• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    超高壓處理對藍(lán)莓酚類物質(zhì)生物可獲得率及抗氧化性的影響

    2019-09-10 18:13:39王鷗周潔心蔡圣寶黃建
    中國食物與營養(yǎng) 2019年11期
    關(guān)鍵詞:超高壓抗氧化性藍(lán)莓

    王鷗 周潔心 蔡圣寶 黃建

    摘?要:目的:探討不同條件超高壓處理對藍(lán)莓酚類物質(zhì)的生物可獲得率以及抗氧化性的影響。方法:在不同壓力下對藍(lán)莓果實進(jìn)行不同時間的超高壓處理。分析測定不同處理條件下藍(lán)莓中酚類物質(zhì)的含量。通過測定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除能力評價超高壓處理后藍(lán)莓的抗氧化能力變化。利用超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)四級桿質(zhì)譜分析鑒定藍(lán)莓中主要酚類物質(zhì)及其含量變化情況。結(jié)果:不同壓力與處理時間下,超高壓處理均能提高藍(lán)莓總酚、總黃酮和總花色苷的生物可獲得率,其中在500MPa下處理5min效果最佳。DPPH和ABTS自由基清除能力實驗結(jié)果表明,超高壓處理可以顯著提高藍(lán)莓抗氧化性,在500 MPa處理5 min的藍(lán)莓抗氧化能力最強(qiáng)。超高壓前后共鑒定出9種酚類物質(zhì),其中7種為花色苷及其衍生物、2種類黃酮物質(zhì),這些物質(zhì)中除了矮牽牛素外,其余物質(zhì)在超高壓處理后生物可獲得率均顯著增加。結(jié)論:超高壓處理可以顯著提高藍(lán)莓中總酚、總黃酮及花色苷等酚類物質(zhì)的生物可獲得率,增強(qiáng)其清除自由基的能力,提高抗氧化性。

    關(guān)鍵詞:藍(lán)莓;超高壓;酚類物質(zhì);生物可獲得率;抗氧化性

    機(jī)體需要額外的抗氧化劑的協(xié)助以及時地清除體內(nèi)過多的自由基[1-3]。自然界植物體內(nèi)含有多種具有抗氧化能力的次級代謝產(chǎn)物[4],其中植物多酚由于其良好的抗氧化性被廣泛研究。植物廣泛分布于植物體內(nèi),按照其結(jié)構(gòu)的差異,植物多酚可以分為酚酸類、類黃酮類、花青素類以及芪類等[5]。大量研究表明,植物多酚不論在體內(nèi)還是體外均表現(xiàn)出非常優(yōu)異的抗氧化能力[6]。另外,植物多酚可以預(yù)防和改善多種人體疾病,特別是一些退行性疾病,并認(rèn)為植物多酚的這些生物活性與其良好的抗氧化性有關(guān)[7]。然而在植物體內(nèi),許多植物多酚與多種大分子結(jié)合或者被細(xì)胞壁等大分子阻擋,從而導(dǎo)致其生物可獲得率往往較低,而植物多酚的生物可獲得率是其發(fā)揮生物活性的基礎(chǔ),因此,研究者一直在探討如何提高植物體內(nèi)多酚的生物可獲得率。目前常用的方法是發(fā)酵、酶預(yù)處理以及氣爆等,這些方法均能一定程度提高植物體內(nèi)多酚的生物可獲得率[8]。此外,超高壓是一種食品加工新技術(shù),主要用于食品保鮮等非熱加工方面。但也有研究發(fā)現(xiàn),食品原料經(jīng)超高壓加工后,其生物活性成分的生物可獲得率得到了顯著提高[9]。因此,現(xiàn)有研究開始探討超高壓在提高食品功能活性成分的生物可獲得率方面的進(jìn)一步應(yīng)用。

    藍(lán)莓中的植物多酚賦予了藍(lán)莓多種功能活性,如抗氧化、預(yù)防非酒精性脂肪以及預(yù)防心血管疾病等[10],然而,目前關(guān)于超高壓處理對藍(lán)莓多酚生物可獲得率及抗氧化性的影響研究卻少見報道。因此,本研究利用超高壓技術(shù)對新鮮藍(lán)莓進(jìn)行處理,探討不同壓力和處理時間對藍(lán)莓中多酚的生物可獲得率及其抗氧化性的影響。

