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    條斑紫菜不同采收期總硒含量變化研究

    2019-07-15 07:53:12凌云王鳳軍陳安娜沈輝萬夕和葉素丹
    水產(chǎn)養(yǎng)殖 2019年7期
    關(guān)鍵詞:條斑中硒贛榆

    凌云 ,王鳳軍 ,陳安娜 ,沈輝 ,萬夕和 ,葉素丹

    (1.浙江經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,浙江 杭州 310018;2.江蘇省海洋水產(chǎn)研究所,江蘇 南通 226007)

    硒(Se)被稱為“生命之火”,是生物生長(zhǎng)發(fā)育必需的一種微量元素,對(duì)人體來說具有抗氧化、抗衰老、解毒、防癌抗癌和提高免疫力等作用[1-5]。硒具有多種生理功效,攝入不足會(huì)影響人類身體健康,克山病是缺硒的典型癥狀,因此市面上出現(xiàn)多種富硒食品,鼓勵(lì)補(bǔ)硒,但人體攝入過量的硒則會(huì)引起中毒。而作為天然含硒高的食物,海藻就是其中一類。有報(bào)道稱海藻中硒元素含量豐富,但受產(chǎn)地水土環(huán)境中硒含量的影響很大[2,6]。我國(guó)海藻資源豐富,海藻含有多種生物活性物質(zhì)和生物學(xué)功能,對(duì)促進(jìn)人類健康有積極的作用,加強(qiáng)海藻加工開發(fā)研究,具有深刻的戰(zhàn)略意義[7-8]。

    條斑紫菜(Porphyra yezoensis)屬紅毛菜科大型海藻,條斑紫菜養(yǎng)殖加工業(yè)經(jīng)多年發(fā)展已成為江蘇海洋漁業(yè)的支柱產(chǎn)業(yè)。紫菜被稱為“長(zhǎng)壽菜”、“天然微量元素寶庫(kù)”,含有豐富的蛋白質(zhì)、海藻多糖、維生素和礦物質(zhì)等,與人類健康和生命活動(dòng)關(guān)系密切,具有極為重要的保健功效[9]。從紫菜中開發(fā)具有獨(dú)特活性的海洋藥物和保健食品是紫菜研究利用的新方向,筆者之前的研究[10]表明紫菜具有一定含量的硒。目前有多位學(xué)者[11-13]研究表明紫菜在不同生長(zhǎng)海區(qū)、不同生長(zhǎng)時(shí)期紫菜中營(yíng)養(yǎng)成分有一定變化,但都未涉及紫菜中硒含量變化的研究。

    為了研究海藻中硒的含量及其變化,該文以海水養(yǎng)殖條斑紫菜為研究對(duì)象,采用微波+濕法消解法[10]進(jìn)行樣品前處理,使用氫化物-原子熒光光譜法測(cè)定江蘇沿海不同地區(qū)不同采收期條斑紫菜中總硒含量,初步研究條斑紫菜中總硒含量變化,為深入開發(fā)利用條斑紫菜的營(yíng)養(yǎng)和保健價(jià)值提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 樣品

    條斑紫菜取自江蘇沿海連云港贛榆(1號(hào)站位)、鹽城大豐(2號(hào)站位)、南通如東環(huán)漁(3號(hào)站位)、南通如東北漁(4號(hào)站位)和南通海門(5號(hào)站位)5個(gè)站位的紫菜養(yǎng)殖區(qū),取樣站位見圖1。在2012年12月至2013年4月采收周期內(nèi),每個(gè)月在每個(gè)養(yǎng)殖區(qū)選取3個(gè)代表性采樣點(diǎn)進(jìn)行收割,分別獲得頭水、二水、三水、四水和五水5個(gè)批次的新鮮紫菜樣品,共計(jì)75份,每份樣品用清潔海水充分洗凈至無泥沙,晾曬干后用自封袋密封保存。測(cè)定前于50℃烘箱烘干至恒重,粉碎混勻后于干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

