血清ASMase水平對非酒精性脂肪性肝病患者肝纖維化程度的預(yù)測價值

高峻 郭旭升 韓利杰

近年來非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)成為近年來患病增加最為明顯的疾病之一，其屬于一種獲得性代謝應(yīng)激肝損傷。而NAFLD是導(dǎo)致肝纖維化的原因之一[1]。目前對于該疾病尚無特異的臨床診斷手段[2-3]。酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase，ASMase)是一種水解鞘磷脂產(chǎn)生酰胺的重要溶酶體酶，有研究指出其在NAFLD的表達(dá)水平明顯高于正常肝組織[4]，提示其可能成為NAFLD診斷的生物標(biāo)志物。因此本文通過回顧性分析探討血清中ASMase水平對NAFLD患者肝纖維化程度的預(yù)測作用，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

一、 一般資料

選取2015年1月至2018年6月間我院收治87例確診的非酒精性脂肪性肝病患者為研究對象，男性48例，女性39例，患者年齡32～65歲，平均(43.98±6.67)歲；其中男性身高162～187 cm，平均(173.39±6.42)cm，體重72～89 kg，平均(76.25±2.44)kg；女性身高155～178 cm，平均(163.25±4.49)cm，體重48～69 kg，平均(53.67±2.54)kg。

二、 納入排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)入選患者符合《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[5]診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)患者熟知該課題研究，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)因酒精、藥物、病毒、免疫等疾病引起的脂肪性肝病(2)甲狀腺急性病、庫欣綜合征患者；(3)存在肝腎功能不全或嚴(yán)重感染患者；(4)3個月內(nèi)使用保護(hù)肝臟，或服用副作用能夠引起肝損傷藥物治療者；(5)凝血功能異常，有嚴(yán)重心血管疾病患者。

三、 指標(biāo)分析

(一) 體質(zhì)指數(shù)(BIM)檢測：由專人使用同一設(shè)備精確測量患者的身高、體質(zhì)量，計算公式：BIM=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)。

(二) 血清指標(biāo)檢測 入選患者在接受穿刺檢測前3d于清晨空腹?fàn)顟B(tài)抽取患者外周血4 mL于一次性采血管，室溫靜置30 min，3000 r·min-1離心8 min分離血清，-80℃保存，由專門人員管理并檢測患者血清中，采用全自動生化儀檢測血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、 天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)水平。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中酸性鞘磷脂酶(ASMase)水平，試劑盒購于上海北滬生物科技有限公司。

(三) 病理學(xué)檢測 所有入選患者住院后依照檢測要求進(jìn)行肝臟穿刺超聲定位，簽署知情同意書，肝組織標(biāo)本長度1.5～2.0 cm，會管區(qū)數(shù)量不小于6個，標(biāo)本經(jīng)10%多聚甲醛固定、石蠟包埋，制備成組織切片用HE、Masson和網(wǎng)織纖維染色，依據(jù)《非酒精性脂肪性肝病診療指南》肝組織病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)，由兩位病理醫(yī)師分別進(jìn)行，進(jìn)行肝纖維化結(jié)果診斷；如結(jié)果不一致由病理科主任醫(yī)師進(jìn)行結(jié)果確定。根據(jù)肝組織活檢結(jié)果將入選患者分為肝臟非顯著纖維組(S0～S2)和肝臟顯著纖維組(S3～S4)。

四、 統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、不同肝纖維化階段患者一般資料分析

顯著肝纖維化患者的年齡、BMI指數(shù)明顯高于無顯著肝纖維化組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同肝纖維化階段患者一般資料分析(±s)

與非顯著肝纖維化組相比較：①P<0.001

二、 不同肝纖維化階段患者肝功能指標(biāo)和血清ASMase水平分析

兩組患者血清中AST、GGT、ALP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，顯著肝纖維化組患者血清中ALT水平明顯高于非顯著肝纖維化，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同肝纖維化階段患者肝功能指標(biāo)和血清ASMase水平分析(±s)

注：與非顯著肝纖維化組相比較：①P<0.001

三、顯著肝纖維化危險因素Logistic分析

以NAFLD肝纖維化為因變量，以上述單因素分析有統(tǒng)計學(xué)意義項(xiàng)年齡、BMI、ASMase、ALT為自變量，進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示上述指標(biāo)均為顯著肝纖維化的危險因素，見表3。

表3 顯著肝纖維化危險因素Logistic分析

四、ROC曲線分析AMSase對NAFLD患者肝纖維化程度的預(yù)測研究

繪制NAFLD患者血清中AMSase相對表達(dá)水平值數(shù)據(jù)輸入SPSS.20軟件進(jìn)行ROC曲線分析，根據(jù)輸出結(jié)果顯示AMSase最佳相對表達(dá)水平臨界值為88.090 nmol/L，靈敏度80.56%，特異性75.86%，AUC為0.820，見圖1。

圖1 ROC曲線分析

肝纖維化主要是肝星狀細(xì)胞(HSC)參與肝細(xì)胞的損傷修復(fù)過程中，大量活化后的細(xì)胞會轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，導(dǎo)致肝纖維化[6]。ASMase是一種水解鞘磷脂產(chǎn)生酰胺的重要溶酶體酶[7]，能夠促進(jìn)神經(jīng)酰胺和磷脂酰膽堿生成，引起肝細(xì)胞的凋亡及囊性纖維化；也可以通過調(diào)節(jié)組蛋白酶B/D蛋白水解過程，促進(jìn)HSC增殖加劇肝纖維化程度[8]，因此血清中ASMase水平可能成為NAFLD患者肝纖維化程度的診斷標(biāo)志物。

本文依據(jù)NAFLD患者肝組織病理學(xué)診斷結(jié)果，將其分為肝臟非顯著纖維組和肝臟顯著纖維組。分析顯示，顯著肝纖維化組患者血清中AMSase水平明顯高于無顯著肝纖維化(P<0.05)。這可能與肝臟慢性損傷激活肝星狀細(xì)胞的活化及增殖有關(guān)，Haines等[9]研究也證實(shí)AMSase的高表達(dá)，能夠促進(jìn)成肌纖維細(xì)胞的活化。Logistic結(jié)果顯示血清中AMSase水平是NAFLD患者肝纖維化的危險因素之一；ROC曲線分析顯示AUC值為0.82，靈敏度80.56%，特異性75.86%，表明NAFLD患者血清中AMSase水平能夠作為預(yù)測肝纖維程度指標(biāo)。

綜上所述，血清中ASMase水平對非酒精性脂肪性肝病患者肝纖維化程度具有一定的預(yù)測價值，但對于該指標(biāo)能否用于其他疾病引起的肝纖維化程度是否具有預(yù)測價值，是本文研究不足之處，也是值得后期繼續(xù)探討的研究方向。