玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b基因的克隆、表達及亞細胞定位分析

蔡云婷，賈 力，拓昊苑

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 玉米研究所，農(nóng)業(yè)部西南玉米生物學(xué)與遺傳育種重點實驗室，四川 成都 611130)

開花時間是作物最重要的農(nóng)藝性狀之一[1]。開花對植物授粉、種子發(fā)育和形態(tài)、籽粒產(chǎn)量、易馴化程度以及環(huán)境適應(yīng)性等方面會產(chǎn)生重要影響。對植物開花時間的調(diào)控是植物繁殖的核心問題[2]。在特定的時間開花是植物由營養(yǎng)生長轉(zhuǎn)變?yōu)樯成L的關(guān)鍵步驟，是植物生殖產(chǎn)生后代的重要節(jié)點[3]。植物開花受多種內(nèi)源和外源因素的調(diào)節(jié)[4]。近些年，通過對模式植物擬南芥突變體的研究，在調(diào)控植物開花的途徑中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了很多個重要的基因[5-10]。其中，光周期途徑(Photoperiod pathway)是調(diào)節(jié)植物開花的四大重要途徑之一[11]。擬南芥光周期開花調(diào)節(jié)途徑中，光受體接收光照時間長度、強度等光信號，并將信號傳遞給生物節(jié)律鐘[12]。根據(jù)光受體吸收光譜成分的不同可將其分為三類，即光敏色素(Phytochromes)、隱花色素(Cryptochromes)和向光蛋白(Phototropin)[12]。光敏色素包含五類，即phyA(phytochrome A)、phyB(phytochrome B)、phyC(phytochrome C)、phyD(phytochrome D)和phyE(phytochrome E)。光敏色素主要吸收紅光(Red light，R)和遠紅光(Far-Red light，F(xiàn)R)，前者抑制擬南芥花朵的開放，而遠紅光則作用相反[13]。在遠紅光條件下，phyA會抑制開花抑制因子的生成進而促使植物開花[14]。然而，相同條件下phyb突變體則提早開花，這說明phyB抑制開花，但也有研究表明phyB過量表達會促進植物開花[15]。另外，phyC的功能實現(xiàn)也與phyB的活化相關(guān)[16]。隱花色素有兩類，Cry1(Cryptochromes 1)和Cry2(Cryptochromes 2)，主要感知可見光中的藍光[17]。Cry1與Cry12和phyA介導(dǎo)藍光條件下植物的去黃化，促進開花[18]。向光蛋白包含Phot1(Phototropin 1)和Phot2(Phototropin 2)，主要表現(xiàn)在影響植物對藍光依賴的向光性反應(yīng)[19]，會對葉綠體的運動和植物氣孔的開閉產(chǎn)生影響[20]，另外，向光蛋白自身并不直接參與植物開花過程的調(diào)控，對開花時間不會產(chǎn)生影響。