    1?材料與方法

    1.1?材料與設(shè)備

    藍(lán)莓鮮果,云南省昆明市嵩明縣高山藍(lán)莓莊園,果實均勻飽滿,無爛果和雜果;沒食子酸、蘆丁等對照品,成都曼斯特生物科技有限公司,純度均在99%以上;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS],北京拜爾迪生物技術(shù)有限公司;色譜級甲醇、乙腈,德國Merck試劑公司;分析純甲醇、甲酸、乙醇等試劑,國藥集團(tuán)。HPP600MPa/3-5L超高壓處理設(shè)備,包頭科發(fā)高壓科技有限公司;SpectraMax M5型酶標(biāo)儀,美國Molecular公司;Alpha1-2LD plus型真空凍干機(jī),德國Christ公司;Ultimate 3000-Q-Exactive Orbitrap mass液質(zhì)聯(lián)用設(shè)備,德國Thermo Fisher公司。

    1.2?方法

    1.2.1?超高壓處理?藍(lán)莓鮮果洗凈后密封包裝,置于超高壓設(shè)備樣品室中,在不同壓力下處理不同時間。超高壓處理后的藍(lán)莓破碎后,用含1%甲酸的80%甲醇超聲提取0.5h,離心,復(fù)提1次,合并上清液待用。

    1.2.2?總酚含量測定?采用福林酚法測定樣品中總酚含量[11]。取等體積樣品溶液和福林酚試劑,靜置1min后加入1.5 mL 濃度為20%的碳酸鈉溶液,定容至10.0 mL。70℃水浴10 min,冷卻至室溫后與765 nm下讀取吸光值。以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,相同步驟處理,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.2.3?黃酮含量測定?在前期報道的黃酮含量測定方法基礎(chǔ)上稍作改進(jìn)[11]。樣品用甲醇溶解并稀釋,取1mL溶液用70%乙醇定容至2.5 mL,加入0.15 mL濃度為 5% NaNO-2溶液,搖勻靜止5min。加入0.15 mL 濃度為10%的Al(NO-3)-3溶液,搖勻靜置6min,最后加入1.0 mL 濃度為1mol/L 的NaOH。用70%乙醇定容至5.0 mL,靜置30min,500 nm處測定吸光值。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,相同步驟處理,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.2.4?花色苷含量測定?采用pH示差法測定花色苷含量[11]。1.0 mL樣品處理液分別加入至9.0 mL pH為1的KCl緩沖溶液與pH為4.5的乙酸鈉緩沖溶液中。以蒸餾水加緩沖溶液調(diào)零,分別在520、700 nm處測定吸光值,計算花色苷含量。

    1.2.5?抗氧化測定方法

    (1)DPPH自由基清除能力測定[12]:配制濃度為1 mmol/L的DPPH-甲醇儲備液,使用時甲醇稀釋10倍作為反應(yīng)液。取1.0 mL 樣品甲醇稀釋液加入2.0 mL DPPH反應(yīng)液,避光振蕩30 min,于517 nm處測定吸光值。以等體積蒸餾水替代樣品做為空白對照。計算測試樣品與空白對照的吸光值差值,通過其與對照管吸光值比值計算DPPH自由基清除率。

    (2)ABTS自由基清除能力測定[12]:7 mmol/L ABTS和4.9 mmol/L過硫酸鉀溶液等體積混合,室溫避光靜置12h形成ABTS儲備液。使用時儲備液用乙醇稀釋至734 nm下吸光值為0.70 ±0.02,得到ABTS反應(yīng)液。測試時,0.5 mL樣品加入2 mL ABTS反應(yīng)液,30℃水浴6min,于734nm處測定吸光值??瞻讓φ沼玫润w積的蒸餾水代替樣品。計算空白樣品與測試樣品的吸光值差值,通過其與空白樣品吸光值的比值計算ABTS自由基清除率。

    1.2.6?液相-質(zhì)譜聯(lián)用分析條件

    (1)液相分離條件:Agilent ZORBAX RRHDSB-C18柱色譜(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)。柱溫35℃,流速1 mL/min,進(jìn)樣量2 μL。洗脫條件:流動相A為0.5%的甲酸水,流動相B為0.5%的甲酸乙腈。分離洗脫梯度:0~2 min,10%~13% B;2~5min,13%~15% B;5~15 min,15%~20% B;15~20 min,20%~30% B;20~25 min,30%~40% B;25~28 min,40%~60% B;28~30 min,60%~10% B;30~35 min,10% B。

    (2)質(zhì)譜工作條件:ESI離子源,正離子模式,ESI工作壓力為3.9 kV;毛細(xì)管溫度:300 ℃;霧化器壓力:0.207 kV;干燥器壓力:2.068 kV;干燥氣流速:12 L/min;離子掃描范圍100~1 500 m/z。

    1.3?統(tǒng)計分析

    利用SPSS17.0軟件進(jìn)行組間數(shù)據(jù)單因素方差分析及Tukey檢驗。以P<0.05記為差異顯著。試驗進(jìn)行3次平行,結(jié)果表示為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差。

