• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甘蔗響應(yīng)梢腐病菌侵染的蛋白質(zhì)組學(xué)分析

    2019-06-20 22:38王澤平林善海梁強李長寧宋修鵬劉璐李毅杰
    熱帶作物學(xué)報 2019年5期
    關(guān)鍵詞:侵染甘蔗

    王澤平 林善海 梁強 李長寧 宋修鵬 劉璐 李毅杰

    摘? 要? 本文旨在解析甘蔗響應(yīng)梢腐病菌侵染過程中的生理生化機制,為甘蔗抗梢腐病育種及病害防治提供理論指導(dǎo)和科學(xué)參考。以我國甘蔗梢腐病主要致病菌Fusarium verticillioides孢子懸浮液為病原,以高抗梢腐病品種YT94/128和高感梢腐病品種GT37為宿主材料,在溫室條件下進(jìn)行針刺法接種,提取病情指數(shù)最嚴(yán)重時期,即接種后第14天的甘蔗葉片蛋白質(zhì)進(jìn)行iTRAQ定量表達(dá)分析。結(jié)果顯示,從GT37中成功鑒定3707個蛋白,獲得542個差異表達(dá)蛋白,其中上調(diào)表達(dá)187個,下調(diào)表達(dá)355個;從YT94/128中成功鑒定到3068個蛋白,獲得差異蛋白449個,其中上調(diào)表達(dá)191個,下調(diào)表達(dá)258個。這說明遺傳背景不同的甘蔗品種在蛋白質(zhì)組成上有很大差異,推測這是不同甘蔗品種間抗梢腐病性差異的重要分子基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞? 甘蔗;梢腐病;輪枝鐮孢菌;蛋白質(zhì)組學(xué);侵染

    中圖分類號? S566.1? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼? A

    Abstract? This study was to provide a theoretical guidance and scientific reference for sugarcane resistance breeding and disease prevention by analyzing the physiological and biochemical mechanism in the infection process of sugarcane response to pokkah boeng disease. With spore suspension of Fusarium verticillioides (the mainly pathogenic fungus of pokkah boeng disease in China) as the pathogeny and YT94/128 (HR), GT37 (HS) as the tested materials by syringe inoculation under a greenhouse, and the samples were collected at the 14th post-inoculation with the highest disease index to carry out quantitative expression analysis by isobaric tags for relative and absolute quantitation (iTRAQ). The results showed a total of 3707 proteins were successfully identified from GT37, and 542 differentially expressed proteins (DEPs) were obtained, of which 187 were up-regulated and 355 were down-regulated. Meanwhile, a total of 3068 proteins were successfully identified from YT94/128, and 449 DEPs were obtained, of which 191 were up-regulated and 258 were down-regulated. In a word, there are significant differences in the protein composition of sugarcane varieties with different genetic backgrounds, and it is speculated that this is the important molecular basis for the difference of resistance on pokkah boeng disease between different sugarcane varieties.

    Keywords? sugarcane; pokkah boeng disease; Fusarium verticillioides; proteomic; infection

    DOI? 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.05.015

    甘蔗梢腐?。╬okkah boeng disease)是由鐮刀菌(Gibberella fujikuroi)引起的,在我國蔗區(qū)其主要病原為Fusarium verticillioides[1]。該病無季節(jié)性流行,導(dǎo)致甘蔗表現(xiàn)出不同程度受害,已給蔗糖業(yè)可持續(xù)性生產(chǎn)造成嚴(yán)重影響[2]。

    在生物或非生物脅迫條件下,甘蔗蛋白的含量和種類會發(fā)生變化,其表達(dá)豐度或增或減,或產(chǎn)生新的蛋白。乙醇脫氧酶、類異黃酮還原酶、咖啡酸3-O-轉(zhuǎn)移酶、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶、抗壞血酸過氧化物酶、USP家族蛋白以及胱硫醚β-合酶參與甘蔗防衛(wèi)宿根矮化病菌反應(yīng)[3];甘蔗可溶性蛋白在鹽脅迫下的表達(dá)存在顯著差異[4];機械損傷誘導(dǎo)蛋白SUGARWIN2 在赤腐病、鳳梨病病原菌及酵母菌誘導(dǎo)下表達(dá)迥異[5];甘蔗拓補異構(gòu)酶,乙烯不敏感因子以及4次穿膜蛋白3個基因參與防御黑穗病菌侵染[6];蔗芽抗病性涉及活性氧代謝途徑和苯丙烷代謝途徑關(guān)鍵酶活性的變化[7];病程相關(guān)蛋白PR-1和β-1,3葡聚糖酶等被誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)[8];甘蔗可能通過細(xì)胞色素C氧化酶基因的誘導(dǎo),促使植保素合成增多,以此抵抗或抑制病原菌的脅迫[9]。甘蔗抗梢腐病菌F. verticillioides侵染研究表明二者相互作用機制涉及RNA、可溶性蛋白及氨基酸含量的精細(xì)調(diào)節(jié)[10]。

    同位素標(biāo)記相對和絕對定量技術(shù)(Isobaric tag for relative and absolute quantitation,? iTRAQ)作為近年來發(fā)展的蛋白定量技術(shù),其已成功應(yīng)用于解析甘蔗防御外界環(huán)境脅迫涉及的多系統(tǒng)、多水平代謝進(jìn)程[11]。為此,本文擬在上述研究基礎(chǔ)上,利用iTRAQ技術(shù)監(jiān)測梢腐病菌誘導(dǎo)的甘蔗葉片蛋白的表達(dá)水平變化,以獲得甘蔗響應(yīng)梢腐病菌侵染的差異蛋白表達(dá)譜,為解析甘蔗抗梢腐病生理生化機制提供全景掃描圖,進(jìn)而為發(fā)掘病程相關(guān)蛋白和抗病基因提供理論指導(dǎo)和科學(xué)依據(jù)。