光周期途徑中，當植物體感受到光刺激時會產(chǎn)生規(guī)律的自我調(diào)節(jié)，而這一內(nèi)在節(jié)律性被稱為生物鐘，又叫生理鐘、晝夜節(jié)律鐘。大多數(shù)真核生物的生理過程都是受生物鐘的調(diào)控[21]。與此同時，由生物鐘控制的許多輸出路徑會對生物鐘產(chǎn)生負反饋，導(dǎo)致時鐘變?yōu)閺?fù)雜監(jiān)管網(wǎng)絡(luò)中的中心樞紐。植物的一些生理現(xiàn)象，例如葉片運動、氣孔開閉、CO2的固定等均受到生物鐘的調(diào)控，因此能夠觀察到植物的晝夜規(guī)律[22]。生物鐘通常被分為3個部分[23-24]：①輸入途徑：使生物鐘機制與晝夜、溫度循環(huán)同步，能夠向中心振蕩子傳送光信號或者溫度信號，使中央振蕩子與光暗循環(huán)保持相同的機制；②中心振蕩子：是生物鐘的核心組成部分，控制24 h的晝夜節(jié)律；③輸出系統(tǒng)：受中心振蕩子控制，由許多生化途徑和發(fā)育途徑組成。光信號將節(jié)律信號通過中央振蕩器的波動傳輸給下游調(diào)節(jié)基因，參與下游成花誘導(dǎo)與花發(fā)育基因的表達調(diào)控。GIGANTEA(GI)是節(jié)律輸出的通道基因，GI轉(zhuǎn)錄物的含量受節(jié)律鐘的調(diào)控，在清晨時轉(zhuǎn)錄水平處于最低點，之后持續(xù)上升，在大約9 h后達到最高點。GI是控制植物開花的重要基因CO的上游基因，其與ELF3和FKF1共同作用，可以調(diào)控CO和FT的轉(zhuǎn)錄翻譯進而促進開花[25-26]。通過植物本身對生物鐘和光信號的處理，將這2種信號結(jié)合起來，進而保證CO(CONSTANS)基因的轉(zhuǎn)錄及翻譯的穩(wěn)定性[27]。CO(CONSTANS)是在擬南芥中發(fā)現(xiàn)的第一個由節(jié)律調(diào)控并且會對擬南芥開花產(chǎn)生影響的基因。中央振蕩器是生物鐘的最關(guān)鍵的部分，輸入生物節(jié)律鐘的光信號在中央振蕩器中產(chǎn)生節(jié)律并向下游通路傳遞晝夜節(jié)律信號。中央振蕩器主要由2個MYB類蛋白基因LHY(Late elongated hypocotyl)、CCA1(Circadian clock associated1)組成的具有自主調(diào)控機制的負反饋環(huán)和一種擬南芥?zhèn)螒?yīng)答調(diào)節(jié)蛋白基因家族APRRs(Arabidopsis pseudo-response regulators)組成[28]。

TOC1(Timing of CAB expression 1)又叫APRR1或PRR1，是PRR家族主要成員之一[29]。APRRs小家族有5個成員，包括APRR1/TOC1、APRR3、APRR5、APRR7、APRR9，并且其余4個基因的轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平與TOC1類似，都表現(xiàn)出晝夜節(jié)律變化。與PRR家族其他成員結(jié)構(gòu)類似，TOC1的N端存在PR結(jié)構(gòu)域(Pseudoreceiver domain)，C端存在CCT結(jié)構(gòu)域(CONSTANS(CO)， CO-like， TOC1)， 但與PRR5、PRR7和PRR9不同的是，TOC1基因不存在IR區(qū)域(Intermediate region)[29]。TOC1主要負責(zé)中央振蕩器中的調(diào)節(jié)。中央振蕩器核心的負反饋環(huán)由Alabadí等[30]在2001年發(fā)現(xiàn)。Alabadí等[30]針對cca1、lhy以及TOC1過表達的擬南芥植株證明，在夜晚TOC1基因表達量升高，進而刺激CCA1/LHY表達量的升高，緊接著CCA1/LHY的積累會反饋抑制TOC1基因的表達,這就是中央振蕩器中核心的負反饋環(huán)。

隨后，Nakamichi等[31]發(fā)現(xiàn)了中央振蕩器在早晨也會形成一個由CCA1/LHY與PRR9/PRR7構(gòu)成的負反饋環(huán)。2006年，Locke等[32]依據(jù)試驗構(gòu)建出了一個完整的中央振蕩器的反饋模型。TOC1在早晨的表達量達到最高值，緊接著CCA1/LHY與TOC1啟動子區(qū)域的夜晚元件EE(EE-element，AAATATCT)相結(jié)合，使TOC1的轉(zhuǎn)錄被抑制。當CCA1/LHY表達量最大時，CCA1/LHY啟動子區(qū)域的順式作用元件(TOC1 morning element，T1ME)會與TOC1的CCT結(jié)構(gòu)域結(jié)合進而抑制CCA1/LHY表達[33]。

