甾烯醇原藥對小麥黃矮病的毒力測定及防效試驗

吳 寬, 武占敏, 郝興安, 吳云鋒

(1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物工程分院 陜西 楊凌 712100,2.內(nèi)蒙古鄂爾多斯市植保植檢站，內(nèi)蒙古鄂爾多斯 017000 3.西北農(nóng)林科技大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院, 陜西 楊凌 712100)

在國內(nèi)，黃矮病是影響小麥產(chǎn)量和質(zhì)量的一種重要病毒病[1]。小麥黃矮病曾于1960、1964、1966、1970、1973、1978、1980、1988、 1999年在西北干旱地區(qū)多次大面積流行危害, 造成小麥大面積減產(chǎn)。陜西省是小麥黃矮病發(fā)生的重災(zāi)區(qū), 全省各地小麥黃矮病的發(fā)病情況較重, 該地區(qū)流行病原為GAV、GPV和PAV。小麥?zhǔn)芎?，葉片黃化、植株矮縮，穗子變小，產(chǎn)量降低。目前，由于生產(chǎn)上缺乏優(yōu)質(zhì)抗病毒病品種，對小麥黃矮病的主要防治措施是噴施抗病毒藥物和殺蟲劑[2]。因此，篩選高效、低毒的生物源抗病毒劑尤為重要[3～4]，筆者研究對實驗室提取制備的甾烯醇原藥進(jìn)行了小麥黃矮病的毒力測定及田間藥效試驗，旨在為生產(chǎn)上提供綠色防控藥劑。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

試驗于2016-2018年西北農(nóng)林科技大學(xué)植物病毒實驗室溫室進(jìn)行。甾烯醇原藥、大麥黃矮病毒GAV和麥二叉蚜(Schizaphisgramimum)由實驗室提供，毒源小麥和蚜蟲在人工氣候箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度20℃，光周期為16 h∶8 h(L∶D)。對照藥劑選用1.5%植病靈水乳劑，由曲阜市爾福農(nóng)藥廠生產(chǎn)，小麥品種選用小偃6號。

1.2 病毒接種與施藥方法

將小麥種子播種到塑料苗盆中，置于有防蟲網(wǎng)的溫室內(nèi)培養(yǎng)，4片葉期進(jìn)行試驗處理。毒力測定的方法是接種病毒2d后噴施藥物，甾烯醇原藥稀釋為2.5、5、7.5、10、12.5、15 mg·L-15個濃度梯度，用小型噴霧器噴施葉面，對照藥劑植病靈按使用說明施藥，用帶GAV的麥二叉蚜傳播接種小麥(每株3～4頭)，預(yù)防試驗方法是噴施15 mg·L-1甾烯醇原藥稀釋液2 d后接種病毒，治療試驗為接種病毒2 d后施藥，發(fā)病對照為只接種病毒不施藥，每個處理52～55株，重復(fù)3次。

1.3 病情調(diào)查與藥效、毒力計算

處理后每15 d調(diào)查1次發(fā)病株數(shù)、發(fā)病嚴(yán)重度，計算發(fā)病率、防治效果。發(fā)病率(%)=發(fā)病株數(shù)/處理總株數(shù)×100，相對防效(%)=(對照發(fā)病率-處理發(fā)病率)/對照發(fā)病率×100。毒力是指藥劑本身對病蟲草的抑制或致殘作用和程度。半致死劑量(LD50)即致死中量，一次給藥有半數(shù)(50%)受試動物死亡所需的劑量或濃度，單位為 mg·kg-1。參考方法[5～7]計算毒力回歸線，將藥劑各濃度及其防治效果的原數(shù)據(jù)換算成各濃度對數(shù)值(x)和防效機(jī)率值(y)，求得各藥劑防效機(jī)率值與濃度對數(shù)值回歸(y=a+bx)，計算LC50。

2 實驗結(jié)果

2.1 甾烯醇原藥對黃矮病的毒力測定

給小麥接種病毒后噴施不同濃度2.5、5、7.5、10、12.5、15 mg·L-1甾烯醇原藥，調(diào)查發(fā)現(xiàn)對小麥黃矮病毒病有一定的防治效果，使用濃度為15 mg·L-1，防治效果為77.42%。對甾烯醇原藥對小麥黃矮病的毒力回歸方程為y=4.4513+1.036x,相關(guān)系數(shù)r=0.9656,有效抑制中濃度LC50=3.38 mg·L-1(表1)，95%置信限在2.3558～4.8633，卡方值(χ2) 為97.48。

2.2 預(yù)防試驗結(jié)果

實驗結(jié)果表明噴施15 mg·L-1甾烯醇原藥稀釋液2d后接種病毒，處理區(qū)葉片呈現(xiàn)深綠，植株長勢旺盛，相對預(yù)防效為77.62%，未噴藥對照區(qū)小麥葉片普遍變黃，植株矮化，無效分蘗增多，發(fā)病株率達(dá)到92.31%，甾烯醇原藥防治效果優(yōu)于對照藥劑處理(表 1)。

表1 甾烯醇原藥對小麥黃矮病的毒力測定

表2 甾烯醇對小麥黃矮病的預(yù)防效果

注:數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，差異顯著(P<0.05，TukeyHSD法)。

2.3 治療試驗結(jié)果

實驗結(jié)果表明接種病毒2 d后噴施15 mg·L-1甾烯醇原藥稀釋液，甾烯醇處理區(qū)大多數(shù)植株葉片綠色，個別植株發(fā)病，治療效果為76.16%，而對照藥劑的相對防效為71.59%，未噴藥對照發(fā)病率達(dá)到94.23%(表3)。

3 實驗結(jié)論

甾烯醇原藥對小麥黃矮病毒病有良好的防治效果，使用濃度為15 mg·L-1，防治效果達(dá)到77.42%。甾烯醇原藥對小麥黃矮病的有效抑制中濃度LC50=3.38 mg·L-1。田間藥效試驗表明甾烯醇原藥既可以預(yù)防，也能較好治療小麥黃矮病，是一種新的植物源病毒抑制劑。

表3 甾烯醇對小麥黃矮病的治療效果

4 討論

據(jù)統(tǒng)計，2016年我國小麥播種面積24 187 Khm2，小麥種植面積大，黃矮病的防治一直是小麥生產(chǎn)中的技術(shù)難題，該病通過蚜蟲傳播，所以，蚜蟲爆發(fā)遷飛會引起黃矮病的大流行，威脅糧食安全[8]。為了有效控制該病害，國內(nèi)外開展了大量研究。目前生產(chǎn)防治中主要應(yīng)用的抗病毒制劑有寧南霉素、寡糖鏈蛋白、毒氟磷、植病靈等[9]，被廣泛應(yīng)用于小麥、果樹、蔬菜、花卉、水稻等作物病毒病防治，解淀粉芽胞桿菌用于小麥黃花葉病的生物防治[10]。

筆者研究開展了甾烯醇原藥對小麥黃矮病的毒力測定和田間防效試驗，毒力測定結(jié)果表明甾烯醇原藥對小麥黃矮病較好的防治效果，發(fā)病率低于對照藥物，說明甾烯醇對小麥黃矮病有良好的防治效果，可以作為小麥黃矮病的綠色防控藥劑[11]。