    1? 材料與方法

    1.1? 材料

    室內(nèi)條件下種植高抗梢腐病品種YT94/128和高感品種GT37,待其5~6葉時,選取長勢一致植株利用針刺法[12]接種病原菌F. verticillioides,并遮蔭保濕,保持大棚溫度20~35 ℃,濕度80.00%~85.00%。于病情指數(shù)最嚴(yán)重階段即接種后第14天采集甘蔗+1葉(接種病原菌和清水的2個甘蔗品種,各3次生物學(xué)重復(fù),共計12個樣品)經(jīng)液氮速凍,保存于80 ℃冰箱備用。

    1.2? 方法

    1.2.1? 蛋白質(zhì)提取及測定? 按照每106個細(xì)胞加約400 μL 裂解液的比例(7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,0.1% PMSF,65 mmol/L DTT),在樣品中加入合適的裂解液,冰浴超聲(超聲5 s停10 s,超聲3~5 min);冰上靜置40 min;14 000 r/min 4 ℃離心30 min,取上清。參考蘇亞春[8]的方法進(jìn)行蛋白質(zhì)定量和檢測。

    1.2.2? 蛋白質(zhì)電泳、烷基化及酶解? SDS-PAGE電泳:取出需要的樣本量加入終濃度為10 mmol/L DTT,在56 ℃下反應(yīng)30 min后,加入終濃度20 mmol/L IAA室溫下避光反應(yīng)30 min;每管各加入預(yù)冷的丙酮(丙酮∶樣品體積比=5∶1),20 ℃沉淀2 h;12 000 r/min,4 ℃,離心20 min,取沉淀;加入含1 mol/L尿素的TEAB溶解液(dissolution buffer)20 μL,充分混勻溶解樣品;按照質(zhì)量比1∶50(酶∶蛋白)加入Trypsin,在37 ℃酶解15 h;酶解液加入終濃度0.5%的TFA終止酶解,濃縮凍干。

    1.2.3? iTRAQ標(biāo)記及質(zhì)譜分析? 胰蛋白酶消化后,用真空離心泵抽干肽段;用0.5 mol/L TEAB復(fù)溶肽段,按照魏春燕[11]方法進(jìn)行iTRAQ(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)標(biāo)記。

    高pH反相液相色譜法(RPLC)第一維分離:2.1 mm×150 mm XBridge BEH300(Waters公司,USA);色譜儀器:Waters UPLC;A相:水(氨水、甲酸調(diào)至pH 10);B相:100%CAN;紫外檢測波長:214~280 nm;流速:200 μL/min;梯度:60 min。根據(jù)峰型和時間共收取20個餾分,真空離心濃縮后,用50 μL RPLC A相溶解,進(jìn)行第二維分析。采用Triple TOF 5600(Applied Biosystem,USA)質(zhì)譜儀進(jìn)行LC-TMS分析,采集軟件:Analyst TF(ABI,USA);反相柱:ZORBAX 300SB C18 色譜柱(5 ?m,300 A,0.1 mm×150 mm,microm,USA);色譜儀器:Eksigent 1D plus;色譜分離90 min;A: 5%CAN,0.1%甲酸;B:98% CAN,0.1%甲酸;流速:300 μL/min。

    1.2.4? 蛋白質(zhì)鑒定及生物信息學(xué)分析? 應(yīng)用Mascot 2.3.02 軟件,在西南大學(xué)家蠶基因組數(shù)據(jù)庫SilkDB(http://silkworm.swu.edu.cn/silkdb/doc/ download.html)中進(jìn)行蛋白質(zhì)的鑒定和定量。最終選擇肽段數(shù)≥2,表達(dá)水平差異倍數(shù)>1.0(上調(diào))或<1.0(下調(diào)),且P<0.05的蛋白質(zhì)為顯著差異表達(dá)蛋白。選擇歐洲生物信息研究所(European Bioinformatics Institute,EMBL-EBI)維護(hù)的QuickGO(http://www.ebi.ac.uk/QuickGO/)注釋工具對差異蛋白質(zhì)進(jìn)行基因功能聚類GO分析,把所有差異表達(dá)蛋白質(zhì)向Gene Ontology 數(shù)據(jù)庫(http://www.geneontology.org/)的各個條目映射,計算分布在每個條目的蛋白質(zhì)數(shù)目,然后應(yīng)用超幾何檢驗,找出與所有蛋白質(zhì)背景相比在差異蛋白質(zhì)中顯著富集的GO條目。Pathway通路顯著性富集分析方法與GO功能富集分析方法相同,以KEGG Pathway為單位,應(yīng)用超幾何檢驗,找出與所有鑒定到的蛋白質(zhì)背景相比,在差異蛋白質(zhì)中顯著性富集的Pathway。

    2? 結(jié)果與分析

    2.1? 蛋白質(zhì)組的質(zhì)譜鑒定結(jié)果

    接種梢腐病菌后,GT37與對照相比有542個差異表達(dá)蛋白,其中上調(diào)表達(dá)187個,下調(diào)表達(dá)355個。YT94/128較之對照獲得差異蛋白449個,其中上調(diào)表達(dá)191個,下調(diào)表達(dá)258個。接種清水后,YT94/128較之GT37有131個差異蛋白下調(diào)表達(dá),87個蛋白上調(diào)表達(dá),而在接種病原菌后,YT94/128較之GT37有44個差異蛋白下調(diào)表達(dá),151個蛋白上調(diào)表達(dá)。

