適宜河北西部山區(qū)栽培的黑木耳優(yōu)良菌株篩選研究*

鄭素月，史靈燕，趙翠敏，張?jiān)讫垼鹩?/p>

（河北工程大學(xué)園林與生態(tài)工程學(xué)院，河北 邯鄲 056021）

黑木耳（Auricularia auricula），又稱木耳、川耳、云耳[1]，隸屬木耳目 （Auriculariales） 木耳科（Auriculariaceae） 木耳屬（Auricularia），是我國傳統(tǒng)的食用菌栽培菌類之一[2]，也是我國分布最廣泛，最主要的栽培食用菌之一[3]。作為一種可食用的大型真菌，黑木耳不僅營養(yǎng)豐富、肉質(zhì)細(xì)膩、口感脆滑，味道鮮美，而且還具有多種保健醫(yī)療價(jià)值，具有降血糖、降血脂、抗病毒、抗腫瘤等生理活性[4-5]，被營養(yǎng)學(xué)專家譽(yù)為“素中之葷”和“素中之王”，深受國人的喜愛。據(jù)中國食用菌協(xié)會統(tǒng)計(jì)，2016年黑木耳總產(chǎn)量為6.80×106t，僅次于香菇位居全國第二，是我國食用菌主要品種。其中，黑龍江省黑木耳產(chǎn)量2.83×106t，占全國黑木耳總產(chǎn)量的45.26%（數(shù)據(jù)來自中國食用菌協(xié)會）。

河北省內(nèi)保定市阜平縣是全國著名的革命老區(qū)，地處太行山脈[6]。2013年，國務(wù)院扶貧辦將阜平確定為 “燕山—太行山區(qū)區(qū)域發(fā)展與扶貧攻堅(jiān)試點(diǎn)”，經(jīng)反復(fù)探索和考察論證，阜平縣將食用菌列為 “三年脫貧、五年致富、八年小康”的重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)來扶持發(fā)展[6]，栽培種類以香菇和黑木耳為主。但阜平地區(qū)黑木耳產(chǎn)業(yè)基礎(chǔ)薄弱，產(chǎn)業(yè)發(fā)展缺乏適宜的栽培品種。為此，課題組從黑木耳主產(chǎn)區(qū)黑龍江、吉林、遼寧等地引進(jìn)了24個黑木耳菌株。在前期菌株鑒定的基礎(chǔ)上，從24個黑木耳菌株中選擇了19株采用吊袋栽培技術(shù)進(jìn)行出耳品比試驗(yàn)，以期為保定阜平地區(qū)為代表的西部山區(qū)黑木耳生產(chǎn)篩選出優(yōu)良菌株。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株

供試的黑木耳菌株19個，分別來源于遼寧、黑龍江、吉林、河北等地，詳見表1。

1.1.2 培養(yǎng)基配方

母種培養(yǎng)基：土豆200 g、瓊脂20 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂3 g、維生素B12片、麥麩300 g（煮汁），水1 000 mL；液體搖瓶培養(yǎng)基：土豆300 g、葡萄糖30 g、蛋白胨2 g、硫酸鎂1 g、磷酸二氫鉀3 g，消泡劑3 mL，水1 000 mL；發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基：復(fù)合培養(yǎng)基1 390 g、紅糖925 g、玉米面1 600 g、消泡劑50 mL，水100 L；栽培袋：木屑88%、麥麩8%、石膏1%、石灰1%、豆粕粉2%，含水量為57%左右。

表1 供試黑木耳菌株及來源Tab.1 Tested strains of Auricularia auricula and their sources

1.2 方法

1.2.1 菌絲生長速度測定

將菌種在母種培養(yǎng)基上活化后，打孔器取菌落邊緣菌齡一致的菌種塊，接種到母種培養(yǎng)基平板中央，25℃恒溫培養(yǎng)。試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)，記錄菌絲生長速度、長勢等；采用十字交叉法測量菌落直徑。

1.2.2 菌種制作

將黑木耳菌株活化后接種到液體搖瓶培養(yǎng)基中，7 d左右無菌操作轉(zhuǎn)接到發(fā)酵罐中。接種72 h后，每隔24 h取樣觀察，看菌液顏色是否正常、澄清透明。培養(yǎng)7 d接培養(yǎng)袋，每袋接種量35 mL左右，每個菌株接1 000袋，移入20℃~25℃培養(yǎng)室培養(yǎng)。

1.2.3 栽培管理

栽培袋培養(yǎng)45 d左右刺孔，孔徑0.3 cm~0.4 cm，孔深0.6 cm~0.8 cm，總孔數(shù)180個左右；刺孔后菌絲恢復(fù)5 d~7 d，噴水增濕，溫度維持在18℃~23℃為宜；催好芽后吊袋入棚，每串吊6個菌包，干濕交替管理，當(dāng)耳片充分展開，長到1元硬幣大小時，即可采收。

1.2.4 試驗(yàn)地點(diǎn)和記錄內(nèi)容

試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在保定市阜平縣嘉鑫食用菌種植有限公司生產(chǎn)基地。2018年春季栽培，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每菌株重復(fù)3次，每個重復(fù)192個菌棒。各菌株分別記錄耳片顏色、出芽整齊度、出耳時間、生物轉(zhuǎn)化率等農(nóng)藝性狀。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

菌絲生長速度（cm·d-1）為菌落直徑（cm）除以菌絲生長天數(shù)（d）。菌絲日均生長速度、生物轉(zhuǎn)化率采用SPSS 16.0軟件中Duncan式新復(fù)極差法，進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果分析

