• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    煙草PP2C家族基因降雨量響應(yīng)表達(dá)模式分析

    2019-09-10 07:22:44何曉健張柳王戈程亞東毛自朝楊煥文
    中國煙草科學(xué) 2019年2期
    關(guān)鍵詞:生物信息學(xué)降雨量煙草

    何曉健 張柳 王戈 程亞東 毛自朝 楊煥文

    摘? 要:PP2C是一類單體絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶,廣泛參與生物體內(nèi)多個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。PP2C基因家族的鑒定和功能研究已在多種作物上報(bào)道。為探明不同降雨量條件下煙草PP2C基因家族表達(dá)特征,通過塑料大棚內(nèi)模擬人工定量噴灌試驗(yàn)和不同降雨量的田間試驗(yàn),利用RNA-Seq技術(shù)對(duì)移栽后40和60 d煙葉中PP2C家族基因進(jìn)行了表達(dá)分析。結(jié)果顯示,18個(gè)煙草PP2C家族基因的表達(dá)明顯受降雨量影響,可分成9個(gè)亞族。其中6個(gè)PP2C家族成員的表達(dá)隨著降雨量增大而降低,4個(gè)PP2C家族成員的表達(dá)隨著降雨量增大而升高。本研究初步探明了云煙87中受降雨量影響的PP2C基因家族種類及其表達(dá)特點(diǎn),為抗旱育種和抗旱栽培提供參考。

    關(guān)鍵詞:煙草;降雨量;PP2C;生物信息學(xué)

    中圖分類號(hào):S572.01????????? 文章編號(hào):1007-5119(2019)02-0044-08????? DOI:10.13496/j.issn.1007-5119.2019.02.007

    Abstract: PP2C is a class of monomeric serine/threonine protein phosphatases that are widely involved in multiple signal transduction pathways in organisms. Identification and functional studies of the PP2C gene family have been reported in a variety of crops. In order to ascertain the expression characteristics of tobacco PP2C gene family members under different rainfall conditions, the expression of PP2C family genes in tobacco leaves at 40 and 60 days after transplanting was analyzed by RNA-Seq technique through simulated artificial quantitative irrigation in plastic greenhouse and field experiments with different rainfall. The results showed that the expression of 18 tobacco PP2C family genes was significantly affected by rainfall and could be divided into 9 subfamilies. The expression of six PP2C family members decreased with increasing rainfall, and the expression of four PP2C family members increased with increasing rainfall. In this study we have preliminarily identified the types and expression characteristics of the PP2C gene family affected by rainfall in Yunyan 87, providing reference for drought-resistant breeding and drought-resistant cultivation.

    生物體內(nèi)普遍存在由蛋白激酶和蛋白磷酸酶介導(dǎo)的可逆磷酸化反應(yīng),在調(diào)控植物細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和逆境脅迫響應(yīng)過程中發(fā)揮著重要作用[1]。針對(duì)不同特異性底物和特定抑制劑敏感性不同,蛋白磷酸酶(PPs)通常被分為PP1,PP2A,PP2B或PP2C[2]。PP2Cs是一類依賴Mg2+或Mn2+的單體絲氨酸/蘇氨酸殘基蛋白磷酸酶[3-4],也是高等植物中最大的蛋白磷酸酶家族[5],在真核生物脫落酸、茉莉酸、水楊酸等信號(hào)傳導(dǎo)途徑中起著重要的調(diào)控作用[6-7]。研究發(fā)現(xiàn),擬南芥中有80個(gè)PP2C基因[8],水稻中有78個(gè)[9],其中擬南芥PP2C基因被分為A-E、F1、F2、G-L共13個(gè)亞族[8]。相關(guān)研究顯示,PP2C酶催化可逆磷酸化作用,并反作用特定蛋白激酶,調(diào)控ABA信號(hào)通路,與水分等非生物逆境脅迫的耐受性相關(guān),進(jìn)而影響植物生長發(fā)育[10]。

    水分是影響煙草生長的重要因子,除了灌溉外,降雨是煙草生長水分供應(yīng)的關(guān)鍵途徑[11]。我國許多煙區(qū)年降雨量分布不均,影響煙葉的產(chǎn)量和品質(zhì)[12]。作為重要的生態(tài)因子,降雨量影響著煙草基因的表達(dá)[11]。目前對(duì)煙草中PP2C家族基因雖有一些報(bào)道[13],但不同降雨量條件下煙草PP2C家族基因的表達(dá)尚未見相關(guān)研究,本研究利用已公開的NCBI煙草基因組數(shù)據(jù)(PRJNA319578、PRJNA208209)結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室建立的云煙87煙草轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(PRJNA206414)進(jìn)行PP2C家族基因的預(yù)測(cè),對(duì)塑料大棚內(nèi)降雨量模擬試驗(yàn)和不同降雨量田間試驗(yàn)下的云煙87葉片樣品進(jìn)行RNA-Seq,結(jié)合生物信息學(xué)分析,探究了降雨量對(duì)煙草PP2C家族基因表達(dá)的影響,為煙草的抗旱育種與栽培提供指導(dǎo)。

