不同植物蛋白水平的代乳粉對羔羊胸腺和脾臟組織器官的影響

熊忙利,李光芒

(1.咸陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 咸陽 712000; 2.藍(lán)田縣普化鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,陜西 藍(lán)田 710505)

羔羊代乳粉能有效節(jié)省羊乳、降低飼喂成本、增加養(yǎng)羊經(jīng)濟效益。代乳粉的使用是養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展的趨勢，有著非常廣闊的應(yīng)用前景。隨著羊奶制品價格的上漲，現(xiàn)代羔羊代乳粉主要是根據(jù)羔羊的營養(yǎng)需要采用來源廣、價格低的植物性原料代替羊奶飼喂羔羊。本試驗是根據(jù)羔羊營養(yǎng)需要及鮮羊奶組分配制羔羊代乳粉，研究價格低廉、來源廣泛的植物性蛋白原料代替鮮羊奶對羔羊早期脾臟和胸腺器官及其組織形態(tài)的影響，從而為羔羊代乳粉的使用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗隨機選取體質(zhì)健康、體重接近、剛出生的關(guān)中奶山羊羔羊，陜西省永壽縣綠康生態(tài)養(yǎng)殖專業(yè)合作社提供。

1.2 試驗設(shè)計

試驗采用單因子隨機區(qū)組試驗設(shè)計。隨機選取體質(zhì)健壯、體重接近、剛出生的關(guān)中奶山羊羔羊45只，將45只羔羊隨機分成3組(Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組)，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)5只羔羊。Ⅰ組飼喂植物蛋白水平為65%代乳粉、Ⅱ組飼喂植物蛋白水平為75%代乳粉、Ⅲ組飼喂植物蛋白水平為85%代乳粉。

羔羊出生后0～5日齡飼喂初乳，飼養(yǎng)管理按常規(guī)進行。試驗分為預(yù)飼期和試驗期，預(yù)試期6～10日齡逐漸過渡到代乳粉，試驗期10～70日齡(60 d)各組按照不同植物蛋白水平的代乳粉飼喂。飼喂時，先用65℃左右溫開水沖調(diào)代乳粉，再用涼開水調(diào)制成含12%的干物質(zhì)液體(溫度38℃左右)飼喂羔羊。飼喂時做到定人、定時、定量、定溫，代乳粉飼喂30min后自由飲涼開水。7日齡后在飼喂代乳粉基礎(chǔ)上添加優(yōu)質(zhì)青干草，15日齡后添加精料，自由采食和飲水。

試驗所用代乳粉參照羔羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NRC，2001))進行配制。不同植物蛋白水平代乳粉營養(yǎng)組成和成分見表1。

1.3 測定項目

試驗結(jié)束后，停食24 h，測定羔羊體重，每組隨機選擇5只羔羊靜脈放血處死，取1/3的胸腺和脾臟，將其稱重后放入100 ml·L-1的中性福爾馬林固定液內(nèi)，按常規(guī)制作成石蠟包埋塊，以5 μm連續(xù)切片，HE染色后在顯微鏡下觀察并照相。顯微鏡由咸陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院提供，型號為：江南永新XD-202生物倒置顯微鏡。

脾臟指數(shù)=脾臟重量/宰前活重，胸腺指數(shù)=胸腺重量(g)/宰前活重(kg)；胸腺皮質(zhì)細(xì)胞數(shù)是用400倍鏡的顯微鏡記錄胸腺皮質(zhì)區(qū)的淋巴細(xì)胞數(shù)量，總共計算12處胸腺小葉皮質(zhì)淋巴細(xì)胞數(shù)量，計算平均數(shù)值即為胸腺皮質(zhì)淋巴細(xì)胞數(shù)量；胸腺皮質(zhì)厚度是用100倍鏡的顯微鏡測量一個胸腺小葉皮質(zhì)最寬處和最窄處的數(shù)值，計算平均值即為一個胸腺小葉皮質(zhì)厚度，按照同樣方法測量胸腺小葉30個，計算平均值為胸腺皮質(zhì)厚度；脾臟中央動脈周圍淋巴鞘細(xì)胞數(shù)：在400倍鏡下，以脾中央小動脈為中點，計壓在標(biāo)線下的淋巴細(xì)胞數(shù)，按同樣方法計算5個脾中央小動脈周圍淋巴鞘細(xì)胞數(shù)，取均數(shù)即為脾中央小動脈周圍淋巴鞘細(xì)胞數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進行分析以P<0.05為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊脾臟和胸腺指數(shù)的影響

