellite loci derived from EST-SSR in bread wheat [J]. Theor Appl Genet, 108:392-1400.

    HUANG SH, 2013. Primary study on authenticity and purity detection of rapeseed hybrids using SSR markers [D]. Wuhan:Huazhong Agricultural University:1-48.? [黃壽輝, 2013. 油菜雜交種真實(shí)性和純度SSR標(biāo)記檢測初步研究 [D]. 武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué):1-48.]

    JIN JQ, CUI HR, GONG XC,et al., 2007. Studies on tea plants germplasms using EST-SSR marker [J]. Heletitas, 29(1):103-108.? [金基強(qiáng), 崔海瑞, 龔曉春, 等, 2007. 用EST-SSR標(biāo)記對(duì)茶樹種質(zhì)資源的研究 [J]. 遺傳, 29(1):103-108.]

    LIANG HL, LIANG YR, 2003. The principle and application of plant molecular marker and the of in genetics and breeding of tea [J]. Tea, 29(4):191-194.? [粱慧玲, 梁月榮, 2003. 植物分子標(biāo)記技術(shù)原理及其在茶樹育種中的應(yīng)用 [J]. 茶葉, 29(4):191-194.]

    LIU BY, 2009. Application studies of EST-SSR and ISSR markers in tea germplasms fromyunnan [D]. Beijing:Chinese Academy of Agricultural Sciences:1-97.? [劉本英, 2009. EST-SSR和ISSR分子標(biāo)記在云南茶樹資源中的應(yīng)用研究 [D]. 北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院:1-97.]

    LIU BY, WANG LY, ZHOU J, et al., 2008. Fingerprinting construction and genetic diversity analysis of Yunnan Dayezhong tea germplasm resources by ISSR markers [J].? J Plant Gene Resour, (9):458-464.? [劉本英, 王麗鴛, 周健, 等, 2008. 云南大葉種茶樹種質(zhì)資源ISSR指紋圖譜構(gòu)建及遺傳多樣性分析 [J]. 植物遺傳資源學(xué)報(bào), (9):458-464.]

    LIU Z, WANG XC, ZHAO LP, et al., 2008. Genetic diversity and relationship analysis of tea germplasms originated from southwestern China based on EST-SSR [J]. Mol Plant Breed, 6(1):100-110.? [劉振, 王新超, 趙麗萍, 等, 2008. 基于EST-SSR的西南茶區(qū)茶樹資源遺傳多樣性和親緣關(guān)系分析 [J]. 分子植物育種, 6(1):100-110.]

    PENG JR, LI CC, TAN YW, et al., 2019. Clustering analysis for wild ancient tea germplasm resources in Debao County and Longlin County,Guangxi based on SSR molecular markers [J]. J Southern Agric, 50(1):1-7. [彭靖茹, 李朝昌, 檀業(yè)維, 等, 2019. 基于SSR分子標(biāo)記的廣西德??h和隆林縣野生古茶樹聚類分析 [J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 50(1):1-7.]

    POWELL W, MACHRAY GC, PROVAN J, 1996. Polymorphism revealedby simple sequence repeats [J]. Trends Plant Sci, 1(7):215-222.

    QIAO TT, 2010. Genetic diversity of tea and association analysis of phenotypic traits with EST SSR markers [D]. Beijing:Chinese Academy of Agricultural Sciences:1-57. [喬婷婷, 2010. 茶樹資源遺傳多樣性及其表型性狀關(guān)聯(lián)EST SSR位點(diǎn)的初步鑒定 [D]. 北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院:1-57.]

    QIN XJ, CHEN XQ, CHEN CF, et al., 2006. A review of the germplasm resources of characteristic tea trees in Guangxi? [J]. Chin Countryside Well-Off Technol, (10):37-38.? [覃秀菊, 陳新強(qiáng), 陳春芬, 等, 2006. 廣西特性茶樹種質(zhì)資源綜述 [J]. 中國農(nóng)村小康科技, (10):37-38.]

    ROHLF FJ, 2000. NTSYS-pc numerical taxonomy and multivariate analysis system version 2.1? [OL]. New York:pplied Biostatistics Inc. http://www.exetersoftware.com/cat/ntsyspc/ntsyspc.html.

    SAHA MC, MIAN MA, EUJAYLL, et al., 2004. Tall fescue EST-SSR markers with transferability across several grass species [J]. Theor? Appl Genet, 109:783-791.

