張鮑虎 張 莉 楊書(shū)才 周 杰
深圳市坪山區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東深圳 518118
呼吸道感染性疾病對(duì)人類(lèi)健康的危害近年來(lái)逐漸加重,而引起感染的病原體種類(lèi)繁多,有病毒、細(xì)菌、支原體、衣原體等,這些病原體可能會(huì)單一感染,也可能會(huì)出現(xiàn)多重感染,臨床癥狀亦呈現(xiàn)多樣化[1],而呼吸道感染在人群中以兒童的發(fā)病率較高[2-3],對(duì)于呼吸道感染病情及時(shí)準(zhǔn)確診斷需求亦越來(lái)越高,且病原體感染后,臨床癥狀往往不夠特異,臨床醫(yī)生難以把握病情,所以對(duì)患者進(jìn)行必要的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)越發(fā)重要,而實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法多種多樣,如細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)菌培養(yǎng)、間接免疫熒光法、病原體基因檢測(cè)等[4],使用間接免疫熒光法檢測(cè)病原體感染后的血清特異性IgM 能夠直接反映患者感染的病原體種類(lèi),對(duì)臨床治療及時(shí)提供理論依據(jù),且此類(lèi)方法準(zhǔn)確高效,成本低廉,操作簡(jiǎn)便[5-7]。
收集2015 年1 月~2016 年12 月在我院就診的住院及門(mén)診呼吸道疾病感染患者4014 例,其中男2439 例,女1575 例,依研究設(shè)計(jì)將年齡分三組:(1)<18 歲組患者3201 例;(2)18 ~50 歲組患者607 例;(3)>50 歲患者206 例,患者主要臨床癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱、咳嗽、流涕、喘息,經(jīng)聽(tīng)診有肺部細(xì)濕啰音。
奧林巴斯CX41-32RFL/CX-DCD 熒光顯微鏡,檢測(cè)試劑盒為西班牙格拉納達(dá)VIRCELL,S,L 公司生產(chǎn)的呼吸道九連檢載玻片,檢測(cè)項(xiàng)目包括腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)、副流感病毒1/2/3型(PIV)、嗜肺軍團(tuán)菌(LP)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CP)。
1.3.1 采樣方法 要求患者空腹,離心后分離血清待測(cè)。
1.3.2 檢測(cè)方法 嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)正確操作。
1.3.3 結(jié)果判定 陽(yáng)性結(jié)果:ADV、RSV、INFA、INFB、PIV 的整個(gè)孔里有1%~15%細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜或細(xì)胞核出現(xiàn)蘋(píng)果綠色熒光,MP 細(xì)胞外周出現(xiàn)蘋(píng)果綠色熒光,LP、COX、CP 中所有菌體呈現(xiàn)蘋(píng)果綠色熒光。陰性結(jié)果:MP、ADV、RSV、INFA、INFB、PIV 中的細(xì)胞呈現(xiàn)紅色,COX、LP、CP 孔里無(wú)熒光。質(zhì)量控制:每一次檢測(cè)使用試劑盒配套陰陽(yáng)性質(zhì)控品,陰性質(zhì)控9 項(xiàng)結(jié)果均為陰性,陽(yáng)性質(zhì)控9 項(xiàng)結(jié)果均為陽(yáng)性才能判斷實(shí)驗(yàn)合格。
采用SPSS16.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示,采用χ2檢驗(yàn),P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
共檢出IgM 陽(yáng)性1474 例,陽(yáng)性率36.72%,部分患者呈現(xiàn)多重感染情況,其中排名前三的分別是MP 981 例,LP 203 例,INFB 192 例,陽(yáng)性率分別為:24.44%、5.06%及4.78%,陽(yáng)性率構(gòu)成比分別為:66.55%、13.77%及13.03%。見(jiàn)表1。
表1 九種呼吸道病原體陽(yáng)性率及陽(yáng)性構(gòu)成比
男性患者2439 例共檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果783 例,陽(yáng)性率32.10%,女性患者1575 例共檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果691 例,陽(yáng)性率43.87%,男性患者人群感染率明顯低于女性患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=57.052,P <0.01)。見(jiàn)表2。
表2 男女患者呼吸道陽(yáng)性檢出率
按照常規(guī)慣例將每年的3 ~5 月定為春季,以此為順序,春和冬季人群感染率明顯高于夏和秋,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05),各季節(jié)感染人群以MP 為主,其他病原體隨季節(jié)變換交替流行。見(jiàn)表3。
