肝素結(jié)合蛋白濃度檢測在膿毒癥診斷中的應(yīng)用價值

張艷 黃深華 何大海 王華麗 陳潔 余華 孔麗蕊

膿毒癥指宿主對感染反應(yīng)失調(diào)引起的致命性器官功能障礙［1］，是炎癥及抗炎癥反應(yīng)平衡失調(diào)所導(dǎo)致的全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response sydrome，SIRS）［2］。膿毒癥按嚴重程度分為膿毒癥和膿毒性休克。機體發(fā)生感染時，多形核白細胞游走伴隨血漿外滲，感染加重發(fā)生SIRS，后發(fā)展為膿毒癥；膿毒癥進一步發(fā)展，合并出現(xiàn)嚴重的循環(huán)、細胞/代謝紊亂失調(diào)，導(dǎo)致膿毒性休克，死亡風(fēng)險增加［3］。相關(guān)研究顯示，對于感染患者延遲給藥治療，其病死率明顯升高［4］。目前，臨床常采用病原學(xué)檢查和實驗室檢測對感染進行診斷，雖然病原學(xué)檢測是感染診斷的金標準，但是其檢測時間較長、標本易污染、培養(yǎng)條件高，且檢出陽性率較低，常會延誤疾病的治療。本研究對肝素結(jié)合蛋白（heparin binding protein，HBP）濃度進行檢測，并與其他檢測指標進行比較，探討HBP 對膿毒癥診斷的應(yīng)用價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象及分組 選取2018 年1 月—12 月本院收治的52 例膿毒癥患者為研究對象，根據(jù)疾病嚴重程度不同分為膿毒癥組（26 例）和膿毒性休克組（26 例），另選35 例健康體檢人群為健康對照組。

1.2 方法

1.2.1 血液標本采集 抽取所有膿毒癥患者入組時外周空腹靜脈血3 管，每管各2.5 mL。一管為無抗凝劑血液，靜置30 min 后分離血清用于降鈣素原（procalcitonin，PCT）檢測；一管EDTA 抗凝全血用于超敏C-反應(yīng)蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）和白細胞計數(shù)（white blood cell count，WBC）檢測；一管為枸櫞酸鈉抗凝血，離心分離血漿用于HBP 檢測。

1.2.2 儀器與試劑 HBP 檢測儀器為北京普朗新科技有限公司，試劑購自中國杭州中翰盛泰公司；PCT 檢測使用mini VIDAS 梅里埃免疫熒光分析儀及其配套檢測試劑；hs-CRP 檢測使用RBD-1000艾瑞德快速免疫分析儀及配套試劑；WBC 檢測使用XT-1800i 希森美康血球儀及其配套試劑。

1.2.3 檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測HBP，采用酶聯(lián)免疫熒光法檢測PCT，采用免疫層析法檢測hs-CRP，采用全自動血球分析儀檢測WBC。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用t 檢驗；計數(shù)資料以例表示，采用χ2檢驗。以臨床是否診斷為膿毒癥作為狀態(tài)變量，以膿毒癥患者檢測數(shù)據(jù)為檢驗變量，繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC），評價各指標對膿毒癥的診斷效能，確定最佳臨界值。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 共納入87例受檢者。所有受檢者性別、年齡方面比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 3 組受檢者的一般資料比較（s）

表1 3 組受檢者的一般資料比較（s）

組別 例數(shù)（例）性別（例） 年齡（歲）男性 女性 范圍x±s健康對照組 35 17 18 6 ～74 55.27±2.68膿毒癥組 26 12 14 3 ～72 54.25±3.25膿毒性休克組 26 11 15 5 ～69 54.68±3.14

2.2 各組間HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 的比較健康對照組、膿毒癥組、膿毒性休克組之間的HBP、PCT、hs-CRP、WBC 兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，其中膿毒性休克組的HBP 升高最為明顯（均P＜0.01）。見表2。

表2 3 組受檢者HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 比較（

表2 3 組受檢者HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 比較（

注：與健康對照組比較，aP＜0.01，bP＜0.05；與膿毒癥組比較，cP＜0.01

WBC（×109/L）健康對照組 35 2.85± 0.76 0.25±0.09 2.63±1.33 7.29±0.80膿毒癥組 26 8.55± 1.27 a 0.38±0.34 b 3.17±1.53 b 9.26±0.87 b膿毒性休克組26 96.72±21.35 ac1.86±0.67 ac10.91±6.21 ac12.49±1.56 b組別 例數(shù)（例）HBP（μg/L）PCT（μg/L）hs-CRP（g/L）

