自身免疫性疾病患者CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5基因多態(tài)性與羥氯喹不良反應(yīng)/血藥濃度的相關(guān)性研究

高貝貝 潘夢璐 楊春蘭 宋帥 帥宗文 夏泉

摘 要 目的：研究自身免疫性疾?。ˋID）患者細(xì)胞色素P450（CYP）酶的亞型CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5的基因多態(tài)性與羥氯喹不良反應(yīng)、血藥濃度的相關(guān)性，為羥氯喹的臨床個體化用藥提供參考。方法：病例來自安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科2017年7月-2018年8月收治的因長期（>6個月）服用羥氯喹（日劑量為200～400 mg）出現(xiàn)不良反應(yīng)的77例AID患者，收集患者信息、血樣和不良反應(yīng)發(fā)生情況，按不良反應(yīng)發(fā)生部位分為肝功能正常組和肝功能異常組、腎功能正常組和腎功能異常組、眼部正常組和眼部異常組，采用高效液相色譜法測定羥氯喹全血藥物濃度，MassARRAY系統(tǒng)檢測患者CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5的基因型，通過χ2檢驗分析不同基因型患者羥氯喹不良反應(yīng)的發(fā)生差異，通過兩獨立樣本t檢驗和單因素方差分析不同基因型患者羥氯喹血藥濃度的差異。結(jié)果：CYP3A5 rs4646453位點在腎功能正常組與腎功能異常組的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），腎功能異常組患者中CC基因型較AA+AC基因型的發(fā)生率高；CYP2C8 rs10882526位點在肝功能正常組與肝功能異常組的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），肝功能異常組患者中等位基因G較等位基因A的發(fā)生率高，AG基因型較AA基因型的發(fā)生率高。77例AID患者CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5的基因多態(tài)性與血藥濃度無顯著相關(guān)性。在亞組分析時，58例系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者中CYP2C8 rs10882521的GT、GG和TT基因型的平均血藥濃度分別為514.1、735.3、785.9 ng/mL，其中GG和TT基因型明顯高于GT基因型（P<0.05）。結(jié)論：AID患者攜帶CYP3A5 rs4646453 CC基因型服用羥氯喹腎功能異常的發(fā)生率更高，攜帶CYP2C8 rs10882526位點的等位基因G和AG基因型服用羥氯喹肝功能異常的發(fā)生率更高。SLE患者服用相同劑量羥氯喹，攜帶CYP2C8 rs10882521 GT基因型較其他基因型患者血藥濃度低。

關(guān)鍵詞 自身免疫性疾；細(xì)胞色素P450；基因多態(tài)性；羥氯喹；不良反應(yīng)；血藥濃度

Study on Relationship of CYP3A4，CYP2C8 and CYP3A5 Gene Polymorphism with ADR/Blood Concentration of Hydroxychloroquine in Patients with Autoimmune Disease

GAO Beibei1，PAN Menglu2，YANG Chunlan1，SONG Shuai1，SHUAI Zongwen2，XIA Quan1（1.Dept. of Pharmacy， the First Affiliated Hospital of Anhui Medical University， Hefei 230022， China；2.Dept. of Rheumatology， the First Affiliated Hospital of Anhui Medical University， Hefei 230022， China）