    1? 材料與方法

    1.1? 試驗(yàn)處理

    試驗(yàn)分為塑料大棚內(nèi)模擬試驗(yàn)和大田驗(yàn)證試驗(yàn)兩部分。供試烤煙品種為云煙87。

    模擬試驗(yàn)在云南玉溪趙桅烤煙試驗(yàn)點(diǎn)(102.29° E,24.18° N,海拔1645 m)進(jìn)行,搭建簡易塑料大棚進(jìn)行避雨栽培,大棚四周通風(fēng)良好,棚內(nèi)溫度條件與室外試驗(yàn)基本一致。參照降雨量有顯著差異的云南3個(gè)地區(qū)34年的年均降雨量及其旬分布特征,設(shè)計(jì)低、中、高3個(gè)降雨量處理:低降雨量(≤500 mm,典型區(qū)域?yàn)闁|川)、中等降雨量(650~700 mm,典型區(qū)域?yàn)榻ǎ┖透呓涤炅浚ā?100 mm,典型區(qū)域?yàn)閷幎M(jìn)行降雨量模擬人工定量噴灌。3個(gè)處理移栽后0~40 d的模擬旬降雨量分別為32、42和71 mm(與東川、江川、寧洱3地34年平均降雨量等同),移栽后40~60 d模擬旬降雨量分別為30、53和90 mm,每5天模擬降雨1次。每個(gè)處理設(shè)3個(gè)小區(qū)(重復(fù)),每個(gè)小區(qū)按照株行距50 cm×120 cm栽種36株烤煙,小區(qū)規(guī)格為6 m×3.6 m,小區(qū)四周各設(shè)2列保護(hù)行。其他栽培管理措施與常規(guī)大田試驗(yàn)相同。

    為了驗(yàn)證塑料大棚內(nèi)降雨量模擬試驗(yàn)中PP2C家族基因表達(dá)變化情況,在文山硯山(104.38° E,23.59° N,海拔1540 m)、普洱寧洱(101.08° E,23.06° N,海拔1340 m)和玉溪江川(102.75° E,24.32° N,海拔1725 m)3個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行大田驗(yàn)證。煙苗移栽成活后不澆水,統(tǒng)計(jì)當(dāng)?shù)貙?shí)際降雨量。硯山、寧洱、江川移栽后0~40 d實(shí)際旬均降雨量分別為13 mm、11.5 mm、124 mm,移栽后40~60 d實(shí)際旬均降雨量分別為18 mm、19 mm、227 mm。塑料大棚內(nèi)模擬試驗(yàn)及大田驗(yàn)證試驗(yàn)的旬降雨量統(tǒng)計(jì)見圖1。

    1.2? RNA-Seq技術(shù)

    塑料大棚內(nèi)模擬試驗(yàn)和大田驗(yàn)證試驗(yàn)分別在移栽40和60 d后取樣,每個(gè)小區(qū)取3株煙,選取從下向上第10葉(中部煙葉),3個(gè)葉片混合作為一個(gè)樣品,每個(gè)處理共3次生物學(xué)重復(fù)。用不銹鋼剪刀剪去葉尖、葉基和主脈,取葉片中部,用鋁箔紙包裹好后用液氮速凍,分裝50 mL離心管中,?80 ℃儲(chǔ)存,用于RNA-Seq測(cè)序分析。

    使用改良的CTAB法提取樣品總RNA。取質(zhì)量合格的總RNA 6 μg,利用Oligo(dT)磁珠富集mRNA,反轉(zhuǎn)錄合成雙鏈cDNA,對(duì)cDNA片段進(jìn)行末端修復(fù)和銜接子連接后,將產(chǎn)物純化并用PCR富集以產(chǎn)生最終的cDNA文庫。文庫質(zhì)控合格后使用Illumina HiSeq?2000進(jìn)行測(cè)序。將獲得的原始讀段(reads)經(jīng)過去接頭和低質(zhì)量堿基的清洗獲得clean reads,并對(duì)參考數(shù)據(jù)通過Tophat進(jìn)行短序列比對(duì)獲得SAM數(shù)據(jù)文件。SAM交由cufflinks軟件包做差異分析獲得基因的表達(dá)量(RPKM值)。對(duì)表達(dá)量相差兩倍以上,P<0.05的PP2C家族基因進(jìn)行差異分析[14]。

    1.3? 煙草PP2C候選基因的鑒定及生物信息學(xué)分析

    利用已公開的NCBI煙草基因組數(shù)據(jù)(PRJNA319578、PRJNA208209)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室建立的云煙87煙草轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(PRJNA206414)進(jìn)行PP2C家族基因的預(yù)測(cè),獲得56個(gè)云煙87的PP2C家族基因。挑選2個(gè)以上處理RPKM值大于1的基因作為對(duì)降雨量有明顯響應(yīng)的PP2C家族基因,最終獲得18個(gè)候選PP2C家族基因。進(jìn)行NCBI和中國煙草基因組數(shù)據(jù)庫Blast比對(duì)、ORF分析(NCBI ORFfinder,https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ orffinder/)、結(jié)構(gòu)域分析(Pfam database,http://pfam.xfam.org/)、蛋白理化性質(zhì)預(yù)測(cè)(ExPASy,http://web.expasy.org/protparam/)、亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)(WoLF PSORT,http://www.genscript.com/wolf-psort.html)和Clustalx氨基酸多序列比對(duì)以及MEGA5.0系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析。

