湖南麻陽甜橙幼果枳實的質(zhì)量評價分析

邱伊星 肖瑞飛 龔力民 鄧瑩 王智 朱久宜 王煒

〔摘要〕 目的 評價湖南麻陽產(chǎn)甜橙幼果枳實的質(zhì)量，并與市面上不同產(chǎn)地的枳實進行含量比較。方法 參考2015版《中華人民共和國藥典》枳實項下的性狀、鑒別、水分檢查、浸出物、含量測定等多種方法對湖南麻陽產(chǎn)枳實進行全面的質(zhì)量研究，對其他產(chǎn)地枳實進行辛弗林含量的測定并與麻陽產(chǎn)枳實進行比較。結(jié)果 麻陽產(chǎn)枳實的性狀與藥典描述相符;顯微粉末鑒別也與藥典的顯微特征相符;水分含量為11.18%，低于藥典規(guī)定的15%;總灰分為5.14%，低于藥典規(guī)定的7.0%;浸出物測定結(jié)果為26.08%，高于藥典規(guī)定的12.0%;辛弗林含量為1.08%，遠高于藥典0.30%的限度，也高于收集的其他幾個產(chǎn)地枳實中辛弗林含量。結(jié)論 湖南麻陽產(chǎn)枳實按中國藥典枳實項下性狀鑒別、水分檢查、浸出物、含量測定方法檢測均符合標準規(guī)定，且辛弗林含量結(jié)果遠高于藥典限度并優(yōu)于一些市售產(chǎn)品。本研究首次對麻陽產(chǎn)枳實的質(zhì)量進行評價，對發(fā)掘麻陽枳實的質(zhì)量優(yōu)勢、指導(dǎo)麻陽縣甜橙的綜合利用、助力精準扶貧有相當(dāng)積極的作用。

〔關(guān)鍵詞〕 甜橙;麻陽;枳實;質(zhì)量評價;綜合利用

〔中圖分類號〕R284? ? ? ?〔文獻標志碼〕A? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2019.07.013

〔Abstract〕 Objective To evaluate the quality of Fructus Aurantii Immaturus produced in Mayang， Hunan Province and compare it with other products from different producing areas. Methods A comprehensive quality study was conducted on Fructus Aurantii Immaturus from Mayang， Hunan province by referring to the methods of character identification， water content test， extract determination and other methods under the Chinese pharmacopoeia， 2015. The content of synephrine in Fructus Aurantii Immaturus produced in other places was determined and compared with it produced in Mayang. Results The characters of immature bitter orange produced in Mayang were consistent with those described in pharmacopoeia. The microscopic powder identification was also consistent with the microscopic characteristics of the pharmacopoeia. The moisture content was 11.18%， which was lower than the 16% specified in the pharmacopoeia. The total ash was 5.14%， which was lower than the 7.0% specified in pharmacopoeia. The extract was 26.08%， which was higher than the 12.0% specified in pharmacopoeia. The content of synephrine was 1.08%， which was much higher than the limit of 0.30% in pharmacopoeia， and also higher than the content of synephrine in other products. Conclusion The characteristics identification， moisture test， extract and content determination of Fructus Aurantii Immaturus produced in Mayang were all in accordance with the standards of Chinese pharmacopoeia. This study is the first to evaluate the quality of the Fructus Aurantii Immaturus in Mayang， and has a positive effect on the exploration of the quality advantage and comprehensive utilization of the Fructus Aurantii Immaturus in Mayang.