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the relationship of CYP3A4， CYP2C8 and CYP3A5 gene polymorphism with ADR/blood concentration of hydroxychloroquine in patients with autoimmune disease （AID）， and to provide reference for individual medication of hydroxychloroquine. METHODS： Totally 77 AID patients，who were treated with hydroxychloroquine （daily dose of 200 mg to 400 mg） for a long-term （>6 months）， were selected from the department of rheumatology and immunology， the First Affiliated Hospital of Anhui Medical University during Jul. 2017 to Aug. 2018. The information， blood sample and ADR of them were collected. Those patients were divided into normal liver function group， abnormal liver function group， normal renal function group， abnormal renal function group， normal eye group and abnormal eye group according to the site of ADR. The concentration of hydroxychloroquine was determined by HPLC. Genotype of CYP3A4， CYP2C8 and CYP3A5 were detected by MassARRAY microarray system. The differences of hydroxychloroquine-induced ADR in different genotypes were analyzed by χ2 test. The blood concentration difference of hydroxychloroquine in different genotypes were analyzed by independent sample t-test and one-way ANOVA. RESULTS： There was statistical significance in the distribution of CYP3A5 rs4646453 locus between normal renal function group and abnormal renal function group（P<0.05）. The incidence of CC genotype was higher than that of AA+AC genotype in abnormal renal function group. There was statistical significance in the distribution of CYP2C8 rs10882526 locus between normal liver function group and abnormal liver function group（P<0.05）. The incidence of allele G was higher than that of allele A in abnormal liver function group， and the incidence of AG genotype was higher than that of AA genotype. There was no significant correlation of the gene polymorphisms of CYP3A4， CYP2C8 and CYP3A5 with blood concentration among 77 AID patients. In subgroup analysis， blood concentration of GT， GG and TT genotypes of CYP2C8 rs10882521 in 58 patients with systemic lupus erythematosus （SLE） were 514.1，735.3 and 785.9 ng/mL， respectively； GG and TT genotypes were significantly higher than GT genotype （P<0.05）. CONCLUSIONS： AID patients with CYP3A5 rs4646453 CC genotype have a higher incidence of renal dysfunction due to taking hydroxychloroquine； patients with CYP2C8 rs10882526 locus allele G and AG have a relatively high incidence of renal dysfunction due to taking hydroxychloroquine. When SLE patients taking the same dose of hydroxychloroquine， the blood concentration of hydroxychloroquine in patients carrying CYP2C8 rs10882521 GT genotype is lower than other genotypes.

KEYWORDS Autoimmune disease； CYP； Gene polymorphism； Hydroxychloroquine； ADR； Blood concentration

自身免疫性疾?。ˋID）是由于機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂，對自身抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)，損害自身組織而引起的一類疾病，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）等[1]。羥氯喹作為SLE的一線基礎(chǔ)用藥和RA治療中改善病情的主要抗風(fēng)濕藥，隨著其廣泛應(yīng)用，其有效性和安全性備受關(guān)注[2]。羥氯喹半衰期長，藥動學(xué)存在明顯的個體差異，細(xì)胞色素P450（CYP）單加氧酶系中的2D6、3A4、3A5和2C8亞型參與羥氯喹在肝中代謝的過程，代謝酶的基因多態(tài)性可能是導(dǎo)致不同個體藥物濃度差異和不良反應(yīng)的重要決定因素[3-5]。本研究通過測定服用6個月以上羥氯喹的AID患者的血藥濃度及CYP3A4、CYP2C8、CYP3A5的基因型，以及收集患者服用羥氯喹后的不良反應(yīng)，分析患者CYP3A4、CYP2C8、CYP3A5基因多態(tài)性與羥氯喹不良反應(yīng)、血藥濃度的關(guān)系，為羥氯喹的臨床個體化用藥提供參考。

1 資料來源與方法

1.1 研究對象

77例研究對象均為2017年6月-2018年8月在安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門診因長期服用羥氯喹出現(xiàn)不良反應(yīng)就診患者，詳細(xì)記錄患者一般信息和用藥信息。

1.1.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）癥狀符合RA和SLE相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)者[6-7]，無相關(guān)藥物禁忌；（2）口服羥氯喹治療時間為6個月以上；（3）每日服藥劑量為200～400 mg。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）非SLE患者及RA患者；（2）妊娠期及哺乳期婦女；（3）資料不完全者；（4）依從性差患者；（5）使用羥氯喹治療前發(fā)生過肝腎功能異常或眼部不良反應(yīng)者。