    2.2? 差異表達(dá)蛋白質(zhì)的GO功能注釋

    GT37中注釋到3707個蛋白,其中生物學(xué)過程(biological process)中蛋白數(shù)目最多的是代謝進(jìn)程(metabolic process),為322個;分子功能(molecular function)中蛋白數(shù)目最多的則是催化活性(catalytic activity),共計299個,細(xì)胞成分(cellular component)中蛋白數(shù)目最多的是細(xì)胞組分(cell part)和細(xì)胞(cell),二者均為419個。YT94/128中注釋到3068個蛋白,其中生物學(xué)過程中蛋白數(shù)目最多的是細(xì)胞進(jìn)程,為285個,分子功能中蛋白數(shù)目最多的是催化活性,為237個,細(xì)胞成分中蛋白數(shù)目最多的是細(xì)胞組分和細(xì)胞,二者均為345個。

    2.3? 差異表達(dá)蛋白質(zhì)的KEGG通路富集分析

    GT37中主要富集的通路有光合生物體碳固定(carbon fixation in photosynthetic organisms)、碳代謝(carbon metabolism)、戊糖磷酸途徑(pentose phosphate pathway)、光合作用(photosynthesis)、氨基酸生物合成(biosynthesis of amino acids)、丙酮酸鹽代謝(pyruvate metabolism)、亞油酸代謝(linoleic acid metabolism)、光合作用捕光蛋白(photosynthesis/antenna proteins)、乙醛酸和二羧酸代謝(glyoxylate and dicarboxylate metabolism)和代謝途徑(metabolic pathways)。YT94/128中主要富集的通路有亞油酸代謝、乙醛酸和二羧酸代謝、光合作用、光合作用捕光蛋白、苯丙烷類生物合成、碳代謝、谷胱甘肽代謝、萜類物質(zhì)代謝、次生代謝物質(zhì)合成和丙酮酸鹽代謝。將通路富集信息與定量分析結(jié)果整合見表1,得到部分重要差異蛋白質(zhì)的基本信息,其中主要包括15個光合作用相關(guān)蛋白、25個氮代謝蛋白、6個萜類物質(zhì)代謝蛋白和6個植物-病原菌互作蛋白。

    CK、JZ分別表示采用清水和孢子懸浮液接種第14天的樣品。

    3? 討論

    本文基于iTRAQ組學(xué)技術(shù)構(gòu)建了梢腐病菌侵染不同甘蔗材料的差異蛋白表達(dá)譜。代謝通路分析發(fā)現(xiàn)葉綠素a-b結(jié)合蛋白(Lhcb1-3)作為光合作用部位關(guān)鍵性成分在光捕獲和光調(diào)節(jié)方面發(fā)揮重要作用[13]。此類蛋白下調(diào)表達(dá),說明在病原菌誘導(dǎo)的衰老和死亡過程中控制PSⅡ-捕光復(fù)合體(PSⅡ-LHCⅡ)動力的類囊體結(jié)構(gòu)蛋白(THF1)受到負(fù)調(diào)控。三磷酸腺苷合成酶(ATP synthase,α、β、γ)作為病原菌侵染潛在受體在受到脅迫后上調(diào)表達(dá),暗示梢腐病菌可通過影響宿主甘蔗ATP 合成酶的活性來擾亂其正常能量代謝。細(xì)胞色素b6f蛋白復(fù)合體(PetB和PetC)在PSⅠ和 PSⅡ反應(yīng)中心的產(chǎn)氧光合作用和跨膜電化學(xué)質(zhì)子梯度中為ATP合酶提供電路連接[14],各類植物中,細(xì)胞核編碼因子在Cyt b6f復(fù)合體轉(zhuǎn)錄過程中是必不可少的,諸如玉米中的CRP1蛋白、衣藻屬的MCA1蛋白、以及擬南芥的PGR3、HCF152、HCF153蛋白。在光保護(hù)機制誘導(dǎo)下,過氧化物酶能協(xié)助清除過氧化氫,此類蛋白上調(diào)表達(dá)說明甘蔗在受到病原菌脅迫后,其葉片氧化還原反應(yīng)速度顯著加快。PSⅠ(由PsaC、PsaG和PsaL組成)參與電子傳遞和狀態(tài)轉(zhuǎn)換以維持高效光合作用,其大部分組合因子在藍(lán)藻細(xì)菌、真核藻類和CK、JZ分別表示采用清水和孢子懸浮液接種第14天的樣品。

    高等植物中具有高度保守性[15],除C5XAT4以外,大部分顯著上調(diào)表達(dá),據(jù)此推斷C5XNG5、C5X3S4、A1E9X5以及PSⅠ的其他組成部分可能共同產(chǎn)生了一組聚合體,它們能確保對病原體侵染的快速響應(yīng)和光合效率的正常進(jìn)行。PSⅡ周圍的細(xì)胞色素蛋白參與環(huán)式電子傳遞調(diào)節(jié),且對外界環(huán)境誘導(dǎo)有保護(hù)效應(yīng)。由此可見,光合作用機制自動響應(yīng)促使甘蔗調(diào)控適應(yīng)外界脅迫,避免真菌對正常代謝途徑的進(jìn)一步侵?jǐn)_,或使得甘蔗植株在受到較輕感染后能盡快恢復(fù)生長。相反,感病基因型甘蔗卻無法產(chǎn)生足夠的適應(yīng)性。

