高凱娜,陳虹,沈威,洪溢,黃佳,李白,高廣春,李軍*
(1.嘉興職業(yè)技術(shù)學(xué)院,浙江 嘉興 314036; 2.嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院,浙江 嘉興 314001; 3.嘉興市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,浙江 嘉興 314016)
西紅花(Crocussativus)又名藏紅花、番紅花,為鳶尾科番紅花屬植物,以其干燥柱頭入藥,被稱為“植物黃金”或“紅色金子”。西紅花在浙江建德、麗水及上海等地廣泛種植,且產(chǎn)量較高。由于種植西紅花具有較高的收益,逐漸成為研究熱點。針對西紅花栽培技術(shù)、病蟲害防治、組培快繁技術(shù)、真?zhèn)舞b別、西紅花苷提取工藝等方面已有大量研究報道[1-6]。其中,姚沖等[2]以西紅花苷、藏紅花苦素和藏紅花醛含量的綜合評分為指標(biāo),研究了西紅花一體化工藝,發(fā)現(xiàn)最佳一體化工藝為西紅花開花當(dāng)天采收,冷藏時間12 h內(nèi),干燥溫度為90 ℃。
在浙江地區(qū),室內(nèi)培育過程中西紅花花期集中在10月下旬至11月中旬,在采收加工過程中一般要求當(dāng)天采收、當(dāng)天加工,具有用工量大、時間短的特點[2]。另外,藏紅花的烘干方法也多種多樣,有熱蒸汽烘干、普通烘箱烘干及西紅花專用烘箱烘干等。不同烘干方法下,成品西紅花在色澤、外形等方面也具有一定差異[7]。本研究結(jié)合西紅花苷含量測定,針對西紅花的采后加工過程中采花期、采后貯藏溫度及烘干溫度等方面進(jìn)行研究,為西紅花的高效生產(chǎn)加工工藝提供理論基礎(chǔ)。
根據(jù)西紅花不同開花期,按照從開花初期至開花末期將西紅花開花期分為I、II、III、IV、V共5個不同的開花期(圖1)。2018年11月在西紅花開花期進(jìn)行取材,將樣品進(jìn)行3個處理:(1)于5個不同的開花期分別采集20朵花的柱頭,用80 ℃烘干;(2)設(shè)定1個開花期(開花期III)、2個貯藏溫度(4 ℃和25 ℃)及6個貯藏時間(0、4、8、12、16及20 h),分別采集20朵花的柱頭于80 ℃烘干;(3)設(shè)定1個開花期(開花期III)、4個烘干溫度(40 ℃、60 ℃、80 ℃及100 ℃),分別采集20朵花的柱頭,用不同溫度進(jìn)行烘干。將烘干后的西紅花用粉碎機(jī)粉碎,過40目(0.42 mm)篩后待用。
圖1 不同開花期西紅花
1.2.1 色譜條件
Zorbax Eclipse XDB-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相∶甲醇/水(45/55,V/V);檢測波長:440 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量10 μL。
1.2.2 對照樣品制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
精密稱取對照品西紅花苷-I(10 mg)和西紅花苷-II(4 mg),置于25 mL棕色量瓶中,加適量的50%乙醇,室溫下避光超聲(40KHZ)處理20 min,放置至室溫,用50%的乙醇稀釋至刻度,搖勻,制備成原液,然后分別取1、2、3、4、5、6 mL原液定容至25 mL。配制成西紅花苷-I對照品溶液(16~96 μg·mL-1)和西紅花苷-II對照品溶液(6.4~38.4 μg·mL-1),置于4 ℃冰箱避光保存。
將對照樣品各進(jìn)樣20 μL,測定峰面積,以對照品濃度為橫坐標(biāo),峰面積積分值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到西紅花苷-I及西紅花苷-II回歸方程及相關(guān)系數(shù),分別為Y=57.76X-4.186 7(R2=0.999 1)和Y=69.99X-1.546 7(R2=0.999 0)。