結(jié)果見表2。由表2可知，Ⅰ組和Ⅱ組胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均顯著高于Ⅲ組(P<0.05)。Ⅰ組和Ⅱ組胸腺指數(shù)分別較Ⅲ組高18.75%、15.62%，脾臟指數(shù)分別較Ⅲ組高12.06%、9.93%。

表1 不同植物蛋白水平代乳粉營養(yǎng)組成和成分

表2 不同植物蛋白水平的代乳粉對羔羊

注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)小寫字母相同或無肩標(biāo)表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

2.2 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊胸腺皮質(zhì)厚度級皮質(zhì)細(xì)胞數(shù)的影響

結(jié)果見表3。

由表3可知，Ⅰ組和Ⅱ組皮質(zhì)厚度均顯著高于Ⅲ組(P<0.05)，Ⅰ組和Ⅱ組皮質(zhì)厚度分別較Ⅲ組高35.75%、22.86%，胸腺皮質(zhì)細(xì)胞個數(shù)各組間差異不顯著(P>0.05)。

2.3 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊脾臟中央小動脈周圍淋巴鞘細(xì)胞數(shù)的影響

結(jié)果見表4。

表3 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊胸腺皮質(zhì)厚度及皮質(zhì)細(xì)胞數(shù)測定結(jié)果

表4 不同植物性代乳粉對羔羊脾臟中央小動脈周圍淋巴鞘細(xì)胞數(shù)測定結(jié)果

由表4可知，脾臟中央小動脈周圍淋巴鞘的淋巴細(xì)胞數(shù)各組間差異不顯著(P>0.05)。

3 討論

3.1 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊胸腺指數(shù)及胸腺組織學(xué)形態(tài)影響的討論

胸腺皮質(zhì)厚度和胸腺指數(shù)是反映胸腺組織器官生長發(fā)育的重要指標(biāo)之一。試驗表明試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的胸腺皮質(zhì)厚度和胸腺指數(shù)均顯著高于Ⅲ組，而Ⅰ組和Ⅱ組之間差異不顯著。說明用植物蛋白水平為85%的代乳粉代替鮮羊乳對羔羊早期胸腺的生長發(fā)育有一定的抑制作用。

影響胸腺生長發(fā)育受阻的原因：羔羊?qū)θ榈鞍椎南矢哂趯χ参锏鞍椎南剩S著植物性蛋白水平的增多，羔羊?qū)Υ榉壑械牡鞍踪|(zhì)消化率下降，導(dǎo)致羔羊?qū)χ参锏鞍踪|(zhì)的消化吸收降低，研究發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量影響羔羊胸腺生長的發(fā)育和胸腺皮質(zhì)厚度；研究發(fā)現(xiàn)大豆中的胰蛋白酶抑制因子會抑制飼糧中半胱氨酸和蛋氨吸收，而蛋氨酸對動物脾臟和胸腺組織器官的發(fā)育影響較大。因此，植物蛋白水平的增加會抑制羔羊胸腺的生長發(fā)育。

3.2 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊脾臟指數(shù)及脾臟組織學(xué)形態(tài)影響的討論

脾臟指數(shù)是衡量脾臟生長發(fā)育的重要指標(biāo)之一，脾臟指數(shù)增大表明機體免疫功能增強。試驗表明試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組脾臟指數(shù)顯著高于Ⅲ組，Ⅰ組和Ⅱ組脾臟指數(shù)分別較Ⅲ組高12.06%、9.93%，Ⅰ組和Ⅱ組之間差異不顯著。說明用植物蛋白水平為85%的代乳粉代替鮮羊乳對羔羊脾臟發(fā)育有抑制作用。

觀察顯示Ⅰ組和Ⅱ組動脈周圍淋巴鞘較Ⅲ組略厚，計數(shù)結(jié)果顯示各組間動脈周圍淋巴鞘淋巴細(xì)胞數(shù)量差異不顯著，說明不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊細(xì)胞免疫應(yīng)答有一定增強作用，其原因可能與乳清蛋白的免疫增進作用有關(guān)，需進一步研究。

綜上所述，與含85%植物蛋白代乳粉相比較，代乳粉中植物蛋白水平為75%、65%時對羔羊10～70日齡脾臟和胸腺器官的正常發(fā)育影響較小，而且植物蛋白水平為75%的代乳粉比植物蛋白水平為65%的代乳粉原料價格便宜。可見，選用植物蛋白水平為75%的代乳粉對羔羊脾臟和胸腺組織器官的生長發(fā)育影響較小且成本較低。