QuEChERS提取和SPE串聯(lián)柱法提取菠菜中毒死蜱的方法對比

□ 侯亞婷 華維檢測技術(shù)天津有限公司

目前農(nóng)藥殘留前處理方法主要包括液液萃取、加速溶劑萃取、基質(zhì)固相分散萃取、固相萃取（SPE）和QuEChERS等[1-3]。2003年，美國東部農(nóng)業(yè)研究中心的Steven J. Lehotay等人開發(fā)了一種簡易的前處理方法，該方法用乙腈提取蔬菜水果中的多種農(nóng)藥殘留，并用固相材料（PSA）、C18等吸附提取液中的雜質(zhì)，提取液離心后的上清液直接進GC-MS分析，QuEChERS從此應(yīng)運而生。這種技術(shù)以其操作簡便，耗時短，消耗化學(xué)試劑少等優(yōu)點成為近年來發(fā)展最為迅速的前處理技術(shù)。

本文對比了QuEChERS和石墨化炭黑固相萃取柱串聯(lián)氟羅里硅土固相萃取柱兩種方法的回收率、線性關(guān)系、檢出限，提出評價結(jié)論，為相關(guān)工作提供參考。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

毒死蜱農(nóng)藥標準品（濃度1 000.7 μg/mL，Bepure公司）；乙腈；乙酸乙酯、環(huán)己烷（色譜純）；檸檬酸鈉、檸檬酸氫二鈉、無水硫酸鎂及氯化鈉（分析純）；吸附劑PSA：（40～63 μm 60 A Agela公司）

島津GC-MS 2010氣相色譜-四級桿質(zhì)譜儀，配有電子轟擊源（EI）。

標準溶液配制：將1 mL濃度為1 000.7 μg/mL的標準品溶液用丙酮定容至10 mL。于4 ℃避光保存。

表1 兩種前處理方法下菠菜中毒死蜱峰面積、回收率、檢出限

1.2 色譜工作條件

色譜柱：DB-5 ms，（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；色譜柱溫度：50 ℃（保持2 min）→20 ℃/min→200℃（保持1 min）→5 ℃/min→240℃→20 ℃/min→270 ℃（保持10 min）；進樣量：1 μL。柱流量：1.0 mL/min；進樣口溫度：280 ℃。

1.3 質(zhì)譜工作條件

GC-MS接口溫度：260 ℃；離子源溫度：200 ℃；電離能量：70 eV；電離方式：EI；進樣方式：無分流進樣；監(jiān)測離子：197、258、286及314。

1.4 SPE前處理

稱取10 g試樣于50 mL離心管中，加入6 g無水硫酸鈉和30 mL乙酸乙酯，均質(zhì)提取2 min，5 000 r/min離心5 min，上清液過濾于250 mL濃縮瓶中，殘渣中加入30 mL乙酸乙酯再提取一次，過濾，合并濾液于250 mL濃縮瓶中，于40 ℃下濃縮至近干，用2 mL乙酸乙酯-正己烷溶液溶解殘渣。將石墨炭黑固相萃取柱和氟羅里硅土固相萃取柱自上而下串聯(lián)，在石墨化炭黑固相萃取柱上加1.5 cm高的石墨化炭黑，使用前用6 mL乙酸乙酯-正己烷預(yù)淋洗，棄去淋洗液；將全部待凈化液傾入連接柱中，用3 mL乙酸乙酯-正己烷分3次洗滌濃縮瓶，將洗滌液傾入連接柱中，再用12 mL乙酸乙酯-正己烷洗脫，收集上述洗脫液至濃縮瓶中，于40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用乙酸乙酯溶解并定容至1.0 mL，供氣相色譜-質(zhì)譜儀測定。

1.5 QuEChERS前處理

稱取10 g試樣于50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈、4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉及4顆玻璃珠，蓋上蓋劇烈振蕩1 min后4 500 r/min離心5 min。吸取6 mL上清液加到裝有0.885 g無水硫酸鎂、0.15 g PSA和0.015 g GCB的15 mL塑料離心管中；渦旋混勻 1 min。4 500 r/min離心 5 min，準確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40 ℃水浴氮吹近干。加入1 mL乙酸乙酯復(fù)溶，過0.45 μm濾膜后供氣相色譜-質(zhì)譜儀測定。

2 基質(zhì)效應(yīng)

通過測定毒死蜱濃度為0.1 μg/mL的標準溶液和相同濃度的基質(zhì)標準溶液，對比兩種前處理的基質(zhì)效應(yīng)。

評價發(fā)現(xiàn)，兩種前處理方式均出現(xiàn)基質(zhì)增強效應(yīng)，且兩個峰面積的RSD為2.59%，符合重復(fù)性要求，可以認為兩種方法產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)相同。

3 回收率

應(yīng)用兩種前處理方法在菠菜空白基質(zhì)中進行回收率實驗，添加水平為0.1 mg/kg。回收率結(jié)果見表1。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩種方法回收率符合重復(fù)性要求[4]。

4 檢出限

將用兩種處理方法提取的空白基質(zhì)配制濃度為0.1 μg/mL的基質(zhì)溶液，應(yīng)用相同的色譜質(zhì)譜條件測定，計算3倍信噪比（S/N）對應(yīng)的檢出限（LOD）,結(jié)果如表1所示，兩種方法都顯著降低了檢出限，且檢出限符合重復(fù)性要求[5]。

5 時間和成本

以完成一個樣品為例，對比兩種前處理方法，SPE耗時約120 min左右，主要以SPE洗脫和旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟耗費時間最多。另外，SPE方法還耗費了90 mL乙酸乙酯和2個固相萃取柱。QuEChERS法只耗時30 min左右，耗費10 mL乙腈。相比之下QuEChERS法操作更為簡便、有機溶劑消耗少。適合大批量樣品的測定。

6 結(jié)論

系統(tǒng)比較了SPE和QuEChERS兩種不同的前處理方法，實驗結(jié)果表明，SPE法和QuEChERS法均能達到良好的提取效果，滿足菠菜中毒死蜱殘留檢測要求。但從時間和成本考慮，QuEChERS法更加適合大批量處理樣品。