反復(fù)呼吸道感染兒童中腸道菌群失調(diào)對(duì)其免疫功能的影響

區(qū)曉毅 陳贊鋼 廖繼研 李北坤

廣東省英德市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心兒科，廣東英德 513000

反復(fù)呼吸道感染（recurrent respiratory tract infection，RRTI）是指在一年之內(nèi)，0～3歲、3～6歲及6歲以上三個(gè)不同年齡段的兒童發(fā)生呼吸道感染的次數(shù)分別超多7、6、5次，并且已經(jīng)對(duì)兒童的成長(zhǎng)發(fā)育造成了比較嚴(yán)重的影響，則可認(rèn)為兒童患有反復(fù)呼吸道感染現(xiàn)象。目前研究認(rèn)為是多種因素造成呼吸道較為嚴(yán)重感染的并且較為復(fù)雜，如微量元素或者維生素缺乏導(dǎo)致的免疫功能低下等先天性因素，父母對(duì)孩子的喂養(yǎng)方式、兒童飲食、生活習(xí)慣、生活環(huán)境等后天影響等都是重要影響因素。人體腸道內(nèi)微生物的種類分布情況等會(huì)對(duì)人體代謝功能、免疫功能產(chǎn)生重要影響，同時(shí)也需要經(jīng)過(guò)漫長(zhǎng)的時(shí)間進(jìn)行菌群發(fā)育，如果在兒童期間由于抗生素或者疫苗的原因?qū)е履c道發(fā)育并不完整，便會(huì)對(duì)兒童的生理健康產(chǎn)生不良影響[1]。基于統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，判斷各年齡段兒童腸道菌落種類，IgM、IgG、IgA值是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，來(lái)判定兒童腸道是否出現(xiàn)菌群失調(diào)現(xiàn)象[2]?；谝陨显?，本次研究主要針對(duì)兒童呼吸道感染條件下腸道菌群的變化進(jìn)行分析比對(duì)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2015年7月～2017年10月在我院進(jìn)行治療的100例被確診為反復(fù)呼吸道感染的兒童作為觀察組；選取同時(shí)期來(lái)到我院進(jìn)行就診的非反復(fù)呼吸道感染的其他兒童100例作為對(duì)照組。對(duì)照組和觀察組兒童均按照0～3歲、3～6歲、6歲以上年齡段分成三組。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）觀察組符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科分會(huì)呼吸學(xué)組對(duì)反復(fù)呼吸道感染就診的標(biāo)準(zhǔn)；（2）對(duì)照組為非反復(fù)呼吸道感染兒童；（3）觀察組和對(duì)照組兩組兒童均無(wú)其他并發(fā)癥；（4）近1個(gè)月觀察研究對(duì)象均未使用免疫調(diào)節(jié)劑、抗生素及腎上腺皮質(zhì)激素等，所有參與研究的患兒均由家屬簽署知情同意書。采集信息（包括年齡、性別、是否早產(chǎn)，是否母乳喂養(yǎng)等資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比較性[3]。判斷反復(fù)呼吸道感染時(shí)根據(jù)，上呼吸道感染次數(shù)，反復(fù)氣管支氣管炎/反復(fù)肺炎在一年內(nèi)感染的次數(shù)為條件。見表1。

表1 兩組兒童一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 研究方法 根據(jù)大腸桿菌菌落失調(diào)情況將呼吸道感染組分為菌群失調(diào)組和非菌群失調(diào)組，分析人體免疫系統(tǒng)情況與大腸菌群是否失調(diào)的聯(lián)系，根據(jù)0～3歲、3～6歲、6歲以上等年齡差異將感染組分為三組。檢測(cè)這三組不同年齡段兒童免疫球蛋白的含量、腸道內(nèi)部菌群分布情況比較異同來(lái)探究其與反復(fù)呼吸道感染之間的聯(lián)系[4]。