    VARSHNEY RK, GRANER A, SORRELLS ME, 2005. Genic microsatellite markers in plants:Features and applications [J]. Trends Biotechnol, 23(1):48-55.

    WANG LY, CHENG H, ZHOU J, 2004. Advances on DNA molecular markers and gene-engineering in tea plants [J]. J Tea Sci, 24(1):12-17.? [王麗鴛, 成浩, 周健, 2004. 茶樹DNA分子標(biāo)記及基因工程研究進(jìn)展 [J]. 茶葉科學(xué), 24(1):12-17.]

    YAO MZ, CHEN L, 2003. The application of molecular marker in genetics and breeding of tea [J]. Biotechnol Bull, (5):27-30.? [姚明哲, 陳亮, 2003. 分子標(biāo)記在茶樹遺傳育種上的應(yīng)用 [J]. 生物技術(shù)通報(bào), (5):27-30.]

    YAO MZ, 2009. Studies on genetic diversity and structure of tea ermnlasm in China based on ISSR and EST-SSR markers [D]. Hangzhou:Zhejiang University:1-90.? [姚明哲, 2009. 利用ISSR和EST-SSR標(biāo)記研究中國茶樹資源的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu) [D]. 杭州:浙江大學(xué):1-90.]

    YEH FC, YANG RC, BOYLE T, 1999. POPGENE:Microsoft window-based freeware for population genetic analysis, version 1.31 [OL]. Edmonton, Canada:University of Alberta. http://sites.ualberta.ca/~fveh/popgene.html.

    YU FL, 1986. An analysis on the origin and origin cener of tea trees [J]. J Tea Sci, 6(1):1-8.? [虞富蓮, 1986. 論茶樹原產(chǎn)地和起源中心 [J]. 茶葉科學(xué), 6(1):1-8.]

    ZHOU M, LI YY, SUN XM, et al., 2013. Genetic diversity assessment of ancient tea plants in Yunnan Province of China revealed by EST-SSR markers? [J]. Acta Agric Boreal-Sin, (28):91-96.? [周萌, 李友勇, 孫雪梅, 等, 2013. 基于EST-SSR標(biāo)記的云南大茶樹遺傳多樣性分析 [J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào), (28):91-96.]