    2?結(jié)果與分析

    2.1?超高壓處理對藍(lán)莓酚類物質(zhì)含量的影響

    如表1所示,相較于未處理組,經(jīng)過500 MPa處理10 min組的總酚含量以及300 MPa處理5 min組的總花色苷含量與未處理組相比未有顯著變化,其余處理壓力與處理時間下,均可以顯著提高藍(lán)莓中酚類物質(zhì)的生物可獲得率(P<0.05)。從總酚變化角度分析,400 MPa和500 MPa超高壓處理5 min后藍(lán)莓多酚的生物可獲得率最高 (P<0.05),分別達(dá)到26.61±1.63、27.15±1.81mg/100g,與未處理組相比分別提升了32.78%、35.48%。經(jīng)過500 MPa處理5min的藍(lán)莓,其總黃酮的生物可獲得率最高,提升為未處理組的126.61%(P<0.05)。此外,與未處理組相比,藍(lán)莓經(jīng)過500 MPa處理5 min后,其總花色苷的生物可獲得率也增加最為明顯,上升了46.10%。因此,綜合分析超高壓處理后總酚、總黃酮和總花色苷結(jié)果可知,500 MPa壓力下處理5 min對藍(lán)莓酚類物質(zhì)的生物可獲得率提高的效果最好。

    2.2?超高壓處理對藍(lán)莓多酚抗氧化能力的影響

    2.2.1?DPPH自由基清除能力?如表2所示,超高壓處理前后的藍(lán)莓均表現(xiàn)出DPPH自由基清除能力,并呈現(xiàn)劑量效應(yīng)。同一測試濃度下,500 MPa處理后的藍(lán)莓對DPPH自由基清除力達(dá)到最高。當(dāng)500 MPa下處理5 min后,在1.39 mg/mL濃度條件下,有超過83%的DPPH自由基可以被藍(lán)莓清除掉。如表4所示,除300 MPa處理10 min外,其他所有超高壓處理組對DPPH自由基清除能力的IC-50值均顯著低于未處理組 (P<0.05),表明超高壓處理顯著提高了藍(lán)莓對DPPH自由基的清除能力。其中,500 MPa處理5 min的藍(lán)莓對DPPH自由基清除能力的IC-50值最低 (P<0.05),說明該條件處理下的藍(lán)莓對DPPH自由基清除能力最強(qiáng)。

    2.2.2?ABTS自由基清除能力?如表3所示,超高壓處理前后的藍(lán)莓均表現(xiàn)出ABTS自由基清除能力,同時呈現(xiàn)劑量效應(yīng)。在0.43~0.87 mg/mL測試濃度范圍內(nèi),多數(shù)壓力處理下,處理5 min后的藍(lán)莓ABTS自由基清除能力顯著高于同一壓力下處理10 min (P<0.05)。其中,500 MPa處理5 min后,當(dāng)在0.87 mg/mL濃度條件下,藍(lán)莓對ABTS自由基的清除率近70%。如表4所示,除300 MPa下處理10 min外,其余處理條件下藍(lán)莓對ABTS自由基清除能力的IC-50值均顯著小于未處理組 (P<0.05)。與DPPH自由基清除能力結(jié)果相似,500 MPa處理5min的藍(lán)莓對ABTS自由基清除能力的IC-50值最低 (P<0.05),說明該條件處理下藍(lán)莓對ABTS自由基清除能力最強(qiáng)。

    2.3?超高壓后藍(lán)莓多酚成分分析

    基于上述結(jié)果分析,500 MPa處理5 min對藍(lán)莓酚類物質(zhì)的生物可獲得率提高最為顯著,因此,利用UHPLC-ESI-MS/MS對該超高壓條件處理前后藍(lán)莓的酚類物質(zhì)組成及含量變化進(jìn)行分析??傠x子流如附圖所示,酚類物質(zhì)定性分析結(jié)果(酚類物質(zhì)名稱、保留時間、[M]+m/z以及MS/MS碎片等)如表5所示,共有9種酚類物質(zhì)被鑒定出來,其中7種花色苷及其衍生物,分別為飛燕草素-3-二葡萄糖苷([M]+ m/z=465.102 6)、矮牽牛素-3-O-葡萄糖苷([M]+m/z =479.107 4)、矢車菊素-3-O葡萄糖苷([M]+m/z = 449.107 4)、錦葵色素-3-O-半乳糖苷([M]+m/z=493.133 3)、芍藥素-3-O-葡萄糖苷([M]+m/z =463.122 7)、錦葵色素([M]+m/z=331.080 3)以及矮牽牛素([M]+m/z=317.065 3),其余2種分別為槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷([M+H]+m/z=435.091 9)和槲皮素([M+H]+m/z=303.049 6)。

