12種殺菌劑對辣椒炭疽病菌的毒力測定

任艷玲 王濤 王 力 楊豐 何絲汀 安可 羅麗華

摘? ? 要：為了篩選出有效防治辣椒炭疽病的藥劑，采用菌絲生長速率法測定12 種殺菌劑對辣椒炭疽病菌的室內毒力。結果表明，供試殺菌劑對辣椒炭疽病菌絲生長均有不同程度的抑制，其中化學殺菌劑毒力由強到弱依次為多菌靈、氟硅唑、腐霉利、己唑醇、嘧菌酯、溴菌腈、菌核凈、噻呋酰胺和嘧霉胺，EC50值分別為0.43、057、1.20、3.27、7.97、11.80、13.96、41.71、105.07 mg·L-1;生物殺菌劑毒力由強到弱依次為丁子香酚、多抗霉素和中生菌素，EC50值分別為1.84、8.02、20.48 mg·L-1。研究結果為防治辣椒炭疽病提供了科學指導。

關鍵詞： 辣椒; 炭疽病; 殺菌劑; 菌絲生長速率法; 毒力測定

Abstract：Anthracnose is an important disease in the production and storage of pepper. Agents for effective control of pepper were screened to provide guidance for prevention. The indoor toxicity of 12 fungicides was detected by using mycelial growth aate method. The strongest efficacy was found in Pythium， while the weakest efficacy was revealed in thifluzamide （Drug efficacy： carbendazim >fluorosilazole > fumarin >hexazolol >pyrimethimide > bromonitrile > sclerotin >thiafuramide >pyrimethimide .The EC50 was 0.43、057、1.20、3.27、7.97、11.80、13.96、41.71 and 105.07 mg·L-1， respecitively）. The virulence of biological fungicides was strongest efficacy for butyrophenol， and weakest for polyantimycin （eugenol >polyclonal antibiotic > mesomycin， with the EC50 was1.84， 8.02 and 20.48 mg L-1， respectively）. In order to enhance the efficacy of microbicides and extend the onset time， the reasonable rotation or mixing microbicides should be scientifically measured according to the onset time of microbicides and the type of action. The current study provides scientific guidance for the prevention and control of pepper diseases caused by anthracnos.

Key words：Pepper; Anthracnos; Fungicide; Growth rate method; Toxicity measurement

辣椒是原產南美的一年生茄科草本經(jīng)濟作物，其果實因豐富的維生素C等營養(yǎng)和獨特的口感贏得消費者廣泛認可，成為重要蔬菜及調味品，種植面積和產量在蔬菜類作物中名列前茅[1-4]。辣椒在我國已有數(shù)百年栽培食用史，貴州在全國辣椒產業(yè)中具有重要地位，2016年貴州辣椒種植面積32萬hm2，產量487萬t，產值146億元，全國占比分別超過24%、17%和21%，辣椒已成為貴州重要優(yōu)勢產業(yè)，在促進農民增收，推進精準脫貧方面發(fā)揮重要作用[5-6]。長時間大面積種植，特別是連片連作導致辣椒病害頻繁發(fā)生，影響產量和質量，給從業(yè)者造成較大經(jīng)濟損失。炭疽病是辣椒上的主要病害，在我國、印度、印度尼西亞和韓國等主產區(qū)常年引起減產達30% 以上，泰國減產嚴重年份高達80%[7]，我國陜西少數(shù)嚴重區(qū)域損失達90%[8]，貴州5個主產區(qū)辣椒病害調查，發(fā)現(xiàn)炭疽病廣泛發(fā)生，危害最嚴重的貴陽市辣椒基地發(fā)病率高達83%，危害最輕的遵義發(fā)病率也有33%[9]。辣椒炭疽病致病菌群種類復雜，已先后報道10余種病原菌[7-8]，不同地區(qū)致病菌種類區(qū)別很大，即使同一種致病菌，由于栽培環(huán)境和用藥習慣不同，對同種殺菌劑敏感性差異也可能較大[10-12]。由于地區(qū)辣椒炭疽病針對性研究相對較少，各地在辣椒炭疽病藥劑防治中存在較大盲目和隨意性，筆者以2017年從貴陽花溪辣椒種植基地分離出的炭疽病原菌為目標，2018年9—12月在貴州山地特色水果及制品工程研究中心，選擇廣泛使用的殺菌劑進行室內毒力測定，以篩選出具有較強抑制作用的藥劑，為針對性防治提辣椒炭疽病供技術支持和科學指導。