1.1.2 分組 羥氯喹不良反應(yīng)包括肝腎功能異常、眼部不良反應(yīng)、皮膚黏膜反應(yīng)、消化道反應(yīng)、心臟毒性等。目前，在臨床上觀察到肝腎功能異常和眼部不良反應(yīng)較為常見，因此本研究根據(jù)患者口服羥氯喹后是否出現(xiàn)肝功能異常（轉(zhuǎn)氨酶異常升高）分為肝功能正常組和肝功能異常組，是否出現(xiàn)腎功能異常（肌酐異常升高）分為腎功能正常組和腎功能異常組，是否出現(xiàn)眼部不良反應(yīng)（睫狀體調(diào)節(jié)障礙、視網(wǎng)膜炎、視野缺損等）分為眼部正常組和眼部異常組。

1.2 藥品與儀器

羥氯喹對照品（美國Sigma-Aloaich公司，批號：90527-50MG，純度：≥95%）；硫酸羥氯喹（上海中西制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H19990263）；DP318- 02血液基因組DNA提取試劑盒（北京天根生化科技有限公司）；XW-80A渦旋機(jī)（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）；E2695液相色譜儀（美國Waters公司）；HC-3018R高速冷凍離心機(jī)（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）；9700 GeneAmp PCR擴(kuò)增儀（美國Applied Biosystems公司）；MassArrayTM Nanodispenser質(zhì)譜點樣儀、MassARRAY compact System質(zhì)譜檢測系統(tǒng)和G384+10 SpectrochipTM質(zhì)譜檢測芯片（美國Agena公司）。

1.3 羥氯喹血藥濃度測定

參考本課題組前期建立方法[8]，采集靜脈血3 mL于乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝采血管中，反復(fù)振搖混勻后取全血樣品100 μL置于1.5 mL離心管中，加甲醇-硫酸銅溶液（7 ∶ 1，V/V）200 μL，振蕩2 min，渦旋3 min，14 000 r/min離心5 min，取上清液10 μL進(jìn)樣，通過高效液相色譜法測定羥氯喹血藥濃度。對剩余血樣進(jìn)行編號、記錄，并于-80 ℃凍存?zhèn)錅y基因型。色譜條件：色譜柱為Symmetry C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為0.05 mol/mL高氯酸鈉溶液-乙腈（70 ∶ 30，V/V）；檢測波長為254 nm；柱溫為35 ℃；流速為0.8 mL/min；進(jìn)樣時間為12 min；進(jìn)樣量為10 μL。

1.4 基因檢測

1.4.1 DNA提取 按照DP318-02血液基因組DNA提取試劑盒提取患者凍存血樣DNA。

1.4.2 引物的合成和擴(kuò)增 根據(jù)Assay Design Suite V2.0（Sequenom）在線軟件設(shè)計聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）引物和單堿基延伸引物。本研究對CYP2C8（rs10882521、rs10882526、rs7910936、rs11572081、rs11572103、rs1711- 0453），CYP3A4（rs1851426、rs2242480、rs2246709、rs2740574、rs4646437、rs4646440、rs765598920）和CYP3A5（rs3800959、rs4646450、rs4646453）共16個單核苷酸多態(tài)性位點（SNPs）進(jìn)行了分型檢測。所有需要分型的DNA樣本都稀釋到5～10 ng/μL。取1 μL DNA樣本與0.95 μL水、0.625 μL PCR緩沖液（含15 mmol/L MgCl2）、1 μL的2.5 mmol/L脫氧核糖核苷三磷酸（dNTP）、0.325 μL的25 mmol/L MgCl2、1 μL PCR引物以及0.1 μL HotStar Taq 酶混合。PCR反應(yīng)條件：94 ℃、15 min；94 ℃、20 s，56 ℃、30 s，72 ℃、1 min，共45個循環(huán)；最終72 ℃、3 min。PCR擴(kuò)增后，剩余的dNTP將被去磷酸消化掉，反應(yīng)體系包括1.53 μL水、0.17 μL SAP緩沖液、0.3 U堿性磷酸酶。該反應(yīng)體系在37 ℃下溫浴40 min，然后85 ℃加熱5 min使酶失活。堿性磷酸酶處理后，針對SNPs的單堿基延伸引物在下列反應(yīng)體系中進(jìn)行：0.755 μL水、0.2 μL 10×延伸反應(yīng)緩沖液（iPLEX緩沖液）、0.2 μL 終止混合物、0.041 μL 延伸反應(yīng)酶（iPLEX酶），0.804 μL 10 μmol/L的延伸引物。

