抗禽流感病毒高抗體水平種雞群的動(dòng)態(tài)免疫效果監(jiān)測(cè)及分析

仇薪鑫，李 龍，田格如

(楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

禽流感(Avian Influenza, AI)是一種高度接觸性禽類傳染病，近幾年，高致病性禽流感病毒感染人的情況愈發(fā)嚴(yán)重，對(duì)人類健康和公共衛(wèi)生安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，僅在2017年，中國(guó)人感染H7N9禽流感發(fā)病人數(shù)達(dá)589人，死亡人數(shù)約250人。我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)目前預(yù)防禽流感的主要措施依然是強(qiáng)制進(jìn)行疫苗免疫，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求規(guī)?；B(yǎng)殖企業(yè)，應(yīng)常年保持90%以上的群體免疫密度，并且抗體合格率達(dá)70%以上。

抗體水平的檢測(cè)能夠有效反映畜禽群體的總體抗體水平，有助于我們?cè)u(píng)價(jià)其免疫效果，為合理指導(dǎo)畜禽群體的免疫過程提供基礎(chǔ)。疫病抗體水平的定期、連續(xù)監(jiān)測(cè)可以幫助我們有效地掌握其變化規(guī)律，為不斷改進(jìn)和優(yōu)化免疫程序提供支撐，為評(píng)估該病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)、摸清該病的流行現(xiàn)狀和評(píng)價(jià)其疫苗免疫質(zhì)量提供依據(jù)，更重要的是可以幫助養(yǎng)殖企業(yè)合理控制免疫成本，保證生產(chǎn)過程，提高效益。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)對(duì)象 陜西省某規(guī)模化種雞場(chǎng)A5、B5兩棟舍的雞群，品種是德國(guó)薩索肉雞。

1.1.2 試劑材料 禽流感病毒H9亞型和H5亞型血凝抑制試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)抗原(青島易邦生物技術(shù)有限公司)，H9抗原生產(chǎn)批號(hào)：201502，H5抗原生產(chǎn)批號(hào)：201507；陽(yáng)性血清(中國(guó)哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司)。

PBS緩沖液(pH7.2，0.01 mol·L-1)，3.8%檸檬酸鈉抗凝劑，均為自制。

1.2 方法

1.2.1 抽樣 A5舍2 000只雞、B5舍1 980只雞，在保證正常生產(chǎn)的情況下，計(jì)劃從6周齡開始，每?jī)芍芊謩e從兩棟雞舍隨機(jī)采集血清樣品50份。

1.2.2 微量法血凝試驗(yàn)(HA)與血凝抑制試驗(yàn)(HI) 依據(jù)《GB/T 16550-2008 新城疫診斷技術(shù)》中所規(guī)定的血清學(xué)試驗(yàn)診斷方法。

1.2.3 免疫程序 免疫程序見表3。

2 結(jié)果

開產(chǎn)日齡150 d左右，將開產(chǎn)前的免疫階段定為基礎(chǔ)免疫階段。

2.1 基礎(chǔ)免疫階段抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表2、3結(jié)果顯示，經(jīng)過基礎(chǔ)免疫，在開產(chǎn)時(shí)兩組雞群AI H5平均抗體水平能夠達(dá)到11 log2，AI H9能夠達(dá)到12 log2～13 log2。在以HI效價(jià)≥4 log2為合格標(biāo)準(zhǔn)的情況下，雞群AIH5、AI H9抗體水平整體合格率為100%。基礎(chǔ)免疫過程中，兩組雞群AIH5、AI H9平均抗體水平都呈不斷上升趨勢(shì)，變化基本同步。說明在此免疫程序下，雞群在開產(chǎn)時(shí)能夠達(dá)到較高AIH5、AI H9抗體水平，免疫效果較好。

2.2 生產(chǎn)階段抗體水平檢測(cè)結(jié)果

注：140日齡后每?jī)蓚€(gè)月注射一次AI H9滅活疫苗，0.5 mL·只-1；每三個(gè)月注射一次AI H5滅活疫苗，0.5 mL·只-1。

表2 基礎(chǔ)免疫階段AIH5抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表3 基礎(chǔ)免疫階段AIH9抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表4 生產(chǎn)階段AIH5抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表5 生產(chǎn)階段AIH9抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表4、表5結(jié)果顯示，整個(gè)生產(chǎn)階段兩組雞群AI H5平均抗體水平基本保持在11 log2～12 log2，總體HI效價(jià)在8 log2～15 log2之間；AI H9平均抗體水平維持在12 log2～14 log2，整體抗體水平主要在10 log2～16 log2之間，免疫效果較好。在產(chǎn)蛋高峰期時(shí)，AI H5的抗體水平能夠達(dá)到12 log2，生產(chǎn)后期平均抗體水平呈下降趨勢(shì)，AI H9平均抗體水平主要維持在13 log2～14 log2，說明在建立起高抗體水平雞群后，經(jīng)過每三個(gè)月免疫一次AI H5滅活疫苗，兩個(gè)月免疫一次AI H9滅活苗的強(qiáng)化免疫，能夠使雞群在全部生產(chǎn)階段維持較高的抗體水平，有效抵御AI H5、AI H9病毒的侵襲，保證了生產(chǎn)效益。

3 討論

一般在疫病防控工作中，基于我國(guó)針對(duì)重大動(dòng)物疫病所提倡的“應(yīng)免盡免，不留空當(dāng)”的理論依據(jù)，對(duì)于規(guī)?；B(yǎng)殖的雞群，主要通過科學(xué)地提高免疫頻次和免疫比例，從而使雞群獲得較好的免疫水平。由于行業(yè)內(nèi)對(duì)于此類重大動(dòng)物疫病無廣泛認(rèn)可的保護(hù)性抗體水平標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)前階段，我們主要以雞群群體免疫合格率和抗體水平的均勻度為評(píng)價(jià)指標(biāo)。當(dāng)雞群群體免疫合格率高，抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果均勻時(shí)，表明雞群群體免疫力較高，雞群抵御疫病的能力強(qiáng)，免疫效果較好，特異性疫病爆發(fā)和流行的幾率較??；若相反，則雞群群體免疫力低下，雞群抵御疫病的能力較弱，免疫效果較差，相關(guān)特異性疫病發(fā)生和流行的幾率較大。同樣情況下，如果特異性抗體水平維持時(shí)間越長(zhǎng)，說明其免疫質(zhì)量越好，反之則越差[8]。

由于生產(chǎn)過程中雞群不斷淘汰，生產(chǎn)后期樣本數(shù)量有所下降，但基本不影響其免疫效果的評(píng)估。在不斷跟蹤檢測(cè)其禽流感病毒抗體水平動(dòng)態(tài)變化的過程中，發(fā)現(xiàn)通過基礎(chǔ)免疫階段，在雞群開產(chǎn)時(shí)，AI H5的平均抗體水平基本達(dá)到11 log2，AI H9的平均抗體水平基本達(dá)到13 log2。主要生產(chǎn)階段，通過不斷強(qiáng)化免疫，能夠使雞群一直保持高AIV抗體水平，AI H5平均抗體水平維持在11 log2～12 log2，AI H9平均抗體水平維持在12 log2～14 log2。說明此免疫程序下，能夠有效建立產(chǎn)生抗禽流感病毒的高抗體水平種雞群，生產(chǎn)階段呈均勻、整齊的群體免疫水平，免疫質(zhì)量較好，能夠有效抵御這兩種病毒的侵襲，很好地保證生產(chǎn)過程。