健脾清化散瘀飲對(duì)脾虛濕熱血瘀型RGE患者IL-8、TNF-α、IL-10及EGF、bFGF表達(dá)的影響*

毛欣欣 歐陽潔 柯 曉△ 高尤亮 方文怡

近年來，隆起糜爛性胃炎(raised erosive gastritis,REG)因其病理表現(xiàn)具有高度癌變傾向而被大家重視[1]。研究發(fā)現(xiàn)[2]致炎因子白細(xì)胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、抗炎因子白細(xì)胞介素-10(IL-10)的表達(dá)失?？梢鹞葛つぱ装Y發(fā)生、發(fā)展，造成胃黏膜損傷；而表皮細(xì)胞生長因子(EGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)的表達(dá)失常，則可引起胃黏膜增殖異常；二者同時(shí)作用，誘發(fā)了REG的發(fā)生發(fā)展[3～5]。因此，IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF的表達(dá)異?？赡苁谴龠M(jìn)REG發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素。課題組前期研究顯示健脾清化散瘀飲治療REG療效顯著高于西藥[6]。本研究擬在前期的觀察基礎(chǔ)上繼續(xù)觀察健脾清化散瘀飲的療效，并通過檢測REG患者治療前后胃黏膜IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF的表達(dá)水平來探索健脾清化散瘀飲治療REG可能的機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2013—2015年被福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院確診為REG的病人中隨機(jī)選擇符合納入、排除標(biāo)準(zhǔn)的患者36例作為治療組，去除臨床資料欠缺及失訪者，最終30例進(jìn)入統(tǒng)計(jì)分析。同時(shí)，隨機(jī)選擇20例健康體檢者作為對(duì)照組。2組在性別、年齡方面沒有明顯差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 胃鏡及病理診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2012年《中國慢性胃炎共識(shí)意見》擬定[7]。

1.2.2 中醫(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照2011年《慢性胃炎的中西醫(yī)結(jié)診療共識(shí)意見》[8]并由福建省中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病專業(yè)委員會(huì)與國醫(yī)大師楊春波教授共同商討擬定。主癥：1)胃脘痞脹或疼痛；2)癥狀于餐后或飲食不慎后可加重或發(fā)作；3)舌質(zhì)暗，可有瘀點(diǎn)、瘀斑，舌下絡(luò)脈瘀張，苔黃膩。次癥：1)胃脘灼燒感；2)口干、口苦、口臭；3)神疲體倦；4)納食不香；5)胃痛纏綿難愈。鏡下表現(xiàn)[7]：單個(gè)或多個(gè)疣狀、膨大皺襞狀或丘疹樣隆起，最大徑5～10 mm，頂端可見黏膜缺損或臍樣凹陷，中央有糜爛。證型確定：具備主癥3項(xiàng)加次癥1項(xiàng)，并結(jié)合鏡下表現(xiàn)。

1.3 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：1)年齡大于18歲并小于60歲；2)治療組符合中、西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)；3)對(duì)照組無臨床癥狀，鏡下胃黏膜正常，Hp陰性；病理提示正?；蜉p度淺表性炎癥；4)同意參與本研究并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)妊娠及哺乳期婦女；2)合并嚴(yán)重的其他系統(tǒng)的疾病如心腦血管、肝腎及血液系統(tǒng)等疾??；3)精神病患者；4)伴有消化性潰瘍者。

1.4 方法

1.4.1 治療方法 1)一般治療：消除不良精神心理因素，戒煙戒酒，糾正不良生活、飲食習(xí)慣。2)中醫(yī)治療：予健脾清化散瘀飲口服，方藥如下：黨參15 g，白術(shù)9 g，扁豆15 g，茯苓15 g，陳皮9 g，法半夏9 g，厚樸9 g，砂仁6 g，茵陳9 g，黃連3 g，鱉甲18 g，莪術(shù)9 g，丹參15 g，炙甘草3 g；由本院統(tǒng)一代煎，每日1劑，于早晚餐前半小時(shí)溫服，療程3個(gè)月。

