ERα和AROM在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義

邵婷　張雪英　韓小妹　王寧　董立娜　黃旭艷　劉小靜　湯忠玉　王鳳艷

【摘要】 目的：探討上皮性漿液性卵巢癌、卵巢良性腫瘤及正常卵巢組織中雌激素受體α（ERα）與芳香化酶（AROM）的表達(dá)。方法：采用免疫組化檢測(cè)ERα與AROM在卵巢上皮性漿液性癌、卵巢良性腫瘤及正常卵巢組織中表達(dá)情況，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：卵巢癌組織中ERα高表達(dá)、AROM低表達(dá)，與正常卵巢組織及良性腫瘤組織中表達(dá)情況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：上皮性漿液性卵巢癌中ERα高表達(dá)及AROM低表達(dá)，提示ERα選擇性抑制劑可能是防治卵巢癌發(fā)生的可行途徑之一，而AROM低表達(dá)與ERα高表達(dá)之間可能存在相關(guān)因子表達(dá)通路，為卵巢癌治療提供了新思路。

【關(guān)鍵詞】 雌激素受體α; 芳香化酶; 上皮性漿液性卵巢癌

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.03.020 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2019）03-00-03

Expression and Significance of ERα and AROM in Epithelial Ovarian Carcinoma/SHAO Ting，ZHANG Xueying，HAN Xiaomei，et al.//Chinese and Foreign Medical Research，2019，17（3）：-49

【Abstract】 Objective：To study the expressions of ERα and AROM in epithelial serous ovarian cancer，benign ovarian tumor and normal ovarian tissue.Method：The expression of ERα and AROM in ovarian epithelial serous carcinoma，benign ovarian tumor and normal ovarian tissue were detected by immunohistochemistry technique.Summarized the relevant clinical data for analysis.Result：The high expression of ERα and the low expression of AROM in ovarian cancer tissues were significantly different from those in normal ovarian tissues and benign tumor tissues（P<0.05）.Conclusion：High expression of ERα and low expression of AROM in epithelial serous ovarian cancer are associated，suggesting that ERα selective inhibitor may be one of the feasible ways to prevent ovarian cancer.However，there may be a related factor expression pathway between the low expression of AROM and the high expression of ERα，which provides new ideas and methods for the treatment of ovarian cancer.

【Key words】 Estrogen receptor α; Aromatase; Epithelial ovarian cancer

First-authors address：Affiliated Hospital of Chifeng University，Chifeng 024005，China

卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤，由于卵巢癌早期缺少臨床癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查又比較局限，因此早期診斷比較困難，就診時(shí)60%～70%已為晚期，而晚期病例的療效不佳。雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌，居?jì)D科惡性腫瘤的第三位，但死亡率卻超過(guò)宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌之和，高居?jì)D科癌癥首位，是嚴(yán)重威脅婦女健康的最大疾患[1]。本研究采用免疫組化方法研究上皮性漿液性卵巢癌中ERα、AROM的表達(dá)情況，以探尋上皮性漿液性卵巢癌中雌激素相關(guān)因子表達(dá)及內(nèi)分泌治療的可行性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年1-12月赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院婦科手術(shù)切除卵巢組織的蠟塊共90例，行HE染色復(fù)查診斷及免疫組化研究，臨床、隨訪及病理資料完整。其中50例卵巢上皮性漿液性癌為惡性組，20例卵巢良性腫瘤為良性組，20例正常卵巢組織為正常組。卵巢上皮性漿液性癌患者年齡23～75歲，平均（50.3±14.6）歲;腫瘤大小2～10 cm，平均（5.3±2.2）cm;腫瘤TNM臨床分期Ⅰ期12例，Ⅱ期7例，Ⅲ期26例，Ⅳ期5例;腫瘤病理分級(jí)G1 14例，G2 8例，G3 28例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者23例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者27例。所有患者術(shù)前未接受放療、化療治療。良性組患者年齡24～73歲，平均（51.2±13.9）歲;腫瘤大小2～10 cm，平均（5.5±2.4）cm，術(shù)后病理回報(bào)示漿液性囊腺瘤。正常組患者年齡40～74歲，平均（50.9±14.2）歲。三組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 主要試劑

