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      健胃散對胃黏膜損傷的保護(hù)作用及對胃腸道蠕動的推進(jìn)作用△

      2019-05-13 08:47:42呂曉黃先菊王大貴郭燕燕楊忍
      中國現(xiàn)代中藥 2019年4期
      關(guān)鍵詞:藥組箭頭無水乙醇

      呂曉,黃先菊,王大貴,郭燕燕,楊忍

      中南民族大學(xué) 藥學(xué)院,湖北 武漢 430074

      近幾十年來,飲酒人群大幅上升,急性酒精性胃黏膜損傷發(fā)病率隨之升高。研究顯示,經(jīng)口攝入高濃度乙醇可直接侵蝕胃黏膜組織,引起胃黏膜屏障受損,胃黏膜急性炎癥,出現(xiàn)胃黏膜充血、水腫、出血、糜爛及潰瘍形成等癥狀[1]。短時間內(nèi)大量飲酒可引起幽門痙攣,延長胃的排空時間,引起惡心、嘔吐等癥狀,胃鏡下常表現(xiàn)為急性出血糜爛胃炎。

      乙醇不僅可直接作用于胃黏膜造成其表層損傷,而且能夠削弱胃黏膜防御因子的保護(hù)作用,是不容忽視的強(qiáng)烈的致傷性胃黏膜攻擊因子。預(yù)防和治療胃黏膜損傷的相關(guān)研究日益受到研究學(xué)者的廣泛關(guān)注[2]。根據(jù)中醫(yī)理論指導(dǎo),健胃散由雞內(nèi)金、海螵蛸、三七、黃芪等中藥材組成處方,相輔相成,共同發(fā)揮療效,對無水乙醇作用導(dǎo)致的胃黏膜損傷有良好的預(yù)治療作用,增強(qiáng)胃黏膜的自我保護(hù)功能,并有促進(jìn)胃腸蠕動的作用,促進(jìn)消化,減少胃內(nèi)不良影響物的停留時間。

      在本次實(shí)驗(yàn)中,對健胃散能保護(hù)胃黏膜以及促進(jìn)胃腸蠕動進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

      1 材料和儀器

      1.1 動物

      SPF級KM小鼠,體質(zhì)量(22±5)g,由湖北省實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供,許可證號:SCXK(鄂)2016-0089。

      1.2 藥品和試劑

      呂氏健胃散(由雞內(nèi)金、三七、黃芪、海螵蛸等10味藥物組方而成)。將藥材粉碎成散劑,4 ℃下貯存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)時以蜂蜜+純化水配置成混懸液使用。無水乙醇,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品(批號:20170605);通用型組織固定液(4%多聚甲醛、PB緩沖液)武漢博爾夫生物科技有限公司;生理鹽水,武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司(批號:1705030804)。碳末混懸液。

      1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

      手術(shù)剪、鑷子、游標(biāo)卡尺、直尺、1 mL注射器。

      2 方法

      2.1 胃黏膜損傷實(shí)驗(yàn)

      選取檢疫合格的KM小鼠30只,適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后,雌雄各半隨機(jī)分為空白對照組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組,每組6只??瞻讓φ战M和模型組連續(xù)5 d每天灌胃0.2 mL/10 g生理鹽水,健胃散成人日用劑量為6~9 g/60 kg,小鼠用量為人的10倍,最低劑量設(shè)為成人用量6 g/60 kg的10倍;中劑量設(shè)為成人用量9 g/60 kg的10倍;最高劑量設(shè)為成人用量9 g/60 kg的15倍。給藥組連續(xù)5d每天按計劃量灌胃給藥,喂養(yǎng)至第5 d時所有組進(jìn)行禁食不禁水24 h后,除空白對照組外,其余組灌胃給予無水乙醇0.1 mL/10 g,1 h后處死動物,暴露完整胃,結(jié)扎幽門,灌注適量10%甲醛溶液,固定20 min,然后沿胃大彎剪開,洗凈胃內(nèi)容物,展開胃黏膜,用游標(biāo)卡尺測量出血點(diǎn)或出血帶的長度和寬度。

      2.2 胃腸道推進(jìn)實(shí)驗(yàn)