1.4.2 觀察指標(biāo) 1)主要臨床癥狀、體征觀察及胃鏡檢查： 主要臨床癥狀、體征由同個(gè)指定的臨床醫(yī)師根據(jù)證候量化表進(jìn)行觀察記錄，每4周記錄一次。胃鏡檢查則由同個(gè)醫(yī)師使用同型號(hào)胃鏡進(jìn)行檢查，REG患者治療后均于療程結(jié)束后1周內(nèi)完成復(fù)查。2)黏膜組織學(xué)檢查：健康體檢者于胃竇部取胃黏膜組織3塊。REG患者在治療前于鏡下胃竇隆起糜爛處取胃黏膜組織3塊并拍照留底；治療后病變未消失者，于原部位取胃黏膜組織3塊；病變消失者，盡量于原部位取胃黏膜組織3塊。觀察治療前后胃黏膜組織的病理學(xué)變化。3)IL-8、TNF-α、IL-10及EGF、bFGF指標(biāo)觀察：采用MaxVisionTM/AP免疫組化法測定 IL-8、TNF-α、IL-10及EGF、bFGF值。檢測結(jié)果采用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像分析，并測量IOD值(光密度總和)。

1.4.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 1)胃鏡及病理療效判定標(biāo)準(zhǔn)：參考2011年《慢性胃炎中西醫(yī)結(jié)合診療共識(shí)意見》[8]來統(tǒng)計(jì)并計(jì)算改善等級(jí)。2)中醫(yī)證候療效判定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)2011年《慢性胃炎中西醫(yī)結(jié)合診療共識(shí)意見》進(jìn)行判定，分為臨床痊愈、顯效、有效、無效4級(jí)[8]：臨床痊愈：療效指數(shù)≥95%，主要癥狀、體征消失或基本消失；顯效：70%≤療效指數(shù)<95%，主要癥狀、體征明顯改善；有效：30%≤療效指數(shù)<70%，主要癥狀、體征明顯好轉(zhuǎn)；無效：療效指數(shù)<30%，主要癥狀、體征無明顯改善，甚或加重。療效指數(shù)=(治療前積分-治療后積分)/治療前積分×100%(按證候量化表進(jìn)行評(píng)分，所有癥狀分無、輕、中、重4級(jí)，在主癥分別記0、2、4、6分，在次癥分別記0、l、2、3分)。

1.4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的2組及多組比較各采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)和Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水平α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 治療組中醫(yī)證候、鏡下及病理療效 見表1。

2.2 治療組治療前后與對(duì)照組胃黏膜IL-8、IL-10、TNF-α、EGF、bFGF表達(dá)的比較 見表2。

表1 治療組中醫(yī)證候、鏡下及病理療效 (例，%)

表2 治療組治療前后與對(duì)照組胃黏膜IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF表達(dá)的比較 (例，

注：與對(duì)照組比較，1)P<0.05，2)P<0.01；與治療前比較，3)P<0.05，4)P<0.01

3 討論

隨著胃癌發(fā)生率的逐年增加及年輕化趨勢，REG作為一種具有高度癌變傾向的特殊類型胃炎，積極診治具有重要意義。然而，REG因其病因及發(fā)病機(jī)制不清，在西醫(yī)方面尚無特異性療法。而近年來眾多的研究表明[6,9，10]中醫(yī)藥治療本病具有顯著優(yōu)勢，療效明顯高于西藥，安全無不良作用且治愈后不易復(fù)發(fā)。但目前有關(guān)中醫(yī)藥治療本病的研究基本上停留在療效觀察水平，對(duì)于本病的治療機(jī)制方面的研究還非常欠缺，因此深入探索中醫(yī)藥治療REG的作用機(jī)制顯得尤為重要。本研究即基于此展開相關(guān)的研究工作。