    1.4? 不同降雨量下表達(dá)模式分析

    2? 結(jié)? 果

    2.1? 表達(dá)受降雨量影響的煙草PP2C家族基因鑒定

    利用RNA-Seq測(cè)序獲得18個(gè)隨降雨量變化有明顯響應(yīng)并具有完整ORF的候選PP2C基因家族成員。通過在NCBI數(shù)據(jù)庫和中國煙草基因組數(shù)據(jù)庫比對(duì)分別命名為NtPP2C01、NtPP2C10、NtPP2C12、NtPP2C27、NtPP2C28、NtPP2C33、NtPP2C34、NtPP2C35、NtPP2C37、NtPP2C43、NtPP2C49、NtPP2C50、NtPP2C52、NtPP2C58、NtPP2C59、NtPP2C60、NtPP2C63、NtPP2C76。通過分析NtPP2C家族基因理化性質(zhì),結(jié)果顯示18個(gè)NtPP2C基因家族成員中,蛋白質(zhì)編碼最長的526 aa,最短的267 aa,等電位范圍從4.49~9.19,18個(gè)煙草PP2C家族基因均含有PP2C保守結(jié)構(gòu)域(表1)。

    2.2? 表達(dá)受降雨量影響的煙草PP2C家族基因亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)

    利用WoLF PSORT對(duì)18個(gè)煙草PP2C家族基因進(jìn)行亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè),結(jié)果表明表達(dá)受降雨量影響的煙草PP2C家族基因在細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中表達(dá)集中,在過氧化物酶體、細(xì)胞骨架、液泡、高爾基體和細(xì)胞基質(zhì)中少量表達(dá),在細(xì)胞膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中不表達(dá)(表2)。表達(dá)受降雨量影響的煙草PP2C家族基因表達(dá)部位的不同可能與其執(zhí)行不同的功能有關(guān)。

    2.3? 表達(dá)受降雨量影響的煙草PP2C基因編碼蛋白系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建

    個(gè)與煙草候選PP2C基因蛋白同源性相近的水稻PP2C基因編碼蛋白,利用MEGA5構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖2),根據(jù)擬南芥和水稻PP2C基因的分類,18個(gè)云煙87煙草的PP2C基因分別屬于A、D、E、F1、F2、G、H、K、L 9個(gè)亞族。其中NtPP2C37和NtPP2C50屬于A亞族,NtPP2C43、NtPP2C60和NtPP2C63屬于D亞族,NtPP2C33、NtPP2C34和NtPP2C52屬于E亞族,NtPP2C10、NtPP2C28和NtPP2C58屬于F1亞族,NtPP2C59和NtPP2C76屬于F2亞族,NtPP2C27和NtPP2C49屬于G亞族, NtPP2C12屬于H亞族,NtPP2C01屬于K亞族, NtPP2C35屬于L亞族。

    2.4? 表達(dá)受降雨量影響的煙草PP2C基因表達(dá)趨勢(shì)

    按照降雨量從低到高排列,通過塑料大棚內(nèi)數(shù)據(jù)(圖3)和大田驗(yàn)證數(shù)據(jù)(圖4)比較后發(fā)現(xiàn),

    塑料大棚內(nèi)試驗(yàn)云煙87的PP2C家族基因在移栽后40 d沒有移栽后60 d的變化顯著??赡苁且圃院?0 d烤煙正處于團(tuán)棵期后期,而移栽后60 d烤煙正處于旺長期,烤煙旺長期對(duì)水分和降雨量更為敏感,因此PP2C家族基因的表達(dá)差異大。并且在塑料大棚內(nèi)精準(zhǔn)調(diào)控條件下,基因家族表達(dá)的規(guī)律性更強(qiáng),所以在隨后PP2C家族基因表達(dá)變化的分析中,主要以60 d獲得的數(shù)據(jù)為主。采用基因表達(dá)隨降雨量的高低變化進(jìn)行趨勢(shì)分析。試驗(yàn)結(jié)果表明,塑料大棚內(nèi)和大田驗(yàn)證試驗(yàn)中NtPP2C37、NtPP2C63、NtPP2C34、NtPP2C10、NtPP2C58、NtPP2C49? 6個(gè)基因總體表達(dá)隨著降雨量的增大而降低。NtPP2C50、NtPP2C43、NtPP2C33、NtPP2C52? 4個(gè)基因總體表達(dá)隨著降雨量的增大而升高。

    3? 討? 論

    利用RNA-Seq可以很方便地對(duì)植物基因表達(dá)情況進(jìn)行分析[15]。本研究分別在塑料大棚內(nèi)模擬和大田不同降雨量下開展煙草栽培試驗(yàn),并采集栽后40 d和栽后60 d不同處理的樣品,通過RNA-Seq,共鑒定了18個(gè)對(duì)降雨量有明顯響應(yīng)的煙草PP2C家族基因?;蚨ㄎ活A(yù)測(cè)表明,這18個(gè)煙草PP2C家族基因主要在細(xì)胞質(zhì)、葉綠體、線粒體和細(xì)胞核中表達(dá)。根據(jù)煙草、擬南芥和水稻PP2C基因編碼蛋白進(jìn)化樹構(gòu)建結(jié)果,將18個(gè)煙草PP2C家族基因分成9個(gè)亞族:A、D、E、F1、F2、G、H、K、L亞族。