    猜你喜歡
    遺傳多樣性種質(zhì)資源廣西
    廣西廣西
    歌海(2017年1期)2017-05-30 13:07:40
    綠肥作物紫云英研究進(jìn)展
    大白菜種質(zhì)資源抗根腫病基因CRa和CRb的分子標(biāo)記鑒定與分析
    茄子種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀遺傳多樣性分析
    廣西尼的呀
    歌海(2016年6期)2017-01-10 01:35:52
    玉米種質(zhì)資源抗旱性鑒定研究進(jìn)展
    淺析田間水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與完善
    西藏野核桃的表型特征及其保育措施
    水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與遺傳多樣性研究
    廣西出土的商代銅卣
    大眾考古(2014年3期)2014-06-26 08:30:46
    99精品在免费线老司机午夜| 欧美成人免费av一区二区三区| 嫩草影院入口| 色播亚洲综合网| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲七黄色美女视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 色精品久久人妻99蜜桃| 嫩草影院入口| 1024手机看黄色片| 国内精品久久久久久久电影| 色视频www国产| 成年女人毛片免费观看观看9| 色av中文字幕| 高潮久久久久久久久久久不卡| 九九在线视频观看精品| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 性色av乱码一区二区三区2| 久久久久性生活片| 国产伦在线观看视频一区| 此物有八面人人有两片| 欧美性猛交黑人性爽| 日韩有码中文字幕| 免费在线观看日本一区| 在线观看av片永久免费下载| 精品午夜福利在线看| 久久午夜福利片| 中文字幕免费在线视频6| 一本综合久久免费| 一级a爱片免费观看的视频| 18禁在线播放成人免费| 中出人妻视频一区二区| 一个人看的www免费观看视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 又爽又黄无遮挡网站| 国产精品人妻久久久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 长腿黑丝高跟| 1024手机看黄色片| 亚洲午夜理论影院| 少妇人妻一区二区三区视频| 69av精品久久久久久| 如何舔出高潮| 亚洲,欧美,日韩| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 此物有八面人人有两片| 免费电影在线观看免费观看| 免费无遮挡裸体视频| 国产探花极品一区二区| 网址你懂的国产日韩在线| 久久精品91蜜桃| 亚洲精品在线观看二区| 91av网一区二区| 亚洲av.av天堂| 久久久久久久午夜电影| 99国产精品一区二区蜜桃av| 日韩高清综合在线| 国产中年淑女户外野战色| 国产v大片淫在线免费观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲内射少妇av| 午夜福利在线观看吧| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美成人性av电影在线观看| 免费黄网站久久成人精品 | 久久性视频一级片| 成人精品一区二区免费| 欧美在线黄色| 久久久久九九精品影院| 看片在线看免费视频| 亚洲 国产 在线| 国产精品爽爽va在线观看网站| x7x7x7水蜜桃| 在线播放无遮挡| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲无线在线观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 91字幕亚洲| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产精品亚洲av一区麻豆| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久99热这里只有精品18| 亚洲五月天丁香| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久香蕉精品热| 国产精品免费一区二区三区在线| 午夜激情福利司机影院| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲av.av天堂| 给我免费播放毛片高清在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 大型黄色视频在线免费观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 一个人看的www免费观看视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 日韩欧美精品免费久久 | 少妇的逼好多水| 午夜激情福利司机影院| 一个人看的www免费观看视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲成av人片免费观看| 国产探花在线观看一区二区| 色在线成人网| 亚洲精华国产精华精| 九色国产91popny在线| 欧美日韩黄片免| 少妇的逼好多水| 久久久久性生活片| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 男女下面进入的视频免费午夜| 97热精品久久久久久| 欧美极品一区二区三区四区| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 人人妻,人人澡人人爽秒播| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲综合色惰| 我要搜黄色片| 国产淫片久久久久久久久 | 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产成年人精品一区二区| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 午夜a级毛片| 午夜免费激情av| 免费人成在线观看视频色| 在线观看av片永久免费下载| 夜夜爽天天搞| 在线国产一区二区在线| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 高清毛片免费观看视频网站| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美在线黄色| 久99久视频精品免费| 欧美日韩国产亚洲二区| 一进一出好大好爽视频| 亚洲成人久久爱视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲av免费在线观看| 51国产日韩欧美| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 日韩大尺度精品在线看网址| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 99久久无色码亚洲精品果冻| 看黄色毛片网站| 少妇人妻一区二区三区视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 成人美女网站在线观看视频| 成人三级黄色视频| 精品欧美国产一区二区三| 日日夜夜操网爽| 色在线成人网| 嫁个100分男人电影在线观看| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲 国产 在线| 成年女人永久免费观看视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 免费看光身美女| 五月伊人婷婷丁香| 精品午夜福利在线看| 日本一二三区视频观看| 久久伊人香网站| 757午夜福利合集在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 五月玫瑰六月丁香| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品不卡视频一区二区 | 午夜福利在线观看吧| 亚洲一区高清亚洲精品| 色综合婷婷激情| 日韩欧美国产一区二区入口| 俄罗斯特黄特色一大片| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看 | 成年女人看的毛片在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 一本一本综合久久| 亚洲av成人精品一区久久| 久久久久久九九精品二区国产| 