再礦化技術(shù)及免疫微生態(tài)制劑防齲研究

郭紅

摘 要：研究表明齲病是由細(xì)菌、飲食、宿主和時間四大因素作用而導(dǎo)致牙體硬組織脫礦、有機(jī)質(zhì)降解的慢性、進(jìn)行性、破壞性疾病。它是失牙的主要原因之一。齲病病因明確，早期預(yù)防、診斷對該病防治有莫大的意義。齲病初級預(yù)防主要是針對病因采取預(yù)防措施，相對二級、三級預(yù)防來說效果是最好的，可使牙體組織遠(yuǎn)離致病因子，從而從根本上預(yù)防齲病的發(fā)生。本文即通過收集大量有關(guān)文獻(xiàn)，就現(xiàn)階段國內(nèi)外齲病預(yù)防的新材料、新藥物、新方法和新技術(shù)的研究及應(yīng)用做綜合性描述。

關(guān)鍵詞：齲病預(yù)防? 再礦化? ?免疫防齲? ?微生態(tài)制劑

中圖分類號：R780.1? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

引言

齲病是以細(xì)菌為主多因素導(dǎo)致的表現(xiàn)為牙體硬組織持續(xù)性脫礦、有機(jī)質(zhì)被降解，最終導(dǎo)致失牙的感染性疾病。牙體缺損或過早失牙將破壞牙列完整，嚴(yán)重降低咀嚼力，進(jìn)而削弱口腔的消化功能，加重腸胃道的負(fù)擔(dān)，久而久之容易導(dǎo)致胃腸疾病。另外若不及早防治的話，齲病還可引起一系列的并發(fā)癥，如急慢性牙髓炎、急慢性根尖周炎、甚至根尖囊腫，嚴(yán)重危害根尖周組織的健康。因其在人群中發(fā)病率相當(dāng)高，僅次于心血管疾病及癌癥而被世界衛(wèi)生組織列為人類第三大疾病。 據(jù)研究表明齲病病因涵蓋細(xì)菌、宿主、飲食及時間等四個因素，俗稱“四聯(lián)因”，其中細(xì)菌為主要致病因素。齲病病因明確，因此該病是完全可防可控的。根據(jù)疾病三級預(yù)防制原則，齲病預(yù)防效果最好的是初級預(yù)防，即針對齲病病因采取預(yù)防措施，將致病因子與牙齒有效隔離，從源頭上預(yù)防齲病的產(chǎn)生。其次是二級預(yù)防，即早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。古往今來人們在生活生產(chǎn)實(shí)踐中摸索總結(jié)出一系列齲病預(yù)防措施，尤其近代專家們的研究成果更是層出不窮，如氟化物防齲、免疫防齲、藥物防齲、窩溝封閉等。本文即是通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)就現(xiàn)階段齲病預(yù)防在新材料、新藥物、新技術(shù)、新方法等方面做一個全面的介紹。