2.1 不同黑木耳菌株母種生長情況

供試的19個黑木耳菌株在母種培養(yǎng)基上長勢情況見表2。

所有菌株菌絲顏色潔白，多數(shù)菌株菌絲生長粗壯、旺盛，菌絲邊緣生長整齊；各菌株間菌絲生長速度差異顯著，日平均生長速度為0.5 cm·d-1~0.7 cm·d-1，其中Aaj6菌株菌絲生長速度最快，顯著高于其他菌株（P＜0.05），其次是Aaj17和Aaj7菌株，Aaj1菌株生長速度最慢，顯著低于其他菌株（P＜0.05）。

表2 黑木耳菌株母種菌絲生長情況Tab.2 Mycelium growth of Auricularia auricula strains on mother chlture media

2.2 不同黑木耳菌株出耳性狀比較

部分菌株出耳場景見圖1，不同黑木耳品種出耳過程子實(shí)體農(nóng)藝性狀見表3。

圖1 部分吊袋栽培黑木耳菌株形態(tài)Fig.1 Morphology of some strains of Auricularia auricula cultivated by hanging bags

從鮮耳形態(tài)來看，菌株Aaj20、Aaj19、Aaj12子實(shí)體顏色黑，正反面差異明顯，耳形優(yōu)美，肉厚，耳根短，表現(xiàn)較好；從干耳形態(tài)來看，菌株Aaj9、Aaj19、Aaj23等，耳片黑褐色，有光亮感，背面灰色，無拳耳、流耳、蛀蟲耳和霉?fàn)€耳等情況，并且朵片完整；從出耳整齊度來看，菌株Aaj16、Aaj22出耳快，出耳整齊，木耳正反面差異明顯，耳邊緣圓整，且抗雜性強(qiáng)。

表3 黑木耳不同菌株的耳片形態(tài)特征Tab.3 Fruting pieces morphological characteristics of different strains of Auricularia auricula

2.3 不同黑木耳菌株產(chǎn)量分析

不同黑木耳產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表4。

由表4可知，菌株Aaj22產(chǎn)量最高，產(chǎn)量顯著高于其他菌株；其次是菌株Aaj16、Aaj19、Aaj20、產(chǎn)量均在25 g/棒以上；多數(shù)菌株的產(chǎn)量集中在18 g/棒~25 g/棒；菌株 Aaj17、Aaj9、Aaj11、Aaj10 的平均產(chǎn)量較低，產(chǎn)量均在15 g/棒以下。

3 結(jié)論

黑木耳的形態(tài)特征因受氣候條件的影響，差異較大，東北地區(qū)為我國黑木耳的主產(chǎn)區(qū)，主要包括黑龍江省的東寧、瑗琿、延壽、林口及延吉、吉林等地市縣[7]。針對東北地區(qū)黑木耳優(yōu)良菌株的篩選前人已做過研究[8-9]。近年來，黑木耳產(chǎn)業(yè)有著由北向南發(fā)展的趨勢，河北西部山區(qū)特定的氣候條件較適宜黑木耳的生產(chǎn)，通過引進(jìn)的19個菌株綜合栽培農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量結(jié)果分析，野森一代、黑丹一代、黑山、黑耳厚4個菌株第一潮耳產(chǎn)量較高，抗雜能力強(qiáng)，其鮮耳形態(tài)、干耳形態(tài)表現(xiàn)都好，出耳較早，整齊度高，栽培表現(xiàn)優(yōu)異。其中菌株黑丹一代耳形好，顏色黑，抗雜能力強(qiáng)，出耳齊，出耳快；菌株黑山正面黑色略亮，耳片寬大肥厚，耐高溫；菌株黑耳厚顏色黝黑，耳片較厚，耳片邊緣整齊，形狀好；菌株野森一代半筋品種，淺黑色，耐大水，出耳快，耳片邊緣較為整齊，抗雜能力強(qiáng)，正反面差異明顯，4個菌株適宜在河北西部山區(qū)進(jìn)行推廣栽培。從19個菌株的母種生長速度和產(chǎn)量對比結(jié)果來看，母種生長速度與產(chǎn)量不成正比。因此，黑木耳的母種生長速度不能作為衡量產(chǎn)量等出耳性狀的指標(biāo)。

表4 第一潮木耳的干重產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)表
Tab.4 Dry weight production statistics of the first tide Auricularia auricula

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[5]Reza MA,Hossain MA,Lee SJ,et al.Dichlormethane extract of the jelly ear mushroom Auricularia auricula-judae(higher Basidiomycetes)inhibits tumor cell growth in vitro[J].International Journal of Medicinal Mushrooms,2014,16(1):37-47.

[6]通占元，鄭素月，侯桂森.精準(zhǔn)扶貧視角下河北阜平縣食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展模式探討[J].中國食用菌，2016，35（6）：63-66，68.

[7]馬云橋，張介弛.黑龍江省黑木耳菌種生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展對策[J].北方園藝，2010，42（14）：218-219.

[8]杜萍，張春鳳，姜國勝，等.黑龍江黑木耳優(yōu)良菌株篩選研究[J].菌物學(xué)報(bào)，2014，33（2）：230-241.

[9]杜萍，曹天旭，徐文東.34個黑木耳菌株秋季栽培比較試驗(yàn)[J].食藥用菌，2013，21（6）：360-363.