1.4.3 測序 SNPs分型采用美國Sequenom公司的MassARRAY系統(tǒng)完成，該系統(tǒng)是基于基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)（MALDI-TOF）。單堿基延伸反應(yīng)在下列條件下進(jìn)行：94 ℃、30 s；94 ℃、5 s，52 ℃、5 s，80 ℃、5 s，5個循環(huán)，共40個循環(huán)；最后72 ℃、3 min。在終止反應(yīng)物中加入6 mg陽離子交換樹脂脫鹽，混合后加入25 μL水懸浮。使用MassARRAYTM Nanodispenser質(zhì)譜點樣儀將最終的分型產(chǎn)物點樣到一塊384孔的spectroCHIP上，并用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜進(jìn)行分析。最終結(jié)果由MassARRAY Typer 4.0軟件系統(tǒng)完成基因分型分析。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

1.5.1 遺傳學(xué)分析 Hardy-Weinberg equilibrium（HWE）檢驗：采用χ2檢驗判斷多態(tài)性位點的基因，統(tǒng)計基因型為純合子和雜合子的期望頻率，并將期望值與觀察值進(jìn)行比較，P>0.001認(rèn)為該基因型頻率符合HWE 定律，表示所納入患者具有群體代表性。

1.5.2 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析處理?；蛐椭g計量資料用x±s表示，不同組基因型患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較采用χ2檢驗，羥氯喹血藥濃度的組間比較采用兩獨立樣本t檢驗和單因素方差分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者的一般情況

共收集AID患者77例（SLE患者58例、RA患者19例），其中男性6例、女性71例，年齡分布在15～74歲，平均年齡為（40.3±13.7）歲，口服羥氯喹療程為（72.7±65.3）個月。不良反應(yīng)發(fā)生情況見表1。

77例AID患者中，SLE患者58例，男性4例、女性 54例，年齡分布在15～56歲，平均年齡為（40.0±14.1）歲，口服羥氯喹療程（69.5±55.0）個月；RA患者19例，男性2例、女性17例，年齡分布在26～74歲，平均年齡為（40.7±13.9）歲，口服羥氯喹療程（74.0±66.7）個月。

2.2 HWE平衡檢驗

77例AID患者和58例SLE患者16個SNPs位點的分型檢測結(jié)果顯示，除了CYP2C8 rs11572081和rs11572103、CYP3A4 rs2740574和rs765598920未發(fā)生突變，無需進(jìn)行統(tǒng)計分析外，其他12個SNPs位點HWE平衡檢驗的P均大于0.001，等位基因和基因型的觀察值和期望值吻合良好，符合 HWE定律，說明所納入研究的樣本具有群體代表性。77例AID患者和58例SLE患者基因型的HWE檢驗見表2。

2.3 CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5基因多態(tài)性與不良反應(yīng)的相關(guān)性

對77例AID患者各位點不同基因型及等位基因與羥氯喹發(fā)生不良反應(yīng)的相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，在腎功能異常方面，僅CYP3A5 rs4646453位點在腎功能正常組與腎功能異常組的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.040 6），腎功能異常組患者中CC基因型較AA+AC基因型的發(fā)生率高，而CYP3A4、CYP2C8各位點不同基因型間及等位基因間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。在肝功能異常方面，CYP2C8 rs10882526位點在肝功能正常組與肝功能異常組的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（等位基因P=0.015 9，基因型P=0.01），肝功能異常組患者中等位基因G較等位基因A的發(fā)生率高；肝功能異常組患者中AG基因型較AA基因型的發(fā)生率高，等位基因與基因型頻數(shù)分析結(jié)果一致。CYP3A4、CYP3A5及CYP2C8其他位點不同基因型和等位基因在肝功能正常組和肝功能異常組間無顯著相關(guān)性（P>0.05）。在眼部不良反應(yīng)方面，CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5各位點不同基因型和等位基因在眼部正常組和眼部異常組的分布差異均不具有顯著相關(guān)性（P>0.05）。CYP3A5 rs4646453和CYP2C8 rs10882526 基因型患者肝腎功能異常的情況統(tǒng)計見表3，CYP2C8 rs10882526等位基因患者肝功能異常的情況統(tǒng)計見表4。