    甘蔗葉片氮代謝通路積極響應(yīng)梢腐病菌的侵染[10]。C5Z0N4作為二氫硫辛酸脫氫酶以及C5WSJ3作為3-羥基異丁酰輔酶A水解酶參與半胱氨酸和蛋氨酸代謝途徑,而半胱氨酸是硫酸鹽同化作用的主要初級產(chǎn)物,硫素缺乏可導(dǎo)致葉片褪綠黃化、心葉伸長遲緩及花青素和大量細(xì)胞內(nèi)含物的積累,這與氮素供應(yīng)受限或紊亂所致癥狀極其相似,說明抗感差異材料中利用此類蛋白機制是迥然相反的。在β-丙氨酸代謝過程中,β-丙氨酸可能通過胺氧化酶(C5XCA6)、多胺氧化酶(C5YIG8)或谷氨酸脫羧酶(C5WMY2)進(jìn)行氧化脫氨基作用形成一些半醛,然后經(jīng)過重組參與丙酮酸代謝進(jìn)程,反過來又通過胺化作用產(chǎn)生β-丙氨酸。胺氧化酶(C5XCA6)和脯氨酸脫氫酶(C5WSJ9)在YT94/128中上調(diào)表達(dá),在GT37中下調(diào)表達(dá),表明抗病性更強的甘蔗材料可能具有更活躍的胺代謝分解。C5XPZ6作為γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽水解酶以及C5WY74、C5WNQ0作為谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶在感抗植物中上調(diào)表達(dá),表明它們在谷氨酸代謝中都扮演了非常重要角色。C5XPZ6又作為白三烯C4水解酶發(fā)揮重要作用,這說明該酶發(fā)揮的生理生化功能與甘蔗獲得系統(tǒng)性抗性有關(guān)。系統(tǒng)性抗性典型性特征表現(xiàn)為防御廣譜抗菌,并獨立于微生物或化學(xué)誘導(dǎo)物用于初級誘導(dǎo)。因此,進(jìn)一步鑒定花生四烯酸是否是為系統(tǒng)性抗性真正誘導(dǎo)者,或在甘蔗中體內(nèi)流動存在發(fā)揮作用是非常有必要的。

    基于3-氨基丙腈具有抗病毒活性,因此氨腈代謝通路也被認(rèn)為與甘蔗抗梢腐病機制相關(guān)。C5Z796,作為一種胺裂解酶,在感抗材料中上調(diào)表達(dá),尤其是在YT94/128中顯著上調(diào),參與了賴氨酸代謝過程中L-天冬氨酸4-半醛和(2S, 4S)-4-羥基-2, 3, 4, 5-四氫二吡啶的反應(yīng)。當(dāng)細(xì)胞碳水化合物供應(yīng)被耗盡時,其可作為另一種呼吸底物發(fā)揮重要作用,而二氫吡啶二羧酸合成酶(DHDPS)保持正常調(diào)節(jié)水平,賴氨酸是不會增長的[16]。在同批接種樣品中,感抗材料中不僅賴氨酸含量較對照顯著增長[10],參與賴氨酸代謝進(jìn)程并起主要催化還原活性的C5Z796蛋白也顯著上調(diào)表達(dá)。因此,C5Z796蛋白被認(rèn)為是甘蔗與病原菌互作的一種特征性蛋白。

    萜類化合物由于其揮發(fā)性、風(fēng)味/香氣和毒性等特性,在植物防御中發(fā)揮重要作用 [17]。通路富集分析表明萜類蛋白C5XAU4作為焦磷酸-δ-異構(gòu)酶參與類異戊二烯及甾醇生物合成,C5XHL1作為催化酶參與香葉酸合成,C5YB59參與脫落酸信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、法內(nèi)二磷酸及異戊烯半胱氨酸的合成,C5X5D5參與脫落酸信號途徑的負(fù)調(diào)控、蛋白的法尼基化修飾、香葉酰香葉?;?、分生組織的形成及水分喪失響應(yīng)過程,C5X0Z0將乙酰輔酶a與乙酰輔酶a結(jié)合形成β-羥基-β-甲戊二酸單酰輔酶a。這些反應(yīng)都是在一系列萜烯合成酶催化下進(jìn)行,中間合成產(chǎn)物有許多是次生代謝產(chǎn)物,它們可以保護(hù)甘蔗不受梢腐病菌的侵害。在受感染的植物中,萜烯的生物合成被抑制,降低了植物抗性,增強了病毒的傳播性能[18]?;诖?,針對萜類化合物是否能作為毒素抑制梢腐病菌的生殖和繁育、是否存在特定的萜烯化合物使梢腐病菌產(chǎn)生排斥反應(yīng)影響對不同遺傳背景甘蔗的選擇行為以及是否存在特定的萜烯化合物通過吸引天敵(內(nèi)生菌)間接防御梢腐病菌的侵染這一系列問題開展進(jìn)一步探討是非常有必要的。