〔Keywords〕 Citrus sinensis; Mayang; Fructus Aurantii Immaturus; quality evaluation; comprehensive utilization

枳實為常用中藥，應(yīng)用歷史悠久，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其味苦、辛、酸，性微寒，歸脾、胃經(jīng)。具有破氣消積、化痰散痞的功效，主要用于治療積滯內(nèi)停、痞滿脹痛、瀉痢后重、大便不通、痰滯氣阻、胸痹、結(jié)胸、臟器下垂。2015版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）中收錄枳實為蕓香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培變種或甜橙Citrus sinensis Osbeck 的干燥幼果。5～6 月收集自落的果實，除去雜質(zhì)，自中部橫切為兩半，曬干或低溫干燥， 較小者直接曬干或低溫干燥[1]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明枳實主要具有促進胃排空[2-3]、升高血壓[3-4]、加強心肌收縮力[5]、促進脂質(zhì)代謝[6]的作用。

甜橙為麻陽苗族自治縣最大的支柱產(chǎn)業(yè)，種植面積占全國甜橙的1/4，為全國四大柑橘產(chǎn)地之一。甜橙由于產(chǎn)量高，在成熟前，有1/3-1/2的幼果掉落，掉落的幼果未被充分利用，成果個子小，價格低。2015版《中國藥典》規(guī)定甜橙幼果可以作為枳實來源。隨著中醫(yī)藥法的實施，中醫(yī)藥發(fā)展進一步完善和擴大，柑橘類中藥材市場需求也在逐年擴大，因此提倡疏果行為，發(fā)展幼果炮制加工，既可為提高成果的品質(zhì)與市場競爭力，又可以緩解柑橘類藥用資源的緊缺現(xiàn)狀。但麻陽產(chǎn)甜橙幼果之前未加工成枳實進行售賣，也未進行過質(zhì)量評價，其是否符合《中國藥典》的標準尚不清楚，也不知其與市面上所售枳實有何區(qū)別。本研究旨在通過評價湖南麻陽產(chǎn)甜橙幼果枳實的質(zhì)量并于市面上不同產(chǎn)地的枳實進行比較而發(fā)掘其特色，從而促進與指導(dǎo)麻陽縣甜橙的綜合利用，實現(xiàn)多元發(fā)展多方共贏，為助力鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略提供動力。

1 材料與方法

1.1? 藥材

枳實樣品1-6采集于湖南省懷化市麻陽苗族自治縣舒家村鄉(xiāng)張公坡村，樣品7-9收集自重慶直轄市江津區(qū)，樣品10-11收集自江西省鷹潭市，樣品12-13收集自浙江省桐鄉(xiāng)市，樣品14-16收集自陜西省漢中市，樣品17收集自湖南省長沙市。以上樣品經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)王煒教授鑒定為枳實。樣品詳細信息見表1。

1.2? 試劑

辛弗林對照品（上海源葉生物科技有限公司，批號：Y26O7Y17088，質(zhì)量分數(shù)≥98%）;枳實對照藥材（上海源葉生物科技有限公司，批號Y12M9H61262）;聚酰胺（臺州市路橋四甲生化塑料廠，批號20170301）;磷酸二氫鉀（上海滬試實驗室器材股份有限公司，批號20171211）;十二烷基磺酸鈉、茚三酮、正丁醇均購于國藥集團化學(xué)試劑有限公司;甲醇（色譜純，德國默克公司）;薄層層析硅膠板（煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司）。

1.3? 儀器

美國Agilent 1200 LC型高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司，配備G1311C型四元泵，G1329B型進樣器，G1316A型溫控箱，G4214型多波長檢測器）;JY502型分析天平（上海浦春計量儀器有限公司）;AE100型電子天平（梅特勒-托利多公司）;KQ2200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;CHK2-F-GS型生物顯微鏡（日本奧林巴斯有限公司）;SX2-2.5-12N型馬弗爐（上海一恒儀器有限公司）。

1.4? 實驗方法

參考2015版《中國藥典》枳實項下的性狀、鑒別、水分檢查、浸出物、含量測定方法對湖南麻陽產(chǎn)枳實進行質(zhì)量研究，薄層鑒別以辛弗林為對照品，含量測定也以辛弗林計。另將其他產(chǎn)地枳實的性狀、薄層色譜和含量測定結(jié)果與麻陽產(chǎn)枳實進行比較。