    圖1 江蘇條斑紫菜不同產(chǎn)地取樣站位圖

    1.2 儀器與試劑

    AFS-9800型原子熒光光譜儀(硒空心陰極燈和純度為99.99%的氬氣作載氣)及計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)(北京科創(chuàng)海光儀器有限公司),Mars 5微波消解儀(美國(guó)CEM),高級(jí)臺(tái)式封閉電爐(天津市泰斯特儀器有限公司),EH35APlus型數(shù)顯電熱板(北京萊伯泰科公司),電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司),超純水(美國(guó)密理博公司)等。

    硝酸、高氯酸、雙氧水、鹽酸、氫氧化鉀、硼氫化鉀為優(yōu)級(jí)純。6 mol/L鹽酸、100 g/L鐵氰化鉀溶液(掩蔽劑)、1.5%硼氫化鉀+0.5%氫氧化鉀(還原劑)、5%鹽酸(載流)。紫菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW10023、硒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):1 000 μg/mL,皆購(gòu)自于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

    1.3 測(cè)定方法

    標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:取1 000 μg/mL的Se標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL,加水定容至100 mL容量瓶,配制成濃度為10 μg/mL Se標(biāo)準(zhǔn)中間液,再取此液1 mL,加水定容至100 mL容量瓶,配制成濃度為100 μg/L的Se標(biāo)準(zhǔn)工作液;分別吸取100 μg/L的Se標(biāo)準(zhǔn)工作液0、0.1、0.5、1、2、4 mL 于 20 mL 比色管中,定容至 10 mL刻度線后,加入2 mL HCl和1 mL 100g/L K3[Fe(CN)6],混勻,放置 20 min,制成 0、2.5、5、10、20、40 μg/L 的Se標(biāo)準(zhǔn)曲線。儀器測(cè)定條件,見表1。

    樣品前處理:稱取0.5 g紫菜樣品于微波消解管中,加入5 mLHNO3,冷消解30 min后加2 mLH2O2,振搖混合均勻,于微波消解儀上消化,消解條件如表2所述。將溶液冷卻轉(zhuǎn)移至150 mL三角瓶,加入1 mL HClO4,置于電爐上趕酸至溶液變?yōu)榍辶翢o色并有白煙冒出(切不可完全蒸干),加入5 mL 6 mol/L HCL繼續(xù)加熱至溶液清亮并伴有白煙出現(xiàn),冷卻至室溫定容至10 mL,加入2 mL HCl和1 mL100 g/LK3[Fe(CN)6],混勻,取上清液待測(cè)。每個(gè)樣品平行3次,同時(shí)進(jìn)行試劑空白試驗(yàn)。同標(biāo)準(zhǔn)曲線一起上機(jī)測(cè)定含量。

    表1 總硒測(cè)定的HG-AFS條件

    表2 微波消解程序

    試樣測(cè)定結(jié)果按以下公式計(jì)算:

    式中:X:試樣中 Se的含量,mg/kg;C:試樣消化液測(cè)定濃度,μg/L;C0:試樣空白消化液測(cè)定濃度,μg/L;m:試樣質(zhì)量,g;V:試樣消化液總體積,mL。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,采用SPSS statistics 19進(jìn)行ANOVA方差分析,進(jìn)行LSD檢驗(yàn)和Duncan法多重比較,以P<0.05作為差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 線性關(guān)系、精密度及回收率

    按選定的AFS儀器工作條件下測(cè)定Se的熒光強(qiáng)度,測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線在0~40 μg/L范圍內(nèi),線性良好,線性回歸方程為y=44.445x-35.240,相關(guān)系數(shù)R為0.9993。

    質(zhì)控樣紫菜(GBW10023)稱樣量為0.5 g(精確至0.0001 g),采用微波+濕法消解法進(jìn)行硒的測(cè)定,連續(xù)6次測(cè)定紫菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中硒含量平均值為(0.125±0.004)mg/kg,紫菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)硒標(biāo)準(zhǔn)值為(0.124±0.014)mg/kg。測(cè)定結(jié)果在誤差允許范圍內(nèi)。