    PP2C是一類具有多種功能的蛋白磷酸酶,在植物水分脅迫過程中發(fā)揮著重要的作用[16-17]。相關(guān)研究顯示,A亞族調(diào)控脫落酸(abscisic acid,ABA)信號(hào)途徑[18],擬南芥ABI1和ABI2基因?qū)儆贏亞族[19],是ABA信號(hào)途徑中的調(diào)控基因[20-21]。B亞族在蛋白激酶MAPK途徑起作用[22],苜蓿中B亞族是MAPK途徑中的負(fù)調(diào)控因子,受逆境脅迫誘導(dǎo)[23-24]。C亞族與花器官發(fā)育相關(guān)[4]。G亞族擬南芥基因AtPP2CG1能夠調(diào)控?cái)M南芥對(duì)鹽脅迫的響應(yīng)[25]。E亞族在丹參中預(yù)測(cè)與植物組織器官發(fā)育相關(guān)[26]。

    基因調(diào)控是復(fù)雜而多元化的過程,塑料大棚內(nèi)環(huán)境較單一,誘導(dǎo)基因家族表達(dá)的條件可控,通過綜合分析塑料大棚內(nèi)和大田試驗(yàn)不同降雨量下PP2C基因家族表達(dá)量變化,NtPP2C37、NtPP2C63、NtPP2C34、NtPP2C10、NtPP2C58、NtPP2C49六個(gè)基因總體表達(dá)隨著降雨量的增大而降低,可能與干旱脅迫等非逆境脅迫相關(guān)。趙娜[27]研究發(fā)現(xiàn)中間錦雞兒CiPP2C37-like在干旱、高鹽、低溫和ABA脅迫下表達(dá)量上調(diào)。閔東紅等[1]發(fā)現(xiàn)在干旱脅迫處理下,谷子SiPP2C10相對(duì)表達(dá)量上調(diào)2倍以上。這與本文研究結(jié)果相一致,推測(cè)NtPP2C37和NtPP2C10為抗旱相關(guān)基因。NtPP2C50、NtPP2C43、NtPP2C33、NtPP2C52四個(gè)基因總體表達(dá)隨著降雨量的增大而升高,可能與煙草水分代謝相關(guān)。同家族中不同基因差異表達(dá)結(jié)果不盡相同,可能是存在不同的應(yīng)答機(jī)制。

    水分是影響煙草生長發(fā)育的重要環(huán)境因子,煙草產(chǎn)量和質(zhì)量的形成很大程度上決定于其生育期水分供應(yīng)。隨著降雨量增多,煙草中發(fā)生了豐富的基因調(diào)控變化[11],通過研究低、中、高降雨量下PP2C家族基因的表達(dá)變化,可以有針對(duì)性地篩選與抗旱性有關(guān)的PP2C家族基因,為后續(xù)抗旱育種和抗旱栽培奠定基礎(chǔ)。

    4? 結(jié)? 論

    本研究利用NCBI煙草基因組數(shù)據(jù)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室建立的云煙87煙草轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫,通過RNA-Seq技術(shù)發(fā)現(xiàn)了云煙87中18個(gè)對(duì)不同降雨量有明顯響應(yīng)的PP2C家族基因,可分成9個(gè)亞家族。其中6個(gè)PP2C家族成員的表達(dá)隨著降雨量的增多而降低,4個(gè)PP2C家族成員的表達(dá)隨著降雨量增多而升高。本研究可為抗旱育種和抗旱栽培提供參考。

    參考文獻(xiàn)

    [1]閔東紅,薛飛洋,馬亞男,等. 谷子PP2C基因家族的特性[J]. 作物學(xué)報(bào),2013,39(12):2135-2144.MIN D H, XUE F Y, MA Y N, et al. Characteristics of PP2C gene family in foxtail millet[J]. Acta Agronomica Sinica, 2013, 39(12): 2135-2144.

    [2]LUAN S. Protein phosphatases in plants[J]. Annual Review of Plant Biology, 2003, 54(54): 63-92.

    [3]STERN A, PRIVMAN E, RASIS M, et al. Evolution of the metazoan protein phosphatase 2C superfamily[J]. Journal of Molecular Evolution, 2007, 64: 61-70.

    [4]COHEN P. The structure and regijlation of protein phosphatases[J]. Annu Rev Biochem, 1989, 58: 453-508.

    [5]CAO J M, JIANG M, LI P, et al. Genome-wide identification and evolutionary analyses of the PP2C gene family with their expression profiling in response to multiple stresses in Brachypodium distachyon[J]. BMC Genomics, 2016, 17 (1): 175.

    [6]SHEEN J. Mutational analysis of protein phosphatase 2C involved in abscisic acid signal transduction in higher plants[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1998, 95: 975-980.

    [7]NISHIMURA N, OKAMOTO M, NARUSAKA M, et al. ABA hypersensitive germination2-1 causes the activation of both abscisic acid and salicylic acid responses in Arabidopsis[J]. Plant Cell Physiol, 2009, 50: 2112-2122.

    [8]HONG S W, JON J H, KWAK J M. Identification of a receptor-like protein kinase gene rapidly induced by abacisic acid, dehydration, high salt and cold treatments in Arabidopsis thaliana[J]. Plant Physiology, 1997, 113(4): 1203-1212.