    植物寄主抗病性與其合成的多肽有關(guān)。蛋白C5YJ75和C5X3T9具有ATP酶活性,可能與RAR1結(jié)為協(xié)同分子伴侶積極參與RPM1介導(dǎo)的抗性機制。前人已通過大麥白粉病研究發(fā)現(xiàn)了RAR1蛋白在抗病信號中的作用[19],在一些屬于NBS-LRR家族的基因(12, 36-38)中,也發(fā)現(xiàn)了同樣的作用[20]。此外,Hsp90可以穩(wěn)定RPM1并保護(hù)它不受Sgt1介導(dǎo)的降解,在無熱休克情況下通過主動抑制熱休克轉(zhuǎn)錄因子功能,對熱誘導(dǎo)基因進(jìn)行負(fù)調(diào)控[21]。C5XEC3被注釋為Sgt1 disease resistance protein,暗示其可能參與植物與病原菌的互作進(jìn)程。所有外界環(huán)境變化都可導(dǎo)致第二信使鈣(Ca2+)信號的產(chǎn)生[22],鈣依賴性蛋白激酶(CDPKs),代表潛在的Ca2+解碼器以轉(zhuǎn)化發(fā)育和環(huán)境應(yīng)激信號。蛋白C5XBP4通過參與ATP的結(jié)合、催化鈣依賴性蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶的活性以及與Ca2+和鈣調(diào)蛋白的結(jié)合積極參與脫落酸信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、肽基絲氨酸磷酸化以及蛋白自身磷酸化等生理過程,表明其可能在快速響應(yīng)病原菌脅迫,且在植物激素調(diào)節(jié)適應(yīng)性方面發(fā)揮重要作用。前人通過對大豆鈣調(diào)蛋白(CaMs)的過度表達(dá)研究,證明了CaM參與植物防御反應(yīng)的直接證據(jù)[23]。在轉(zhuǎn)基因煙草和擬南芥中,SCaM4和SCaM5的表達(dá)會導(dǎo)致自發(fā)損傷,增加PR基因表達(dá),增強對細(xì)菌、真菌和病毒病原體的抵抗力[24]。有趣的是,沉默煙草中的一個CaM(Nb-CaM1),抑制煙草細(xì)胞中煙草花葉病毒p50誘導(dǎo)的HR,而不是Cf9-Avr9或Pto-AvrPto和pst dc3000誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡,說明CaM可以對不同的病原體產(chǎn)生特異性[25]。這表明CaMs在植物防御中起著至關(guān)重要的作用,也暗示了鈣調(diào)蛋白C5YMD2以及C5XQS6在甘蔗材料中有助于防御梢腐病菌的進(jìn)一步侵染。

    綜上所述,遺傳背景不同的甘蔗品種在蛋白質(zhì)組成上有很大差異,這可能是不同甘蔗品種間抗梢腐病性差異的重要分子基礎(chǔ)。而光合作用電子傳遞蛋白C5YLG2、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶C5XPZ6、胺氧化酶C5Z796以及鈣調(diào)蛋白C5YMD2作為高豐度差異表達(dá)蛋白,應(yīng)可視為潛在重要抗病相關(guān)蛋白,其表達(dá)特性和功能特征有必要進(jìn)一步深入研究。

    參考文獻(xiàn)

    Lin Z Y, Xu S Q, Que Y X, et al. Species-specific detection and identification of Fusarium species complex, the causal agent of sugarcane pokkah boeng in China[J]. PLoS One, 2014: 9(8): e104195.

    王澤平, 陳? 奕, 孫海軍, 等. 廣西甘蔗主栽品種梢腐病田間抗性初步評價[J]. 熱帶作物學(xué)報, 2016(5): 952-957.

    謝曉娜. 宿根矮化病菌侵染后甘蔗防御酶活性和蛋白質(zhì)表達(dá)的變化[D]. 南寧: 廣西大學(xué), 2014.

    Pacheco C M, Pestana-Calsa M C, Gozzo F C, et al. Differentially delayed root proteome responses to salt stress in sugar cane varieties[J]. Journal of Proteome Research, 2013, 12(12): 5681-5695.

    Franco F P, Santiago A C, Henrique-Silva F, et al. The sugarcane defense protein SUGARWIN2 causes cell death in Colletotrichum falcatum but not in non-pathogenic fungi[J]. PLoS One , 2014, 9(3): e91159.

    Huang N, Zhang Y Y, Xiao X H, et al. Identification of smut-responsive genes in sugarcane using cDNA-SRAP[J]. Genetics and Molecular Research, 2015, 14(2): 6808.

    宋修鵬. 黑穗病菌侵染初期甘蔗幼苗光合生理變化及基因差異表達(dá)[D]. 南寧: 廣西大學(xué), 2014.

    蘇亞春. 甘蔗應(yīng)答黑穗病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組與蛋白組研究及抗性相關(guān)基因挖掘[D]. 福州: 福建農(nóng)林大學(xué), 2014.

    闕友雄, 許莉萍, 張木清, 等. 甘蔗中一個NBS-LRR類基因的全長克隆與表達(dá)分析[J]. 作物學(xué)報, 2009, 35(6): 1161-1166.

    王澤平, 李毅杰, 梁? 強, 等. 不同甘蔗在梢腐病菌侵染下氮代謝相關(guān)指標(biāo)的變化[J]. 植物生理學(xué)報, 2017, 53(11): 1963-1970.

    魏春燕. 內(nèi)生固氮菌DX120E與甘蔗互作的生理和分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究[D]. 南寧: 廣西大學(xué), 2016.

    Wang Z P, Sun H J, Guo Q, et al. Artificial inoculation method of pokkah boeng disease of sugarcane and screening of resistant germplasm resources in subtropical China[J]. Sugar Tech, 2017, 19(3): 283-292.

    Galka P, Santabarbara S, Khuong T T H, et al. Functional analyses of the plant photosystem I-light-harvesting complex II supercomplex reveal that light-harvesting complex II loosely

    bound to photosystem II is a very efficient antenna for photosystem Ⅰ in state Ⅱ [J]. The Plant Cell, 2012, 24(7): 2963-2978.

    Saif Hasan S, Yamashita E, Cramer W A. Transmembrane signaling and assembly of the cytochrome b6f-lipidic charge transfer complex[J]. Biochimica et Biophysica Acta, 2013 1827(11-12): 1295-1308.

    Yang X F, Wang Y T, Chen S T, et al. PBR1 selectively controls biogenesis of photosynthetic complexes by modulating translation of the large chloroplast gene Ycf1 in Arabidopsis[J]. Cell Discovery, 2016, 2: 16003.

    Amir R, Galili G. Regulation of lysine and threonine metabolism in plants[M]// Setlow J K. Genetic Engineering: Principles and Methods, vol 21. Boston: Springer, 1999: 57-77.