欧美性猛交黑人性爽| 毛片女人毛片| 中文字幕久久专区| 免费在线观看影片大全网站| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲最大成人手机在线| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲最大成人中文| 少妇人妻一区二区三区视频| 午夜亚洲福利在线播放| 三级毛片av免费| 国产精品不卡视频一区二区 | 久久久久久久精品吃奶| 麻豆av噜噜一区二区三区| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 在线观看66精品国产| 亚洲国产精品999在线| 我要看日韩黄色一级片| 麻豆av噜噜一区二区三区| 老女人水多毛片| 国产视频一区二区在线看| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲第一电影网av| 成人欧美大片| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线| www.www免费av| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 精品久久久久久久久久久久久| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 黄色一级大片看看| 国产毛片a区久久久久| 午夜福利高清视频| 男人舔奶头视频| 波多野结衣高清作品| 岛国在线免费视频观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 内射极品少妇av片p| 国产精品免费一区二区三区在线| 免费黄网站久久成人精品 | 成人性生交大片免费视频hd| av天堂中文字幕网| 国产一区二区激情短视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产午夜福利久久久久久| 3wmmmm亚洲av在线观看| 精品久久久久久久久av| 男人的好看免费观看在线视频| 特大巨黑吊av在线直播| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 色吧在线观看| 日韩欧美精品免费久久 | 亚洲国产精品sss在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲国产精品久久男人天堂| 久久国产乱子免费精品| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成人特级黄色片久久久久久久| 性色av乱码一区二区三区2| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产高清激情床上av| 免费在线观看成人毛片| 悠悠久久av| 国产精品久久视频播放| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 十八禁网站免费在线| 国产成人啪精品午夜网站| 国产爱豆传媒在线观看| 青草久久国产| av福利片在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 麻豆一二三区av精品| 色吧在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| av在线观看视频网站免费| 久久午夜亚洲精品久久| 精品不卡国产一区二区三区| 性色av乱码一区二区三区2| 国产探花在线观看一区二区| 宅男免费午夜| 高清在线国产一区| 少妇丰满av| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲欧美日韩东京热| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 欧美zozozo另类| 亚洲人成网站高清观看| 国产主播在线观看一区二区| 色视频www国产| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲精华国产精华精| 老司机深夜福利视频在线观看| 久久久久久久午夜电影| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲av.av天堂| 国语自产精品视频在线第100页| 精品人妻视频免费看| 国产淫片久久久久久久久 | 最近视频中文字幕2019在线8| 十八禁国产超污无遮挡网站| eeuss影院久久| 久久久久性生活片| 久久欧美精品欧美久久欧美| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲国产高清在线一区二区三| 嫩草影院新地址| 在线播放无遮挡| 国产成人福利小说| 窝窝影院91人妻| 日韩欧美三级三区| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产av在哪里看| 久久久国产成人免费| 欧美日韩综合久久久久久 | 亚洲国产色片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 97热精品久久久久久| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 综合色av麻豆| 99精品在免费线老司机午夜| 一进一出好大好爽视频| 国产在视频线在精品| 一区福利在线观看| 婷婷丁香在线五月| 午夜福利欧美成人| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产午夜福利久久久久久| 午夜老司机福利剧场| 免费无遮挡裸体视频| 一级毛片久久久久久久久女| 在线观看舔阴道视频| АⅤ资源中文在线天堂| 十八禁国产超污无遮挡网站| 宅男免费午夜| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久久久久久久大av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 精品人妻视频免费看| 两人在一起打扑克的视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 欧美一区二区亚洲| netflix在线观看网站| 亚洲激情在线av| 91麻豆av在线| 国产三级在线视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 99视频精品全部免费 在线| 99久久无色码亚洲精品果冻| 在线观看66精品国产| 老鸭窝网址在线观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 深爱激情五月婷婷| 欧美日本视频| 欧美一区二区亚洲| 国产精品亚洲美女久久久| 黄色视频,在线免费观看| 真人做人爱边吃奶动态| 色吧在线观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 久久99热这里只有精品18| 亚洲avbb在线观看| 国产主播在线观看一区二区| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 国产毛片a区久久久久| 中文字幕熟女人妻在线| 少妇的逼水好多| 免费高清视频大片| 国产精品电影一区二区三区| 免费电影在线观看免费观看| 午夜久久久久精精品| 亚洲美女视频黄频| 久久伊人香网站| 午夜福利18| 久久99热6这里只有精品| 免费看a级黄色片| 久久99热6这里只有精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 给我免费播放毛片高清在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 最近在线观看免费完整版| 国产一区二区三区视频了| 国产精华一区二区三区| 国产一级毛片七仙女欲春2| 嫁个100分男人电影在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 婷婷精品国产亚洲av在线| 日本免费a在线| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产男靠女视频免费网站| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲真实伦在线观看| 成年免费大片在线观看| 美女大奶头视频| 首页视频小说图片口味搜索| 午夜福利欧美成人| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 在线观看免费视频日本深夜| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 国产爱豆传媒在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 