    [9]XUE T, WANG D, ZHANG S, et al. Genome-wide and expression analysis of protein phosphatase 2C in rice and Arabidopsis[J]. BMC Genomics, 2008, 9(1): 550.

    [10]張繼紅,陶能國. 植物PP2C蛋白磷酸酶ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及逆境脅迫調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 廣西植物,2015,35(6):935-941.ZHANG J H, TAO N G. Research progress on regulation mechanism of plant PP2C protein phosphatase ABA signal transduction and abiotic stress[J]. The Plants in Guangxi, 2015, 35 (6): 935-941.

    [11]張柳,何曉健,林春,等. 降雨量對(duì)“云煙87”葉片基因表達(dá)影響的分析[J]. 分子植物育種,2018,16(16):5483-5504.ZHANG L, HE X J, LIN C, et al. Analysis of the influence of rainfall on gene expression in leaves of Yunyan 87[J]. Molecular Plant Breeding, 2018, 16(16): 5483-5504.

    [12]李國蕓,李志偉,甄煥菊,等. 水分脅迫條件下煙草生理生化響應(yīng)研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào),2007,23(9):298-301.LI G Y, LI Z W, ZHEN H J, et al. Research advance on physiological and biochemical reponses in tobacco under water stress[J]. Chinese Agricultural Bulletin, 2007, 23(9): 298-301.

    [13]張雪薇,劉侖,魯黎明,等. 煙草磷酸酶基因 NtPP2C16的克隆、表達(dá)載體構(gòu)建及表達(dá)分析[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào),2017,32(5):78-85.ZHANG X W, LIU L, LU L M, et al. Cloning construction of expression vector and expression analysis of NtPP2C16 in Nicotiana tabacum[J]. Acta Agriculturae Boreali-Sinica, 2017, 32(5): 78-85.

    [14]COLE T, ADAM R, LOYAL G, et al. Differential gene and transcript expression analysis of RNA-seq experiments with TopHat and Cufflinks[J]. Nature Protocols, 2012, 7: 562-578.

    [15]XIANG L X, HE D, DONG W R, et al. Deep sequencing-based transcriptome profiling analysis of bacteria-challenged Lateolabrax japonicus reveals insight into the immune-relevant genes in marine fish[J]. BMC genomics, 2010, 11(1): 472.

    [16]LIU L, HU X, SONG J, et al. Over-expression of a Zea mays L.protein phosphatase 2C gene (ZmPP2C) in Arabidopsis thaliana decreases tolerance to salt and drought[J]. Journal of Plant Physiology, 2009, 166 (5): 531-542.

    [17]胡偉,顏彥,何艷臻. 小麥TaPP2C59基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 麥類作物學(xué)報(bào),2014,34(10):1334-1340.HU W, YAN Y, HE Y Z. Cloning and expression analysis of TaPP2C59 gene in wheat[J]. Journal of Triticeae Crops, 2014, 34(10): 1334-1340.

    [18]ZHANG J H, LI X S, HE Z M, et al. Molecular character of a phosphatase 2C(PP2C)gene relation to stress tolerancein Arabidopsis thaliana[J]. Molecular Biology Reports, 2013, 40(3): 2633-2644.

    [19]CUI M H, YOO K S, HYOUNG S, et al. An Arabidopsis R2R2-MYB transcription factor, AtMYB20, negatively regulates type 2C serine/threonine protein phosphatases to enhance salt tolerance[J]. FEBS Letters, 2013, 587(12): 1773-1778.

    [20]LEUNG J, MERLOT S, GIRAUDAT J. The Arabidopsis ABSCISIC ACID-INSENSITIVE2( ABI2) and ABI1 genes encode homologous protein phosphatases 2C involved in abscisic acid signal transduction[J]. The Plant Cell, 1997, 9(5): 759-771.

    [21]GOSTI F, BEAUDOIN N, SERIZET C, et al. ABI1 protein phosphatase 2C is a negative regulator of abscisic acid signaling[J]. The Plant Cell, 1999, 11(10): 1897-1909.

    [22]SCHWEIGHOFER A, KAZANAVICIUTE V, SCHEIKL E, et al. The PP2C-type phosphatase AP2C1, which negatively regulates MPK4 and MPK6, modulates innate immunity, jasmonic acid, and ethylene levels in Arabidopsis[J]. The Plant Cell, 2007, 19(7): 2213-2224.

    [23]MESKIENE I, BAUDOUIN E, SCHWEIGHOFER A, et al. Stress-induced protein phosphatase 2C is a negative regulator of a mitogen-activated protein kinase[J]. Journal of Biological Chemistry, 2003, 278(21): 18945-18952.

    [24]郭鵬,張士剛,邢鑫,等.歐美楊 PdPP2C 基因的克隆與功能分析[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2015,37(2):100-106.GUO P, ZHANG S G, XING X, et al. Cloning and function analysis of PdPP2C from Popululus deltoises[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2015, 37(2): 100-106.

    [25]LIU X, ZHU Y, ZHAI H, et al. AtPP2CG1, a protein phosphatase 2C, positively regulates salt tolerance of Arabidopsis in abscisic acid-dependent manner[J]. Biochemical & Biophysical Research Communications, 2012, 422(4): 710.