2.3 各檢測指標對膿毒癥和膿毒性休克的診斷價值 HBP 對膿毒癥特別是膿毒性休克的診斷敏感度和特異度均明顯高于PCT、hs-CRP 和WBC（均P＜0.05）。見表3。

表3 HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 診斷膿毒癥和膿毒性休克的敏感度、特異度

2.4 ROC 曲線分析 HBP、PCT、hs-CRP 對膿毒癥均有預(yù)測價值（均P＜0.05），其中HBP 預(yù)測膿毒癥的敏感度和特異度最佳。見圖1，表4。

圖1 HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 預(yù)測膿毒癥的ROC 曲線

表4 HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 對膿毒癥的預(yù)測價值

3 討論

膿毒癥是由于病原菌感染致毒素釋放后形成炎癥介質(zhì)對機體組織造成損害，引起的全身炎癥反應(yīng)，多見于外科大手術(shù)、感染、嚴重創(chuàng)傷等，為嚴重的并發(fā)癥，可能導(dǎo)致多器官功能衰竭（multiple organ failure，MOF）和休克。感染性疾病在臨床的發(fā)病率較高，發(fā)病初期不易被發(fā)現(xiàn)，如果在疾病早期未給予患者有效的診斷和治療，會嚴重影響其健康和生命安全，甚至可造成患者死亡。因此，在感染性疾病中，準確有效的診斷具有重要意義［5］。PCT、hs-CRP、WBC 等檢測常用于感染性疾病診斷，但檢測方法缺陷較多，且檢測準確性較低，如WBC 對感染的診斷準確度和特異度均較低，不能較好地區(qū)分細菌和非細菌感染，也不能反映患者的預(yù)后情況［6］；hs-CRP是一種出現(xiàn)較早的急性時相反應(yīng)蛋白，敏感度高但診斷特異度較低［7］；PCT 僅在感染出現(xiàn)機體全身反應(yīng)時才會產(chǎn)生，局部感染或慢性感染時血清水平正常或輕微升高［8-9］，診斷敏感度和特異度也較低［10］。

HBP存在于中性粒細胞內(nèi)的分泌顆粒和嗜天青顆粒中，當機體發(fā)生感染時，毒素刺激中性粒細胞釋放HBP，造成HBP 升高；HBP 是中性粒細胞被激活后釋放的一種多功能蛋白，同時也是一種促炎癥反應(yīng)介質(zhì)，可使單核細胞和巨噬細胞被激活，導(dǎo)致血管出血，引起組織水腫。相關(guān)研究表明，HBP 與多種感染性疾病存在密切的關(guān)系，通過動態(tài)檢測重癥膿毒血癥和膿毒性休克患者血液中的HBP 濃度，能有效預(yù)測患者可能出現(xiàn)的嚴重并發(fā)癥，進而為患者提供有效的治療［11-12］。多項研究表明，動態(tài)檢測HBP 可作為感染的早期診斷指標，且結(jié)果準確有效［13-14］。

本研究顯示，膿毒癥組和膿毒性休克組的HBP均明顯高于健康對照組，各組間HBP、PCT、hs-CRP和WBC 比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，但HBP 差異更為明顯，更有利于疾病診斷；死亡風(fēng)險增加的膿毒性休克組的HBP 又明顯高于膿毒癥組，提示在嚴重程度評價中也有明顯優(yōu)勢。由此可見，HBP 對膿毒癥的預(yù)測效果優(yōu)于PCT、hs-CRP 和WBC，特別是膿毒性休克組，敏感度和特異度可達100.0%。ROC曲線顯示，HBP 對膿毒癥有重要的預(yù)測價值，其最佳臨界值為7.295 μg/L 時，敏感度和特異度分別為0.625、1.000。

綜上所述，在感染性疾病診斷中應(yīng)用HBP 檢測具有較明顯的診斷優(yōu)勢，有利于感染性疾病患者的早期鑒別診斷，可使膿毒癥患者得到及時治療，從而提高治療效果。HBP 是一種顆粒釋放蛋白，與細菌感染的關(guān)系密切，具有高特異度、高敏感度、高陽性和陰性檢出率等優(yōu)點，能更準確地反映患者是否感染膿毒癥。HBP 作為臨床新型炎癥標志物，其優(yōu)于傳統(tǒng)炎癥標志物［15-16］，且對膿毒癥的早期預(yù)警、預(yù)測評估及療效觀察具有特異性的臨床價值［9,17］。HBP 聯(lián)合PCT、hs-CRP 檢測對患者疾病嚴重程度進行評估在膿毒癥診斷分級中有一定的應(yīng)用價值［18］。