• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    卵巢癌組織HMGN5基因表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系分析

    2019-05-23 02:38:04張培先
    關(guān)鍵詞:卵巢癌免疫組化標(biāo)本

    張 潔 張培先 龍 軼 王 以

    昆明醫(yī)科大學(xué)附屬延安醫(yī)院(650051)

    卵巢癌是女性最常見的三大惡性腫瘤之一,由于缺乏有效的早期診斷方法,超過50%的卵巢癌患者確診時(shí)已為腫瘤晚期,多數(shù)伴隨遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移。國(guó)內(nèi)外臨床資料表明,卵巢癌患者五年生存率低于50%,且復(fù)發(fā)率非常高(80%)[1-3]。卵巢癌病因目前尚不十分清楚,其發(fā)病可能與年齡、生育、血型、精神,環(huán)境及遺傳等因素有關(guān)。本研究分析HMGN5基因在卵巢癌中的表達(dá)變化及與患者臨床病理特征的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 研究資料

    收集2008年1月-2012年12月本院手術(shù)切除的卵巢癌標(biāo)本120例,年齡(50.8±10.5)歲(20~81歲);患者均經(jīng)過病理、影像和臨床診斷為原發(fā)性卵巢癌。根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)分型方法進(jìn)行組織學(xué)分型:漿液性腺癌68例,黏液性腺癌30例,其他類22例。按WHO標(biāo)準(zhǔn)TNM分期進(jìn)行臨床分期:I期21例,II期47例,III期49例和IV期3例。按解剖位置分為左側(cè)卵巢癌38例,右側(cè)卵巢癌55例和雙側(cè)卵巢癌27例。所有患者在手術(shù)前均未進(jìn)行過化療和放療。卵巢癌患者平均隨訪5.2年,最長(zhǎng)8.3年,死亡29例,存活50例,生存信息不祥41例。選取癌旁正常組織35例作為對(duì)照。

    1.2 標(biāo)本處理

    ①冷凍標(biāo)本:手術(shù)后將腫瘤或癌旁卵巢組織(距離至少1cm)編號(hào)放入凍存管迅速置于液氮中速凍,?80℃冰箱保存,用于測(cè)定基因mRNA表達(dá)。②石蠟樣本:手術(shù)后將腫瘤或癌旁卵巢組織放入福爾馬林固定24h,沖洗后進(jìn)行梯度酒精脫水,二甲苯透明,最后浸入石蠟包埋,用于測(cè)定基因蛋白表達(dá)。

    1.3 實(shí)時(shí)定量PCR

    采用液氮研磨和Trizol法提取標(biāo)本組織總RNA,測(cè)定OD260/OD280值。利用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒取5μg總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后儲(chǔ)存待用。實(shí)時(shí)定量PCR使用SYBR Premix Ex Taq II和CFX熒光定量?jī)x器(Bio-RadLaboratories)檢測(cè),結(jié)果分析使用2-ΔΔCT計(jì)算。HMGN5和-actin基因的引物如下:HMGN5-Forward:5'-TAC AAC AAT GCC CAA AAG AAA GGC T-3',HMGN5Reverse:5'-TGT AAC TGG CAC AAG CAT AGC AGA-3';-actin Forward:5'-CCA CGA AAC TAC CTT CAA CTC C-3',-actin Reverse:5'-GTG ATC TCC TTC TGC ATC CTG T-3'。

    1.4 免疫組化

    HMGN5抗體購(gòu)于Abbexa公司。免疫組化操作參考文獻(xiàn)[4]。一抗按1:100稀釋,通過細(xì)胞染色強(qiáng)度進(jìn)行免疫組化結(jié)果定性分析,染色強(qiáng)度≤10%為陰性,>10%為陽(yáng)性。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    應(yīng)用軟件SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,HMGN5基因的mRNA表達(dá)水平用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 標(biāo)本組織中HMGN5的mRNA表達(dá)

    35例卵巢癌組織、21例癌旁組織進(jìn)行了定量PCR檢測(cè),結(jié)果表明,HMGN5的mRNA在卵巢癌旁組織中表達(dá)(1.250±0.1980)低于卵巢癌組織水平(4.589±0.2606)(P<0.0001)。

    2.2 標(biāo)本組織中HMGN5蛋白表達(dá)

    120例卵巢癌組織、35例癌旁組織進(jìn)行了免疫組化分析,HMGN5表達(dá)陽(yáng)性在癌旁組織標(biāo)本中有5例,陽(yáng)性表達(dá)率14.3%;在卵巢癌組織標(biāo)本有88例,陽(yáng)性表達(dá)率73.3%。兩組陽(yáng)性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)。染色結(jié)果見圖1。

    2.3 卵巢癌患者臨床病理特征與HMGN5表達(dá)相關(guān)性分析

    統(tǒng)計(jì)分析顯示,卵巢癌患者HMGN5蛋白表達(dá)與其腫瘤大小、TNM分期和生存狀態(tài)密切相關(guān)(P<0.05);與患者年齡、腫瘤位置、病理分級(jí)和組織學(xué)類型等未見有關(guān)(P>0.05),見表1。

    表1 不同臨床特征卵巢癌患者HMGN5蛋白表達(dá)比較[例(%)]