    稱取0.5 g紫菜質(zhì)控樣9份(含硒量為0.062 μg),分別加入3種不同濃度的Se標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),平行3次,按上述方法測(cè)其含量,取其平均值,由表3結(jié)果可見加標(biāo)回收率為90%~98%,符合加標(biāo)回收要求,說明該方法測(cè)定紫菜中硒是可行有效的。

    表3 紫菜質(zhì)控樣加標(biāo)回收率測(cè)定

    2.2 不同地區(qū)各采收期條斑紫菜中硒含量

    通過上述方法測(cè)定江蘇沿海5個(gè)地區(qū)5次采收期條斑紫菜中硒含量,測(cè)得結(jié)果見表4,江蘇沿海條斑紫菜硒含量在0.089~0.284 mg/kg之間,平均值為0.145 mg/kg。經(jīng)方差分析表明,在5個(gè)地區(qū)不同采收期的條斑紫菜中硒含量有所差異,差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其中,頭水紫菜中硒在各地區(qū)差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),硒含量依次為贛榆>環(huán)漁>海門>北漁>大豐,平均值為0.110 mg/kg;二水紫菜中硒在各地區(qū)差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),硒含量依次為贛榆>環(huán)漁>海門>北漁>大豐,平均值為0.124 mg/kg;三水紫菜中硒在各地區(qū)差異極具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),硒含量依次為環(huán)漁>海門>贛榆>北漁>大豐,且在環(huán)漁地區(qū)出現(xiàn)條斑紫菜硒含量最高值為0.284 mg/kg,平均值為0.191 mg/kg;四水紫菜中硒在各地區(qū)差異極具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),大豐>贛榆>環(huán)漁>海門>北漁,平均值為0.164 mg/kg;五水紫菜中硒在各地區(qū)差異極具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),硒含量依次為贛榆>大豐>海門>環(huán)漁>北漁,在北漁地區(qū)出現(xiàn)條斑紫菜硒含量為0.138 mg/kg。通過不同采收期條斑紫菜硒含量的平均值可見,三水條斑紫菜中硒含量為最高,四水次之。

    從各地區(qū)來看,連云港贛榆地區(qū)中條斑紫菜硒含量從0.150 mg/kg增加至0.240 mg/kg,平均值為0.182 mg/kg,通過差異性分析和LSD檢驗(yàn),得出連云港地區(qū)采收的頭水至四水條斑紫菜硒含量之間差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而五水條斑紫菜硒含量與前5個(gè)月有具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.05)。鹽城大豐地區(qū)中條斑紫菜硒含量在0.091~0.200mg/kg之間,平均值為0.133 mg/kg,通過差異性分析和LSD檢驗(yàn),得出頭水和二水條斑紫菜硒含量差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,三水和五水條斑紫菜硒含量差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但分別與四水之間差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如東環(huán)漁地區(qū)中條斑紫菜中硒的含量在0.112~0.284 mg/kg之間,平均值為0.161 mg/kg,通過差異性分析和LSD檢驗(yàn),得出環(huán)漁地區(qū)頭水、二水和五水條斑紫菜硒含量差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但分別與三水、四水相比差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如東北漁地區(qū)中條斑紫菜硒含量在0.089~0.160 mg/kg之間,平均值為 0.116 mg/kg,通過差異性分析和LSD檢驗(yàn),得出北漁地區(qū)頭水和五水條斑紫菜硒含量差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,二水和四水條斑紫菜硒含量差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但分別與三水之間差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。海門地區(qū)中條斑紫菜硒含量在0.101~0.190 mg/kg之間,平均值為0.135 mg/kg,通過差異性分析和LSD檢驗(yàn),得出海門地區(qū)頭水、二水和五水條斑紫菜硒含量差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但分別與三水、四水相比差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與環(huán)漁地區(qū)比較相似。通過對(duì)各地區(qū)條斑紫菜中硒含量比較,連云港贛榆地區(qū)條斑紫菜中硒含量較高,環(huán)漁地區(qū)次之。

