表皮生長因子對抗NMDA受體腦炎致海馬神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用

李振宏

[摘要] 目的 研究表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）干預(yù)治療抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及機(jī)制，為抗NMDA受體腦炎提供新的治療靶點(diǎn)。 方法 建立抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷模型，當(dāng)神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)至第8天，將實(shí)驗(yàn)組分為1﹑2 d和3 d 3個(gè)時(shí)相點(diǎn)， 每個(gè)時(shí)相點(diǎn)15個(gè)標(biāo)本，在實(shí)驗(yàn)組中加入EGF（10 ng/mL），應(yīng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法、免疫組織化學(xué)和TUNEL細(xì)胞凋亡檢測等技術(shù)， 檢測EGF對抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用以及細(xì)胞凋亡基因caspase-3表達(dá)水平變化。 結(jié)果 當(dāng)谷氨酸濃度為100﹑200 μmol/L時(shí)，細(xì)胞凋亡率高[（2.2 ±1.014）%、（3.3±0.975）%]，而細(xì)胞存活率并不低[（77.6±5.039）%、（73.4±4.969）%];在誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡實(shí)驗(yàn)中，凋亡后3 d內(nèi)，3組細(xì)胞的神經(jīng)元細(xì)胞存活率相互比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;3組細(xì)胞的神經(jīng)元凋亡率相互比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;3組細(xì)胞的caspase-3基因陽性表達(dá)率相互比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論EGF對抗NMDA受體腦炎導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷有保護(hù)作用，可能是EGF通過促使凋亡基因caspase-3表達(dá)減少，抑制神經(jīng)元凋亡發(fā)生，從而對抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷起到保護(hù)作用。

[關(guān)鍵詞] 抗NMDA受體腦炎;神經(jīng)元;損傷;表皮生長因子

[中圖分類號] R742 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號] 1674-0742（2019）02（b）-0047-05

Protective Effect of Epidermal Growth Factor on Hippocampal Neuronal Injury Induced by NMDA Receptor Encephalitis

LI Zhen-hong

Department of Pediatrics， Ganzhou Hospital Affiliated to Nanchang University， Ganzhou， Jiangxi Province， 341000 China

[Abstract] Objective To study the protective effect and mechanism of epidermal growth factor （EGF） intervention on anti-NMDA receptor encephalitis-induced neuronal injury， and provide a new therapeutic target for anti-NMDA receptor encephalitis. Methods A neuronal injury model induced by anti-NMDA receptor encephalitis was established. When the neuron cells were cultured until day 8， the experimental components were divided into three phases， one day， two days and three days， each phase point 15 samples. In the experimental group， EGF（10 ng/mL） was added to the experimental group， and the protective effect of EGF against NMDA receptor encephalitis-induced neuronal injury was detected by trypan blue staining， immunohistochemistry and TUNEL apoptosis detection. And the expression level of the apoptosis gene caspase-3 was changed. Results When the concentration of glutamic acid was 100， 200 μmol / L， the apoptotic rate was high [（2.2± 1.014）%，（3.3±0.975）%]， while the cell survival rate was not low [（77.6±5.039）%，（73.4±4.969）%]; in the induction of neurons of the apoptosis experiment， the neuronal cell survival rates of the three groups were compared within 3 days after apoptosis， and the difference was statistically significant（P<0.05）. The neuronal apoptosis rates of the three groups were compared with each other. the difference was statistically significant（P<0.05）. The positive expression rates of caspase-3 gene in the three groups were compared with each other， and the statistical the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion EGF has a protective effect against neuronal damage caused by NMDA receptor encephalitis. It may be that EGF inhibits neuronal apoptosis and playing a protective role in inhibiting the expression of caspase-3 and inhibiting neuronal damage induced by NMDA receptor encephalitis.

[Key words] Anti-NMDA receptor encephalitis; Neurons; Injury; Epidermal growth factor