    3 討論

    卵巢癌是一種發(fā)病率高但非常隱蔽的婦科惡性腫瘤,早期表現(xiàn)不明顯、篩查難以發(fā)現(xiàn)異常,許多患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已為腫瘤晚期并出現(xiàn)了大面積轉(zhuǎn)移,而且在后期化療治療過程中易產(chǎn)生耐藥,卵巢癌死亡率高居女性腫瘤前列[5-6]。目前治療卵巢癌的手段主要是采用外科手術(shù)切除和綜合化療的方式。然而,由于大多數(shù)卵巢癌患者化療后都會(huì)產(chǎn)生不同程度抵抗,使卵巢癌患者的5年生存率非常低[5]。因此,急需針對(duì)不同患者耐藥程度制定個(gè)性化治療方案,從而提高患者的生存時(shí)間和生活質(zhì)量。

    已有研究表明,HMGN5基因在多種人類腫瘤中表達(dá)明顯上調(diào)。在前列腺癌體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均表明,降低HMGN5基因表達(dá)能夠顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖能力[7];在膀胱癌中HMGN5基因能明顯促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和侵襲能力[8-9];在腎癌體內(nèi)外研究顯示,HMGN5基因表達(dá)降低能夠抑制透明腎細(xì)胞癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和侵襲能力[10];在肺癌中干擾HMGN5基因表達(dá)會(huì)顯著導(dǎo)致肺癌細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯[11];在乳腺癌中HMGN5基因表達(dá)明顯上調(diào),且能促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力[12];在骨肉瘤中HMGN5基因表達(dá)與臨床分期關(guān)系密切,抑制HMGN5表達(dá)能夠?qū)е履[瘤細(xì)胞周期阻滯,抑制細(xì)胞侵襲和增加阿霉素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的敏感性[13];在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中干擾HMGN5表達(dá)致使腫瘤細(xì)胞周期阻滯到G1期、細(xì)胞增殖延緩,并出現(xiàn)更多的凋亡細(xì)胞[14]。然而,HMGN5基因在卵巢癌中的表達(dá)和作用目前并不清楚。本研究發(fā)現(xiàn),HMGN5在卵巢癌組織的表達(dá)量明顯高于癌旁組織,且卵巢癌樣本中蛋白表達(dá)陽(yáng)性率高于卵巢癌旁組織,這些結(jié)果提示HMGN5很可能參與了卵巢癌的發(fā)病進(jìn)程,而且很可能是一個(gè)癌基因。

    腫瘤大小和TNM臨床分期在一定程度上反映了腫瘤最基本的生物學(xué)特征。本文進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),HMGN5蛋白陽(yáng)性表達(dá)與卵巢腫瘤大小和臨床分期密切相關(guān),推斷HMGN5表達(dá)上調(diào)與腫瘤進(jìn)展和惡性程度關(guān)系密切。由于腫瘤進(jìn)展和惡性程度影響卵巢癌患者的預(yù)后,推測(cè)HMGN5的陽(yáng)性表達(dá)可能與患者生存時(shí)間有關(guān)。通過深入分析也發(fā)現(xiàn)了密切關(guān)系。這些結(jié)果表明,HMGN5可能在卵巢癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要功能,并可能成為評(píng)估卵巢癌患者預(yù)后的生物標(biāo)志物。

    卵巢癌化療后出現(xiàn)明顯的化療抵抗是患者死亡率高的重要原因。最近有研究發(fā)現(xiàn),HMGN5基因表達(dá)能夠明顯影響腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性[15-17]。提示 HMGN5基因陽(yáng)性表達(dá)與患者不良預(yù)后呈正相關(guān)關(guān)系,可能與腫瘤細(xì)胞化療敏感性密切關(guān)聯(lián),但這一結(jié)論還需深入研究予以證明。

    綜上所述,HMGN5基因參與了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程,是一個(gè)潛在檢測(cè)標(biāo)志物,可能作為腫瘤治療靶標(biāo)和患者預(yù)后評(píng)估指標(biāo)。

    猜你喜歡
    卵巢癌免疫組化標(biāo)本
    昆蟲標(biāo)本制作——以蝴蝶標(biāo)本為例
    鞏義丁香花園唐墓出土器物介紹
    COVID-19大便標(biāo)本采集器的設(shè)計(jì)及應(yīng)用
    夏枯草水提液對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎的治療作用及機(jī)制研究
    卵巢癌:被遺忘的女性“沉默殺手”
    嬰幼兒原始黏液樣間葉性腫瘤一例及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)
    結(jié)直腸癌組織中SOX9與RUNX1表達(dá)及其臨床意義
    Wnt3 a和TCF4在人卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義
    子宮瘢痕妊娠的病理免疫組化特點(diǎn)分析
    microRNA與卵巢癌轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展
    九寨沟县| 汪清县| 普兰店市| 卫辉市| 成安县| 桦川县| 芒康县| 财经| 容城县| 宿松县| 灵宝市| 舞阳县| 莱西市| 通江县| 衡阳市| 叶城县| 达州市| 东乡族自治县| 东兰县| 碌曲县| 江口县| 大田县| 南漳县| 宝丰县| 铁岭县| 全州县| 喀什市| 镶黄旗| 汉源县| 岳普湖县| 西充县| 革吉县| 沁水县| 贵阳市| 响水县| 抚顺市| 札达县| 成安县| 马关县| 东丰县| 维西|