AROM（兔抗人多克隆抗體）、ERα（兔抗人多克隆抗體），均購(gòu)自美國(guó)Santa Cruze公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

組織以10%甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，常規(guī)HE染色切片經(jīng)兩位病理醫(yī)生復(fù)診。免疫組化步驟參照說(shuō)明書(shū)操作，石蠟切片常規(guī)脫蠟、脫水，暴露抗原、抗原修復(fù)，加正常血清，分別滴加一抗ERα和AROM，PBS沖洗，再滴加生物素標(biāo)記第二抗體，PBS沖洗，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定

胞漿或胞核表現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。高倍鏡下選擇5個(gè)有代表性視野計(jì)數(shù)，每個(gè)視野100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算高倍視野中陽(yáng)性癌細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，<10%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%～25%（+）、26%～50%（++）、>50%（+++）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 20.0軟件處理、分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ERα、AROM在卵巢正常組織、良性腫瘤及卵巢上皮性漿液性癌中表達(dá)

ERα在惡性組中高表達(dá)（圖1①），表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于正常組（圖1②）及良性組（圖1③）;表達(dá)陽(yáng)性率與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=13.11;P<0.01），與良性組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=10.61;P<0.01）;正常組與良性組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。AROM在惡性組中低表達(dá)（圖1④），表達(dá)陽(yáng)性率明顯低于正常組（圖1⑤）及良性組（圖1⑥），

與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=8.72;P<0.01），與良性組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=6.65;P<0.01）;正常組與良性組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。

3 討論

卵巢癌是女性生殖器常見(jiàn)的三大惡性腫瘤之一，由于卵巢位于盆腔深部，早期病變不易發(fā)現(xiàn)，晚期病例也缺乏有效的治療手段，卵巢癌致死率居?jì)D科惡性腫瘤首位，已成為嚴(yán)重威脅婦女生命和健康的主要腫瘤。

卵巢癌難以早期發(fā)現(xiàn)且病因不清是死亡率居首位的重要原因。目前研究證實(shí)卵巢既是雌激素產(chǎn)生的器官，又是雌激素的靶器官，與雌激素的關(guān)系非常密切[2]。雌激素替代治療曾被認(rèn)為是絕經(jīng)后婦女永葆青春的靈丹妙藥，但通過(guò)大樣本跟蹤調(diào)查發(fā)現(xiàn)卵巢癌的發(fā)生與激素替代治療有相關(guān)性[3]。陳飛等[4]研究表明，相對(duì)于正常卵巢組織，卵巢腫瘤中ERα表達(dá)增加，而ERβ水平明顯下降，且ERα/ERβ也有明顯差異，因此認(rèn)為ERα與ERβ的平衡失調(diào)可能與卵巢癌的發(fā)生有關(guān)。

AROM是雌激素生物合成過(guò)程中最后一步限速酶，國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究表明AROM在乳腺癌[5-6]、子宮內(nèi)膜癌[7]、子宮內(nèi)膜異位癥[8]等疾病中有高表達(dá)，并對(duì)這些疾病的發(fā)生發(fā)展起重要作用，而且應(yīng)用芳香化酶抑制劑治療這些疾病已收到較好療效，因此有必要對(duì)其在卵巢癌組織中的表達(dá)情況及作用進(jìn)行進(jìn)一步研究，以更深入地了解局部雌激素在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中的作用，并為卵巢癌的內(nèi)分泌治療提供新的途徑。馬愛(ài)清等[9]研究表明，卵巢漿液性腺癌組織中存在P450Arom表達(dá)，且與患者的預(yù)后差可能相關(guān)，可為芳香化酶抑制劑在卵巢漿液性腺癌上的應(yīng)用提供一定參考依據(jù)。馮婷等[10]研究表明，漿液性卵巢癌存在局部雌激素相關(guān)調(diào)節(jié)因子表達(dá)的改變，表現(xiàn)為P450Arom蛋白表達(dá)缺失、ERα蛋白表達(dá)上調(diào)。韓麗麗等[11]研究表明ER陽(yáng)性率越高，患者術(shù)后生存率越低。對(duì)于ER陽(yáng)性的乳腺癌患者，激素治療已經(jīng)作為癌癥完整系統(tǒng)治療的一部分;在子宮內(nèi)膜癌激素治療已作為癌癥轉(zhuǎn)移的二線治療方案，卵巢作為一種內(nèi)分泌器官，激素療法在卵巢癌的應(yīng)用值得研究和期待[12]。