生物鐘與開花調(diào)節(jié)的信號網(wǎng)絡(luò)緊密相連，這也就使得植物開花調(diào)節(jié)機制變得更為復(fù)雜。轉(zhuǎn)錄因子TOC1(Timing of CAB expression 1)是植物生物鐘的基本組成成分，之前在擬南芥的研究中表明，AtTOC1會對LHY/CCA1的表達有促進作用，也與ZTL、FKF1、ABA等基因產(chǎn)生互作?？墒?，在玉米中對TOC1的研究并不深入，并且TOC1在玉米中存在2個同源基因，因此，研究TOC1在玉米中的作用也更為必要。本研究通過擬南芥AtTOC1基因的氨基酸序列得到2個在玉米內(nèi)的同源基因ZmTOC1a及ZmTOC1b，克隆獲得了這2個基因的開放閱讀框的序列，并對目的基因編碼蛋白的特性和表達進行了分析，初步了解了ZmTOC1a和ZmTOC1b的表達模式。對植物光周期的調(diào)控因子的研究和進一步深入挖掘，不僅有利于加深對植物花發(fā)育過程生物學(xué)機理的了解，而且有利于利用熱帶、亞熱帶玉米種質(zhì)資源。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗所需玉米材料B73由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)玉米研究所提供。DNA Marker、大腸桿菌感受態(tài)購自北京全式金生物技術(shù)有限公司；KOD 購自 TaKaRa 公司；限制性內(nèi)切酶KpnⅠ、XbaⅠ購買于NEB公司；Plasmid Extraction Kit、Gel Extraction Kit 購自 Omega 公司；SuperScript?Ⅱ Reverse Transcriptase Kit 購自 Invitrogen 公司；RNase Free 的槍頭購自 Axygen 公司；卡那霉素、氨芐青霉素、利福霉素、乙酰丁香酮等購自 Biotopped 公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 RNA提取及cDNA合成 將玉米種子放在有充足蒸餾水的濾紙上28 ℃催芽3 d，種植在營養(yǎng)土中培養(yǎng)至三葉一心時，挑選長勢正常的植株。取幼嫩的玉米葉片 2 g 剪碎放入液氮預(yù)冷的研缽，加入適量液氮，迅速研磨直至葉片變?yōu)榉勰┖螅瑢颖巨D(zhuǎn)入1.5 mL離心管中。按照RNA試劑盒提取說明書，提取總 RNA。使用濃度為1.5%的瓊脂糖對樣品進行條帶完整性檢測，并結(jié)合核酸蛋白儀檢測RNA樣品濃度和純度。將電泳圖中條帶清晰、儀器檢測濃度合適的樣品，使用SuperScript?Ⅱ Reverse Transcriptase Kit 反轉(zhuǎn)錄為cDNA。

1.2.2 候選基因同源克隆 采用GenBank數(shù)據(jù)庫中擬南芥AtTOC1(AT5G61380)的氨基酸序列，在玉米數(shù)據(jù)庫MaizeGDB中Blast同源搜索到玉米TOC1基因。在UTR區(qū)域設(shè)計特異性引物TOC1a-F/R、TOC1b-F/R(表1)，以基因組cDNA作為模板，使用KOD高保真酶進行基因CDS全長序列的擴增。擴增完成后，連接pEASY-BLUNT載體，進行測序。將測序正確的菌液提取質(zhì)粒并保存于-80 ℃。

表1 ZmTOC1a和ZmTOC1b基因擴增引物信息Tab.1 Information list of ZmTOC1a/ZmTOC1b amplification primer

1.2.3 亞細胞定位分析

1.2.3.1 構(gòu)建表達載體 根據(jù)ZmTOC1a/ZmTOC1b在Maize GDB上的序列信息，設(shè)計去除終止密碼子的CDS區(qū)域的擴增引物，并在引物兩端分別加上合適的同源臂序列。以保存的質(zhì)粒為模板，使用帶有同源臂的引物擴增基因完整的開放閱讀框。將表達載體pCAMBIA2300-35S-eGFP使用限制性內(nèi)切酶KpnⅠ及XbaⅠ線性化。而后使用ClonExpress?MultiS One Step Cloning Kit(南京，諾唯贊)將線性化載體與PCR產(chǎn)物連接并轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)。挑取單克隆，進行PCR檢測后，將陽性菌落進行質(zhì)粒提取及測序。在測序結(jié)果比對正確后，將陽性單克隆的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101，從而構(gòu)建目的基因與eGFP融合的過量表達載體: pCAMBIA2300-35S:ZmTOC1a-eGFP,pCAMBIA2300-35S:ZmTOC1b-eGFP。

