重組人促紅細(xì)胞生成素對早產(chǎn)貧血患兒神經(jīng)行為發(fā)育和外周血白細(xì)胞介素表達(dá)的影響*

何興宇，邊朋，張怡

(冀中能源峰峰集團(tuán)有限公司總醫(yī)院北院區(qū)新生兒科，邯鄲 056201)

促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)是一種主要是由腎臟和肝臟分泌的活性糖蛋白，可以通過與紅細(xì)胞上特異性EPO受體結(jié)合，從而促進(jìn)紅細(xì)胞增殖、分化、成熟[1-2]。重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinant human erythropoietin，rhEPO)具有促進(jìn)紅系造血祖細(xì)胞的分化、促進(jìn)紅細(xì)胞生成的作用，還是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子，可改善由多種原因所導(dǎo)致的腦損傷，可改善腦損傷導(dǎo)致的認(rèn)知學(xué)習(xí)損害、神經(jīng)行為發(fā)育障礙[3]。對于臨床早產(chǎn)兒貧血情況以往通常多采用補(bǔ)充鐵劑治療，但隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，rh-EPO已成為治療新生兒貧血的新方法。目前國內(nèi)外研究中rh-EPO對于外周血單核細(xì)胞IL-17和IL-23的表達(dá)影響的研究較少，因此，2015年7月—2017年9月本研究通過對rh-EPO治療后的患兒的外周血單核細(xì)胞IL-17和IL-23表達(dá)的變化，來探究其關(guān)聯(lián)性，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 納入標(biāo)準(zhǔn)：胎齡<37周；出生體質(zhì)量1000～2000 g；頭圍<33 cm；頭顱B超檢查有腦損傷。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并先天性心臟?。桓腥拘约膊?；研究前使用過rh-EPO治療；不符合早產(chǎn)兒診斷標(biāo)準(zhǔn)。選取我院收治的早產(chǎn)兒64例作為研究對象。所有患兒均符合《實(shí)用新生兒學(xué)》[4]中早產(chǎn)兒貧血診斷指標(biāo)：生后 2 周內(nèi)，末梢血血紅蛋白(hemoglobin，Hb)≤145 g·L-1；生后 2 周至 1 個(gè)月，末梢血Hb<110 g·L-1;出生 1 個(gè)月后，末梢血Hb<90 g·L-1。其中男41例，女23例；胎齡28～35周，平均(31.2±2.3)周；體質(zhì)量1510～1913 g，平均為(1732±180) g。將64例患兒簡單隨機(jī)分配為治療組與對照組，每組32例。兩組患兒性別、年齡、體質(zhì)量等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究已通過我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患兒家屬均知情同意。

1.2治療方法 兩組患兒均給予常規(guī)治療，常規(guī)治療包括維持水、電解質(zhì)酸堿平衡，維持溫度、呼吸和營養(yǎng)支持，并在出生后2～3 d給予腦活素2 mL·d-1，10 d為一個(gè)療程。對照組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，于出生后第10天開始服用琥珀酸亞鐵(四川奧邦藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20083003)，根據(jù)元素鐵6 mg·kg-1·d-1計(jì)算，并口服維生素C(四川衣科制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H51020297)0.2 g·d-1、維生素E(華潤雙鶴藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H11022348)25 mg·d-1。治療組在對照組治療的基礎(chǔ)上皮下注射rh-EPO(沈陽三生制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字201112186S)500 U·kg-1，每周3次。兩組患兒治療時(shí)間均為5周。

1.3觀察指標(biāo) 新生兒神經(jīng)行為評定[5](neonatal neurobehavioral assessment，NBNA)：NBNA評分表共20個(gè)項(xiàng)目，每項(xiàng)最高2分，最低0分，總分為40分，當(dāng)評分<35分時(shí)，提示新生兒有腦損傷。共分為5個(gè)部分，①行為能力，②被動(dòng)肌張力，③主動(dòng)肌張力，④原始反射，⑤一般估價(jià)。

Gesell發(fā)育量表[6]：評分包括粗大運(yùn)動(dòng)、精細(xì)運(yùn)動(dòng)、適應(yīng)性行為、語言、個(gè)人社會(huì)性行為五項(xiàng)。

Apgar量表[7]：評分包括肌張力、脈搏、皺眉動(dòng)作、外貌、呼吸五項(xiàng)，滿10分為正常新生兒，小于7分考慮新生兒有輕度窒息，小于4分考慮患有重度窒息。

外周血IL-17、IL-23含量的檢測：治療前與治療后4周抽取患兒空腹靜脈血2 mL，置于抗凝管中，離心取上層清液，采用RT-PCR檢測所有患者治療前后外周單核細(xì)胞IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達(dá)量。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0版軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組患兒一般資料的對比 兩組患兒一般資料對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，研究具有可比性。見表1。