1 材料與方法

1.1 供試菌株與藥劑

供試辣椒炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides），由貴州山地特色水果及制品工程研究中心從貴州省貴陽市花溪區(qū)種植基地辣椒上分離、鑒定，保存于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）斜面上，4 ℃冰箱備用，使用前先進行活化。

供試的12種殺菌劑分別為丁子香酚、中生菌素、多抗霉素、嘧霉胺、噻呋酰胺、溴菌腈、多菌靈、氟硅唑、菌核凈、己唑醇、腐霉利和嘧菌酯，各藥劑的生產廠家、劑型、有效成分含量及毒力測試配置濃度詳見表1。

1.2 方法

研究參考方中達、沈晉良和張焱能等的方法[13-15]。殺菌劑室內毒力測定采用菌絲生長速率法進行。在無菌條件下，用無菌水配制好供試藥劑的母液，然后分別加入55 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中，配成表1濃度，搖勻后倒入9 cm的培養(yǎng)皿中制成相應濃度的含藥平板，對照用等量無菌水與PDA培養(yǎng)基混合均勻制成;供試辣椒炭疽病菌活化后接種在PDA培養(yǎng)基上，25 ℃恒溫培養(yǎng)5 d，用直徑5 mm打孔器在菌落邊緣取菌餅，接種到含有不同濃度藥劑的培養(yǎng)基上，每皿放置1個菌餅，置于25 ℃恒溫箱培養(yǎng)5 d，十字交叉測量各處理菌落直徑，每處理3次重復。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計

抑菌率/%=（對照菌落增長直徑-處理菌落增長直徑）/對照菌落增長直徑×100;將抑菌率換算為概率值，濃度計算轉化為濃度對數(shù)，用SPSS軟件計算求得毒力回歸方程、抑制中濃度EC50和相關系數(shù)，根據(jù)EC50大小評價殺菌劑的抑菌效果。

2 結果與分析

從試驗結果可以看出，供試12種殺菌劑對辣椒炭疽病菌菌絲生長均有不同程度的抑制作用（表2），多菌靈和氟硅唑對辣椒炭疽病菌菌絲生長的抑制作用最強，EC50值均小于1mg·L-1，分別為0.43、0.57 mg·L-1;腐霉利、丁子香酚、己唑醇、嘧菌酯和多抗霉素的抑制作用次之，EC50值均在1～10 mg·L-1之間，分別為1.20、1.84、3.27、7.97、8.02 mg·L-1;溴菌腈、菌核凈、中生菌素、噻呋酰胺和嘧霉胺的抑制作用最弱，EC50值分別為11.80、13.96、20.48、41.71、105.07 mg·L-1。

3 討論與結論

炭疽病是辣椒上的重要病害，可侵染葉、枝和果實等部位，影響辣椒產量和質量，發(fā)生嚴重時能造成重大損失。辣椒炭疽病防治措施歸納起來主要包括選用抗性品種、農業(yè)防治、生物防治和化學藥劑防治等。由于辣椒抗性品種有限、不同區(qū)域優(yōu)勢炭疽菌種類及生物學特性區(qū)別較大，制約了抗性品種和生物防治的推廣應用，目前生產中防治辣椒炭疽病主要依賴化學藥劑。部分地區(qū)進行辣椒炭疽病殺菌劑毒力測試，但選用藥劑種類相對較少，湖南和海南研究僅用了1種[12，16]，貴州2個團隊測試分別選擇了3種和5種[4，9]，重慶、廣西和山東試驗選用了5種、6種和6種殺菌劑[17-19]。大部分辣椒產區(qū)未進行當?shù)貎?yōu)勢炭疽病原菌對不同種類殺菌劑的毒力測試，在藥劑防治中存在較大盲目性和隨意性，以致辣椒炭疽病造成損失不斷增加。

筆者針對生產需要，選取12種常見藥劑進行辣椒炭疽病菌的的室內毒力測定。結果表明，供試殺菌劑對辣椒炭疽病菌均有一定抑制活性，但不同類型化學藥劑間的抑菌能力差異較大，苯并咪唑類殺菌劑防效最好，這與廣西和貴州其他團隊已有研究結果一致[4，9，18];苯并咪唑類的多菌靈、三唑類的氟硅唑和己唑醇、亞胺類的腐霉利和甲氧基丙烯酸酯類的嘧菌酯抑菌效果較好，可作為化學防治首選用藥;機制作用方式未知的溴菌腈、亞胺類的菌核凈、噻唑酰胺類的噻呋酰胺和吡啶類的嘧霉胺也有一定防效，可作為防治的備選或輪換用藥。