1.2.3 西紅花苷提取
精密稱取西紅花樣品各10 mg,分別置于50 mL棕色量瓶中,各組分別加入50%乙醇40 mL,避光超聲處理30 min,放至室溫后,用50%乙醇定容至刻度,0.45 μm微孔濾膜濾過,置于4 ℃冰箱避光保存,取20 μL進(jìn)樣測定,根據(jù)峰面積和標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。
通過對不同開花期西紅花苷含量的測定發(fā)現(xiàn),西紅花苷的總含量為19.16%~27.31%,其中西紅花苷-I的含量為13.66%~19.26%,西紅花苷-II的含量為5.50%~8.28%(圖2)。西紅花苷的總含量在5個不同開花期呈逐漸增加的趨勢,其中在第IV開花期含量最高,為27.31%;西紅花苷-I的含量在第V開花期含量最高,為19.26%;西紅花苷-II的含量在第IV開花期含量最高,為8.28%。在開花后期,西紅花苷的含量差異不顯著。
圖2 不同開花期西紅花苷含量測定
為了研究采后不同貯藏溫度對西紅花苷含量的影響,本研究比較了在4 ℃和25 ℃貯藏溫度下西紅花苷含量的差異。圖3表明,隨著貯藏時間的延長,西紅花苷的總含量呈逐漸降低的趨勢,貯藏20 h后從最初的25.43%降至16.09%。西紅花苷-I的含量變化趨勢與西紅花苷-II的變化趨勢一致,其中西紅花苷-I的含量由18.22%降至11.62%,西紅花苷-II的含量由7.21%降至4.47%。
通過測定40 ℃、60 ℃、80 ℃及100 ℃烘干溫度下西紅花苷的含量發(fā)現(xiàn),西紅花苷的總含量及西紅花苷-I、西紅花苷-II的含量在80 ℃烘干溫度下都最高,分別為23.85%、17.15%及6.69%;在40 ℃烘干溫度下最低,分別為20.75%、14.93%及5.82(圖4)。
西紅花苷含量測定方法有薄層掃描法、分光光度法及高效液相色譜法等,其中高效液相色譜法為常用的檢測方法。何常明等[8]用高效液相色譜法建立了西紅花苷的含量測定方法,測定西紅花苷-1的含量為19%左右、西紅花苷-2的含量為11%左右。徐象華等[9]測定了不同產(chǎn)地西紅花有效成分的含量,發(fā)現(xiàn)浙產(chǎn)西紅花有效成分含量較高,平均總西紅花苷含量為15.247%。高麗等[10]等也測定了不同產(chǎn)地西紅花中西紅花苷的含量,發(fā)現(xiàn)浙江湖州等地的西紅花中的總苷含量超過20%。曾宇紅等[11]測定了不同開花期西紅花柱頭中西紅花苷-II的含量,發(fā)現(xiàn)開花期4 d西紅花苷-II的含量最高,為5.21%。本研究通過測定發(fā)現(xiàn),西紅花苷的總含量為19.16%~27.31%,與已報道結(jié)果基本一致。另外,本研究還發(fā)現(xiàn),西紅花苷含量隨開花期有逐漸增加的趨勢,在開花后期采花獲得的成品西紅花中西紅花苷含量較高,傳統(tǒng)加工方法中為了采花方便,也基本在開花后期進(jìn)行采摘,這與西紅花傳統(tǒng)加工方法的采花期也基本一致。
圖4 不同烘干溫度對西紅花苷含量的影響
4 ℃冷藏處理是常用的植物采后保鮮溫度,而西紅花傳統(tǒng)加工方法中一般采花后直接放在室溫攤晾,且當(dāng)天采摘當(dāng)天加工[12]。本研究發(fā)現(xiàn),西紅花采后進(jìn)行冷藏處理及室溫處理,對西紅花苷的含量影響差異不顯著,而4 ℃冷藏處理還需要專門的冷藏設(shè)備,因此不建議西紅花采后進(jìn)行冷藏處理。但隨著貯藏時間的延長,西紅花苷含量有逐漸降低的趨勢,因此建議西紅花采后在8 h以內(nèi)應(yīng)及時烘干。西紅花在80 ℃下進(jìn)行烘干,成品西紅花中西紅花苷的含量最高。通過外觀及色澤觀察,該溫度下烘干的外觀品質(zhì)也較好,因此建議西紅花的烘干溫度為80 ℃。