    [26]徐志超,浦香東,宋經(jīng)元. 基于丹參基因組的蛋白磷酸酶2C家族的系統(tǒng)分析[J]. 中國現(xiàn)代中藥,2018,20(6):652-657.XU Z C, PU X D, SONG J Y. Genome-wide characterization of PP2C gene family in Salvia miltiorrhiza[J]. Mod Chin Med, 2018, 20(6): 652-657.

    [27]趙娜. 中間錦雞兒CiPP2C37-like基因的克隆和功能分析[D]. 呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.ZHAO N. Cloning and function analysis of CiPP2C37-like gene from Caragana intermedia[D]. Hohhot: Inner Mongolia Agriculture University, 2016.

    猜你喜歡
    生物信息學(xué)降雨量煙草
    煙草具有輻射性?
    降雨量與面積的關(guān)系
    煙草依賴的診斷標(biāo)準(zhǔn)
    “PBL+E—learning”教學(xué)模式探索
    移動(dòng)教學(xué)在生物信息學(xué)課程改革中的應(yīng)用
    今傳媒(2016年11期)2016-12-19 11:35:50
    中醫(yī)大數(shù)據(jù)下生物信息學(xué)的發(fā)展及教育模式淺析
    數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)在生物信息學(xué)中的應(yīng)用
    煙草中茄酮的富集和應(yīng)用
    洞庭湖區(qū)降雨特性分析
    羅甸縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)實(shí)測(cè)降雨量分析及應(yīng)用研究
    久久精品国产a三级三级三级| 国产精品熟女久久久久浪| 色哟哟·www| 精品少妇久久久久久888优播| 美女内射精品一级片tv| 一区二区av电影网| 777米奇影视久久| 免费观看a级毛片全部| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 人人妻人人澡人人看| 成人国产av品久久久| 伊人久久精品亚洲午夜| 两个人的视频大全免费| 日本wwww免费看| 亚洲综合色惰| 免费大片18禁| 最后的刺客免费高清国语| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 两个人的视频大全免费| 亚洲精品成人av观看孕妇| 男男h啪啪无遮挡| 少妇精品久久久久久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 成人毛片60女人毛片免费| 欧美最新免费一区二区三区| 久久av网站| 午夜视频国产福利| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 亚洲欧美精品专区久久| 亚洲精品自拍成人| 久久久久国产网址| 午夜视频国产福利| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲性久久影院| 久久狼人影院| 尾随美女入室| 亚洲性久久影院| 精品一品国产午夜福利视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 伊人久久国产一区二区| 国产毛片在线视频| 午夜日本视频在线| 中国三级夫妇交换| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 51国产日韩欧美| 人人妻人人澡人人看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久久久国产网址| 亚洲,欧美,日韩| 看十八女毛片水多多多| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 最近最新中文字幕免费大全7| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产永久视频网站| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲av不卡在线观看| 一级毛片我不卡| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲精品第二区| 18禁动态无遮挡网站| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久狼人影院| 久久精品国产亚洲av涩爱| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲欧美精品专区久久| 久久99蜜桃精品久久| 深夜a级毛片| 寂寞人妻少妇视频99o| 91久久精品电影网| 国产高清三级在线| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品蜜桃在线观看| 国产精品伦人一区二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 日韩欧美 国产精品| 久久99蜜桃精品久久| 五月玫瑰六月丁香| 国产精品久久久久久av不卡| 另类精品久久| 欧美人与善性xxx| a级毛片在线看网站| 久久久久久伊人网av| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 在线观看美女被高潮喷水网站| a 毛片基地| 精品亚洲成国产av| 国产成人精品福利久久| 亚洲欧美精品专区久久| 国产精品一区二区在线不卡| 国产精品久久久久久精品电影小说| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲美女视频黄频| av卡一久久| 99热6这里只有精品| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲性久久影院| 男人舔奶头视频| 2018国产大陆天天弄谢| 水蜜桃什么品种好| 熟女av电影| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 久久 成人 亚洲| 熟女人妻精品中文字幕| 赤兔流量卡办理| 交换朋友夫妻互换小说| 精品一区在线观看国产| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 观看免费一级毛片| 大话2 男鬼变身卡| 日韩av免费高清视频| 高清欧美精品videossex| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久国产精品大桥未久av | 国产精品国产三级国产专区5o| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 九九在线视频观看精品| 各种免费的搞黄视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 97精品久久久久久久久久精品| 国产高清三级在线| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲综合色惰| 午夜91福利影院| 香蕉精品网在线| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 内射极品少妇av片p| 精品视频人人做人人爽| 69精品国产乱码久久久| av专区在线播放| 日韩电影二区| 国产成人精品一,二区| 国产精品国产av在线观看| 18+在线观看网站| a级片在线免费高清观看视频| 国产一区二区三区综合在线观看 | 高清黄色对白视频在线免费看 | 大香蕉97超碰在线| 久久影院123| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品人妻久久久久久| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| xxx大片免费视频| 国产av国产精品国产| 国产精品久久久久久精品电影小说| 免费在线观看成人毛片| av视频免费观看在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 少妇的逼好多水| 久久久久精品性色| 日韩成人伦理影院| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 2018国产大陆天天弄谢| 色视频www国产| 国产av一区二区精品久久| 亚洲久久久国产精品| 久久99精品国语久久久| 大片免费播放器 马上看| 丝瓜视频免费看黄片| 成人亚洲精品一区在线观看| 高清av免费在线| 国产精品一区www在线观看| 欧美97在线视频| 99视频精品全部免费 在线| 99热国产这里只有精品6| 久久韩国三级中文字幕| 国产色爽女视频免费观看| 国产有黄有色有爽视频| 我的女老师完整版在线观看| 国产成人aa在线观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久99精品国语久久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 极品少妇高潮喷水抽搐| av天堂中文字幕网| 亚洲av.av天堂| 日本av手机在线免费观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲av国产av综合av卡| 日本av手机在线免费观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| .