    表4 不同地區(qū)各采收期條斑紫菜中硒含量 mg/kg

    圖2 贛榆地區(qū)不同采收期條斑紫菜中硒含量變化

    連云港市贛榆地區(qū)不同月份采收條斑紫菜中硒含量結(jié)果見圖2,可以看出從12月到次年4月,隨月份增加條斑紫菜中硒含量逐漸增加,在四月份含量為最高。鹽城市大豐地區(qū)不同月份采收條斑紫菜中硒含量結(jié)果見圖3,可以看出從12月到次年3月條斑紫菜中硒含量逐漸增加,在3月含量為最高,到4月份時(shí)下降。如東環(huán)漁地區(qū)不同月份采收條斑紫菜中硒含量結(jié)果見圖4,從12月份到次年2月,條斑紫菜中硒含量逐漸增加,到3、4月逐漸下降,在江蘇5個(gè)地區(qū)5個(gè)采收期中環(huán)漁地區(qū)2月份條斑紫菜硒含量為最高。如東北漁地區(qū)不同月份采收條斑紫菜中硒含量結(jié)果見圖5,變化趨勢(shì)與如東環(huán)漁地區(qū)相似,如東北漁地區(qū)4月份條斑紫菜中硒含量為在江蘇5個(gè)地區(qū)5個(gè)采收期中最低。海門地區(qū)不同月份采收條斑紫菜中硒含量結(jié)果見圖6,變化趨勢(shì)與如東環(huán)漁、北漁地區(qū)相似,均在2月份達(dá)到最高值,三個(gè)地區(qū)的地理位置比較靠近,歸屬南通市。

    圖3 大豐地區(qū)不同采收期條斑紫菜中硒含量變化

    圖4 環(huán)漁地區(qū)不同采收期條斑紫菜中硒含量變化

    圖5 北漁地區(qū)不同采收期條斑紫菜中硒含量變化

    圖6 海門地區(qū)不同采收期條斑紫菜中硒含量變化

    2.3 每日硒攝入量計(jì)算

    硒是人體必需的抗氧化營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),是谷朧甘肽過氧化物酶的重要組成成分,對(duì)維持人體正常生理機(jī)能起著關(guān)鍵性的作用。通過該試驗(yàn)測(cè)定可知江蘇地區(qū)條斑紫菜硒含量在8.9 μg/100 g到28.4 μg/100 g 之間,平均值為 14.5 μg/100 g。《中國(guó)食物成分表2014版》記載紫菜(干)中的硒含量為7.22 μg/100 g,該試驗(yàn)測(cè)定的條斑紫菜硒含量要高于該值,表明該地區(qū)紫菜硒含量整體較高,屬于天然含硒食品。目前已定人體對(duì)硒的最高耐受量為每人每天400μg[14],我國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦的成人硒攝入量為每日50~250 μg。折算成江蘇海域條斑紫菜干重約為345 g~1.724 kg,即每天食用干重不低于345 g的條斑紫菜干制品即能滿足人體對(duì)硒含量的需求,而對(duì)于中國(guó)人的消費(fèi)習(xí)慣而言,每日也不可能食用過多紫菜,而其他食品中也含有一定量的硒,因此食用適量的紫菜產(chǎn)品有益于人體健康,并不會(huì)引起硒含量的超標(biāo)。

    3 討論

    3.1 各地區(qū)條斑紫菜不同采收期硒含量變化

    通過對(duì)各地區(qū)不同采收期條斑紫菜硒含量研究可見,條斑紫菜中硒含量變化具有一定規(guī)律性,表現(xiàn)為從江蘇沿海北部至南部,條斑紫菜中硒含量最高值分別出現(xiàn)在4月、3月和2月,月份逐漸前移。紫菜生長(zhǎng)在海洋環(huán)境中,海水溫度是決定其生育階段轉(zhuǎn)換和生長(zhǎng)速度的關(guān)鍵性指標(biāo)[15]。在不同地區(qū)海水環(huán)境、氣候和溫度等因素不同,海水表面平均溫度的緯度分布規(guī)律為從低緯向高緯遞減,表現(xiàn)出同一時(shí)期低緯地區(qū)水溫高,高緯地區(qū)水溫低。由于江蘇沿海三市緯度大體相差1度(贛榆N34.83°(連云港市),大豐 N33.19°(鹽城市),如東 N32.33°和海門N31.89°(南通市)),同一月份海水溫度從南通市到連云港市逐漸降低,因此條斑紫菜中硒含量最高值表現(xiàn)出在南通地區(qū)早先出現(xiàn),而在連云港地區(qū)最晚出現(xiàn)。由此推測(cè)條斑紫菜中硒含量與水溫有一定關(guān)系,最高值在一定適宜溫度范圍內(nèi)出現(xiàn),這可能與紫菜內(nèi)部的生理活動(dòng)有關(guān),當(dāng)然也與紫菜生長(zhǎng)所處環(huán)境有關(guān),具體原因有待于進(jìn)一步研究。

