ADSCs細(xì)胞輔助脂肪顆粒移植填充面部軟組織凹陷的臨床療效研究

蘇鈺 王華軍 袁斯明

[摘要]目的：探究脂肪組織源性干細(xì)胞（Adipose derived stem cells，ADSCs）輔助脂肪顆粒移植（Cell-assisted lipotransfer，CAL）在填充面部軟組織凹陷中的臨床應(yīng)用。方法：選取2015年5月-2018年5月經(jīng)筆者醫(yī)院診治的面部軟組織凹陷患者86例，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為研究組和對(duì)照組，各43例。兩組患者均采用局部腫脹吸脂術(shù)于下腹部抽取自體脂肪顆粒組織。研究組經(jīng)分離、純化后獲取的ADSCs與脂肪顆?；旌暇鶆蚝笠蕴畛涿娌寇浗M織凹陷;對(duì)照組單純采用脂肪顆粒移植治療。觀察兩組患者術(shù)后臨床療效并調(diào)查其滿意度，比較兩組患者術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生情況。結(jié)果：研究組患者滿意度為100.00%（43/43）顯著高于對(duì)照組79.07%（34/43），術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率為0.00%顯著低于對(duì)照組的37.21%（16/43），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：CAL可通過提高自體脂肪顆粒存活率以達(dá)到較好的面部軟組織凹陷填充效果，對(duì)患者面部損傷小且術(shù)后并發(fā)癥少，在面部軟組織凹陷的治療中具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]脂肪組織源性干細(xì)胞;自體脂肪顆粒移植;填充;軟組織凹陷;面部;療效

[中圖分類號(hào)]R622 ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A ? ?[文章編號(hào)]1008-6455（2019）07-0082-03

Clinical Efficacy of ADSCs-assisted Fat Granule Transplantation in Filling Facial Soft Tissue Depression

SU Yu，WANG Hua-jun，YUAN Si-ming

（Department of Burn and Plastic Surgery，Nanjing General Hospital of War Zone，Nanjing 210016，Jiangsu，China）

Abstract： Objective ?To investigate the clinical application of adipose tissue-derived stem cells （ADSCs） assisted fat granule transplantation （CAL） in filling facial soft tissue depression. Methods ?86 patients with facial soft tissue depression who were treated by our hospital from May 2015 to May 2018 were enrolled. The patients were divided into study group and control group according to the random number table method， and 43 cases were in both groups. Both groups of patients used local swelling liposuction to extract autologous fat granule tissue in the lower abdomen. The ADSCs obtained after separation and purification in the research group were uniformly mixed with the fat particles to fill the facial soft tissue depression， the control group was treated with fat granule transplantation alone. The clinical efficacy and satisfaction of the patients were observed， and the incidence of postoperative complications was compared between the two groups. ?Results The patient satisfaction rate of the study group was 100.00% （43/43）， which was significantly higher than that of the control group[79.07% （34/43）]， the postoperative complication rate was 0.00% in the study group， which was significantly lower than that of the control group[37.21% （16/43）]， the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion ?CAL can improve the filling effect of facial soft tissue sag by increasing the survival rate of autologous fat granules， it has small facial damage and less postoperative complications， and has good clinical application value in the treatment of facial soft tissue depression.

Key words： adipose tissue-derived stem cells; autologous fat granule transplantation; filling; soft tissue depression; face; efficacy

面部軟組織凹陷主要由半側(cè)顏面萎縮癥及第二腮弓畸形及創(chuàng)傷導(dǎo)致，嚴(yán)重影響患者容貌及心理。降低顆粒脂肪注射移植后的脂肪吸收率，保持移植脂肪組織的體積是治療面部軟組織凹陷的關(guān)鍵。自體組織移植填充、人工合成材料填充和生物材料填充是臨床主要使用的整復(fù)方法，其中自體脂肪移植在面部軟組織凹陷中的應(yīng)用日益廣泛，但脂肪移植后出現(xiàn)壞死、炎癥和高比率的脂肪吸收等現(xiàn)象，其中血液微循環(huán)不足是造成脂肪流失的主要原因[1-3]。脂肪組織源性干細(xì)胞（Adipose derived stem cells，ADSCs）具有促進(jìn)血管生成和脂肪組織再生等作用，但其輔助脂肪顆粒移植在面部軟組織凹陷中的應(yīng)用報(bào)道不多[4-5]。本研究通過將ADSCs細(xì)胞輔助脂肪顆粒移植（Cell-assisted lipotransfer，CAL）應(yīng)用于43例面部軟組織凹陷患者治療中，探究其安全性及有效性。