    Chen F, Tholl D, DAuria J C, et al. Biosynthesis and emission of terpenoid volatiles from Arabidopsis flowers[J]. The Plant Cell, 2003, 15(2): 481-494.

    Susi H, Barrès B, Vale P F, et al. Co-infection alters population dynamics of infectious disease[J]. Nature Communications, 2015, 6: 5975.

    Zhou F, Kurth J, Wei F, et al. Cell-autonomous expression of barley Mla1 confers race-specific resistance to the powdery mildew fungus via a Rar1-independent signaling pathway[J]. The Plant Cell, 2001, 13(2):337-350.

    Jo J, Venkatesh J, Han K, et al. Molecular mapping of PMR1, a novel locus conferring resistance to powdery mildew in pepper (Capsicum annuum)[J]. Frontiers in Plant Science, 2017, 8: 2090.

    Blacklock K, Verkhivker G M. Allosteric regulation of the Hsp90 dynamics and stability by client recruiter cochaperones: protein structure network modeling[J]. PLoS One, 2014, 9(1): e86547.

    Brandt B, Munemasa S, Wang C, et al. Calcium specificity signaling mechanisms in abscisic acid signal transduction in Arabidopsis guard cells[J] eLife, 2015(4): e03599.

    Walton S D, Chakravarthy H, Shettigar V, et al. Divergent soybean calmodulins respond similarly to calcium transients: insight into differential target regulation[J]. Frontiers in Plant Science, 2017, 8: 208.

    Reddy A S N, Ali G S, Celesnik H, et al. Coping with stresses: roles of calcium- and calcium/calmodulin-regulated gene expression[J]. The Plant Cell, 2011, 23(6): 2010-2032.

    Zhu X H, Caplan J, Mamillapalli P, et al. Function of endoplasmic reticulum calcium ATPase in innate immunity-mediated programmed cell death[J]. The EMBO Journal, 2010, 29(5): 1007-1018.