本研究采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)正常卵巢組織、卵巢良性腫瘤及卵巢癌組織中ERα與AROM蛋白表達(dá)水平并進(jìn)行相關(guān)性分析。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ERα在卵巢癌組織中高表達(dá)，而在正常卵巢組織及良性腫瘤組織中低表達(dá)，卵巢癌組織中表達(dá)水平明顯高于正常卵巢及良性腫瘤組織，且比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;AROM在卵巢癌組織中低表達(dá)，而在正常卵巢組織及良性腫瘤組織中高表達(dá)，卵巢癌組織中表達(dá)水平明顯低于正常卵巢及良性腫瘤組織，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。筆者認(rèn)為上皮性卵巢癌中AROM低表達(dá)與ERα高表達(dá)可能存在相關(guān)因子表達(dá)通路，因此進(jìn)一步研究、探索上皮性漿液性卵巢癌的發(fā)病機(jī)制和新的治療手段是非常必要的，通過(guò)本研究可以證實(shí)ERα與AROM表達(dá)在卵巢癌生物學(xué)過(guò)程中可能起到重要作用，為治療卵巢癌提供了新的思路和方法。

研究顯示，上皮性漿液性卵巢癌中也存在某些雌激素相關(guān)因子的變化，這些因子是否能成為卵巢癌內(nèi)分泌治療的新靶點(diǎn)還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]韓麗萍，董子明，喬玉環(huán)，等.卵巢上皮性癌組織中雌激素受體亞型的表達(dá)[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2006（4）：606-610.

[2]劉夢(mèng)娜，謝靜燕，趙樹(shù)立.雌激素受體在卵巢癌研究中的進(jìn)展[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2014，33（2）：215-218.

[3]盧義函，王應(yīng)海，李春琳，等.激素替代治療與婦科惡性腫瘤的研究進(jìn)展[J].昆明理工大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2016，41（6）：86-91.

[4]陳飛，何成章，吳玉玉.上皮性卵巢腫瘤中雌激素受體亞型表達(dá)的研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004（2）：124-126.

[5] Ikeda K，Inoue S.Estrogen receptors and their downstream targets in cancer[J].Arch Histol Cytol，2004，67（5）：435-442.

[6] Vadlamudi R K，Rajhans R，Chakravarty D，et al.Regulation of aromatase induction by nuclear receptor coregulator PELP1[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2010，118（4-5）：211-218.

[7]馬曉欣，張淑蘭，高山，等.芳香化酶蛋白及性激素受體等在子宮內(nèi)膜病變組織中的表達(dá)變化及意義[J].中華婦產(chǎn)科志，2006，41（6）：395-398.

[8]石秀杰.子宮內(nèi)膜異位癥與芳香化酶P450、雌激素受體及其亞型的研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（9）：389-390.

[9]馬愛(ài)清，張秦，劉琦.芳香化酶P450Arom在卵巢漿液性腺癌的表達(dá)及臨床意義[J].腫瘤學(xué)雜志，2014，20（1）：6-10.

[10]馮婷，柴蕓，周堅(jiān)紅.P450Arom，雌激素受體α在漿液性卵巢癌中的表達(dá)[J].腫瘤學(xué)雜志，2010，16（7）：569-571.

[11]韓麗麗，王華杰，張慧慧，等.卵巢上皮性癌雌激素受體、孕激素受體的表達(dá)及與其預(yù)后的關(guān)系[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2016，20（7）：1106-1108.

[12]李婉，孫麗美，劉禹池，等.激素受體與卵巢癌預(yù)后、發(fā)病機(jī)制及治療的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2017，25（4）：657-660.