一、微生態(tài)制劑及抗菌肽的開發(fā)與利用

1.微生態(tài)制劑：致齲菌是齲病的主要致病因素，有效控制細(xì)菌是從根本上減少齲病發(fā)生的優(yōu)良途徑。過去對抗致齲菌主要采用藥物法，比如將抗菌劑加入漱口液及牙膏中，或者口服抗生素等。此類方法在防齲的同時也帶來諸多不良影響，主要是耐藥、口腔菌群失調(diào)以及二重感染。對此微生態(tài)制劑及抗菌肽的開發(fā)應(yīng)運(yùn)而生，不僅防齲而且無耐藥現(xiàn)象，還可以糾正菌群失調(diào)。[1]微生態(tài)制劑指的是根據(jù)微生態(tài)原理而制備的制劑，主要包括由益生菌、經(jīng)基因工程改造的低毒力菌株等制備的活菌制劑及其代謝產(chǎn)物。益生菌是一類適量攝入后有益于人體健康且安全的微生物（主要是細(xì)菌），過去主要用于腸道疾病防治，近年來的研究表明口腔益生菌在口腔疾病預(yù)防方面同樣有著積極不可忽視的作用。[3]它可以通過分泌過氧化氫、小分子抗菌復(fù)合物、細(xì)菌素、粘附抑制因子等抗菌物質(zhì)來抑制致齲菌的生長，并競爭性搶占致齲菌斑在牙面的粘附位點(diǎn)和爭奪營養(yǎng)而削弱致齲菌的生存和繁殖能力，從而達(dá)到防齲的目的。益生菌可添加于食品如牛奶或藥品中，攝取方便。另一類微生態(tài)制劑則是利用基因工程方式改造的低毒性菌株，如拮抗菌株、效應(yīng)菌株等，其防齲機(jī)制是在不破壞口腔微生態(tài)的前提下，將無致病性致齲菌毒力因子缺陷菌株代替病原菌，以此競爭性抑制病原菌，從而達(dá)到生態(tài)防治效果，此法被稱為“細(xì)菌替代療法”。口腔致齲菌主要是變形鏈球菌，變鏈菌通過產(chǎn)酸致齲，且細(xì)菌本身耐酸，目前細(xì)菌替代療法防齲的研究方向主要是通過基因工程構(gòu)建產(chǎn)堿變形鏈球菌替代產(chǎn)酸的變鏈菌，綜上所述細(xì)菌替代療法在防齲方面有良好的應(yīng)用前景。

2.抗菌肽

[1]抗菌肽是一類具有抵抗細(xì)菌及真菌侵襲人體功能的活性小分子短肽（低于100個氨基酸）的總稱。其抗菌機(jī)制主要包括兩個方面，首先是影響肽聚糖的合成，肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的化學(xué)組成部分，主要作用是維持細(xì)胞壁的完整，進(jìn)而維持細(xì)菌的正常代謝而使之得以生存。在肽聚糖的合成過程中其關(guān)鍵反應(yīng)需要Mura酶（UDP-N-乙酰葡萄糖胺烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)移酶）催化，實(shí)驗(yàn)證明抗菌肽可以抑制Mura酶的生成，繼而影響肽聚糖的合成，細(xì)菌因細(xì)胞壁不能維持完整而死亡。另一方面抗菌肽可直接殺滅細(xì)菌，具有兩親性結(jié)構(gòu)的抗菌肽既可以利用自身攜帶的正電荷與細(xì)菌表面的負(fù)電荷相吸而與細(xì)菌緊密結(jié)合，又可以疏水性的C端插入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)形成離子通道，使細(xì)胞質(zhì)外泄而致細(xì)胞死亡。據(jù)研究稱D型氨基酸較L型氨基酸更穩(wěn)定，在體內(nèi)不容易被水解而影響活性，因而成為抗菌肽的最佳候選藥物。抗菌肽對于正常細(xì)胞而言無任何毒副作用，亦不產(chǎn)生耐藥性，其應(yīng)用前景十分廣闊。

二、免疫防齲研究新進(jìn)展

1.細(xì)菌粘附素抗原接種

致齲菌粘附于牙面主要依賴于三大分子，即粘附素（如變鏈菌表面蛋白AgⅠ/Ⅱ、PAc等）、葡糖基轉(zhuǎn)移酶、葡聚糖結(jié)合蛋白。免疫防齲機(jī)制是將滅活的致齲菌以及以上三類粘附素抗原片段接種于人體，致使人體針對上述抗原產(chǎn)生特異性抗體，抗原抗體結(jié)合可以干擾、減少致齲菌在牙面上的附著及抑制細(xì)菌的代謝活動，從而達(dá)到防齲效果。曾經(jīng)有臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示變形鏈球菌全細(xì)胞免疫接種可產(chǎn)生破壞心臟組織的心臟交叉抗體，導(dǎo)致心內(nèi)膜炎的發(fā)生，因此不適用于人體。但粘附素抗原實(shí)驗(yàn)在靈長類動物身上取得了成功。目前防齲疫苗主要采用操作簡單的粘膜吸收途徑進(jìn)行接種，比如鼻腔滴注、灌胃、口服、扁桃體噴霧等形式。