    如表5所示,經(jīng)過500 MPa超高壓處理5 min后,這9種酚類物質(zhì)中有8種的生物可獲得率均得到顯著提升,尤其是錦葵色素-3-O-半乳糖苷,其平均含量提升為未處理組的3倍以上,其次是芍藥素-3-O-葡萄糖苷,較未處理組提升了2.5倍。矮牽牛素在超高壓處理后的生物可獲得率并沒有顯著變化。

    3?討論

    超高壓作為一種新的食品加工技術(shù)除用于殺菌保鮮目的外,還可以顯著提升食品中營養(yǎng)物質(zhì)含量,特別是一些功能成分的生物可獲得率。有研究發(fā)現(xiàn),與微波提取、熱浸提等方法相比,超高壓處理可以顯著提高藍(lán)莓多酚的提取率,同時這一方法得到的花色苷在儲存期間更為穩(wěn)定[13]。本研究通過比較不同超高壓條件處理后,藍(lán)莓總酚、總黃酮和總花色苷的變化情況可知,在相同處理壓力下,處理5 min的效果優(yōu)于處理10 min,推測其原因可能是因為超高壓處理導(dǎo)致植物細(xì)胞內(nèi)酶活發(fā)生變化,因而過長時間的處理會導(dǎo)致已釋放的酚類物質(zhì)發(fā)生一定損失[14]。另外,總體來說,在處理相同時間下,500 MPa處理的結(jié)果優(yōu)于400 MPa和300 MPa,這可能是由于較高的壓力有利于破壞藍(lán)莓細(xì)胞壁,從而有利于植物細(xì)胞中的酚類物質(zhì)更多地被釋放,特別是包含在液泡中的花色苷類物質(zhì),從而增加了其生物可獲得率。綜上,在本研究探討范圍內(nèi),500 MPa壓力下處理5 min是獲得藍(lán)莓酚類物質(zhì)的較好條件,這一條件與前人研究中發(fā)現(xiàn)的藍(lán)莓汁中花色苷的最佳保留條件一致[15]。

    大量研究表明,植物多酚具有預(yù)防多種慢性疾病的作用,而這一作用被認(rèn)為與其所表現(xiàn)的突出的抗氧化性密不可分[16-17]。前期研究結(jié)果顯示,超高壓處理糙米、茶葉等不同的植物均被證實具有增強(qiáng)其抗氧化能力的作用[18-19]。本研究中,利用DPPH和ABTS自由基清除實驗探討了藍(lán)莓經(jīng)過不同條件超高壓處理后抗氧化能力的變化。從實驗結(jié)果來看,不同超高壓條件處理后均可以顯著提升藍(lán)莓的抗氧化性,尤其是ABTS自由基的清除能力,經(jīng)過500 MPa處理5 min的藍(lán)莓對ABTS自由基清除的IC-50值只有未處理組的一半,說明藍(lán)莓經(jīng)此條件超高壓處理后對ABTS自由基的清除能力提高了1倍。這可能是由于在此超高壓條件下,藍(lán)莓的多酚生物可獲得率得到極大的提高所引起的。前人對超高壓處理藍(lán)靛果的研究也同樣表明,超高處理可以有效提高藍(lán)靛果的抗氧化能力[20]。

    綜上,超高壓處理可以顯著提高藍(lán)莓中總酚、總黃酮及花色苷等酚類物質(zhì)的生物可獲得率,增強(qiáng)其清除自由基的能力,提高抗氧化性。未來食品加工過程中可考慮利用該技術(shù)提高藍(lán)莓相關(guān)食品的營養(yǎng)價值。

    參考文獻(xiàn)

    [1]Cai Shengbao,et al.Comparative study of the effects of solid-state fermentation with three filamentous fungi on the total phenolics content (TPC),flavonoids,and antioxidant activities of subfractions from oats (Avena sativa L.)[J].Journal of Agriculture and Food Chemistry,2012,60(1):507-513.

    [2]Blokhina Olga,Eija Virolainen,Kurt V Fagerstedt.Antioxidants,oxidative damage and oxygen deprivation stress:a review [J].Annnal of Botany,2003,91(2):179-194.

    [3]Poprac Jomova,et al.Targeting free radicals in oxidative stress-related human diseases [J].Trends in Pharmacological Sciences,2017,38(7):592-607.

    [4]Xu Dong-Ping,et al.Natural antioxidants in foods and medicinal plants:extraction,assessment and resources [J].International Journal of Molecular Sciences,2017,18(1):96.

    [5]Rangel-Huerta,et al.A systematic review of the efficacy of bioactive compounds in cardiovascular disease:phenolic compounds [J].Nutrients,2015,7(7):5177-5216.

    [6]Chen Guan Lin,et al.Antioxidant activities and contents of free,esterified and insoluble-bound phenolics in 14 subtropical fruit leaves collected from the south of China [J].Journal of Functional Foods,2017(30):290-302.