    猜你喜歡
    侵染甘蔗
    枯萎鐮刀病菌侵染西瓜幼苗的過程特征
    甘蔗的問題
    甜甜的甘蔗
    吃甘蔗
    甘蔗
    AM真菌對甘草侵染及生長的影響
    引種濱梅菌根侵染特性研究
    不同叢枝菌根真菌對小麥幼苗侵染及生物產(chǎn)量的影響
    黑熊吃甘蔗
    1株侵染蓖麻的葡萄座腔菌菌株鑒定
    亚洲成人中文字幕在线播放| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品久久久久久电影网| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 少妇熟女欧美另类| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美三级亚洲精品| www.色视频.com| 精品少妇久久久久久888优播| 国产精品99久久99久久久不卡 | 男的添女的下面高潮视频| 我的女老师完整版在线观看| 日韩免费高清中文字幕av| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | av国产久精品久网站免费入址| 成人亚洲精品av一区二区| 中文资源天堂在线| 精品人妻视频免费看| 99九九线精品视频在线观看视频| 久久99热6这里只有精品| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产成人精品久久久久久| 中文字幕av成人在线电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 天天一区二区日本电影三级| 色5月婷婷丁香| 国产午夜精品一二区理论片| 久久亚洲国产成人精品v| 一级爰片在线观看| 婷婷色av中文字幕| 久久精品夜色国产| 性色avwww在线观看| 欧美国产精品一级二级三级 | 免费黄网站久久成人精品| 男插女下体视频免费在线播放| 最后的刺客免费高清国语| 神马国产精品三级电影在线观看| 大话2 男鬼变身卡| 国产一区二区三区综合在线观看 | 天堂中文最新版在线下载 | 午夜福利网站1000一区二区三区| 天堂中文最新版在线下载 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产成人精品婷婷| 一级a做视频免费观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品.久久久| 欧美三级亚洲精品| 街头女战士在线观看网站| 精品一区二区免费观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 午夜免费鲁丝| 一级毛片我不卡| 午夜爱爱视频在线播放| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产色爽女视频免费观看| 免费看不卡的av| 国产成人精品福利久久| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产真实伦视频高清在线观看| 色吧在线观看| 中国国产av一级| 丰满少妇做爰视频| 人妻系列 视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产精品国产av在线观看| 三级经典国产精品| 两个人的视频大全免费| av国产免费在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲精品久久午夜乱码| 在现免费观看毛片| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲欧美日韩东京热| 永久免费av网站大全| eeuss影院久久| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 69人妻影院| 99久国产av精品国产电影| 成人二区视频| 观看免费一级毛片| 亚洲,欧美,日韩| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成人毛片a级毛片在线播放| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| av免费在线看不卡| 午夜免费鲁丝| 熟女人妻精品中文字幕| 一级黄片播放器| 日日啪夜夜爽| 亚洲精品456在线播放app| 男人狂女人下面高潮的视频| 99热这里只有是精品50| 中国美白少妇内射xxxbb| 免费av不卡在线播放| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲欧洲国产日韩| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 欧美 日韩 精品 国产| 国产一区有黄有色的免费视频| 欧美日本视频| h日本视频在线播放| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲国产欧美人成| 特大巨黑吊av在线直播| 免费观看在线日韩| 久久久国产一区二区| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 国产高清不卡午夜福利| 国产男女内射视频| 麻豆乱淫一区二区| 人体艺术视频欧美日本| 搡老乐熟女国产| 亚洲精品456在线播放app| 一个人看的www免费观看视频| 一区二区av电影网| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产探花极品一区二区| 亚洲av免费在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 黄色配什么色好看| 一边亲一边摸免费视频| 99热全是精品| 亚洲成人av在线免费| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲成人久久爱视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | av天堂中文字幕网| 亚洲精品国产成人久久av| 美女视频免费永久观看网站| 最近中文字幕2019免费版| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲经典国产精华液单| 欧美另类一区| 丝瓜视频免费看黄片| 日本免费在线观看一区| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 在线天堂最新版资源| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 免费在线观看成人毛片| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 在线观看人妻少妇| 国产精品福利在线免费观看| 免费观看的影片在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产精品久久久久久精品电影| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲无线观看免费| 我的女老师完整版在线观看| 久久久久国产精品人妻一区二区| av天堂中文字幕网| 欧美性感艳星| 黄色欧美视频在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 一区二区三区乱码不卡18| 国产探花在线观看一区二区| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美zozozo另类| 乱码一卡2卡4卡精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 舔av片在线| 别揉我奶头 嗯啊视频| 身体一侧抽搐| av在线播放精品| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲国产最新在线播放| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲精品国产色婷婷电影| 美女视频免费永久观看网站| 中文天堂在线官网| 一区二区三区免费毛片| av在线亚洲专区| 亚洲av男天堂| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚洲丝袜综合中文字幕| 久久久久精品久久久久真实原创| 一级黄片播放器| 久久女婷五月综合色啪小说 | 中文在线观看免费www的网站| 久久精品人妻少妇| 婷婷色综合www| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 99久久精品热视频| 成人二区视频| 久久精品人妻少妇| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久久欧美国产精品| eeuss影院久久| 国产片特级美女逼逼视频| 搞女人的毛片| 成人特级av手机在线观看| 亚洲不卡免费看| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 69av精品久久久久久| 精品一区二区三卡| 99热网站在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 91午夜精品亚洲一区二区三区| av卡一久久| a级一级毛片免费在线观看| 99热国产这里只有精品6| 国产精品嫩草影院av在线观看| 伦精品一区二区三区| 亚洲精品色激情综合| 免费看av在线观看网站| 91久久精品电影网| 一区二区三区乱码不卡18| 日韩成人伦理影院| 国产成人福利小说| tube8黄色片| 国产乱人视频| 综合色av麻豆| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产爽快片一区二区三区| 欧美日本视频| 亚洲精品,欧美精品| 深爱激情五月婷婷| 成年免费大片在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲av中文av极速乱| 国产亚洲最大av| 日韩 亚洲 欧美在线| av专区在线播放| 国产乱人视频| 亚洲国产欧美人成| 51国产日韩欧美| 国产又色又爽无遮挡免| 久久久亚洲精品成人影院| 一级二级三级毛片免费看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 日韩欧美精品v在线| 在现免费观看毛片| 亚洲成人av在线免费| 青青草视频在线视频观看| 亚洲三级黄色毛片| 免费电影在线观看免费观看| 中文字幕免费在线视频6| 日韩人妻高清精品专区| 大香蕉97超碰在线| 国产高清不卡午夜福利| 色播亚洲综合网| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美精品国产亚洲| av在线老鸭窝| 高清日韩中文字幕在线| 成年av动漫网址| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 99视频精品全部免费 在线| 观看美女的网站| 青春草视频在线免费观看| 一区二区av电影网| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产精品成人在线| 在线免费观看不下载黄p国产| 欧美区成人在线视频| 久久久久久久精品精品| 色5月婷婷丁香| 2018国产大陆天天弄谢| 99热这里只有是精品50| 最近最新中文字幕免费大全7| 极品教师在线视频| 日韩欧美精品v在线| 国产精品一区www在线观看| 免费av不卡在线播放| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 日韩电影二区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产在线一区二区三区精| 欧美日韩视频精品一区| 美女高潮的动态| 边亲边吃奶的免费视频| 免费观看的影片在线观看| 看十八女毛片水多多多| 免费观看性生交大片5| 人妻 亚洲 视频| 日韩三级伦理在线观看| tube8黄色片| 亚洲av成人精品一二三区| 久久精品久久久久久久性| 亚洲精品aⅴ在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 九草在线视频观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩欧美一区视频在线观看 | 久久精品国产自在天天线| 