      選取檢疫合格的KM小鼠24只,適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后,雌雄各半隨機(jī)分為空白對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組,每組6只。禁食不禁水8 h后給藥一次。空白對照組灌胃0.2 mL/10 g生理鹽水,給藥組給藥量同上。30 min后,每組灌胃給予碳末混懸液0.2 mL,20 min后,脫頸椎處死,立即剖開腹腔,分離腸系及幽門,測出幽門至碳末距的長度和小腸的總長度,求得二者的比值為推進(jìn)率。

      2.3 觀察指標(biāo)及檢測方法

      2.3.1 動物生長情況觀察 實(shí)驗(yàn)期間觀察動物精神、活動、毛色、進(jìn)食、飲水等生理情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時記錄體質(zhì)量的變化。

      2.3.2 各實(shí)驗(yàn)組胃黏膜損傷程度 以損傷發(fā)生率、損傷積分指數(shù)和損傷抑制率表示。

      (1)

      (2)

      (A、B分別為模型組與試驗(yàn)組的損傷積分)

      (3)

      2.3.3 各實(shí)驗(yàn)組胃腸推進(jìn)結(jié)果檢測 通過測量小腸的總長度和幽門至碳末距的長度,求出推進(jìn)率來觀測藥品對小鼠胃腸的推進(jìn)作用。

      (4)

      2.4 統(tǒng)計方法

      3 結(jié)果

      3.1 動物一般身體情況觀察

      各組小鼠在飼養(yǎng)期間均精神狀態(tài)良好,反應(yīng)靈敏,行動自如,皮毛光澤油亮,體質(zhì)量變化不明顯。

      3.2 健胃散對小鼠體質(zhì)量的影響

      各組KM小鼠實(shí)驗(yàn)期間體質(zhì)量變化情況見表1。如表1所示,在本實(shí)驗(yàn)室條件下,健胃散對小鼠的生長無顯著影響。

      表1 小鼠試驗(yàn)期間體質(zhì)量變化情況

      3.3 健胃散對無水乙醇所致胃黏膜損傷的影響

      無水乙醇損傷1 h后,解剖各小鼠胃部,肉眼可見對照組小鼠胃黏膜光滑完整,沒有出血現(xiàn)象。其余各組小鼠均出現(xiàn)了黏膜出血、組織壞死。模型組動物損傷最為嚴(yán)重,表現(xiàn)為大塊的出血面積,呈鮮紅色。高、中、低劑量給藥組則表現(xiàn)為點(diǎn)狀或條狀出血,出血面積明顯縮小(圖1)。根據(jù)評分標(biāo)準(zhǔn)計算各組動物損傷評分(表2,圖2)。空白組小鼠沒有發(fā)生損傷(損傷發(fā)生率為0),低劑量組和中劑量組的胃黏膜損傷發(fā)生率均為100%,高劑量組損傷發(fā)生率為40%。胃保護(hù)產(chǎn)品各個劑量組損傷抑制率分別為低劑量組50%,中劑量組62.5%,高劑量組90%,結(jié)果證實(shí)胃保護(hù)產(chǎn)品對胃黏膜損傷的保護(hù)具有劑量依賴性。健胃散可劑量依賴性地減輕無水乙醇所致的胃黏膜損傷。減輕胃黏膜損傷程度,具有良好的胃黏膜保護(hù)作用。