表3 不同季節(jié)呼吸道病原體檢測(cè)結(jié)果
4014 例樣本中,<18 歲組的3201 例,檢出陽(yáng)性1288 例,年齡分組人群感染率<18 歲組與>50歲組人群感染率明顯高于18 ~50 歲組的人群,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。見(jiàn)表4。
表4 不同年齡組呼吸道病原體檢測(cè)結(jié)果
引起呼吸道疾病的病原體較多,感染癥狀類(lèi)似,一般不容易直接區(qū)分,臨床的經(jīng)驗(yàn)治療可能會(huì)導(dǎo)致抗生素濫用,耽誤患者病情治療,而引起呼吸道感染的因素較多,常見(jiàn)有細(xì)菌、病毒、衣原體、支原體等微生物[8],如何快速準(zhǔn)確的檢測(cè)出病原體種類(lèi)成為呼吸道疾病治療的關(guān)鍵。
目前呼吸道病原體檢測(cè)方法較多,常見(jiàn)的有核酸檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)及血清病原體抗體檢測(cè)等方法。核酸檢測(cè)方法準(zhǔn)確高效,但需要購(gòu)置昂貴的儀器,不適用于基層醫(yī)院。細(xì)胞培養(yǎng)方法,培養(yǎng)呼吸道病原體難度大,操作復(fù)雜,檢測(cè)周期長(zhǎng),不適于臨床需求。本實(shí)驗(yàn)使用間接免疫熒光法(IFA)檢測(cè)病原體抗體,可以同時(shí)檢測(cè)9 種呼吸道感染性疾病的常見(jiàn)病原體,檢測(cè)周期短,結(jié)果準(zhǔn)確,操作簡(jiǎn)便,適用于大量標(biāo)本同時(shí)檢測(cè),能及時(shí)為臨床治療提供理論依據(jù),是一種可靠的呼吸道常見(jiàn)病原體檢測(cè)方法[9-11]。
呼吸道感染性疾病是一種常見(jiàn)病,本次研究發(fā)現(xiàn)4014 例患者呼吸道病原體檢測(cè)結(jié)果,共檢出IgM陽(yáng)性1474 例,總陽(yáng)性率 36.72%,這與莫偉平、白潔、林傳俊等研究一致[12-14],各類(lèi)病原體檢出率以MP為主,與多數(shù)報(bào)道相符,排名第二的LP 人群感染率為5.06%,明顯高于莫偉平、白潔、林傳俊等研究結(jié)果[12-14],這可能是由于LP 的主要傳播方式與社區(qū)獲得性感染有關(guān),坪山區(qū)位列深圳東部,人口相對(duì)集中容易導(dǎo)致社區(qū)獲得性肺炎的傳播;另外LP 夏季1153 例呼吸道患者陽(yáng)性人數(shù)68 例,占比5.90%位列四季第一,這可能與炎熱的夏季空調(diào)使用密切相關(guān),LP 常隱藏于空調(diào)制冷裝置中,隨冷風(fēng)吹出導(dǎo)致人體感染,研究提示人們即使在炎熱的夏季也應(yīng)該保持室內(nèi)通風(fēng)減少呼吸道疾病感染。此次研究發(fā)現(xiàn)9 例COX 感染的患者,蜱是COX 傳播的主要媒介,而坪山區(qū)周邊山區(qū)較多,容易接觸叢林導(dǎo)致感染,提示人們出入?yún)擦謺r(shí)應(yīng)涂抹驅(qū)蟲(chóng)藥物以避免感染此類(lèi)疾病。另外研究發(fā)現(xiàn)男女感染比率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可能是由于女性體質(zhì)相對(duì)較弱容易發(fā)生感染,本次研究統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示女性感染人群明顯高于男性,這與王金華等研究相符[15]。
呼吸道疾病可發(fā)生于各個(gè)年齡段,以老人和兒童發(fā)病率較高,是老人和兒童人群的重要死因之一[16-17],而一線城市人口密度大,人員活動(dòng)范圍相對(duì)集中,更容易促進(jìn)呼吸道疾病的傳播,另外老人和兒童的免疫力相對(duì)低下,易成為呼吸道病原體的感染對(duì)象,本次研究發(fā)現(xiàn)<18 歲組和>50 歲相對(duì)于18 ~50 歲組較易發(fā)生感染,人群感染率統(tǒng)計(jì)顯示:<18 歲組與>50 歲分別為40.24%、34.47%,明顯高于18 ~50 歲組18.95%,>50 歲組的人群感染率與王金華等研究結(jié)果差異較大[15],這可能與區(qū)域差異有關(guān)。因季節(jié)和地域性差異導(dǎo)致的呼吸道病原體流行性也存在一定變化,因此對(duì)本地區(qū)的呼吸道感染性病原體流行病學(xué)調(diào)查和研究尤其重要,研究發(fā)現(xiàn)本地區(qū)春和冬季人群感染率明顯高于夏和秋,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05),提示人們?cè)谌菀装l(fā)生呼吸道疾病的春冬季應(yīng)盡量避開(kāi)人群密集的場(chǎng)所,以免感染呼吸道病原體,各季節(jié)感染病原體數(shù)量以MP 為主,其次是LP 和INFB,其他各項(xiàng)病原體感染隨季節(jié)變換感染情況也有所變化。
綜上所述,本研究從性別、季節(jié)、環(huán)境與年齡等多方面分析了本地區(qū)的呼吸道疾病的病原體感染情況,為本地區(qū)流行病學(xué)調(diào)查提供了大量寶貴數(shù)據(jù),也為臨床對(duì)呼吸道疾病的治療提供高效、準(zhǔn)確的理論參考依據(jù)。