抗N-甲基-D-天門冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA） 受體腦炎是一種起病時(shí)臨床表現(xiàn)不典型，易被臨床工作者忽視的一種神經(jīng)系統(tǒng)疾病[1]。表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）是Cohen[2]于1962年發(fā)現(xiàn)的一種可促進(jìn)人體細(xì)胞生長的營養(yǎng)因子，由多個(gè)氨基酸編碼組成，在正常人體內(nèi)表皮生長因子含量較少。隨著醫(yī)學(xué)生物技術(shù)的不斷提高，現(xiàn)在國內(nèi)外已能大量生產(chǎn)人表皮生長因子。該研究針對抗NMDA受體腦炎的發(fā)病機(jī)制，通過建立抗NMDA受體腦炎體外培養(yǎng)模型， 當(dāng)神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)至第8天，將實(shí)驗(yàn)組分為1﹑2 d和3 d 3個(gè)時(shí)相點(diǎn)， 每個(gè)時(shí)相點(diǎn)15個(gè)標(biāo)本，觀察EGF對抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用，了解EGF對神經(jīng)元的作用和機(jī)制， 為抗NMDA受體腦炎的臨床研究提供新的靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選擇剛出生的SD大鼠培養(yǎng)原代神經(jīng)元細(xì)胞， 把原代神經(jīng)元細(xì)胞分3組（實(shí)驗(yàn)組﹑對照組和正常組），每組分1﹑2 d和3 d 3個(gè)時(shí)相點(diǎn)， 每個(gè)時(shí)相點(diǎn)15個(gè)標(biāo)本。

1.2 方法

1.2.1 原代神經(jīng)元培養(yǎng) 選擇剛出生的SD大鼠，用眼科鑷取出海馬，D-Hanks液清洗后，剪成1 mm3左右的小塊，在37℃溫度下用0.25%胰蛋白酶消化組織小塊后， 調(diào)節(jié)細(xì)胞懸液濃度為1×106/mL， 接種于經(jīng)0.01%多聚賴氨酸預(yù)處理的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。在神經(jīng)元培養(yǎng)第9天， 經(jīng)過神經(jīng)微絲-200免疫組織化學(xué)法鑒定， 神經(jīng)元細(xì)胞占培養(yǎng)細(xì)胞的90%以上。

1.2.2 建立抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷模型當(dāng)神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)至第9天，將神經(jīng)元分為谷氨酸實(shí)驗(yàn)組及正常對照組，谷氨酸濃度分別為100 、200 、300 、400 μmol/ L 。正常對照組不加入任何藥品處理，實(shí)驗(yàn)組中不同濃度的谷氨酸與神經(jīng)元細(xì)胞作用15 min后更換新鮮培養(yǎng)液， 24 h后進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色和TUNEL細(xì)胞凋亡檢測。

1.2.3 臺(tái)盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞存活率神經(jīng)元細(xì)胞 經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)法染色后，隨機(jī)選取15個(gè)視野，計(jì)數(shù)藍(lán)染神經(jīng)元數(shù)，死亡細(xì)胞被染成藍(lán)色， 未著色的細(xì)胞為存活細(xì)胞。神經(jīng)元存活率（%）=（實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)元存活數(shù)/細(xì)胞總數(shù)） ×100%。

1.2.4 TUNEL檢測細(xì)胞凋亡率 神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)TUNEL檢測，隨機(jī)選取15個(gè)視野，計(jì)數(shù)深棕色神經(jīng)元數(shù)，凋亡細(xì)胞被染成深棕色， 未著色的細(xì)胞為存活細(xì)胞。神經(jīng)元凋亡率（%）= （實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)元凋亡數(shù)/細(xì)胞總數(shù)） ×100%。

1.2.5 凋亡基因Caspase-3表達(dá)檢測 采用免疫組織化學(xué)方法，隨機(jī)選取15個(gè)視野，計(jì)數(shù)陽性神經(jīng)元數(shù)和總神經(jīng)元數(shù)， 陽性神經(jīng)元為細(xì)胞中有棕色著色者， 凋亡基因caspase-3陽性表達(dá)率（%）= （陽性神經(jīng)元數(shù)/神經(jīng)元總數(shù)） ×100%。

1.2.6 EGF對抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用 把神經(jīng)元分為實(shí)驗(yàn)組﹑對照組和正常組共3組，每組分1﹑2 d和3 d三個(gè)時(shí)相點(diǎn)， 每個(gè)時(shí)相點(diǎn)15個(gè)標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)組在加谷氨酸前1天加入EGF （10 ng/mL）， 對照組中加入相同劑量緩沖液， 正常組不作處理。

當(dāng)神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)至第9天， 將低濃度谷氨酸（100 μmol/L）加入實(shí)驗(yàn)組和對照組中，15 min后換回正常細(xì)胞培養(yǎng)液， 正常組不加入谷氨酸。繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至1﹑2 d和3 d進(jìn)行細(xì)胞存活率、凋亡率和凋亡基因檢測。

1.2.7 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行3組細(xì)胞數(shù)據(jù)分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示計(jì)量資料， 兩組間進(jìn)行t檢驗(yàn)分析，多組間比較采用方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）