      表2 各組動物胃黏膜損傷評分情況

      注:—表示不需要計算損傷抑制率。

      注:***表示與模型組比較,P<0.01。圖2 各組小鼠胃黏膜損傷積分比較

      3.4 健胃散對無水乙醇所致胃病理組織學(xué)影響

      通過出血點(diǎn)計算損傷抑制率及病理組織學(xué)分析可發(fā)現(xiàn)胃保護(hù)產(chǎn)品各個劑量組對胃黏膜損傷的保護(hù)效果均顯著,可有效降低無水乙醇造成的急性胃黏膜損傷,并且作用具有劑量依賴性。病理學(xué)檢查結(jié)果與肉眼大體觀察結(jié)果一致(圖3),對照組動物組織整體結(jié)構(gòu)基本正常,黏膜層無明顯壞死及變形,組織無明顯炎癥。模型組動物胃黏膜損傷最為嚴(yán)重。組織整體結(jié)構(gòu)重度異常,黏膜層廣泛糜爛壞死,并可見大量紅細(xì)胞,如紅色箭頭所示;黏膜下層重度水腫,如黑色箭頭所示。健胃產(chǎn)品各個給藥組對胃黏膜損傷均有改善作用,且呈現(xiàn)劑量依賴性(圖3)。低劑量組動物胃組織整體結(jié)構(gòu)中度異常,黏膜層可見上皮細(xì)胞點(diǎn)狀壞死,并可見少量出血,如黑色箭頭所示;黏膜層可見少量炎癥細(xì)胞浸潤,炎癥細(xì)胞以中性粒細(xì)胞為主,如黃色箭頭所示;黏膜下層可見水腫,如紅色箭頭所示。黏膜層部分動脈可見充血,如綠色箭頭所示。中劑量組組織整體結(jié)構(gòu)輕度異常,黏膜層結(jié)構(gòu)基本正常,黏膜上皮無明顯壞死變性;黏膜下層輕度水腫,部分腸壁脫落,如黑色箭頭所示。黏膜層部分動脈可見充血,如紅色箭頭所示。高劑量組組織整體結(jié)構(gòu)輕度異常,黏膜層無明顯壞死及變形;黏膜下層可見輕度水腫,如黑色箭頭所示;組織無明顯炎癥細(xì)胞浸潤。

      注:A.對照組;B.模型組;C.低劑量組;D.中劑量組;E.高劑量組;圖中箭頭指向出血位置。圖1 各組動物胃解剖圖

      注:A.對照組;B.模型組;C.低劑量組(0.6 g·kg-1×10);D.中劑量組(0.9 g·kg-1×10); E.高劑量(0.9 g·kg-1×15)組。圖3 各組動物胃黏膜病理圖

      3.5 健胃散對胃腸道推進(jìn)的作用

      一種物質(zhì)如果能加速腸道的蠕動,則性能加速小腸的推進(jìn)運(yùn)動,從而促進(jìn)倡導(dǎo)腸道內(nèi)容廢物的排空速度,減少代謝廢物在腸內(nèi)的停留時間,即減少廢物,有害物對腸道的惡性刺激時間,從而對腸道起到保健作用[7-9]。在本實(shí)驗(yàn)室條件下,從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可看出,空白組小鼠推進(jìn)率為37.96%,健胃散各個劑量組推進(jìn)率分別為低劑量組63.9%,中劑量組58.2%,高劑量組57.5%,結(jié)果證實(shí)健胃散對胃腸有推進(jìn)作用并且作用不具有劑量依賴性。但三個給藥組的推進(jìn)率都大于生理鹽水組,且各個給藥組與對照組相比存在顯著差異(P<0.01)說明此藥有推進(jìn)胃腸蠕動的作用,結(jié)果證實(shí)胃保護(hù)產(chǎn)品對胃腸道的推進(jìn)作用但不具有劑量依賴性。結(jié)果見表3及圖4。

      表3 各組動物胃腸推進(jìn)情況總析

      注:**表示與對照組比較,P<0.01。圖4 各組胃腸推進(jìn)率比較

      4 討論

      健胃散中的主要成分黃芪含有黃芪總苷,研究發(fā)現(xiàn)黃芪總苷具有保護(hù)胃黏膜屏障,維持組織結(jié)構(gòu)完整性,調(diào)節(jié)整體胃酸分泌重要作用[3];主要成分雞內(nèi)金可激活保護(hù)胃黏膜相關(guān)因子,改善胃黏膜損傷引起的不適,調(diào)整胃腸功能[4-5];主要成分海螵蛸性咸、澀、微溫,具有收斂止血、制酸止痛等功效[6];主要成分三七中含有人參皂苷,可抗炎止血[7],對胃黏膜損傷導(dǎo)致的出血有止血的功效;配方中大黃含有蒽醌類生物活性成分,具有瀉下作用,少量的大黃能促進(jìn)胃排空。健胃散中的各成分相輔相成,共同發(fā)揮保護(hù)胃黏膜的作用,我們對其中的保護(hù)機(jī)制將進(jìn)一步探究。

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