国产精品久久| 国产成人91sexporn| 在线观看免费高清a一片| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 五月开心婷婷网| 日韩制服骚丝袜av| av不卡在线播放| 亚洲三级黄色毛片| 黄色一级大片看看| 亚洲国产欧美在线一区| 精品人妻熟女av久视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 99久久人妻综合| 免费观看av网站的网址| 久久国产亚洲av麻豆专区| 免费少妇av软件| 国产精品无大码| 婷婷色综合www| 91精品一卡2卡3卡4卡| 精品久久久久久电影网| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 大话2 男鬼变身卡| 一区二区三区免费毛片| 精品人妻熟女毛片av久久网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 天堂8中文在线网| 在线观看人妻少妇| 日本av免费视频播放| 美女cb高潮喷水在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 三级国产精品片| 欧美日韩综合久久久久久| 中国国产av一级| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产精品欧美亚洲77777| 色视频www国产| 久久久国产精品麻豆| 丰满人妻一区二区三区视频av| 老司机影院成人| 人人妻人人看人人澡| 国产 一区精品| 嫩草影院入口| 免费看不卡的av| 国产熟女午夜一区二区三区 | 色婷婷久久久亚洲欧美| 人妻 亚洲 视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 人人妻人人澡人人看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 日韩电影二区| 成人国产麻豆网| 亚洲欧美清纯卡通| 熟女av电影| 亚洲av成人精品一二三区| 高清欧美精品videossex| 在线观看免费视频网站a站| 国产极品天堂在线| 亚洲精品国产av成人精品| 日韩电影二区| 国产 一区精品| 婷婷色麻豆天堂久久| 777米奇影视久久| 国产av国产精品国产| 精品国产国语对白av| 最近2019中文字幕mv第一页| 老熟女久久久| 亚洲久久久国产精品| 国产极品天堂在线| 久久久久视频综合| 六月丁香七月| 美女视频免费永久观看网站| 久久狼人影院| av有码第一页| 哪个播放器可以免费观看大片| 成人影院久久| 国产精品99久久99久久久不卡 | av一本久久久久| 欧美日韩亚洲高清精品| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲欧洲国产日韩| 国产精品久久久久成人av| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 99re6热这里在线精品视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 极品少妇高潮喷水抽搐| 只有这里有精品99| 日本欧美国产在线视频| 99re6热这里在线精品视频| av免费在线看不卡| 欧美日韩av久久| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 久久国产精品大桥未久av | 国产成人午夜福利电影在线观看| 最黄视频免费看| 一本大道久久a久久精品| 国产乱人偷精品视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产淫语在线视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 波野结衣二区三区在线| 久久综合国产亚洲精品| 99热这里只有是精品50| 国产精品成人在线| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美最新免费一区二区三区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 男的添女的下面高潮视频| 97在线视频观看| 欧美3d第一页| 制服丝袜香蕉在线| 91久久精品国产一区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 丰满乱子伦码专区| 九九爱精品视频在线观看| 男女边摸边吃奶| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品国产乱码久久久久久小说| 女性被躁到高潮视频| 亚洲国产精品999| 极品人妻少妇av视频| 五月天丁香电影| 亚洲国产日韩一区二区| 多毛熟女@视频| 亚洲不卡免费看| 国产免费一级a男人的天堂| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲三级黄色毛片| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 黄色怎么调成土黄色| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲av中文av极速乱| 春色校园在线视频观看| 成年人免费黄色播放视频 | a级一级毛片免费在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 香蕉精品网在线| av播播在线观看一区| 久久久久网色| 亚洲欧美精品自产自拍| 嫩草影院新地址| 黄色欧美视频在线观看| 少妇人妻久久综合中文| 久久精品国产亚洲网站| 永久免费av网站大全| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成人国产麻豆网| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲av二区三区四区| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产精品伦人一区二区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 婷婷色综合www| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 啦啦啦在线观看免费高清www| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 性高湖久久久久久久久免费观看| 国国产精品蜜臀av免费| av在线app专区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 91精品国产国语对白视频| 男女无遮挡免费网站观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品不卡视频一区二区| av福利片在线| 少妇 在线观看| av.