2.抗齲齒卵黃體抗體防齲

[4]抗齲齒卵黃體抗體（IgY）是將滅活變形鏈球菌接種于母雞，并從雞卵黃中取得的抗體。人體接種此抗體后可起到被動免疫作用，試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示接種IgY后，變鏈菌、乳酸桿菌明顯減少，產(chǎn)酸能力下降。IgY主要通過改變變形鏈球菌表面的理化特性和抗粘附來達(dá)到防齲目的。IgY試劑為噴劑型，是一種成本低、產(chǎn)率高、提純快捷且穩(wěn)定性良好的局部防齲制劑。臨床建議每隔6個月做一個療程的噴涂可以鞏固防齲效果。

三、再礦化防齲

利用人工方法使齲損脫礦的牙釉質(zhì)和牙骨質(zhì)再礦化，主要用于防治早期釉質(zhì)齲。這里主要介紹納米羥基磷灰石、酪蛋白磷酸肽鈣氟磷復(fù)合體溶液以及磷酸三鈣水解法三種再礦化途徑。

1.納米羥基磷灰石

牙釉質(zhì)的化學(xué)成分是羥基磷灰石，占97%。[8]納米羥基磷灰石是羥基磷灰石的納米級形式納米材料微粒粒徑小，顆粒表面原子數(shù)增多，較高的表面能可使其易與其他原子相結(jié)合，與普通材料相比具有更良好的化學(xué)和生物活性。納米羥基磷灰石能通過多種途徑控制變鏈菌在牙面的附著，首先與牙釉質(zhì)本身的羥基磷灰石競爭性吸附變鏈菌，而且前者吸附量大于后者，因而減少了牙菌斑的數(shù)量。納米羥基磷灰石再礦化作用主要體現(xiàn)在當(dāng)牙釉質(zhì)脫礦時，人工合成的納米羥基磷灰石可以直接填充牙釉質(zhì)脫礦后的晶體間隙。另一方面，納米羥基磷灰石的良好化學(xué)活性可使鈣離子不斷遷移，從而加速脫礦區(qū)再礦化。

2.酪蛋白磷酸肽鈣氟磷復(fù)合體溶液的再礦化作用

[5]酪蛋白磷酸肽是牛乳酪蛋白中具有生物活性的色氨酸多肽片段，其在溶液中可與鈣磷結(jié)合形成酪蛋白磷酸肽鈣磷復(fù)合體，加氟后形成酪蛋白磷酸肽鈣氟磷復(fù)合體。酪蛋白磷酸肽是良好的載體，可以促進(jìn)牙齒對鈣磷的吸收和利用，可添加于食品及保健品中。加氟后則可以增強(qiáng)防齲效果。實(shí)驗(yàn)證明酪蛋白磷酸肽鈣氟磷復(fù)合體對于牙釉質(zhì)缺損有明顯的再礦化效果。

3.ɑ-磷酸三鈣水解法再礦化修復(fù)早期釉質(zhì)齲

[7]ɑ-磷酸三鈣是優(yōu)良的骨修復(fù)材料，并可作為食品添加劑增強(qiáng)鈣的攝入，可緩解缺鈣狀況。有關(guān)實(shí)驗(yàn)證明ɑ-磷酸三鈣水解后，主要形成低鈣/磷比（或缺鈣）羥基磷灰石（CDHA），在脫礦了的釉質(zhì)表面制備CDHA涂層使釉質(zhì)再礦化，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該涂層與釉質(zhì)表面結(jié)合牢固，硬度及耐磨性與正常牙釉質(zhì)無異。此法不需要磨除正常牙體組織，可用于早期釉質(zhì)齲的原位修復(fù)。臨床早前主要采取貼膜或涂刷的方式，但唾液會影響溶液的濃度和成分，目前有研究人員發(fā)明了一種牙齦套，可將涂層液封閉在牙套與釉質(zhì)和牙齦緣之間以達(dá)到治療效果。

本文主要從免疫、微生態(tài)制劑以及再礦化等方面綜合闡述了齲病預(yù)防的最新研究成果，由此可見齲病防治研究領(lǐng)域不斷擴(kuò)大，水平不斷提高，前景廣闊。

參考文獻(xiàn)

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