2 結(jié)果

2.1 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定神經(jīng)元接種

在細(xì)胞培養(yǎng)瓶后，可見神經(jīng)元為懸浮在始建于培養(yǎng)液中的圓形細(xì)胞，， 細(xì)胞密度很高。1 d后在培養(yǎng)瓶壁上可見大多數(shù)神經(jīng)元基本貼壁， 少數(shù)神經(jīng)元可見軸突生長， 軸突長度約占細(xì)胞體的一半， 2 d后大多數(shù)神經(jīng)元有軸突生長，長度約為胞體的2～3倍，3 d后神經(jīng)元細(xì)胞胞體變大，軸突長度增長不明顯， 第4～5天可見許多細(xì)胞碎片，為崩解的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞， 培養(yǎng)第8天，軸突逐漸增長， 彼此相互連接， 形成網(wǎng)狀（照片1）。

細(xì)胞培養(yǎng)第9天， 免疫組織化學(xué)鑒定神經(jīng)元， 神經(jīng)元細(xì)胞及其軸突被染成棕色，棕色陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞的90%以上（照片2）。

2.2 抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷模型

2.2.1 細(xì)胞存活率 比較不同濃度的谷氨酸作用于神經(jīng)元細(xì)胞6 h后，可見部分細(xì)胞胞體腫脹，細(xì)胞軸突變短;1 d后部分腫脹細(xì)胞裂解。采用臺(tái)盼藍(lán)染色法計(jì)算神經(jīng)元存活率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各種濃度的谷氨酸都能誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞死亡，各種濃度的谷氨酸組神經(jīng)元細(xì)胞與對照組神經(jīng)元細(xì)胞比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01） ，而且隨著實(shí)驗(yàn)組谷氨酸濃度逐漸升高，神經(jīng)元細(xì)胞的存活率也逐漸下降（照片3）。

2.2.2 細(xì)胞凋亡率 比較TUNEL染色發(fā)現(xiàn)，不同濃度的谷氨酸作用于神經(jīng)元細(xì)胞1 d后，神經(jīng)元細(xì)胞體積變小，細(xì)胞核固縮。各種濃度的谷氨酸都能誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），在谷氨酸濃度為100﹑200 μmol/ L時(shí)，神經(jīng)元凋亡率隨著谷氨酸濃度的升高而上升，在谷氨酸濃度為200﹑300﹑400 μmol/ L時(shí)，細(xì)胞凋亡率隨著濃度的上升而下降（照片4）。相關(guān)數(shù)據(jù)見表1、圖1、圖2。

2.3 EGF對神經(jīng)元的保護(hù)作用

2.3.1 細(xì)胞凋亡檢測 在神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)第9天，使用100 μmol/L谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡后，通過TUNE方法檢測， 結(jié)果顯示：凋亡后第1天， 正常組的神經(jīng)元凋亡率為0.8%， 較實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞（1.4%）和對照組細(xì)胞（2%）明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞與對照組細(xì)胞比較， 統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。細(xì)胞凋亡后第2天，正常組的神經(jīng)元凋亡率為1.1%，較實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞（2.2%）和對照組細(xì)胞（5.4%）明顯下調(diào)， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞與對照組細(xì)胞統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。凋亡后第3天，正常組的神經(jīng)元凋亡率為1.4%，較實(shí)驗(yàn)組（3.5%）和對照組（6.2%）明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞與對照組細(xì)胞比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（照片5）相關(guān)數(shù)據(jù)見表2、圖3。

2.3.2 神經(jīng)元存活率檢測 在谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡后的1﹑2 d和3 d，使用行臺(tái)盼藍(lán)方法染色， 結(jié)果顯示：凋亡后1 d， 正常組的神經(jīng)元存活率為90.2%，較實(shí)驗(yàn)組（90.2%）和對照組（75.9%）明顯增加， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與對照組細(xì)胞比較， 實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率明顯上調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。凋亡后第48 h， 正常組的細(xì)胞存活率為84.4%，較實(shí)驗(yàn)組（75.3%）和對照組（70.5%）明顯增加， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與對照組細(xì)胞比較， 實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率明顯增上調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。凋亡后72 h， 正常組的細(xì)胞存活率為81.4%，較實(shí)驗(yàn)組（72.3%）和對照組（66.6%）明顯增加， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與對照組比較， 實(shí)驗(yàn)組存活細(xì)胞明顯增加， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。存著數(shù)據(jù)見表3、圖4。