1.2.2 檢測(cè)方法 首先采集5g的兒童新鮮糞便在無(wú)菌容器中，并將其涂抹在載玻片上，將其推成薄膜狀的薄層，自然風(fēng)干后固定并將其染色，使用革蘭染色法，干燥，觀察。通過(guò)在油鏡中觀察涂片的5個(gè)視野來(lái)確定涂片上菌群的總量以及菌群的種類，其中可參照《腸道菌群糞便涂片檢查圖譜》來(lái)確定[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，在Excel表格中錄入實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并建立數(shù)據(jù)庫(kù)，計(jì)量資料采用（）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)，非反復(fù)呼吸道感染組、反復(fù)呼吸道感染組中的菌群失調(diào)組和非菌群失調(diào)組組間的比較采用單因素方差法分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.4 觀察指標(biāo)[6]

糞便涂片染色干燥之后，放于油鏡中從5個(gè)視野進(jìn)行檢測(cè)，主要有紅色和紫色兩種表現(xiàn)，記錄細(xì)菌的總數(shù)及各種顏色表現(xiàn)情況。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

本研究反復(fù)呼吸道感染患兒100例中有38例存在腸道菌群失調(diào)的情況，占38%；非反復(fù)呼吸道感染組100例中兒童發(fā)生腸道菌群失調(diào)的有26例，占26%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：反復(fù)呼吸道感染組腸道菌群的失調(diào)率明顯要高于非反復(fù)呼吸道感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 腸道菌群失調(diào)在不同年齡階段的表現(xiàn)情況比較

觀察組在0～3歲及3～6歲年齡段腸道菌群失調(diào)比例分別為18例、14例占總38例的47.3%和36.8%相對(duì)于對(duì)照組在相應(yīng)年齡段的10例、6例占總23例的43.4%和26.1%發(fā)生率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而＞6歲年齡段差異不明顯。見表2。

2.3 不同年齡段免疫球蛋白含量以及免疫水平比較

在0～3歲和3～6歲這兩個(gè)年齡階段，IgA的含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而IgM、IgG比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；在＞6歲的年齡階段，IgG、IgA及IgM的含量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；另外，菌群失調(diào)組和非菌群失調(diào)組相比較，在0～3歲、3～6歲、＞6歲這三個(gè)年齡階段IgG、IgA及IgM的含量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表2 各個(gè)年齡階段反復(fù)呼吸道感染組與非反復(fù)呼吸道感染組菌群失調(diào)率比較

表3 不同年齡段非反復(fù)呼吸道感染組、反復(fù)呼吸道感染組中菌群失調(diào)組和非菌群失調(diào)組血清免疫球蛋白比較（）

表3 不同年齡段非反復(fù)呼吸道感染組、反復(fù)呼吸道感染組中菌群失調(diào)組和非菌群失調(diào)組血清免疫球蛋白比較（）

年齡（歲） 組別 菌群失調(diào)組 非菌群失調(diào)組 對(duì)照組 F P 0～3 IgA 0.82±0.12 0.78±0.54 0.83±0.12 8.251 0.124 IgM 1.35±0.32 1.43±0.16 1.38±0.12 0.185 0.054 IgG 4.36±0.35 4.14±0.47 4.03±0.12 0.245 0.128 3～6 IgA 1.03±0.84 1.15±0.51 1.28±0.12 4.952 0.015 IgM 1.25±0.04 1.12±0.54 1.02±0.12 0.542 0.132 IgG 6.62±0.95 6.82±0.75 6.41±0.12 0.254 0.130＞6 IgA 1.81±0.71 1.85±0.84 1.93±0.12 1.362 0.158 IgM 1.58±0.34 1.52±0.62 1.38±0.12 0.754 0.185 IgG 8.54±0.33 8.04±0.49 8.75±0.12 0.215 0.162