日韩一区二区三区影片| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲精品日本国产第一区| 色网站视频免费| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| av在线亚洲专区| 久久久久久久午夜电影| 男女那种视频在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 国产伦精品一区二区三区视频9| 免费看av在线观看网站| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产亚洲一区二区精品| 日本与韩国留学比较| 日韩 亚洲 欧美在线| 国内精品美女久久久久久| 大片免费播放器 马上看| 免费看光身美女| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜免费观看性视频| 五月玫瑰六月丁香| 国产免费又黄又爽又色| 大码成人一级视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 日日撸夜夜添| 老女人水多毛片| 久久99热这里只有精品18| 欧美日韩亚洲高清精品| 看非洲黑人一级黄片| 国产精品久久久久久精品古装| 2022亚洲国产成人精品| 久久99热6这里只有精品| 久久久精品欧美日韩精品| 成人一区二区视频在线观看| 精品久久国产蜜桃| 久久久精品免费免费高清| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 丝袜喷水一区| 日韩三级伦理在线观看| 国产成人精品一,二区| 久久久久久久久大av| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲天堂av无毛| 国产69精品久久久久777片| 男人舔奶头视频| 麻豆成人午夜福利视频| 国产永久视频网站| 99热6这里只有精品| 中文字幕av成人在线电影| 美女cb高潮喷水在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 日韩av不卡免费在线播放| 2018国产大陆天天弄谢| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 26uuu在线亚洲综合色| 午夜免费鲁丝| 久久久久久久国产电影| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产大屁股一区二区在线视频| www.av在线官网国产| 国产永久视频网站| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产乱人偷精品视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美成人a在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 久久久久精品久久久久真实原创| 97精品久久久久久久久久精品| av福利片在线观看| 亚洲欧洲日产国产| 成人二区视频| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 好男人视频免费观看在线| 乱码一卡2卡4卡精品| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产亚洲精品久久久com| 国产成人a区在线观看| 熟女电影av网| 高清日韩中文字幕在线| 国产精品熟女久久久久浪| 特级一级黄色大片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 国产91av在线免费观看| 日韩av不卡免费在线播放| videossex国产| av在线亚洲专区| 中国三级夫妇交换| 婷婷色av中文字幕| 日本免费在线观看一区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 午夜精品一区二区三区免费看| 日本色播在线视频| 国产人妻一区二区三区在| 99久久九九国产精品国产免费| 夫妻午夜视频| 亚洲美女搞黄在线观看| 午夜日本视频在线| 午夜老司机福利剧场| 熟女av电影| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产精品一二三区在线看| 欧美xxⅹ黑人| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久久欧美国产精品| 丰满人妻一区二区三区视频av| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 91久久精品电影网| 嫩草影院入口| 国产精品不卡视频一区二区| 日韩三级伦理在线观看| 欧美 日韩 精品 国产| 日韩av不卡免费在线播放| 插阴视频在线观看视频| 国产成人一区二区在线| 久久久国产一区二区| 国产久久久一区二区三区| 国产黄频视频在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲av二区三区四区| 中国国产av一级| 精品久久久噜噜| 亚洲国产av新网站| 日本黄色片子视频| 中文天堂在线官网| 午夜老司机福利剧场| 亚洲国产日韩一区二区| 一级毛片电影观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 欧美bdsm另类| 少妇熟女欧美另类| 永久网站在线| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 精品少妇黑人巨大在线播放| 久久久久久国产a免费观看| 老女人水多毛片| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久久久性生活片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 天天躁日日操中文字幕| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 观看免费一级毛片| 国产一区二区三区av在线| 亚洲综合精品二区| 亚洲国产精品999| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产有黄有色有爽视频| 免费大片18禁| 99热这里只有是精品50| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久99热6这里只有精品| 2021天堂中文幕一二区在线观| 成人亚洲精品av一区二区| 一级毛片 在线播放| 精品一区二区三卡| 久久影院123| 国产欧美亚洲国产| 亚洲欧美清纯卡通| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 亚州av有码| 国产又色又爽无遮挡免| 久久韩国三级中文字幕| 午夜福利网站1000一区二区三区| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲综合色惰| 赤兔流量卡办理| 嫩草影院新地址| 九九在线视频观看精品| 99热6这里只有精品| eeuss影院久久| av在线老鸭窝| 成人漫画全彩无遮挡| h日本视频在线播放| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲精品成人久久久久久| 丝袜喷水一区| 欧美性感艳星| 精品国产露脸久久av麻豆| 波多野结衣巨乳人妻| 欧美激情在线99| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久99热6这里只有精品| 99久久精品热视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美一区二区亚洲| 国产黄片美女视频| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲精品成人久久久久久| 男女那种视频在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 99视频精品全部免费 在线| 最近的中文字幕免费完整| 黄片wwwwww| 国产色婷婷99| 视频中文字幕在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 成人鲁丝片一二三区免费| av免费在线看不卡| 国产欧美日韩精品一区二区| 最近中文字幕高清免费大全6| 免费观看在线日韩| 亚洲成人一二三区av| 最近最新中文字幕免费大全7| 免费av观看视频| 久久午夜福利片| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 成年av动漫网址| 一级a做视频免费观看| 久久鲁丝午夜福利片| 五月天丁香电影| 亚洲成人中文字幕在线播放| 成人综合一区亚洲| 久久97久久精品| 1000部很黄的大片| 中文字幕亚洲精品专区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 黄色配什么色好看| 国产精品一区www在线观看| 黄片wwwwww| 亚洲丝袜综合中文字幕| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 一级二级三级毛片免费看| 国产成人精品福利久久| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产男女超爽视频在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 欧美三级亚洲精品| 老司机影院成人| 国产免费一级a男人的天堂| 一级黄片播放器| 亚洲av.av天堂| 91狼人影院| 久久久久九九精品影院| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 视频中文字幕在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 中文字幕制服av| 夫妻午夜视频| 亚洲成人av在线免费| 国产视频内射| 日韩大片免费观看网站| 一个人看视频在线观看www免费| 日韩亚洲欧美综合| 少妇丰满av| 欧美变态另类bdsm刘玥| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲图色成人| 一级二级三级毛片免费看| 国产午夜福利久久久久久| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲内射少妇av| 亚洲成色77777| 国产视频内射| 777米奇影视久久| 色综合色国产| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 在线播放无遮挡| 2021少妇久久久久久久久久久| 美女主播在线视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 一区二区三区乱码不卡18| 国产一区二区三区av在线| 国产探花在线观看一区二区| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产精品女同一区二区软件| 国产av码专区亚洲av| 老司机影院成人| 神马国产精品三级电影在线观看| a级毛色黄片| 久久久午夜欧美精品| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲自拍偷在线| 中文字幕制服av| 七月丁香在线播放| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲,欧美,日韩| 嫩草影院入口| 九九在线视频观看精品| 日本欧美国产在线视频| 99视频精品全部免费 在线| 高清在线视频一区二区三区| 深夜a级毛片| 久久99热6这里只有精品| 成人国产麻豆网| 黄色欧美视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 麻豆成人av视频| 好男人视频免费观看在线| 亚洲欧美精品自产自拍| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久精品国产自在天天线| 男女那种视频在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 2021天堂中文幕一二区在线观| 免费人成在线观看视频色| 毛片一级片免费看久久久久|