羊肚菌菌種比較試驗

劉建偉

摘要 ? ?通過對6個不同羊肚菌菌種的栽培，觀察測量其在母種培養(yǎng)基、栽培種培養(yǎng)基上的菌絲長勢及菌核數(shù)量，以期篩選出最適合栽培的羊肚菌菌種。結(jié)果表明，3號菌種在母種培養(yǎng)基和栽培種培養(yǎng)基中菌絲生長速度最快、長勢旺盛、菌核數(shù)量多，在實驗室條件下十分適合生長。

關(guān)鍵詞 ? ?羊肚菌;生長情況;母種;栽培種

中圖分類號 ? ?S646 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼 ? ?A

文章編號 ? 1007-5739（2019）18-0042-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）

羊肚菌（Morchella esculenta），俗稱羊肚菜、羊肚子、羊肚蘑，隸屬于子囊菌亞門盤菌綱盤菌目羊肚菌科羊肚菌屬，是世界公認(rèn)的名貴食用菌，肉質(zhì)脆嫩可口，在歐洲被認(rèn)為是僅次于塊菌的美味食用菌[1-2]。除了具有較高的營養(yǎng)價值外，羊肚菌在抗腫瘤[3]、抗氧化[3-4]、降血脂[5]、補(bǔ)腎、補(bǔ)腦、護(hù)肝[6]等方面也具有重要的藥用價值。能夠用于栽培的羊肚菌菌種很多，但品質(zhì)良莠不齊。本研究主要在實驗室條件下，進(jìn)行6個不同羊肚菌菌種的栽培，觀察其菌絲長勢及菌核數(shù)量，以期篩選出最適合栽培的羊肚菌菌種。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?菌種

供試菌種為已經(jīng)人工種植成功的6種不同羊肚菌菌種，分別標(biāo)記1～6號，為市場購買。

1.2 ? ?培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：馬鈴薯500 g（煮汁），白糖20 g，瓊脂20 g，蛋白胨0.5 g，牛肉膏0.5 g，KH2PO4 1 g，MgSO4 1 g，V■ 1 g，水1 000 mL。

原種培養(yǎng)基：木屑65%、小麥20%、土壤10%、KH2PO4 1%、MgSO4 1%、生石灰1.5%、石膏1.5%。

栽培種培養(yǎng)基：雜木屑27%、小麥60%、土壤10%、生石灰1.5%、石膏1.5%。

1.3 ? ?母種、原種和栽培種的制備

1.3.1 ? ?母種制備。按照改良的PDA培養(yǎng)基配方制備母種培養(yǎng)基，即將馬鈴薯煮汁過濾后加葡萄糖、瓊脂，邊攪拌邊加熱，待瓊脂和葡萄糖融化后分裝于試管中，每支試管中培養(yǎng)基大約至試管的1/3處，用棉塞或硅膠塞封口，121 ℃滅菌30 min，取出后擺斜面，冷卻備用。無菌條件下接種，22 ℃避光保存。

1.3.2 ? ?原種制備。將獲得的母種進(jìn)一步進(jìn)行擴(kuò)繁，并把試管種擴(kuò)繁成瓶（袋）。母種擴(kuò)繁成原種時，每支試管以擴(kuò)繁4～6瓶（袋）為宜。在擴(kuò)繁過程中，要嚴(yán)格按無菌操作規(guī)程操作，定期檢查雜菌發(fā)生情況，發(fā)現(xiàn)污染的原種立即淘汰，并隔離污染源，選擇生長旺盛、無感染的菌種作為生產(chǎn)用原種，培養(yǎng)條件與母種相同。

1.3.3 ? ?栽培種制備。栽培種培養(yǎng)基按照配方比例加水?dāng)嚢杈鶆?，以培養(yǎng)料捏在手里既不會流出水又不會碎成渣為宜;裝入玻璃瓶，裝料至玻璃瓶肩，120 ℃滅菌120 min。冷卻后無菌接種，22 ℃避光保存。

1.4 ? ?觀察記錄

羊肚菌菌種接種在PDA培養(yǎng)基平板上，22 ℃培養(yǎng)5 d，使其形成可供試驗的菌落。用打孔器取菌絲餅1塊，放于母種平板中央，每隔24 h用十字交叉法測量菌落直徑，連續(xù)測量5 d，并觀察菌絲長勢、菌核數(shù)量，第3天觀察顏色變化。每個處理5個重復(fù)。

在栽培種培養(yǎng)過程中，菌絲長至玻璃瓶肩下3 cm時，統(tǒng)一劃起始線，5 d后再劃終止線，測算菌絲生長速度[7]，觀察菌核出現(xiàn)時間以及數(shù)量。每個處理5個重復(fù)。