2.2兩組患兒治療前、治療后4周神經(jīng)行為發(fā)育情況比較 治療組與對照組在治療前NBNA評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，治療組與對照組治療后4周均比治療前NBNA評分高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療組治療后4周NBNA評分高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3兩組患兒治療后12周Gesell發(fā)育量表比較 兩組患兒治療后4個(gè)月Gesell評定顯示，治療組粗大運(yùn)動(dòng)、精細(xì)運(yùn)動(dòng)、適應(yīng)性行為、語言、個(gè)人—社會(huì)性行為得分均高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.4兩組患兒治療前、治療后4周IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達(dá)量的比較 兩組患兒治療前IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達(dá)量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，治療后4周治療組與對照組前IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達(dá)量均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療組治療后4周IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達(dá)量均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

3 討論

3.1我國早產(chǎn)兒情況及早產(chǎn)兒貧血的治療措施 早產(chǎn)兒是指胎齡小于37周的活產(chǎn)嬰兒，其出生體質(zhì)量大部分<2500 g，頭圍<33 cm。我國早產(chǎn)兒的發(fā)生率為9.9%，病死率為12.7%～20.8%，新生兒早產(chǎn)已發(fā)展成為我國新生兒死亡最主要原因。貧血是早產(chǎn)兒出生后最常見的并發(fā)癥之一，貧血的發(fā)生率隨著早產(chǎn)兒胎齡的減小而逐漸升高，胎齡越小，出現(xiàn)貧血的概率越高[8]。貧血會(huì)對早產(chǎn)兒生長發(fā)育造成巨大的影響，長時(shí)間貧血會(huì)使早產(chǎn)兒大腦缺血缺氧，從而導(dǎo)致腦損傷。目前臨床上的治療方法主要是以促紅細(xì)胞生成素及鐵劑類藥物的使用為主[9]。早產(chǎn)兒EPO水平低是造成貧血的主要原因，臨床上使用rh-EPO能有效解決早產(chǎn)兒的貧血情況。

表1 兩組患兒一般資料比較

Tab.1Comparisonofgeneraldatabetweentwogroupsofinfants

組別性別男女出生體質(zhì)量/g胎齡/周Apgar評分1 min5 min對照組21111670.4±127.833.1±1.57.4±1.48.5±1.1治療組20121641.2±125.432.4±1.47.4±1.38.5±1.0

表2 治療前后兩組患兒NBNA評分比較

Tab.2ComparisonofNBNAscoresbetweentwogroupsofinfantsbeforeandaftertreatment

分，

與對照組比較，*1P<0.05

Compared with control group，*1P<0.05

表3 兩組患兒治療后12周Gesell發(fā)育量表評分比較

Tab.3ComparisonofGeselldevelopmentscalebetweentwogroupsofinfantsat12weeksaftertreatment

分，

表4 兩組患兒外周血IL-17和IL-23相對表達(dá)量比較

Tab.4ComparisonofIL-17andIL-23relativeexpressioninperipheralbloodbetweentwogroupsofinfants

組別與時(shí)間IL-17IL-23對照組 治療前0.5±0.10.4±0.1 治療后4周0.4±0.10.2±0.11治療組 治療前0.5±0.10.4±0.1 治療后4周0.2±0.1?10.1±0.1?1

與對照組比較，*1P<0.05

Compared with control group，*1P<0.05

3.2rh-EPO對早產(chǎn)貧血患兒神經(jīng)行為發(fā)育的影響 近年來，大量研究顯示，EPO不僅可以用于治療早產(chǎn)兒貧血，而且對中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有神經(jīng)保護(hù)的作用[10-12]。董海鵬等[13]通過對胎齡<34周，出生體質(zhì)量<2500 g的腦損傷早產(chǎn)兒194例研究發(fā)現(xiàn)，早產(chǎn)兒血清EPO水平越低，腦損傷的發(fā)生率越高，EPO對神經(jīng)系統(tǒng)具有一定的保護(hù)作用，但EPO對神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)作用的具體機(jī)制尚未明確。本研究結(jié)果顯示，rh-EPO治療后患兒NBNA評分要高于未經(jīng)rh-EPO治療的患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這說明rh-EPO的使用有助于患兒神經(jīng)行為發(fā)育，對患兒腦損傷有一定的保護(hù)作用。在本研究中，兩組患兒在治療后12周Gesell量表評分顯示，治療組粗大運(yùn)動(dòng)、精細(xì)運(yùn)動(dòng)、適應(yīng)性行為、語言、個(gè)人-社會(huì)性行為得分均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明了rh-EPO對缺血缺氧所導(dǎo)致的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育損傷有一定的修復(fù)作用，可改善神經(jīng)元功能[14～16]。有研究發(fā)現(xiàn)，新生小白鼠經(jīng)過多次使用EPO可改善缺血缺氧后的神經(jīng)發(fā)育問題，預(yù)防因缺血缺氧腦損傷所引起的多巴胺通路神經(jīng)元消耗[17]。相關(guān)研究認(rèn)為，EPO可通過減輕腦水腫程度、促進(jìn)血管再生等發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)的作用[18]。

綜上所述，rh-EPO有助于貧血早產(chǎn)兒神經(jīng)行為的發(fā)育，對腦損傷有一定的保護(hù)作用，可降低IL-17，IL-23促炎細(xì)胞因子的表達(dá)。