1 ?資料和方法

1.1 一般資料：選取2015年5月-2018年5月筆者醫(yī)院診治的面部軟組織凹陷患者86例，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為研究組和對(duì)照組，各43例。研究組：男2例，女41例;年齡19～46歲，平均年齡（37.84±9.53）歲;顳部凹陷12例，額部凹陷8例，上瞼凹陷9例，淚槽溝凹陷6例，鼻唇溝凹陷6例，面部發(fā)育不對(duì)稱2例。對(duì)照組：男1例，女42例;年齡18～46歲，平均年齡（37.86±9.57）歲;顳部凹陷11例，額部凹陷9例，上瞼凹陷10例，淚槽溝凹陷6例，鼻唇溝凹陷6例，面部發(fā)育不對(duì)稱1例。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 術(shù)前準(zhǔn)備：術(shù)前行常規(guī)檢查及?？撇轶w以排除手術(shù)禁忌證。其中檢查重點(diǎn)為：①檢查面部凹陷范圍，根據(jù)凹陷部位解剖情況及術(shù)后整體外部形態(tài)采用美藍(lán)標(biāo)記初步確定需要移植脂肪顆粒的數(shù)量;②檢查面部凹陷缺損的深度，確定凹陷與深部組織及周圍組織的關(guān)系;③根據(jù)手術(shù)區(qū)域及患者要求進(jìn)行模擬塑形，初步擬定凹陷部位的基礎(chǔ)注射量。拍攝患者面部正側(cè)位照片，患者簽署知情同意書。

1.3 脂肪顆粒獲?。簩⑾赂共孔鳛橹竟┻x區(qū)，于其隱蔽處注入腫脹液（2%利多卡因30ml，0.1%腎上腺素1mg，5%碳酸氫鈉10ml，0.9%生理鹽水1 000ml）行局部腫脹麻醉，其中腫脹液體積根據(jù)需填充的脂肪量而定。待供脂區(qū)外觀呈“橘皮”狀、皮膚蒼白、質(zhì)地較硬后，采用20ml注射器連接2～3mm鈍頭吸脂針輕柔抽吸脂肪，需注意吸脂針在脂肪層內(nèi)呈扇形，避免術(shù)后局部組織不平整。抽吸完成后，供脂區(qū)常規(guī)加壓包扎。將吸出的脂肪混懸液經(jīng)1 500r/min離心3min，去除腫脹液及上層油脂，研究組患者需將純凈的脂肪平分兩份。

1.4 ADSCs獲取[6]：將其中一份脂肪顆粒離心管送至細(xì)胞分離室，由專業(yè)人員提取。經(jīng)1 000r/min離心5min去除上層油脂。將處理后的脂肪組織加入等體積的1%膠原酶，充分混合，恒溫震蕩箱內(nèi)進(jìn)行消化處理。經(jīng)1 200r/min離心10min后將各個(gè)離心管內(nèi)沉淀層裝進(jìn)同一離心管中，調(diào)整細(xì)胞濃度至合適濃度備用，取少量細(xì)胞進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)排除細(xì)菌污染。將提取的ADSCs與備用的脂肪顆粒均勻混合作為填充劑備用。

1.5 治療方法：術(shù)前行常規(guī)面部消毒，在標(biāo)記好的受區(qū)邊緣外2cm處以發(fā)際線、眉部、口角和耳垂后等隱蔽處選擇合適進(jìn)針點(diǎn)，給予利多卡因局部浸潤麻醉。研究組患者采用16號(hào)針頭刺破皮膚，2.0mm抽吸針穿刺入受區(qū)，邊推針邊緩慢注射，根據(jù)受區(qū)范圍形成若干個(gè)隧道，呈扇形均勻小劑量注射。多點(diǎn)扇形注射脂肪，按摩塑形，并且調(diào)整注射方向及注入的量，脂肪顆粒的注射量以矯枉過正30%左右為宜。對(duì)照組患者僅給予脂肪顆粒填充治療，注射步驟同研究組。