1.2.3.2 農(nóng)桿菌注射煙草 將含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌100 μL加入至含有卡那霉素以及利福平(質(zhì)量濃度均為50 mg/L)的YEB液體培養(yǎng)基中，28 ℃過夜振蕩培養(yǎng)至生長對數(shù)期(OD600約等于0.6)，4 000 r/min離心8 min收集菌體倒掉上清液。而后，使用無菌水(含有終濃度為 10 mmol/L MgCl2，100 mmol/L MES(pH值5.7)和100 μmol/L乙酰丁香酮)重懸菌體，使菌液濃度達到OD600≈1.0；選取葉齡在5周左右的本氏煙草，用1 mL注射器(去掉針頭)在葉片背部注射菌液直至葉片組織空隙被液體填滿;而后將注射后的煙草放置于25 ℃條件下培養(yǎng)，48 h后用共聚焦顯微鏡觀察注射葉片。

1.2.4 蛋白特性分析及基因進化樹構(gòu)建 使用DNAMAN將目的基因的序列進行翻譯；使用Prot PARAM對基因表達蛋白進行理化性質(zhì)分析；使用NetPhos 3.1 Server對蛋白質(zhì)磷酸化位點預(yù)測；使用MEGA 5.0 構(gòu)建基因進化樹， 進化樹構(gòu)建方法采用MEGA 軟件的NJ 法(Neighbor Joining Method)， Bootstrap 值由 1 000 次重復(fù)得到。

1.2.5 基因組織表達分析 分別取玉米的胚芽鞘、胚根、花藥、雄穗、穗軸、花絲、苞葉、穗位葉、莖、氣生根及根系，使用液氮速凍，并磨碎為粉末狀。后使用RNA提取試劑盒將這11個部位葉片提取RNA，并反轉(zhuǎn)錄為cDNA(參考1.2.1)，稀釋5倍至工作濃度備用。根據(jù)基因序列設(shè)計引物，在11份不同組織的cDNA中擴增待測基因和內(nèi)參基因，本次組織定量試驗內(nèi)參選擇為18S。PCR 程序為 95 ℃ 30 s；95 ℃ 3 s，58 ℃ 5 s，40 個循環(huán)，每個樣本3個重復(fù)。實時熒光定量PCR體系參照表2。進行相對定量 qRT-PCR 分析，使用2-ΔΔ Ct法(Ct 表示循環(huán)數(shù))對結(jié)果進行計算并使用 Excel 軟件對最終結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析并繪制最終的表達量圖表。

表2 實時熒光定量PCR體系Tab.2 PCR system of qRT-PCR

2 結(jié)果與分析

2.1 玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b基因克隆

使用引物TOC1a-F/R、TOC1b-F/R， 進行PCR擴增，得到ZmTOC1a的開放閱讀框的總長度為1 236 bp， 共編碼411個氨基酸；ZmTOC1b的開放閱讀框的全長為1 554 bp，共編碼 517 個氨基酸(圖1)。

2.2 玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b蛋白特性

使用ProtParam在線預(yù)測ZmTOC1a、ZmTOC1b表達蛋白的信息。結(jié)果表明，ZmTOC1a蛋白分子式為C1982H3103N585O647S17，分子質(zhì)量為46.02 ku；ZmTOC1b蛋白分子式為C2468H3909N735O797S29，分子質(zhì)量57.56 ku。理論上，ZmTOC1a蛋白親水性平均系數(shù)(GRAVY)為-0.818，脂肪系數(shù)(Aliphatic index)是56.47。ZmTOC1b蛋白親水性平均系數(shù)(GRAVY)為-0.600，脂肪系數(shù)(Aliphatic index)是 66.94。ZmTOC1a、ZmTOC1b均為不穩(wěn)定蛋白(穩(wěn)定系數(shù)大于40)，其中ZmTOC1a不穩(wěn)定指數(shù)為58.88，ZmTOC1b不穩(wěn)定指數(shù)為51.08 。另外，ZmTOC1a、ZmTOC1b在酵母(Yeast)內(nèi)半衰期均大于20 h，在大腸桿菌(Escherichiacoli)內(nèi)半衰期均大于10 h。對ZmTOC1a、ZmTOC1b編碼的氨基酸序列進行分析，結(jié)果表明，ZmTOC1a蛋白肽鏈帶負電荷的殘基總數(shù)(Asp+Glu)54，帶正電荷的殘基總數(shù)(Arg+Lys)49，預(yù)測等電點(pI)為6.05(<7)，所以推測ZmTOC1a為酸性蛋白。ZmTOC1b蛋白肽鏈帶負電荷的殘基總數(shù)(Asp+Glu)65，帶正電荷的殘基總數(shù)(Arg+Lys)60，預(yù)測等電點(pI)為6.30(<7)，所以推測ZmTOC1b為酸性蛋白。