3 討論

反復(fù)呼吸道感染是一種多發(fā)的兒科疾病且患發(fā)率有明顯升高的趨勢(shì)，尤其是在幼兒時(shí)期更容易引發(fā)該疾病。各種原因引起免疫蛋白球改變、免疫水平發(fā)生變化與小兒反復(fù)呼吸道感染疾病的發(fā)生有關(guān)[7-9]。近年來(lái)濫用抗生素、飲食不當(dāng)?shù)戎饕蛴绊懥藘和庖呦到y(tǒng)的成長(zhǎng)，與此同時(shí)腸道微環(huán)境也對(duì)健康起著重要作用。

3.1 腸道菌群失調(diào)與反復(fù)呼吸道感染在不同年齡段的關(guān)系

本研究中反復(fù)呼吸道感染組的菌群失調(diào)發(fā)生率為38%，與非反復(fù)呼吸道感染組26%相比明顯較高，說(shuō)明兒童腸道菌群失調(diào)與反復(fù)呼吸道感染兩者之間呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系，由此可以推測(cè)造成小兒反復(fù)呼吸道感染的一個(gè)重要致病因素可能是腸道菌群失調(diào)[10]。兒童腸道內(nèi)的菌群處于平衡狀態(tài)時(shí)才能維持其機(jī)體處于健康狀態(tài)，以發(fā)揮其調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、維護(hù)腸黏膜屏障的完整性等作用；但當(dāng)腸道內(nèi)的菌落不穩(wěn)定時(shí)，主要由于外來(lái)因素的侵襲會(huì)導(dǎo)致兒童機(jī)體產(chǎn)生不良反應(yīng)，兒童健康出現(xiàn)問(wèn)題。與此同時(shí)兒童腸道內(nèi)菌落不平衡也會(huì)影響肺部的抗炎性免疫功能，會(huì)通過(guò)影響炎性因子、細(xì)胞因子的正常功能從而易導(dǎo)致呼吸道感染。由于6歲以下兒童的腸壁較薄且尚未發(fā)育完全、屏障功能較差，同時(shí)其內(nèi)部菌落平衡相對(duì)脆弱[11-12]。所以若發(fā)生不當(dāng)飲食規(guī)律、濫用抗生素的情況時(shí)易導(dǎo)致菌落失衡現(xiàn)象，這便是實(shí)驗(yàn)中看到的6歲以下兒童菌落失調(diào)現(xiàn)象較為嚴(yán)重的原因。

3.2 反復(fù)呼吸道感染患兒免疫水平與兒童腸道菌群失調(diào)的關(guān)系

正如前文所述當(dāng)兒童腸道內(nèi)部菌群出現(xiàn)失調(diào)現(xiàn)象時(shí)，尤其在0～6歲的年齡階段，兒童機(jī)體的免疫功能會(huì)明顯降低，主要是由于菌群的變化影響了人體內(nèi)部的免疫球蛋白的含量從而進(jìn)一步影響人機(jī)體的免疫系統(tǒng)[7]。從而就可說(shuō)明出現(xiàn)0～6歲兒童反復(fù)呼吸道感染組患兒的IgA均明顯低于非反復(fù)呼吸道感染組的兒童現(xiàn)象，是由于菌群失衡導(dǎo)致的。有研究表明要提高人體免疫機(jī)能需要將機(jī)體暴露于普通環(huán)境中，接觸大量的多種抗原，腸道內(nèi)布菌群在這個(gè)過(guò)程中產(chǎn)生免疫應(yīng)答，如果在無(wú)菌環(huán)境下動(dòng)物機(jī)體的菌落發(fā)育不完整，固有層淋巴細(xì)胞和免疫球蛋白數(shù)量較少。而對(duì)于6歲以上兒童免疫系統(tǒng)發(fā)育已經(jīng)日趨完善，菌群失調(diào)對(duì)免疫球蛋白的影響降低，從而對(duì)反復(fù)性呼吸道感染的影響減小[13-15]。

綜上所述，腸道菌群失調(diào)是6歲以下兒童患反復(fù)性呼吸道感染的重要影響因素之一，檢測(cè)IgA含量、免疫球蛋白水平、腸道菌落情況等指標(biāo)都可有效預(yù)防反復(fù)型呼吸道感染的發(fā)生。