1.6 術(shù)后處理：術(shù)后包扎注射針孔處，24h內(nèi)間斷性冰敷，1周內(nèi)減少或避免移植區(qū)肌肉活動(dòng)以避免新生血管的損傷。

1.7 療效評(píng)價(jià)：所有患者隨訪期間定期拍照，與術(shù)前對(duì)比，觀察患者局部皮膚是否平整，是否存在硬塊或囊腫，并詢問患者滿意度。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x?±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

術(shù)后隨訪4～17個(gè)月，研究組中40例患者經(jīng)一次填充，3例經(jīng)兩次填充，其中1例出現(xiàn)過度矯正，術(shù)后8個(gè)月經(jīng)局部抽吸后改善，均對(duì)治療效果滿意，滿意度為100.00%（43/43），43例患者移植區(qū)的填充脂肪面積未見明顯縮小，面部凹陷程度及整體輪廓得到明顯改善，面部圓潤飽滿，皮膚柔軟，均未出現(xiàn)硬結(jié)、脂肪液化、感染、腫脹液殘留中毒、血腫等并發(fā)癥。對(duì)照組28例患者經(jīng)一次填充，15例經(jīng)兩次填充，其中5例出現(xiàn)過度矯正，改善后患者滿意度為79.07%（34/43）;43例患者中局部硬結(jié)7例，紅腫9例，并發(fā)癥發(fā)生率為37.21%（16/43）。研究組患者滿意度顯著高于對(duì)照組，術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組典型病例見圖1。

3 ?討論

自體脂肪移植是治療面部軟組織凹陷的主要方法，因其具備無排異性、來源豐富、操作簡(jiǎn)單、無瘢痕、手感自然等優(yōu)點(diǎn)在皺紋填充、面部輪廓調(diào)整等方面有較為廣泛的應(yīng)用[7-8]。但由于脂肪移植早期營養(yǎng)來源主要為組織液的滲透，使移植脂肪顆粒與受床間血運(yùn)建立不足導(dǎo)致脂肪壞死或丟失[9-10]。目前關(guān)于脂肪移植后脂肪細(xì)胞的成活機(jī)制存在較大爭(zhēng)議，主要分為細(xì)胞存活理論和干細(xì)胞代替理論兩種。有研究[11]認(rèn)為脂肪移植后的脂肪顆?？捎腥N不同結(jié)局：①最外層的脂肪細(xì)胞可與周圍組織充分接觸，快速血管化，從而使周圍組織液為脂肪細(xì)胞的存活提供營養(yǎng);②中間部分的脂肪細(xì)胞因?qū)θ毖毖醪荒茌^好耐受，使耐受力較好的脂肪干細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化為脂肪細(xì)胞，以替代死亡的組織細(xì)胞;③最內(nèi)層的脂肪細(xì)胞和脂肪干細(xì)胞均因不能較好的耐受缺血缺氧導(dǎo)致液化壞死。故臨床在進(jìn)行脂肪移植時(shí)常采用細(xì)胞因子、激素等進(jìn)行局部治療，可通過促進(jìn)移植細(xì)胞與受區(qū)建立血供和抑制脂肪細(xì)胞分解，促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的增殖分化，從而促進(jìn)移植體內(nèi)纖維組織的增生，達(dá)到較好的移植效果[12-13]。其中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Basic fibroblast growth factor，bFGF）可通過以下機(jī)制提高脂肪移植的存活率：①活化各種修復(fù)細(xì)胞，對(duì)前脂肪細(xì)胞的增殖分化具有明顯促進(jìn)作用;②加速顆粒脂肪移植成功所需血管生長(zhǎng)，與周圍組織迅速建立血運(yùn)，明顯縮短移植后脂肪細(xì)胞缺血期，降低組織因缺血而導(dǎo)致的壞死，提高脂肪組織的存活率;③二乙氨乙基和葡聚糖凝膠可以用作為bFGF的運(yùn)載工具，二者可通過共同作用維持移植后脂肪體積的不變，在bFGF發(fā)揮作用的同時(shí)，葡聚糖凝膠可促進(jìn)纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)及前脂肪細(xì)胞的增殖分化[14]。