    [7]Skrovankova Sona,et al.Bioactive compounds and antioxidant activity in different types of berries [J].International Journal of Molecular Sciences,2015,16(10):24673-24706.

    [8]Liu Lei,et al.Fermentation and complex enzyme hydrolysis enhance total phenolics and antioxidant activity of aqueous solution from rice bran pretreated by steaming with α-amylase [J].Food Chemistry,2017(221):636-643.

    [9]Santos,Mickael C.,et al.Use of high hydrostatic pressure to increase the content of xanthohumol in beer wort [J].Food and Bioprocess Technology,2013,6(9):2478-2485.

    [10]Maha,Ayoub,De Camargo Adriano Costa,Shahidi Fereidoon.Antioxidants and bioactivities of free,esterified and insoluble-bound phenolics from berry seed meals [J].Food Chemistry,2016(197):221-232.

    [11]Sun Dan,et al.Digestion property and synergistic effect on biological activity of purple rice (Oryza sativa L.)anthocyanins subjected to a simulated gastrointestinal digestion in vitro [J].Food Research International,2015(78):114-123.

    [12]Zhang Chengting,et al.Phenolic composition,antioxidant and pancreatic lipase inhibitory activities of Chinese sumac (Rhus chinensis Mill.)fruits extracted by different solvents and interaction between myricetin-rhamnoside and quercetin-rhamnoside [J].International Journal of Food Science & Technology,2017,53(4):1045-1053.

    [13]張海寧.超高壓輔助提取藍(lán)莓果渣花色苷及其對花色苷降解動力學(xué)的研究[D].南京:江蘇大學(xué),2016.

    [14]Zhang,ZQ,Pang,XQ,Duan,XW,et al.Role of peroxidase in anthocyanin degradation in litchi fruit pericarp [J].Food Chemistry,2005,90(1):47-52.

    [15]李星賀.超高壓處理對藍(lán)莓汁總抗氧化能力、酶活性及主要成分影響的研究[D].沈陽:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué),2017.

    [16]Huang Shiqi,et al.Bioaccessibility and antioxidant activity of phenolics in native and fermented Prinsepia utilis Royle seed during a simulated gastrointestinal digestion in vitro [J].Journal of Functional Foods,2017(37):354-362.

    [17]Zhang Chengting,et al.The free,esterified,and insoluble-bound phenolic profiles of Rhus chinensis Mill.fruits and their pancreatic lipase inhibitory activities with molecular docking analysis [J].Journal of Functional Foods,2018(40):729-735.

    [18]譚俊峰,等.超高壓處理對茶多酚提取率和抗DPPH自由基活性的影響[J].食品科學(xué),2009,30(18):92-95.

    [19]于勇,等.超高壓處理對糙米多酚、黃酮類含量及其抗氧化性的影響[J].農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報,2017,48(11):368-374.

    [20]李新原,等.超高壓處理對藍(lán)靛果抗氧化物提取量及活性的影響[J].食品科學(xué),2017,38 (3):119-124.

    (責(zé)任編輯?唐建敏)