2.3.3 凋亡基因Caspase-3表達(dá)情況 通過免疫組化技術(shù)，檢測凋亡基因caspase-3在神經(jīng)元中的表達(dá)情況，神經(jīng)元胞漿和軸突著色的為caspase-3陽性細(xì)胞。凋亡后第1天， 正常組的caspase-3陽性細(xì)胞率為1.3%， 較實(shí)驗(yàn)組（3.6%）和對照組（6.9%）明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與對照組比較， 實(shí)驗(yàn)組caspase-3陽性細(xì)胞明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。凋亡后第2天， 正常組的caspase-3陽性細(xì)胞率為2.7%， 較實(shí)驗(yàn)組（5.4%）和對照組（12.2%）明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與對照組比較， 實(shí)驗(yàn)組caspase-3陽性細(xì)胞明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。凋亡后第3天， 正常組的caspase-3陽性細(xì)胞率為3.9%， 較實(shí)驗(yàn)組（8.2%）和對照組（13.2%）明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與對照組比較， 實(shí)驗(yàn)組caspase-3陽性細(xì)胞明顯減少， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（照片6），具體數(shù)據(jù)見表4。

3 討論

抗N-甲基-D-天門冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA） 受體腦炎是一種起病時(shí)臨床表現(xiàn)不典型，易被臨床工作者忽視的一種神經(jīng)系統(tǒng)疾病，主要累及人體大腦邊緣系統(tǒng)，典型臨床表現(xiàn)以精神異常與癲癇發(fā)作為特征，其中大多數(shù)患者由腫瘤、感染[1]等引起。目前國內(nèi)外學(xué)者大多數(shù)認(rèn)為該病是抗NMDA抗體介導(dǎo)的免疫損傷所致[3-4]。其中NMDA受體是一種谷氨酸離子型受體，是由多種亞基組成的異四聚體，屬電壓門控通道，大量存在于大腦神經(jīng)細(xì)胞中，其中主要分布在大腦海馬區(qū)等邊緣系統(tǒng)，功能主要是調(diào)節(jié)突觸傳遞及促發(fā)突觸重塑，異常激活常導(dǎo)致驚厥發(fā)作、精神異常等臨床表現(xiàn)[5-6]。

我們在神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)至第10天，當(dāng)神經(jīng)元發(fā)育成熟，細(xì)胞狀態(tài)良好時(shí)，用不同濃度的谷氨酸作用于神經(jīng)元細(xì)胞。通過TUNEL和細(xì)胞存活率檢測，結(jié)果表明谷氨酸可使細(xì)胞死亡率明顯升高，并且隨著谷氨酸濃度的升高而升高;谷氨酸濃度為100﹑200 μmol/ L時(shí)，細(xì)胞凋亡率隨著谷氨酸濃度的升高而升高，而濃度為200﹑300﹑400 μmol/ L時(shí)，細(xì)胞凋亡率隨著谷氨酸濃度的升高而下降。由于谷氨酸濃度為100﹑200 μmol/ L時(shí)，細(xì)胞凋亡率高而細(xì)胞死亡率并不高，提示100﹑200 μmol/ L的谷氨酸為誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的最合適濃度。我們在使用谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的前1 d，在實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)元中加入EGF，然后采用TUNEL檢測和臺(tái)盼藍(lán)染色等方法來評價(jià)EGF對神經(jīng)元的保護(hù)作用。該次的研究結(jié)果表明，加入了EGF的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率明顯高于對照組，而細(xì)胞凋亡率卻明顯低于對照組，提示EGF對抗NMDA受體腦炎導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷具有抑制作用，對神經(jīng)元具有保護(hù)作用。而其對神經(jīng)元的保護(hù)作用，可能主要是通過抑制凋亡的途徑來實(shí)現(xiàn)的。

Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用， 其中caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，它在凋亡信號傳導(dǎo)的許多途徑中發(fā)揮作用。caspase-3 正常以酶原的形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段被激活，活化的caspase-3由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[7-8]。在抗NMDA受體腦炎導(dǎo)致的神經(jīng)元凋亡的機(jī)制中，有無caspase-3的參與，而EGF對其表達(dá)有無抑制作用， 為此我們作了caspase-3免疫組化[9-12]。

結(jié)果顯示：谷氨酸損傷使caspase-3蛋白表達(dá)增加，提示caspase-3參與了抗NMDA受體腦炎導(dǎo)致的神經(jīng)元凋亡的機(jī)制; 實(shí)驗(yàn)組的caspase-3蛋白表達(dá)比對照組明顯減少，并且與細(xì)胞凋亡呈高度正相關(guān)，提示EGF可抑制caspase-3蛋白表達(dá)，因此其抑制凋亡的作用可能與抑制caspase-3蛋白表達(dá)有關(guān)。