脂肪干細(xì)胞作為一種可自我更新和分化成多種細(xì)胞的特殊細(xì)胞，其輔助脂肪顆粒移植的主要途徑有：①當(dāng)移植后部分脂肪細(xì)胞死亡后，脂肪干細(xì)胞可分化為脂肪細(xì)胞，減少脂肪的吸收溶解;②脂肪干細(xì)胞可表達(dá)和分泌多種造血細(xì)胞因子、抗凋亡和促血管生成因子，促進(jìn)脂肪生成及組織血供的建立[15-17]。ADSCs是最為理想的干細(xì)胞來源[18]。研究[19]表明，ADSCs可分泌多種細(xì)胞因子，具有多向分化潛能，是治療多種疾病的研究熱點(diǎn)。CAL概念于2006年被提出，在后來發(fā)展中區(qū)別為干性CAL和濕性CAL。迄今學(xué)者們對(duì)于干性CAL和濕性CAL仍持有不同觀點(diǎn)，但可肯定的是兩者均可保證良好血運(yùn)、有效減少損傷，從而達(dá)到預(yù)期移植效果。本研究中研究組患者采用干性CAL，即將獲取的脂肪顆?；鞈乙和ㄟ^離心純化后分離ADSCs，治療面部軟組織凹陷，結(jié)果顯示：術(shù)后隨訪4～17個(gè)月，40例患者經(jīng)一次填充，3例經(jīng)兩次填充，其中僅1例出現(xiàn)過度矯正;對(duì)照組患者28例患者經(jīng)一次填充，15例經(jīng)兩次填充，其中5例出現(xiàn)過度矯正，說明經(jīng)CAL治療后多數(shù)患者可一次達(dá)到治療目的，獲得滿意療效。術(shù)后8個(gè)月經(jīng)局部抽吸后改善，經(jīng)專業(yè)醫(yī)師比對(duì)患者手術(shù)前后照片，研究組患者滿意度顯著高于對(duì)照組。本研究為避免豐富的面部表情及咀嚼運(yùn)動(dòng)對(duì)移植脂肪成活的影響，囑咐患者1周內(nèi)減少或避免移植區(qū)肌肉活動(dòng)，發(fā)現(xiàn)術(shù)后患者面部均圓潤飽滿，皮膚柔軟，主要由于上述部位脂肪注射的層次以骨膜淺層為主，故減少面部活動(dòng)，可一定程度提升脂肪細(xì)胞存活率。有研究[20]表明，除脂肪顆粒中的纖維條索狀脂肪組織的不有效去除及高壓力推注可影響脂肪成活率、增加術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率。本研究中，采用扇形均勻小劑量注射脂肪避免和移植區(qū)的脂肪堆積，術(shù)后患者填充脂肪面積未見明顯縮小，面部凹陷程度及整體輪廓得到明顯改善，但研究組患者術(shù)后局部紅腫、硬結(jié)等并發(fā)癥發(fā)生率顯著低于對(duì)照組，說明CAL是一種行之有效的面部凹陷治療方法，此結(jié)果可能與CAL的作用機(jī)制有關(guān)。在李春財(cái)?shù)萚6]研究中表明，CAL治療面部軟組織凹陷，具有微創(chuàng)、取材方便、脂肪成活率高的優(yōu)勢(shì)。本研究中也有類似發(fā)現(xiàn)，在隨訪過程中，術(shù)后所有患者均對(duì)效果非常滿意。ADSCs在CAL中的作用機(jī)制可能為：①ADSCs可分化為脂肪細(xì)胞并促進(jìn)脂肪再生;②ADSCs可分化為管內(nèi)皮細(xì)胞和血管壁細(xì)胞，促進(jìn)血運(yùn)建立;③在缺氧、損傷等條件下ADSCs可促進(jìn)血管生長(zhǎng)因子的釋放，誘導(dǎo)移植脂肪周圍的組織血管發(fā)生;④ADSC可自我分化，提高移植脂肪的ADSCs比例，避免移植脂肪組織萎縮。

綜上所述，采用CAL治療面部軟組織凹陷操作簡(jiǎn)單，術(shù)后患者面部凹陷程度及整體輪廓得到明顯改善，面部圓潤飽滿，顯著提升脂肪細(xì)胞存活率，未見并發(fā)癥，安全性較好，臨床可進(jìn)一步深入探討。

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[收稿日期]2019-01-14

本文引用格式：蘇鈺，王華軍，袁斯明.ADSCs細(xì)胞輔助脂肪顆粒移植填充面部軟組織凹陷的臨床療效研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2019，28（7）：82-85.