    猜你喜歡
    超高壓抗氧化性藍(lán)莓
    藍(lán)莓建園技術(shù)
    河北果樹(2021年4期)2021-12-02 01:15:08
    藍(lán)莓姑娘
    米胚多糖的組成及抗氧化性研究
    西海岸的藍(lán)莓名片
    商周刊(2017年5期)2017-08-22 03:35:22
    甜甜的藍(lán)莓果
    簡述超高壓蒸汽管道系統(tǒng)聯(lián)合吹掃主要步驟及控制
    電網(wǎng)發(fā)展、清潔電源接入與地區(qū)能源效率
    超高壓輸電線路防舞動裝置的研究與應(yīng)用
    茶籽多糖抗氧化性及其對DNA氧化損傷的保護(hù)作用
    淺析電力系統(tǒng)超高壓(500KV及以上)操作中過電壓產(chǎn)生的機(jī)理及防護(hù)
    日日撸夜夜添| 国产 一区精品| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久九九热精品免费| 国产av一区在线观看免费| 国产亚洲精品av在线| 成人特级黄色片久久久久久久| 一a级毛片在线观看| 露出奶头的视频| 日韩亚洲欧美综合| 免费一级毛片在线播放高清视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 日韩制服骚丝袜av| 毛片一级片免费看久久久久| 国产av一区在线观看免费| 免费无遮挡裸体视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 国产欧美日韩一区二区精品| 午夜精品一区二区三区免费看| 女同久久另类99精品国产91| 色综合亚洲欧美另类图片| 丝袜美腿在线中文| 国产av一区在线观看免费| 亚洲经典国产精华液单| 91麻豆精品激情在线观看国产| 99久久无色码亚洲精品果冻| 又爽又黄a免费视频| 一个人看的www免费观看视频| 91av网一区二区| 免费大片18禁| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 内射极品少妇av片p| 中文字幕av成人在线电影| 少妇的逼好多水| 精品欧美国产一区二区三| 国产色爽女视频免费观看| 黄色日韩在线| 我的女老师完整版在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲国产色片| 日本欧美国产在线视频| 国产精品一区www在线观看| 一进一出抽搐动态| 亚洲一区高清亚洲精品| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 观看免费一级毛片| 精品一区二区三区av网在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 少妇熟女aⅴ在线视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 99国产极品粉嫩在线观看| 色哟哟·www| 亚洲国产色片| 国产午夜精品论理片| 91久久精品电影网| 中文字幕熟女人妻在线| 免费看日本二区| 搞女人的毛片| 色综合亚洲欧美另类图片| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产色婷婷99| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲精品粉嫩美女一区| 最新在线观看一区二区三区| 三级经典国产精品| 亚州av有码| 国产亚洲精品久久久com| 国产精品一区二区免费欧美| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲最大成人av| 99热全是精品| 欧美激情久久久久久爽电影| 在线免费观看的www视频| 日本一二三区视频观看| 成人精品一区二区免费| 日韩av不卡免费在线播放| 一级毛片电影观看 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久九九热精品免费| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲成人久久性| 成年女人永久免费观看视频| 成人一区二区视频在线观看| 我的老师免费观看完整版| АⅤ资源中文在线天堂| 国产69精品久久久久777片| 欧美人与善性xxx| 国产一区二区三区av在线 | 欧美成人免费av一区二区三区| 又黄又爽又免费观看的视频| 丰满的人妻完整版| 人妻少妇偷人精品九色| 久久鲁丝午夜福利片| 欧美bdsm另类| videossex国产| 亚洲美女搞黄在线观看 | 国产麻豆成人av免费视频| 免费av观看视频| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 插逼视频在线观看| 综合色av麻豆| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产精品一区二区性色av| 少妇的逼好多水| 久久精品国产亚洲网站| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 高清日韩中文字幕在线| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产成人一区二区在线| 国产精品av视频在线免费观看| 午夜免费激情av| 级片在线观看| 国产成人精品久久久久久| 国产一区二区在线观看日韩| 99热只有精品国产| 国产精品三级大全| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 中文字幕免费在线视频6| 国产成人一区二区在线| 精品熟女少妇av免费看| 国产免费一级a男人的天堂| 国产乱人视频| 亚洲综合色惰| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日本a在线网址| 最近手机中文字幕大全| 99热6这里只有精品| 一本精品99久久精品77| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产精品1区2区在线观看.| 男女啪啪激烈高潮av片| 最新中文字幕久久久久| 免费看美女性在线毛片视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 有码 亚洲区| 久久久色成人| 国产探花极品一区二区| 久久久久久久久久黄片| 干丝袜人妻中文字幕| 久久久久国产网址| 哪里可以看免费的av片| 99久国产av精品| 亚洲成人av在线免费| 99热只有精品国产| 欧美3d第一页| 不卡一级毛片| 岛国在线免费视频观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 精华霜和精华液先用哪个| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产精品av视频在线免费观看| 免费观看的影片在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 久久国产乱子免费精品| 国产亚洲av嫩草精品影院| 在线国产一区二区在线| 91av网一区二区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲,欧美,日韩| 国产成人91sexporn| 国产精品嫩草影院av在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 欧美日本亚洲视频在线播放| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲国产精品久久男人天堂| 日日啪夜夜撸| 日本一二三区视频观看| 黄色配什么色好看| a级毛片免费高清观看在线播放| 午夜福利成人在线免费观看| 午夜福利高清视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲成人av在线免费| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 日本 av在线| 日韩av在线大香蕉| 女人被狂操c到高潮| 看片在线看免费视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 女人被狂操c到高潮| 