A.ZmTOC1a;B.ZmTOC1b。

NetPhos 3.1 Server預(yù)測結(jié)果表明(圖2)，ZmTOC1a共存在46個磷酸化位點，其中絲氨酸36個，蘇氨酸8個，酪氨酸2個；ZmTOC1b共存在53個磷酸化位點， 38個絲氨酸位點，12個蘇氨酸位點，3個酪氨酸位點。據(jù)此推測ZmTOC1a、ZmTOC1b翻譯后的磷酸化修飾可能對蛋白功能產(chǎn)生重要的作用。

2.3 玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b系統(tǒng)進化樹分析

將玉米TOC1基因序列放在NCBI中Blast得到了小麥、大麥等幾種主要農(nóng)業(yè)作物及其他植物中的TOC1基因。幾個主要物種中TOC1蛋白編號分別為XP_006647523.1(短穗野生稻，Oryzabrachyantha)、BAD38854.1(水稻，OryzasativaJaponica Group)、XP_002452462.1(高粱，Sorghumbicolor)、XP_004953120.1(谷子，Setariaitalica)、AMK48976.1(小麥，Triticumaestivum)、AEW48242.1(大麥，Hordeumvulgaresubsp.vulgare)。玉米中ZmTOC1a的編號為GRMZM2G020081,ZmTOC1b的編號為GRMZM2G148453。為了確認玉米ZmTOC1a及ZmTOC1b的系統(tǒng)進化位置，利用Mega 5.0軟件制作了TOC1同源基因的系統(tǒng)進化樹(圖3)，并進行了分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高粱中的TOC1基因與玉米TOC1基因親緣關(guān)系最近。

A.ZmTOC1a; B.ZmTOC1b。

圖3 玉米TOC1基因及同源基因系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Evolutionary tree of ZmTOC1 and other homologous gene

2.4 玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b亞細胞定位結(jié)果

將測序正確的載體pCAMBIA2300-35S:ZmTOC1a-eGFP，pCAMBIA2300-35S:ZmTOC1b-eGFP以及空載體pCAMBIA2300-35S:eGFP轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101并進行菌液檢測，將檢測為陽性的農(nóng)桿菌在含有抗性的YEB液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，并注射煙草葉片。pCAMBIA2300-35S:eGFP作為陽性對照，48 h后進行觀察。亞細胞定位結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗對照pCAMBIA2300-35S:eGFP空載體的綠色熒光分布在煙草葉片的細胞核、細胞質(zhì)、質(zhì)體以及細胞膜中;而在注射目的載體的煙草葉片的細胞核及細胞質(zhì)內(nèi)檢測到了綠色熒光蛋白，且細胞核內(nèi)的綠色熒光信號與細胞核定位蛋白熒光信號相重合，因此，可以初步確定ZmTOC1a、ZmTOC1b主要定位在細胞核以及少量細胞質(zhì)中(圖4)。

2.5 玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b在不同組織中表達量分析

為了探究ZmTOC1a、ZmTOC1b的表達模式，使用qRT-PCR檢測基因在玉米11個不同組織中的表達量。結(jié)果顯示，ZmTOC1a及ZmTOC1b在多個組織中表達，但是在不同組織中表達量差異很大。其中2個基因分別在胚根以及胚芽鞘表達量最高。在穗位葉、胚芽鞘、胚根、莖、花絲中高表達，也在雄穗、氣生根、根中有表達，但是在花粉和苞葉中無表達(圖5)。