    3.2 不同地區(qū)相同采收期條斑紫菜中硒含量比較

    通過硒含量測(cè)定結(jié)果可見,贛榆地區(qū)在12月頭水、次年1月二水和4月五水采收期條斑紫菜中硒含量比其他地區(qū)要高;在2月三水采收期,如東環(huán)漁地區(qū)條斑紫菜硒含量比其他地區(qū)高,海門地區(qū)其次,贛榆地區(qū)第三;在3月四水采收期,鹽城大豐地區(qū)條斑紫菜硒含量比其他地區(qū)高,其次為贛榆地區(qū),表現(xiàn)出條斑紫菜硒含量存在明顯的地區(qū)差異和時(shí)間差異。一般認(rèn)為海藻化學(xué)組成隨海藻種類、生長(zhǎng)海區(qū)、季節(jié)變化及環(huán)境因子如水溫、營(yíng)養(yǎng)鹽、光照等不同而有顯著變化[16],該文對(duì)江蘇沿海不同地區(qū)條斑紫菜中硒含量的比較,表明條斑紫菜中總硒含量受生長(zhǎng)海區(qū)、季節(jié)變化和環(huán)境因子的影響而不同。

    3.3 紫菜中硒含量的比較

    藻類的細(xì)胞壁主要有肽聚糖、磷脂和蛋白質(zhì)組成,具有粘性,并帶有一定負(fù)電荷,并能提供能與許多離子結(jié)合的官能團(tuán)[17]。海藻具有很強(qiáng)的生物富集作用,它能夠從很稀的水溶液中富集元素,既可以富集 Pb、Hg、Cd 重金屬元素,又可以富集 Fe、Zn、Se、I等對(duì)人體有益的微量元素[18],而海水提供了豐富的無機(jī)元素,因此海藻比陸生植物含有更多種及多量的天然元素。白研等[19]采用原子熒光法測(cè)定了12種海藻中總硒含量,在0.0268~0.2234 mg/kg之間,其中測(cè)定的紫菜含量為0.0709 mg/kg,該試驗(yàn)測(cè)得的條斑紫菜硒含量(0.089~0.284 mg/kg)與此相當(dāng),并且硒含量略高,屬于天然含硒食品。

    4 結(jié)論

    該文首次采用氫化物發(fā)生—原子熒光光度法對(duì)江蘇沿海5個(gè)地區(qū)5個(gè)采收期條斑紫菜中總硒含量變化進(jìn)行研究,結(jié)果表明江蘇沿海各地區(qū)不同采收期條斑紫菜中硒含量差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,不同地區(qū)中連云港市贛榆地區(qū)條斑紫菜硒含量最高,平均為0.182±0.035 mg/kg,其次為如東環(huán)漁地區(qū);不同采收期中三水條斑紫菜硒含量最高,為0.191±0.055 mg/kg,四水次之。不同地區(qū)條斑紫菜中硒含量最高值出現(xiàn)時(shí)間不一致,并有一定規(guī)律性變化,表現(xiàn)為在江蘇沿海南部條斑紫菜硒含量最高值出現(xiàn)時(shí)間早于江蘇沿海北部,推測(cè)可能與沿海三市海水溫度差異有關(guān)。從總體上分析江蘇沿海各地區(qū)條斑紫菜中硒含量整體較高,為0.145±0.026 mg/kg,屬于天然含硒食品。

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