成人精品一区二区免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 精品一区二区免费观看| 亚洲欧美清纯卡通| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日本成人三级电影网站| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美精品国产亚洲| 午夜免费激情av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 联通29元200g的流量卡| 国产午夜福利久久久久久| 99久久精品热视频| 国产高清有码在线观看视频| 国产美女午夜福利| 联通29元200g的流量卡| 国产熟女欧美一区二区| 日本 av在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 99久国产av精品| 国产精品亚洲美女久久久| av天堂在线播放| 天堂√8在线中文| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲成人av在线免费| 舔av片在线| 一本精品99久久精品77| 美女大奶头视频| 国内精品宾馆在线| 婷婷精品国产亚洲av| 日韩强制内射视频| 国产精品电影一区二区三区| 国产成人91sexporn| 一级黄片播放器| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲精品国产成人久久av| 国产在视频线在精品| 成人毛片a级毛片在线播放| 嫩草影院新地址| 日本一本二区三区精品| 男人舔女人下体高潮全视频| 韩国av在线不卡| 黄色日韩在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 黄色欧美视频在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 精品无人区乱码1区二区| 精品不卡国产一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 久久久精品大字幕| 久久久久久久久大av| 成年免费大片在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 一个人观看的视频www高清免费观看| 午夜视频国产福利| 变态另类丝袜制服| 老女人水多毛片| 91av网一区二区| 日韩 亚洲 欧美在线| 波野结衣二区三区在线| 日日摸夜夜添夜夜爱| 18+在线观看网站| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲成人久久爱视频| 精品不卡国产一区二区三区| 免费搜索国产男女视频| 一个人看视频在线观看www免费| 有码 亚洲区| 又爽又黄a免费视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 少妇熟女欧美另类| 嫩草影视91久久| 性色avwww在线观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 深爱激情五月婷婷| 人人妻人人看人人澡| 黑人高潮一二区| 免费黄网站久久成人精品| av中文乱码字幕在线| 亚洲av免费高清在线观看| 婷婷亚洲欧美| 我要搜黄色片| 国产精品人妻久久久久久| 美女黄网站色视频| 天堂影院成人在线观看| 久久这里只有精品中国| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲国产精品sss在线观看| 一进一出抽搐动态| 午夜福利高清视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲自拍偷在线| 久久精品夜色国产| 日韩人妻高清精品专区| 简卡轻食公司| 精品熟女少妇av免费看| videossex国产| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲av一区综合| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 精品久久久噜噜| 久久这里只有精品中国| 亚洲国产精品久久男人天堂| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久鲁丝午夜福利片| 乱人视频在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 有码 亚洲区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日日撸夜夜添| 国产综合懂色| 国产精品,欧美在线| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品无大码| 久久人人爽人人片av| 午夜福利高清视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国内精品美女久久久久久| 久久6这里有精品| 久久久久久久久久成人| 观看美女的网站| 久久亚洲国产成人精品v| 一级毛片电影观看 | 中文字幕精品亚洲无线码一区| 成年女人看的毛片在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| av.在线天堂| 插阴视频在线观看视频| 免费观看在线日韩| 日本一二三区视频观看| 国产成人精品久久久久久| 一级毛片我不卡| av天堂中文字幕网| 久久久久九九精品影院| 亚洲中文字幕日韩| 国产亚洲精品久久久com| 插逼视频在线观看| 久久九九热精品免费| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av免费高清在线观看| av.在线天堂| 男插女下体视频免费在线播放| 精品不卡国产一区二区三区| 春色校园在线视频观看| 国内精品美女久久久久久| 给我免费播放毛片高清在线观看| 色哟哟哟哟哟哟| 春色校园在线视频观看| 国产精品一区二区性色av| 99久国产av精品国产电影| 九九在线视频观看精品| 99riav亚洲国产免费| 一级黄色大片毛片| 国产成人a∨麻豆精品| 国内精品一区二区在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| av天堂中文字幕网| 性色avwww在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲最大成人手机在线| 国产高清视频在线播放一区| 少妇人妻精品综合一区二区 | 五月伊人婷婷丁香| 成年av动漫网址| 国产不卡一卡二| 91精品国产九色| 亚洲成人中文字幕在线播放| 成人亚洲精品av一区二区| 国产不卡一卡二| 亚洲人成网站在线播| 少妇丰满av| 国产精品久久电影中文字幕| 99热网站在线观看| 亚洲在线自拍视频| 成年女人永久免费观看视频| 97超碰精品成人国产| 最近视频中文字幕2019在线8| 午夜日韩欧美国产| 超碰av人人做人人爽久久| 国产免费男女视频| 91久久精品国产一区二区成人| 婷婷亚洲欧美| 插阴视频在线观看视频| 1000部很黄的大片| 热99re8久久精品国产| 日韩精品青青久久久久久| 99热全是精品| 日本色播在线视频| 午夜福利成人在线免费观看| 一进一出好大好爽视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 亚洲精品成人久久久久久| 国产人妻一区二区三区在| 成人一区二区视频在线观看| 秋霞在线观看毛片| 色哟哟哟哟哟哟| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲在线观看片| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 人妻久久中文字幕网| av中文乱码字幕在线| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 日本在线视频免费播放| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美在线一区亚洲| 欧美成人精品欧美一级黄| 三级经典国产精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 两个人的视频大全免费| 亚洲av熟女| 成人美女网站在线观看视频| 日本色播在线视频| 成人无遮挡网站| 久久鲁丝午夜福利片| 