圖4 ZmTOC1a、ZmTOC1b在煙草葉片中的亞細胞定位Fig.4 Subcellular localization of ZmTOC1a，ZmTOC1b in tobacco

圖5 玉米B73 11個不同組織中ZmTOC1a及ZmTOC1b的表達量分析Fig.5 The expression of ZmTOC1a and ZmTOC1b in eleven different tissues of maize B73

3 結(jié)論與討論

生物鐘與開花調(diào)節(jié)的信號網(wǎng)絡(luò)緊密相連，這也就使得植物開花調(diào)節(jié)機制變得更為復(fù)雜。擬南芥中央振蕩器的主要組成部分AtTOC1會對LHY/CCA1的表達有促進作用，也與ZTL、FKF1、ABA等基因產(chǎn)生互作進而會對擬南芥的生物鐘產(chǎn)生影響?？墒荰OC1在玉米中的研究并不深入，并且筆者在MAIZE GDB中Blast得到了玉米中的2個同源基因ZmTOC1a、ZmTOC1b，因此研究TOC1在玉米中的作用也就更為必要。

使用PCR擴增得到了這2個基因的CDS序列，而后在線預(yù)測了ZmTOC1a、ZmTOC1b表達蛋白的信息。結(jié)果發(fā)現(xiàn)2個基因表達蛋白均為酸性。并且使用NetPhos 3.1 Server預(yù)測的結(jié)果表明，ZmTOC1a存在46個潛在磷酸化位點，ZmTOC1b存在53個潛在磷酸化位點。磷酸化是一種常見的可以調(diào)控蛋白功能和穩(wěn)定性的修飾方式，據(jù)統(tǒng)計在人體中有500多個磷酸化激酶[34]。在目前已知的所有的翻譯后的修飾中磷酸化的種類和數(shù)目最多。推測ZmTOC1a、ZmTOC1b翻譯后的磷酸化修飾可能對蛋白功能產(chǎn)生重要的作用。而且信號蛋白的磷酸化會造成它所調(diào)控下游通路中的其他蛋白磷酸化，形成磷酸化級聯(lián)反應(yīng)。另外，系統(tǒng)發(fā)育樹分析結(jié)果表明，ZmTOC1a、ZmTOC1b在同一個分支中，且與之親緣關(guān)系最近的是高粱中的TOC1基因。推測他們可能含有相類似的功能。有文獻表明AtTOC1為轉(zhuǎn)錄因子及轉(zhuǎn)錄抑制劑[35]，而大多數(shù)轉(zhuǎn)錄因子也是定位在細胞核中的。亞細胞定位結(jié)果顯示，ZmTOC1a及ZmTOC1b表達的蛋白主要定位在細胞核中，與預(yù)期結(jié)果一致。基因組織表達結(jié)果表明，ZmTOC1a及ZmTOC1b在胚芽鞘、穗位葉、花絲等組織中高表達。這與該基因感受、傳遞光信號，參與調(diào)控開花的功能相關(guān)，對ZmTOC1a及ZmTOC1b基因功能的進一步研究有重要的意義。

TOC1除了在光周期通路中發(fā)揮作用，也參與到了脫落酸反饋通路中[36]。脫落酸參與調(diào)控植物的發(fā)育和抗逆過程。Pokhilko等[37]對擬南芥野生型植株進行不同濃度ABA處理，發(fā)現(xiàn)高濃度ABA時，AtTOC1表達量上調(diào)，生物節(jié)律周期延長。Legnaioli等[38]將TOC1-ox、WT和TOC1的RNAi轉(zhuǎn)基因植株進行干旱處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TOC1過量表達的植株對干旱不耐受。TOC1基因在擬南芥中的其他功能有助于加強對ZmTOC1a及ZmTOC1b基因功能的理解，以及后續(xù)的功能探究。發(fā)掘與光周期敏感相關(guān)調(diào)控因子，揭示光周期調(diào)控途徑的分子機制，對于熱帶以及亞熱帶玉米優(yōu)異種質(zhì)資源的利用，植物花發(fā)育過程生物學(xué)機制的深入研究以及玉米分子育種均具有重要的理論和實踐意義。