3-對烯-1-胺及其席夫堿衍生物的抑菌活性研究

朱守記， 王小淑， 徐士超， 趙振東*

(1.中國林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所；生物質(zhì)化學(xué)利用國家工程實(shí)驗(yàn)室；國家林業(yè)和草原局 林產(chǎn)化學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；江蘇省 生物質(zhì)能源與材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 江蘇 南京 210042；2.韓山師范學(xué)院 化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院， 廣東 潮州 521041； 3.廣西科技師范學(xué)院 食品與生化工程學(xué)院；廣西高校制糖工程綜合技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 廣西 來賓 546199)

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 原料、試劑與儀器

1.2 抑菌活性測試

1.2.1 供試菌種 金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)CMCC-26069、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)GIM-1.279及白色念珠菌(Candidaalbicans)ATCC-10231均由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供。

1.2.2 培養(yǎng)基配制 采用微量肉湯稀釋法，在250 mL三角瓶中加入2.1 g 水解酪蛋白(MH)肉湯復(fù)合培養(yǎng)基和100 mL蒸餾水，于121 ℃滅菌30 min，作為金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌的培養(yǎng)基。在250 mL三角瓶中加入2.6 g 馬鈴薯葡萄糖水復(fù)合培養(yǎng)基和100 mL蒸餾水，于121 ℃滅菌30 min，作為白色念珠菌的培養(yǎng)基。

1.2.3 樣品溶液的配制 分別稱取樣品0.06 g，置于10 mL的無菌試管中，加入2 mL DMSO溶解，得到30 g/L的溶液，取30 μL該溶液溶于970 μL含3% DMSO的無菌培養(yǎng)基溶液中，得到質(zhì)量濃度為900 mg/L的樣品溶液(作為母液)。

1.2.4 菌懸液的配制 挑取少量菌種到10 mL的小燒杯中，用無菌水稀釋至相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的菌懸液。取50 μL上述菌懸液，并用相應(yīng)的無菌培養(yǎng)基稀釋1 000倍，作為初始菌懸液。

1.2.5 抑菌活性測試 往96孔平板的2～11號孔中分別加入100 μL含3% DMSO的無菌培養(yǎng)基溶液，往1號孔和2號孔中加入100 μL已配好的母液。從2號孔中取100 μL母液到第3個孔中，從3號孔取100 μL樣品溶液到4號孔，依次類推進(jìn)行梯度稀釋，最后棄去11號孔中100 μL的溶液，便得到1～11孔的質(zhì)量濃度分別為900、 450、 225、 112.5、 56.25、 28.125、 14.062 5、 7.031 3、 3.515 6、 1.757 8 和0.878 9 mg/L的樣品溶液，并分別加入100 μL初始菌懸液，以100 μL含3% DMSO的無菌培養(yǎng)基溶液和100 μL初始菌懸液的混合液作為空白對照組。金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌于37 ℃ 培養(yǎng)24 h，白色念珠菌于30 ℃培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)結(jié)束后，與空白對照組比較，抑制80%以上細(xì)菌生長的最低藥物質(zhì)量濃度作為最小抑菌濃度(MIC)。

2 結(jié)果與討論

2.1 除草活性及構(gòu)效關(guān)系

2.2 抑菌活性測試結(jié)果

表1 3-對烯-1-胺及其席夫堿衍生物的抑菌活性

續(xù)表1

化合物compounds結(jié)構(gòu)式structure最小抑菌濃度minimal inhibitory concentration(MIC)/(mg·L-1)金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae白色念珠菌Candida albicans2f>4504502252g45022556.252h450112.556.252i>450112.5112.52j>450>4504502k>4504502252l22522528.125硫酸卡那霉素Kanamycin sulfate—0.440.44112.5利福平Rifampicin—3.520.44450

2.3 抑菌活性及構(gòu)效關(guān)系

3 結(jié) 論