免费大片18禁| 亚洲人成网站在线观看播放| 一区福利在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 色哟哟哟哟哟哟| 免费观看人在逋| 99久久成人亚洲精品观看| 最好的美女福利视频网| 国产美女午夜福利| 国产爱豆传媒在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 欧美精品国产亚洲| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲综合色惰| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 成人三级黄色视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 偷拍熟女少妇极品色| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 毛片一级片免费看久久久久| 久久鲁丝午夜福利片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 99热只有精品国产| 精品午夜福利视频在线观看一区| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 在线天堂最新版资源| 69av精品久久久久久| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲熟妇熟女久久| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产成人a∨麻豆精品| 欧美三级亚洲精品| 麻豆乱淫一区二区| 成人国产麻豆网| 国产成人a区在线观看| 综合色av麻豆| 亚洲色图av天堂| 久久九九热精品免费| 日韩精品青青久久久久久| 91精品国产九色| 久久久久久伊人网av| 国产探花在线观看一区二区| 日韩欧美免费精品| 精品不卡国产一区二区三区| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 天堂动漫精品| 久久久久免费精品人妻一区二区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 五月玫瑰六月丁香| 亚洲无线观看免费| 欧美成人一区二区免费高清观看| 中文字幕av成人在线电影| 91精品国产九色| av免费在线看不卡| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 长腿黑丝高跟| 一个人看视频在线观看www免费| 欧美成人一区二区免费高清观看| 在线观看av片永久免费下载| 老司机福利观看| 日韩三级伦理在线观看| 国产午夜精品论理片| 久久午夜福利片| 日韩欧美 国产精品| 男人狂女人下面高潮的视频| 精品乱码久久久久久99久播| 日韩欧美在线乱码| 国产精品久久视频播放| 91久久精品电影网| 老司机福利观看| 五月玫瑰六月丁香| 欧美人与善性xxx| 99riav亚洲国产免费| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 天堂√8在线中文| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲欧美日韩高清在线视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 女同久久另类99精品国产91| 久久精品国产亚洲网站| 久久久久久伊人网av| 人人妻人人看人人澡| 国产成人a∨麻豆精品| 一区二区三区高清视频在线| 极品教师在线视频| 天堂动漫精品| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜福利18| 最近最新中文字幕大全电影3| 激情 狠狠 欧美| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久国产乱子免费精品| 精品久久久噜噜| 精品免费久久久久久久清纯| 免费观看在线日韩| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产男人的电影天堂91| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲国产色片| 午夜a级毛片| 成人欧美大片| 久久韩国三级中文字幕| 日韩人妻高清精品专区| 色尼玛亚洲综合影院| 麻豆国产97在线/欧美| 色综合色国产| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 五月伊人婷婷丁香| 99精品在免费线老司机午夜| 日本爱情动作片www.在线观看 | 男人狂女人下面高潮的视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产一区二区在线观看日韩| 美女被艹到高潮喷水动态| 免费人成视频x8x8入口观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 免费黄网站久久成人精品| 一级毛片电影观看 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 超碰av人人做人人爽久久| 成人特级黄色片久久久久久久| 干丝袜人妻中文字幕| 天堂动漫精品| 色综合色国产| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久久久久伊人网av| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲精品国产av成人精品 | 国产高清三级在线| 天美传媒精品一区二区| 两个人的视频大全免费| 欧美高清性xxxxhd video| 天堂动漫精品| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 一级黄片播放器| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产免费男女视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 精品国产三级普通话版| 久久久久久久久中文| 亚洲va在线va天堂va国产| 深夜a级毛片| 免费观看精品视频网站| 欧美成人a在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 国产激情偷乱视频一区二区| 中国美女看黄片| 人人妻人人澡欧美一区二区| 精品久久久噜噜| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 日本爱情动作片www.在线观看 | 成人亚洲精品av一区二区| 男女那种视频在线观看| 成人午夜高清在线视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产色爽女视频免费观看| 一区二区三区四区激情视频 | 日韩强制内射视频| 免费观看在线日韩| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久久久久大精品| 欧美日韩综合久久久久久| 国产单亲对白刺激| 变态另类丝袜制服| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 女人被狂操c到高潮| 精品久久国产蜜桃| 中文亚洲av片在线观看爽| 特大巨黑吊av在线直播| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美三级亚洲精品| 中文字幕免费在线视频6| 久久久精品欧美日韩精品| 国产极品精品免费视频能看的| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 黄色视频,在线免费观看| 我的老师免费观看完整版| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 免费观看人在逋| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲国产精品成人综合色| 2021天堂中文幕一二区在线观| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 午夜福利在线观看吧| 亚洲成人中文字幕在线播放|