在线天堂| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产精品三级大全| 日日啪夜夜爽| 成人毛片a级毛片在线播放| 一本久久精品| 九草在线视频观看| 国产精品一区二区在线不卡| 一级爰片在线观看| 色婷婷av一区二区三区视频| 一级黄片播放器| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 九色成人免费人妻av| 伊人久久国产一区二区| av福利片在线| 老熟女久久久| 亚洲精品色激情综合| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产高清三级在线| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 免费看日本二区| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 有码 亚洲区| av黄色大香蕉| 精华霜和精华液先用哪个| 国产黄色视频一区二区在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲天堂av无毛| 下体分泌物呈黄色| 国产在线免费精品| 中国国产av一级| 国产免费又黄又爽又色| 免费观看a级毛片全部| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产精品99久久久久久久久| 色吧在线观看| 18禁动态无遮挡网站| 日韩av不卡免费在线播放| 插阴视频在线观看视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 18禁在线播放成人免费| 中文资源天堂在线| 搡老乐熟女国产| 国产色婷婷99| 久久国产乱子免费精品| 国产91av在线免费观看| 中国三级夫妇交换| 国产探花极品一区二区| 久热这里只有精品99| 丰满人妻一区二区三区视频av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 天天操日日干夜夜撸| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲中文av在线| 校园人妻丝袜中文字幕| 少妇的逼水好多| 一区二区三区精品91| 国产精品嫩草影院av在线观看| 黄色配什么色好看| av一本久久久久| 日本91视频免费播放| 日本与韩国留学比较| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美区成人在线视频| av在线播放精品| 国产毛片在线视频| 欧美另类一区| 观看免费一级毛片| 最新中文字幕久久久久| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲一区二区三区欧美精品| 曰老女人黄片| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 少妇 在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 男男h啪啪无遮挡| 久久鲁丝午夜福利片| 成人漫画全彩无遮挡| 国产伦精品一区二区三区四那| xxx大片免费视频| 久久久国产欧美日韩av| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲精品456在线播放app| 午夜日本视频在线| 麻豆成人午夜福利视频| 永久网站在线| 最后的刺客免费高清国语| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产精品女同一区二区软件| 大香蕉久久网| 99久国产av精品国产电影| 日韩人妻高清精品专区| 久久久久久久大尺度免费视频| 桃花免费在线播放| 亚洲第一av免费看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 美女福利国产在线| 熟女av电影| 午夜久久久在线观看| 久久久久久久国产电影| 国产极品天堂在线| 99久国产av精品国产电影| 色婷婷久久久亚洲欧美| 51国产日韩欧美| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 成年人午夜在线观看视频| 国产有黄有色有爽视频| 一级毛片我不卡| 国产精品.久久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲久久久国产精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产视频首页在线观看| 18+在线观看网站| 欧美另类一区| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 午夜精品国产一区二区电影| 国产熟女午夜一区二区三区 | 涩涩av久久男人的天堂| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 九九爱精品视频在线观看| 一区二区av电影网| 欧美成人午夜免费资源| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 自线自在国产av| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲va在线va天堂va国产| 女人久久www免费人成看片| 久久ye,这里只有精品| 一级爰片在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 天堂俺去俺来也www色官网| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产老妇伦熟女老妇高清| 午夜福利网站1000一区二区三区| 男人和女人高潮做爰伦理| 成人亚洲精品一区在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产午夜精品一二区理论片| 国产成人91sexporn| 久久久久久久国产电影| 国产精品无大码| 国产一级毛片在线| 亚洲精品,欧美精品| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 免费看av在线观看网站| 久久国产乱子免费精品| 18禁动态无遮挡网站| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产片特级美女逼逼视频| 91久久精品电影网| 亚洲欧美一区二区三区国产| 日韩人妻高清精品专区| 国产中年淑女户外野战色| 只有这里有精品99| 亚洲成人一二三区av| 哪个播放器可以免费观看大片| 特大巨黑吊av在线直播| 久久久久精品久久久久真实原创| 自线自在国产av| 女人精品久久久久毛片| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 能在线免费看毛片的网站| 国产精品国产三级专区第一集| av在线app专区| 亚洲国产精品一区三区| 精品国产露脸久久av麻豆| 观看av在线不卡| 夜夜爽夜夜爽视频| 国精品久久久久久国模美| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久久久久人妻| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产免费视频播放在线视频| 久久免费观看电影| 丝瓜视频免费看黄片| 国产高清国产精品国产三级| 色网站视频免费| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲综合色惰| 亚洲,欧美,日韩| 一本久久精品| 国产一区二区三区av在线| 精品久久久噜噜| 国产精品女同一区二区软件| 国产成人精品久久久久久| 久热久热在线精品观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 99久久精品国产国产毛片| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久婷婷青草| 一区二区三区免费毛片| 久久99蜜桃精品久久| 精品久久久噜噜| 国产成人免费无遮挡视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 精品人妻一区二区三区麻豆| 青青草视频在线视频观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲av不卡在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 最近中文字幕2019免费版| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品午夜福利在线看| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日韩大片免费观看网站| 免费看光身美女| 亚洲国产色片| 日韩制服骚丝袜av| 麻豆成人av视频| 下体分泌物呈黄色| 日本vs欧美在线观看视频 | 中文字幕精品免费在线观看视频 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品久久久噜噜| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲第一av免费看| 美女福利国产在线| 国产精品偷伦视频观看了| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 嫩草影院入口| 国产精品无大码| a级一级毛片免费在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| av免费观看日本| 久久久欧美国产精品| 99久久精品国产国产毛片| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 夫妻性生交免费视频一级片| 日韩一区二区三区影片| 午夜激情久久久久久久| av天堂中文字幕网| 丝袜在线中文字幕| 精品久久国产蜜桃| 全区人妻精品视频| 久久久久久久国产电影| 青春草亚洲视频在线观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 高清在线视频一区二区三区|