2 結(jié)果

2.1? 性狀比較

麻陽產(chǎn)枳實呈半球形，直徑0.8～2.0 cm。外果皮黑綠色，具顆粒狀突起和皺紋，有明顯的花柱殘跡或果梗痕。切面中果皮略隆起，厚0.3～1.2 cm，黃白色或黃褐色，邊緣有1～2列油室，瓤囊棕褐色。質(zhì)堅硬。氣清香，味苦、微酸。麻陽枳實在性狀上與《中國藥典》要求一致。對不同產(chǎn)地枳實性狀進行比較，發(fā)現(xiàn)甜橙幼果枳實與酸橙幼果枳實區(qū)別較大，酸橙幼果枳實的中果皮較厚而瓤囊較小，甜橙幼果枳實中果皮較薄而瓤囊較大，圖1中可見麻陽產(chǎn)甜橙幼果枳實較其他幾個道地產(chǎn)區(qū)酸橙幼果枳實果皮薄而瓤囊大，與重慶產(chǎn)甜橙幼果枳實的性狀較為接近。對各枳實樣本的直徑、中果皮厚度、瓤囊組織厚度進行測量，并計算中果皮、瓤囊組織厚度占直徑的百分比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)麻陽產(chǎn)枳實的中果皮、瓤囊組織占比與重慶產(chǎn)甜橙幼果枳實接近，中果皮占比較其他酸橙幼果枳實小，瓤囊組織占比較酸橙幼果枳實大（見表2）。

2.2 顯微鑒定

對麻陽枳實進行顯微鑒別，可見本品粉末淡黃色。中果皮細胞類圓形或形狀不規(guī)則，壁大多呈不均勻增厚。果皮表皮細胞表面觀多角形、類方形或長方形，氣孔環(huán)式。草酸鈣方晶存在于果皮和汁囊細胞中，呈斜方形、多面體形或雙錐形，直徑2～24 pm。橙皮苷結(jié)晶存在于薄壁細胞中，黃色或無色，呈圓形或無定形團塊，有的顯放射狀紋理。油室碎片多見，分泌細胞狹長而彎曲。螺紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管及管胞小，符合藥典對枳實的粉末顯微特征描述。部分顯微特征見圖2。

2.3? 薄層鑒定

以正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶5）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.5%茚三酮乙醇溶液，在105 °C加熱至斑點顯色清晰。由薄層鑒別結(jié)果（圖3）可見，麻陽枳實的薄層色譜圖與辛弗林對照品相應(yīng)色譜位置上顯相同顏色斑點，說明麻陽枳實樣本中含有辛弗林，符合藥典規(guī)定。

2.4? 水分測定

2015版《中國藥典》規(guī)定枳實中所含水分不得超15%，麻陽枳實樣本（S1-S6）測得水分分別為10.11%、10.23%、12.08%、11.54%、13.14%、9.96%，均符合藥典規(guī)定。

2.5? 灰分測定

2015版《中國藥典》規(guī)定枳實總灰分不得超過7.0%，麻陽枳實樣本（S1-S6）檢測結(jié)果為5.06%、5.14%、5.02%、5.22%、5.25%、5.18%，符合藥典規(guī)定。

2.6? 浸出物測定

2015版《中國藥典》規(guī)定枳實浸出物測定用70%乙醇作溶劑，不得少于12.0%，麻陽枳實樣本（S1-S6）檢測結(jié)果為25.63%、26.71%、24.35%、27.2%、25.24%、27.35%，符合藥典規(guī)定。