IL-8[11，12]是一種炎性細(xì)胞因子，能趨化中性粒細(xì)胞向局部組織集中并釋放出一系列活性物質(zhì)，從而導(dǎo)致局部組織產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，引起胃黏膜損傷。TNF-α[11]也是一種炎癥因子，它通過誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生IL-8來促進(jìn)局部組織的炎癥反應(yīng)，加重組織損傷；并能促進(jìn)凝血酶產(chǎn)生，使黏膜小血管血栓形成，導(dǎo)致黏膜微循環(huán)障礙，胃腸道黏膜屏障功能受損。IL-10[11～13]是一種免疫抑制因子，能抑制和終止炎癥反應(yīng)。它通過抑制炎性細(xì)胞產(chǎn)生、降低炎性細(xì)胞趨化性、減少炎性調(diào)節(jié)因子分泌及促進(jìn)B細(xì)胞的分化增殖來降低炎癥反應(yīng)，減少組織損傷。EGF[4]是一種促生長因子，通過與它的受體(EGFR)結(jié)合來誘導(dǎo)多種組織細(xì)胞生長、遷移。它對(duì)組織的作用主要是促進(jìn)上皮組織生長。而EGF的受體EGFR[14]是原癌基因的表達(dá)產(chǎn)物，如果EGF表達(dá)過度則會(huì)激發(fā)EGFR異?；罨?，導(dǎo)致下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路異常，造成細(xì)胞不斷分裂增殖，形成腫瘤。bFGF[15，16]也是一種細(xì)胞生長因子，它除了能讓成纖維細(xì)胞及成肌細(xì)胞迅速增殖外，還有促進(jìn)血管新生的作用，能使得局部肉芽組織快速生長。其過度表達(dá)，可造成局部肉芽組織等過度生長，血管異常生成，從而引起癌變并促進(jìn)腫瘤生長、浸潤與轉(zhuǎn)移。

本研究對(duì)REG患者IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示均顯著高于健康對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)結(jié)果P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，據(jù)此我們推測：胃黏膜反復(fù)受到各種急慢性刺激后，引發(fā)致炎因子IL-8、TNF-α升高及抗炎因子IL-10的反應(yīng)性升高，使得局部黏膜組織產(chǎn)生強(qiáng)烈的炎癥及免疫反應(yīng)，導(dǎo)致胃黏膜凹陷糜爛；而胃黏膜的反復(fù)損傷糜爛誘發(fā)了EGF及bFGF的異常表達(dá)。EGF的過度表達(dá)使糜爛灶表面黏膜上皮增生、胃小凹上皮增生及腸上皮化生；bFGF的過度表達(dá)，使胃黏膜腺體異常增生、腺頸部延長，黏膜肌層過度增殖隆起；在這多種因素的共同作用下，最終導(dǎo)致了以胃黏膜異常隆起，隆起頂端糜爛為鏡下特征的REG的產(chǎn)生。

中醫(yī)認(rèn)為[17～21]REG的主要發(fā)病基礎(chǔ)與脾虛、濕熱、血瘀密切相關(guān)。而我們前期對(duì)333例REG患者的中醫(yī)證候?qū)W調(diào)查結(jié)果[22]也證實(shí)了REG在臨床上以脾虛濕熱血瘀證最為多見，故REG的中醫(yī)治療應(yīng)著重健脾清熱化濕、活血消瘀散結(jié)。

本研究結(jié)果顯示健脾清化散瘀飲治療REG在中醫(yī)臨床證候、胃鏡及病理上的總有效率高達(dá)93.3%、76.7%、86.7%，療效滿意。同時(shí)，治療組治療后IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF各項(xiàng)指標(biāo)的表達(dá)水平均較治療前顯著降低 (P<0.05)，該結(jié)果表明健脾清化散瘀飲以健脾清熱化濕、活血消瘀散結(jié)為治法能有效治療REG，減輕臨床癥狀，改善鏡下及病理表現(xiàn)，并顯著降低IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF的表達(dá)水平。而根據(jù)IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF在REG發(fā)生發(fā)展過程中可能的作用機(jī)制，我們推測健脾清化散瘀飲有效治療REG的機(jī)制可能是通過下調(diào)IL-8、TNF-α、IL-10、EGF、bFGF的表達(dá)水平來減輕胃黏膜炎癥及異常增生的情況，進(jìn)而改善REG的病情，獲得滿意的療效。