2 ? ?結(jié)果與分析

2.1 ? ?不同羊肚菌菌種在母種培養(yǎng)基上的生長情況

6種羊肚菌菌種在母種培養(yǎng)基上的生長情況見表1。可以看出，在相同的母種培養(yǎng)基上，6種羊肚菌菌種長勢、菌核數(shù)量差別較大。從菌絲生長速度方面看，3號菌種生長速度最快，達(dá)到9.7 mm/d;1號菌種生長速度最慢，為6.4 mm/d。從第3天顏色變化看，6種羊肚菌菌種都發(fā)生明顯的顏色變化，其中1號菌種的顏色變化最晚，表明該菌種菌絲成熟較晚。從菌核數(shù)量看，在相同的時間下，3號菌種的菌核最多，1號最少。從菌絲長勢看，3號菌種長勢非常旺盛，明顯優(yōu)于其他羊肚菌菌種。綜合各項指標(biāo)可以看出，在母種培養(yǎng)基上菌種生長情況由好到劣依次是3號>4號>6號>5號>2號>1號。

2.2 ? ?不同羊肚菌菌種在栽培種培養(yǎng)基上的生長情況

6種羊肚菌菌種在栽培種培養(yǎng)基上的生長情況見表2?？梢钥闯?，3號羊肚菌生長速度最快，達(dá)到9.3 mm/d，長勢旺盛，從接種到長出菌核僅用了9 d;4號菌種長出菌核也是用9 d，但是無論從長勢看，還是從生長速度看，都遜色于3號菌種;1號菌種菌絲生長速度最慢，菌核形成時間最晚且數(shù)量最少。綜合考慮菌核形成時間、長勢、菌核數(shù)量，各菌種由優(yōu)到劣排列順序為3號>4號>6號>2號>5號>1號。各菌種菌核前期均為白色小點(diǎn)，隨著菌絲聚集硬化，菌核顏色加深。

2.3 ? ?不同羊肚菌菌種分生孢子的產(chǎn)生情況

在播種數(shù)天以后，菌絲長透土層，土壤表面開始產(chǎn)生分生孢子，俗稱“菌霜”，15 d左右土壤表面即可被厚厚的菌霜覆蓋。由表3可以看出，3號、4號菌種出現(xiàn)菌霜的時間最早，均為11 d，1號、6號次之，菌霜出現(xiàn)時間為12 d，2號、5號菌種出現(xiàn)菌霜最晚，在第13天才出現(xiàn)菌霜。其中，4號、6號菌種菌霜較厚，3號、5號菌種菌霜厚度稍遜色于4號、6號菌種。說明不同菌種的分生孢子產(chǎn)生能力差異明顯，這可能與羊肚菌品種、氣候有較大的關(guān)系。

3 ? ?結(jié)論與討論

羊肚菌的出菇機(jī)制與菌核生長有一定的關(guān)系[8]。綜合試驗中不同羊肚菌菌種在母種培養(yǎng)基和栽培種培養(yǎng)基中的菌絲長勢、菌核數(shù)量以及分生孢子生長情況來看，3號菌種菌絲長勢非常旺盛、菌核形成時間早且數(shù)量多、栽培種菌霜出現(xiàn)時間短，在實驗室條件下十分適合生長。選出合適的菌種還需要結(jié)合外源營養(yǎng)袋進(jìn)行大田試驗，有待進(jìn)一步研究。

4 ? ?參考文獻(xiàn)

[1] 呂作舟.食用菌栽培學(xué)[M].北京：高等教育出版社，2006：344-349.

[2] 杜習(xí)慧，趙琪，楊祝良.羊肚菌的多樣性、演化歷史及栽培研究進(jìn)展[J].菌物學(xué)報，2014，33（2）：183-197.

[3] HU M，CHEN Y，WANG C，et al.Induction of apoptosis in HepG2 cells by polysaccharide MEP-Ⅱ from the fermentation broth of Morchella esculenta[J].Biotechnology Letters，2013，35（1）：1-10.

[4] MASAPHY S.Biotechnology of morel mushrooms：successful fruiting body formation and development in a soilless system[J].Biotechnology Letters，2010，32（10）：1523-1527.

[5] 殷偉偉，張松，吳金鳳.尖頂羊肚菌活性提取物降血脂作用的研究[J].菌物學(xué)報，2009，28（6）：873-877.

[6] 李峻志，雷萍，孫悅迎.羊肚菌子囊果栽培工藝研究[J].食用菌，2001（4）：23-26.

[7] 劉福陽，王愛仙，王怡暄，等.不同栽培種配方對羊肚菌菌絲、菌核和分生孢子的影響[J].中國食用菌，2018，37（5）：19-22.

[8] 王震，王春弘，魏銀初，等.適宜中原淺山丘陵地區(qū)的羊肚菌高產(chǎn)栽培技術(shù)[J].食用菌，2015，37（4）：39-41.