中國全科醫(yī)學(xué)雜志發(fā)表的文章《堿性成纖維細(xì)胞生長因子對癲癇致誨馬神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用》也做過類似的實(shí)驗(yàn)，采用50 μmol/L的谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡，在實(shí)驗(yàn)組中加入堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF，20 ng/mL），觀察bFGF對損傷神經(jīng)元存活的保護(hù)作用以及caspase-3基因在損傷神經(jīng)元中的表達(dá)情況。在誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡1 d后，實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞存活率（83.8±6.8）%與對照組比較（77.4±6.5）%比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P< 0.05）;實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡率（1.5±0.7）與對照組比較（2.7±1.4）%比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;實(shí)驗(yàn)組的caspase-3基因陽性表達(dá)率（3.8±1.8）與對照組比較（6.2±3.0）%比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與該實(shí)驗(yàn)不同的是，該實(shí)驗(yàn)采用的是濃度為100 μmol/ L的谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡，誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡后加入的是EGF，但說明了EGF對損傷神經(jīng)元也具有保護(hù)作用，以及其抑制凋亡的作用可能與抑制caspase-3蛋白表達(dá)有關(guān)。

綜上所述，該研究提示100μmol/ L谷氨酸可作為抗NMDA受體腦炎導(dǎo)致的神經(jīng)元凋亡的良好模型， EGF對抗NMDA受體腦炎導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷有保護(hù)作用， 可能是EGF通過促使凋亡基因caspase-3表達(dá)減少，抑制神經(jīng)元凋亡發(fā)生從而對抗NMDA受體腦炎誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷起到保護(hù)作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Dong Y，Kalueff AV，Song C. N-methyl-d-aspartate receptor-mediated calcium overload and endoplasmic reticulum stress are involved interleukin-induced neuronal apoptosisin rat hippocampus[J].Neuroimmunol，2017， 307（15）：7-13.

[2] Sayin U， Hutchinson E， Meyerand ME.Age-dependent long-term structural and functional effects of early-life seizures： Evidence for a hippocampal critical period influencing plasticity in adulthood[J].Neuroscience，2015，288（12）： 120-134.

[3] Tian T， Ni H，Sun BL.Neurobehavioral deficits in a rat model of recurrent neonatal seizures are prevented by a ketogenic diet and correlate with hippocampal Zinc/Lipid transporter signals[J]. Biol Trace Elem Res，2015，167（11）：251-258.

[4] Kumari K， Sahni N， Kumari V.Anti-N-Methyl-D-Aspart ate-Receptor Encephalitisin Young Females[J].Anaesthesiol Reanim，2017，45（6）：377-379.

[5] Phillips GD， Jones GN， Callaghan M.Hemiataxia： A Novel Presentation ofAnti-NMDAReceptorAntibody MediatedEnc ephalitisin an Adolescent[J].Case Report Psychiatry，2017，69（12）：25-28.

[6] Li C， Liu C， Lin F.Anti-N-methyl-D-aspartate receptor encephalitisassociated with mediastinal teratoma： a rare case report and literature review[J].Thorac Discovery，2017，9（12）：1118-1121.

[7] Kobayashi M， Nishioka K，Takanashi M.Anti-NMDA receptor encephalitisdue to large-cell neuroendocrine carcinoma of the uterus[J].Neurol Science，2017，15（383）：72-74.

[8] Yang HK， Kim JH， Park YH. Anti-N-methyl-D-aspartate receptor optic neuritis in a patient with a history of encephalitis[J].Ophthalmol，2017，52（6）：216-218.

[9] Jun JS， Seo HG， Lee ST.Botulinum toxin treatment for hypersalivation in anti-NMDA receptor encephalitis[J].Ann Clin Transl Neurol，2017，4（11）：830-834.

[10] Pruss H， Finke C. N-methyl-D-aspartate receptor antibodies in herpes simplex encephalitis[J].Ann Neurol，2012，72（2）：902-904.

[11] Armangue T，Leypoldt F.Herpes simplex virus encephalitis is a trigger of brain autoimmunity[J].Ann Neurol，2014，75（3）：317-320.

[12] Kumar MA，Jain A. Anti-N-methyl-D-aspartate receptor encephalitis during pregnancy[J].Arch Neurol， 2010，67（5）：884-886.

（收稿日期：2018-11-15）