2.4 CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5基因多態(tài)性與血藥濃度的相關(guān)性

分析77例AID患者各位點不同基因型與羥氯喹血藥濃度的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5基因多態(tài)性與羥氯喹血藥濃度無顯著相關(guān)性，P均>0.05。

分析58例SLE患者各位點不同基因型與羥氯喹血藥濃度的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，僅CYP2C8 rs10882521與羥氯喹血藥濃度顯著相關(guān)，該基因的GT、GG和TT 3種基因型患者的羥氯喹平均血藥濃度依次升高，其中GT基因型與GG、TT基因型患者比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。GG基因型與TT基因型患者間羥氯喹平均血藥濃度比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。不同CYP2C8基因型SLE患者的羥氯喹平均血藥濃度結(jié)果見表5。

3 討論

羥氯喹和氯喹同屬于4-氨基喹啉類抗瘧藥，由2個芳香環(huán)構(gòu)成。二者的區(qū)別在于氯喹中的1個乙基在羥氯喹中被1個羥乙基所代替。羥氯喹是通過CYP酶亞型CYP3A4、CYP2C8、CYP3A5在肝代謝，去乙基羥氯喹為主要代謝物。羥氯喹口服給藥75%～100%通過胃腸道吸收，約2～4.5 h后血藥濃度達(dá)峰值。羥氯喹在血漿中大部分與血漿蛋白相結(jié)合，并緩慢達(dá)到穩(wěn)態(tài)濃度。藥物大部分沉積在腎上腺、肝、脾等組織上，血漿消除半衰期為32 d左右，主要通過腎臟排泄，另一部分則通過糞便排泄[9]。

Durcan L等[10]在研究中發(fā)現(xiàn)，SLE患者的高疾病活動度與低濃度羥氯喹存在相關(guān)性，羥氯喹血藥濃度>500 ng/mL可作為臨床起效的臨界點。羥氯喹最被重視的不良反應(yīng)是其引起的視網(wǎng)膜病變，與每日劑量、用藥持續(xù)時間相關(guān)，總體發(fā)生率為7.5%，若服用羥氯喹4.0～5.0 mg/（kg·d），在前10年中視網(wǎng)膜毒性發(fā)生率低于2%，但在使用20年后，其毒性發(fā)生率上升到20%，這些數(shù)據(jù)表明，羥氯喹視網(wǎng)膜病變比以前認(rèn)識的更常見，特別是在高劑量和長使用時間下，雖然從該研究中未發(fā)現(xiàn)完全安全的劑量，但每日5.0 mg/kg的劑量方案與患者長達(dá)10年眼部不良反應(yīng)低發(fā)生率相關(guān)[11-12]。本研究中眼部不良反應(yīng)發(fā)生率大于20%，與已有上述文獻(xiàn)報道相比數(shù)據(jù)偏高，可能原因是本研究中眼部不良反應(yīng)包括眼脹、眼充血、視物模糊、自覺屈光不正等，較文獻(xiàn)報道中眼部不良反應(yīng)統(tǒng)計范圍更廣。然而，研究中所涉及的16個SNPs位點并未發(fā)現(xiàn)與服藥后眼部不良反應(yīng)之間的關(guān)聯(lián)性，可能與本研究的樣本量較少有關(guān)；Lee JY等[5]報道羥氯喹代謝物去乙基羥氯喹與羥氯喹是導(dǎo)致羥氯喹血藥濃度差異的原因之一，是否去乙基羥氯喹與眼部不良反應(yīng)或其他相關(guān)不良反應(yīng)有關(guān)目前還鮮有報道，所以這也是研究的下一個方向。研究表明，羥氯喹最終通過腎排出，腎功能不全患者對羥氯喹清除減少，會顯著增加其血藥濃度以及藥物毒性的風(fēng)險，但腎功能不全患者的羥氯喹用量尚未明確[13]。本研究中筆者分析了CYP3A5基因多態(tài)性與腎功能異常之間的關(guān)系，結(jié)果表明患者攜帶CYP3A5 rs4646453的CC基因型與AA+AC 基因型在腎功能正常組與腎功能異常組的差異分布具有統(tǒng)計學(xué)意義。另外，筆者探索性地研究了長期使用羥氯喹治療的AID患者中CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5基因多態(tài)性與肝功能異常之間的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CYP2C8 rs10882526位點的等位基因G與A、AA基因型和AG基因型在肝功能異常組與肝功能正常組的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。研究結(jié)果證實了在長期使用羥氯喹治療的AID患者中，CYP3A4、CYP2C8和CYP3A5基因多態(tài)性與肝腎功能異常之間具有相關(guān)性。