2.7 含量測定

以高效液相色譜法測定枳實樣本中的辛弗林含量。填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇-磷酸二氫鉀（50∶50）溶液，檢測波長為275 nm。經(jīng)高效液相色譜檢測，5月中旬收集的麻陽枳實樣品（S1-S4）辛弗林含量分別為1.10%、1.16%、1.11%及1.02%，6月中旬及下旬收集自麻陽枳實樣品（S5-S6）辛弗林含量分別為0.89%及1.20%，遠高于藥典規(guī)定的不得少于0.30%的限度，也高于收集的其他幾個產(chǎn)地枳實中辛弗林含量。辛弗林對照品及麻陽枳實的高效液相色譜圖見圖4，17個不同批次的枳實樣品辛弗林含量測定結(jié)果見表3。

3 討論

通過對麻陽產(chǎn)6個批次的枳實樣本進行各項質(zhì)量評價，證明麻陽產(chǎn)枳實性狀、鑒別、水分檢查、浸出物、含量測定均符合《中國藥典》規(guī)定標準，且含量測定的結(jié)果高于藥典限度的4倍并遠優(yōu)于一些市售產(chǎn)品。辛弗林為藥典中含量測定的指標成分，且薄層鑒別選取的對照品也為辛弗林，說明該成分在枳實中具有代表性且為主要活性成分之一。辛弗林可促進食欲并加速脂肪代謝，與枳實的藥理作用相一致，也廣泛用于醫(yī)藥、食品、飲料等保健行業(yè)[7]。麻陽產(chǎn)枳實中辛弗林的含量較高，說明其應(yīng)為質(zhì)優(yōu)產(chǎn)品，值得向市場積極推廣。從實驗中也可看出，市售枳實樣本很多未檢測到辛弗林，且一些產(chǎn)品未達到藥典規(guī)定標準，可見枳實這一產(chǎn)品存在產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，市場混亂的現(xiàn)象。應(yīng)加強市場監(jiān)管，推廣質(zhì)優(yōu)產(chǎn)品，保證并提高這一常用傳統(tǒng)中藥品種的臨床療效。

麻陽苗族自治縣屬武陵山片區(qū)區(qū)域發(fā)展與扶貧攻堅試點縣，甜橙為該縣最大的支柱產(chǎn)業(yè)。目前麻陽縣甜橙產(chǎn)值主要是農(nóng)戶銷售鮮果為主，產(chǎn)品附加值低。甜橙在成熟前，有1/3到1/2的幼果自然掉落，若主動疏果，可提升成果的品質(zhì)，提高市場競爭力。因此，若能開發(fā)利用甜橙幼果的藥用價值，對提高麻陽縣甜橙的附加值有重要意義。本研究首次對麻陽加工品枳實進行了質(zhì)量研究，證明其為符合藥典標準的產(chǎn)品，且挖掘了其辛弗林含量高的特點，對指導(dǎo)麻陽縣張公坡村甜橙的綜合利用、推廣麻陽枳實的銷售、提高其市場認可度有積極作用，也能為提高農(nóng)民收入、精準扶貧精準脫貧、助力鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略提供直接動力。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典·二部[S].中國醫(yī)藥科技出版社，2015：247.

[2] 楊秀麗.枳實改善胃腸動力的研究現(xiàn)狀[J].國際中醫(yī)中藥雜志， 2010，32（3）：277-278.

[3] 張正選，李? 鮮.枳實改善功能性消化不良大鼠胃動力障礙的機制研究[J].陜西中醫(yī)，2018（8）：998-1000.

[4] 尹麗波，林桂梅，侯? 影，等.枳實及其炮制品升壓作用的研究[C]. 中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥炮制分會2011年學(xué)術(shù)年會論文集，2011， 510-512.

[5] 張? 紅，孫明江，王? 凌.枳實的化學(xué)成分及藥理作用研究進展[J]. 中藥材，2009，32（11）：1787-1790.

[6] 焦士蓉，黃承鈺，王? 波，等.枳實對糖尿病小鼠腎臟抗氧化能力及胰島影響[J].中國公共衛(wèi)生，2009，25（6）：662-664.

[7] 張霄瀟，李正勇，馬玉玲，等.中藥枳實的研究進展[J].中國中藥雜志， 2015，40（2）：185-190.