化學殺菌劑因效果快捷、方便在防治中處于主導地位，但生物農藥因低毒安全、對環(huán)境的友好和較難產生抗性等優(yōu)勢越來越多得到重視，是高品質高附加值農產品的首選投入品。筆者選用了3種生物農藥進行室內毒力測定，填補了同類研究較少采用生物農藥的空白。結果表明丁子香酚抑菌活性最好，僅次于多菌靈、氟硅唑和腐霉利3種化學殺菌劑;多抗霉素也有一定的防效，抑菌活性高于溴菌腈、菌核凈、中生菌素、噻呋酰胺和嘧霉胺等化學殺菌劑，兩者可作為防治辣椒炭疽病的首選或輪換藥劑。如果長期使用單一殺菌劑，選擇壓力極易導致病原菌產生抗藥性，為有效延長不同類型殺菌劑在寄主上的使用時間，降低抗藥性產生風險，生產中應依據(jù)殺菌劑的持效期及作用類型確定使用策略，不同類別殺菌劑輪流使用，避免長期、多次使用單一藥劑或作用機理相同的藥劑。

參考文獻

[1] 楊中周.我國辣椒品種選育進展與展望[J].中國瓜菜，2017，30（5）：1-6.

[2] 王雪雅，陸寬，孫小靜，等.貴州不同辣椒品種的品質及揮發(fā)性成分分析[J].食品科學，2018，39（4）：212-218.

[3] 張錦閣，范高領，胡明文.辣椒漂浮育苗影響因素研究進展[J].中國瓜菜，2018，31（4）：5-9.

[4] 曾慶華，肖仲久，向金玉，等. 3種殺菌劑對黑點型辣椒炭疽病菌的室內毒力測定[J]. 貴州農業(yè)科學， 2010， 38（5）：93-94.

[5] 史瓊，王怡蕾，林洪波，等.供給側改革視角下貴州辣椒產業(yè)發(fā)展趨勢探究[J].南方農業(yè)，2017，11（21）：89-91.

[6] 王華書.貴州辣椒產業(yè)鏈的發(fā)展現(xiàn)狀及對策探討[J].貴州農業(yè)科學，2011，39（6）：193-196，201.

[7] 孫春英，毛勝利，張正海，等. 辣椒抗炭疽病遺傳與育種研究進展[J]. 園藝學報， 2013， 40（3）： 579-590.

[8] 楊佳文，趙尊練，張管曲，等.陜西線辣椒炭疽病原菌的鑒定及生物學特性研究[J].西北農業(yè)學報，2017，26（11）：1695-1705.

[9] 李小霞，肖仲久.貴州省辣椒炭疽病病原菌鑒定及室內毒力測定[J].廣東農業(yè)科學，2011，38（17）：55-57，238.

[10] 高楊楊，禾麗菲，李北興，等.山東省辣椒上尖孢炭疽復合種對吡唑醚菌酯的敏感基線及吡唑醚菌酯增效配方篩選[J].農藥學學報，2017，19（6）：701-707.

[11] 滿益龍，譚新球，司乃國，等.不同辣椒炭疽病菌對唑菌酯的敏感性差異[J].植物保護，2016，42（5）：171-176.

[12] 曾向萍，趙志祥，符美英，等.海南辣椒炭疽病病原菌鑒定及其對嘧菌酯的敏感性分析[J].中國植保導刊，2016， 36（5）：5-8，81.

[13] 方中達.植病研究方法[M].3版.北京：中國農業(yè)出版社，1998.

[14] 沈晉良.農藥生物測定[M].3版.北京：中國農業(yè)出版社，2013.

[15] 張焱能，張余川，蒲金基，等.杧果蒂腐病菌的10種殺菌劑室內毒力測定及藥劑復配[J].中國南方果樹，2016，45（4）：74-76.

[16] 夏花，朱宏建，周倩，等.湖南芷江辣椒上一種新炭疽病的病原鑒定[J].植物病理學報，2012，42（2）：120-125.

[17] 張世才，李怡斐，黃任中，等.重慶加工型辣椒炭疽病病原鑒定及防治藥劑室內毒力測定[J].分子植物育種，2017，15（5）：1933-1937.

[18] 韋文添.不同殺菌劑對辣椒炭疽病菌的室內毒力測定[J].江蘇農業(yè)科學，2013，41（4）：117-119.

[19] 高楊楊，禾麗菲，李北興，等.山東省辣椒上尖孢炭疽復合種對吡唑醚菌酯的敏感基線及吡唑醚菌酯增效配方篩 選[J].農藥學學報，2017，19（6）：701-707.