羥氯喹的療效與其血藥濃度呈正相關(guān)[14]。但研究發(fā)現(xiàn)，羥氯喹半衰期較長，血藥濃度波動大，口服6個月以上才能達(dá)到穩(wěn)態(tài)，且個體差異較大，臨床治療中約有40%的患者對此藥物不響應(yīng)或不耐受[15]。羅雪梅等[16]在SLE患者體內(nèi)CYP3A4基因多態(tài)性對羥氯喹血藥濃度研究發(fā)現(xiàn)，CYP3A4*1G rs2242480等位基因突變導(dǎo)致羥氯喹血藥濃度降低。而在筆者的研究中卻沒有發(fā)現(xiàn)該位點與羥氯喹血藥濃度的相關(guān)性。目前，國內(nèi)外關(guān)于羥氯喹藥動學(xué)的研究較少，大多是基于氯喹的藥動學(xué)對羥氯喹作出相應(yīng)的推測[17]，筆者發(fā)現(xiàn)CYP2C8 rs10882521 GT基因型患者羥氯喹血藥濃度偏低，提示在臨床治療中，該類患者可能需要更大劑量給藥方可達(dá)到最佳療效。

CYP酶的基因多態(tài)性可能是導(dǎo)致不同個體對藥物的敏感性和不良反應(yīng)存在差異的重要決定因素[18]?；颊邤y帶CYP3A5 rs4646453位點的CC基因型服用羥氯喹后腎功能異常的發(fā)生率更高，患者攜帶CYP2C8 rs10882526位點的A基因型服用羥氯喹后肝功能異常的發(fā)生率相對較高。SLE患者服用相同劑量羥氯喹，攜帶CYP2C8 rs10882521位點的GT基因型較其他基因型患者羥氯喹血藥濃度較低。因此，用藥前注意相關(guān)基因檢測和用藥后檢測羥氯喹血藥濃度及肝腎功能異常，有助于減少羥氯喹的副作用。根據(jù)本研究結(jié)果，筆者建議醫(yī)師可以初步嘗試根據(jù)CYP3A5 rs4646453、CYP2C8 rs10882526基因型檢測及羥氯喹血藥濃度結(jié)果制訂羥氯喹的個體治療方案。本研究的不足之處在于樣本量較少，且未納入聯(lián)合用藥等其他影響因素，故仍需擴(kuò)大研究樣本量，探索更多可能的影響羥氯喹臨床安全和療效的因素。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 陳新謙，金有豫，湯光.新編藥物學(xué)[M]. 17版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：137-138.

[ 2 ] 閆琳毅，張海艇，林瑋，等.自身免疫性疾病患者長期使用羥氯喹治療的安全性[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2015，9（4）：262-266.