免费看a级黄色片| 国产成人欧美在线观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 他把我摸到了高潮在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲内射少妇av| 中文字幕av在线有码专区| 淫秽高清视频在线观看| 国产亚洲精品av在线| 深爱激情五月婷婷| 免费无遮挡裸体视频| 性插视频无遮挡在线免费观看| 少妇高潮的动态图| 男女视频在线观看网站免费| 精品一区二区三区视频在线观看免费| a在线观看视频网站| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 午夜久久久久精精品| 精品一区二区免费观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 日日夜夜操网爽| 久久久久久久午夜电影| 亚洲,欧美,日韩| 嫩草影院新地址| 日本熟妇午夜| 欧美黑人巨大hd| 免费av不卡在线播放| 69人妻影院| 免费无遮挡裸体视频| 国产欧美日韩一区二区三| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久香蕉精品热| 久9热在线精品视频| 日本黄大片高清| 亚洲在线自拍视频| 99久久精品热视频| 亚洲三级黄色毛片| 91麻豆av在线| 色综合亚洲欧美另类图片| 老女人水多毛片| 我的女老师完整版在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 成人特级av手机在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| a级毛片免费高清观看在线播放| 免费一级毛片在线播放高清视频| or卡值多少钱| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产av不卡久久| 日本三级黄在线观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 在线天堂最新版资源| 久久久国产成人免费| 午夜福利在线在线| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲av免费在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲专区国产一区二区| 1024手机看黄色片| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国产伦精品一区二区三区四那| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲美女黄片视频| 欧美高清性xxxxhd video| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日韩欧美在线乱码| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产精品久久久久久久电影| 国产成人aa在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲内射少妇av| 欧美激情国产日韩精品一区| 在线观看午夜福利视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久国产成人精品二区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 精品久久久久久久久久免费视频| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲色图av天堂| 一本一本综合久久| 日本五十路高清| 日本三级黄在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 伊人久久精品亚洲午夜| 免费观看的影片在线观看| 嫩草影视91久久| 亚洲欧美精品综合久久99| 精品一区二区免费观看| 免费人成在线观看视频色| 观看美女的网站| av天堂中文字幕网| bbb黄色大片| 一a级毛片在线观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产成年人精品一区二区| 91九色精品人成在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看 | 中文字幕久久专区| 国产黄色小视频在线观看| 在线天堂最新版资源| 一级黄片播放器| 最新中文字幕久久久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 最近中文字幕高清免费大全6 | 最好的美女福利视频网| 亚洲不卡免费看| 久久精品国产清高在天天线| 中文字幕av在线有码专区| 毛片一级片免费看久久久久 | 国产一区二区在线观看日韩| 国内精品久久久久精免费| 日本免费a在线| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 欧美黄色淫秽网站| 国产91精品成人一区二区三区| 人人妻人人看人人澡| 天天躁日日操中文字幕| 欧美+亚洲+日韩+国产| 成人亚洲精品av一区二区| 男女床上黄色一级片免费看| 欧美+日韩+精品| 色播亚洲综合网| 精品人妻偷拍中文字幕| 免费在线观看亚洲国产| 一区福利在线观看| 国产在线男女| 天天躁日日操中文字幕| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日本三级黄在线观看| 亚洲无线在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲成a人片在线一区二区| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 日韩高清综合在线| 久久人人精品亚洲av| 亚洲人成网站高清观看| www.999成人在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 97超视频在线观看视频| 国内精品久久久久精免费| 99久久精品热视频| 国产久久久一区二区三区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 中出人妻视频一区二区| 国产私拍福利视频在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 91av网一区二区| 99热精品在线国产| 两个人视频免费观看高清| 91久久精品电影网| 久久伊人香网站| 亚洲最大成人av| 99视频精品全部免费 在线| 国产亚洲欧美98| 男女床上黄色一级片免费看| 黄色配什么色好看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲午夜理论影院| 免费观看的影片在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 啦啦啦韩国在线观看视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 好男人电影高清在线观看| 又爽又黄a免费视频| 超碰av人人做人人爽久久| 国产精品一区二区性色av| 亚洲人成网站在线播| 90打野战视频偷拍视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产v大片淫在线免费观看| 精品久久国产蜜桃| 女同久久另类99精品国产91| 国产成人aa在线观看| 国产主播在线观看一区二区| 9191精品国产免费久久| 亚洲av免费高清在线观看| 少妇丰满av| 99久久99久久久精品蜜桃| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产三级在线视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 天美传媒精品一区二区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美日韩综合久久久久久 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美成人性av电影在线观看| 久久精品人妻少妇| 男女那种视频在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6 | 精品国产三级普通话版| 中文资源天堂在线| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲自拍偷在线| 免费一级毛片在线播放高清视频| 99riav亚洲国产免费| 欧美在线黄色| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 国产男靠女视频免费网站| 99热精品在线国产| 日韩高清综合在线|