[ 3 ] JALLOULI M，GALICIER L，ZAHR N，et al. Determinants of hydroxychloroquine blood concentration variations in systemic lupus erythematosus[J]. Arthritis Rheumatol，2015，67（8）：2176-2184.

[ 4 ] AL-RAWI H，MEGGITT SJ，WILLIAMS FM，et al. Steady- state pharmacokinetics of hydroxychloroquine in patients with cutaneous lupus erythematosus[J]. Lupus，2018，27（5）：847-852.

[ 5 ] LEE JY，VINAYAGAMOORTHY N，HAN K，et al. Association of polymorphisms of cytochrome P450 2D6 with blood hydroxychloroquine levels in patients with systemic lupus erythematosus[J]. Arthritis Rheumato，2016，68（1）：184-190.

[ 6 ] 中華醫(yī)學(xué)會風(fēng)濕病學(xué)分會. 2018中國類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診療指南[J].中華內(nèi)科雜志，2018，57（4）：242-251.

[ 7 ] 中華醫(yī)學(xué)會風(fēng)濕免疫分會.系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷及治療指南[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2010，14（5）：342-346.

[ 8 ] 劉婷婷，余威，楊春蘭，等.羥氯喹治療自身免疫性疾病血藥濃度影響因素分析[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2018，23（12）：1359-1363.

[ 9 ] YEON LEE J，LEE J，KI KWOK S，et al. Factors related to blood hydroxychloroquine concentration in patients with systemic lupus erythematosus[J]. Arthritis Care Res （Hoboken），2017，69（4）：536-542.

[10] DURCAN L，CLARKE WA，MAGDER LS，et al. Hydroxychloroquine blood levels in systemic lupus erythematosus：clarifying dosing controversies and improving adherence[J]. Rheumato，2015，42（11）：2092-2097.

[11] MELLES RB，MARMOR MF. The risk of toxic retinopathy in patients on long-term hydroxychloroquine therapy[J]. JAMA Ophthalmol，2014，132（12）：1453-1460.

[12] CHIANG E，JAMPOL LM，F(xiàn)AWZI AA. Retinal toxicity found in a patient with systemic lupus erythematosus prior to 5 years of treatment with hydroxychloroquine[J]. Rheumatology （Oxford），2014，53（11）：2001.

[13] O’LAUGHLIN JP，MEHTA PH，WONG BC. Life threatening severe QTc prolongation in patient with systemic lupus erythematosus due to hydroxychloroquine[J]. Case Rep in Cardiol，2016.DOI：10.1155/2016/4626279.

[14] CUNHA C，ALEXANDER S，ASHBY D，et al. Hydroxycloroquine blood concentration in lupus nephritis：a determinant of disease out-come？[J]. Nephrol Dial Transplant，2018，33（9）：1604-1610.

[15] COSTEDOAT-CHALUMESU N，AMOURA Z，HULOT JS，et al. Very low blood hydroxychloroquine concentration as an objective marker of poor adherence to treatment of systemic lupus erythematosus[J]. Ann Rheum Dis，2007，66（6）：821-824.

[16] 羅雪梅，姚瑤，葛衛(wèi)紅.細(xì)胞色素P450 3A4*1G與腺苷三磷酸結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2基因多態(tài)性對羥氯喹血藥濃度的影響[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2017，33（24）：2572-2574.

[17] KIM KA，PARK JY，LEE JS，et al. Cytochrome P450 2C8 and CYP3A4/5 are involved in chloroquine metabolish in human liver microsomes[J]. Arch Pharm Res，2003，26（8）：631-637.

[18] 周鵬，張璇，楊葉雅.漢族患者CYP3A4*18基因多態(tài)性與阿立哌唑血藥濃度及不良反應(yīng)的相關(guān)性研究[J].中國藥房，2014，25（28）：2618-2620.

（收稿日期：2018-12-12 修回日期：2019-03-15）

（編輯：鄒麗娟）