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      分子生物學(xué)技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用探析

      2019-04-29 00:00:00姜來迎許程李長昕
      健康護(hù)理 2019年2期

      摘要:近年來,頻發(fā)的食品安全事故使得人們對(duì)于食品安全有了更高的關(guān)注度,相關(guān)機(jī)構(gòu)也加大了對(duì)食品的檢驗(yàn)檢測(cè)力度,但是要全面性、準(zhǔn)確性的檢出食品中的有毒有害物質(zhì),還需要利用先進(jìn)的技術(shù)。分子生物學(xué)是目前食物檢測(cè)中利用到的一種重要方法,其穩(wěn)定性好、可靠性高,對(duì)于檢測(cè)質(zhì)量的保證起著突出的作用,所以強(qiáng)化其應(yīng)用的現(xiàn)實(shí)價(jià)值顯著。就當(dāng)前的食品檢測(cè)分析來看,微生物是食品檢測(cè)中的重要內(nèi)容,因此在微生物檢測(cè)中深化分析生物技術(shù)的具體應(yīng)用必然會(huì)具有突出的成效?;诖?,本文就分子生物學(xué)技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)中的具體應(yīng)用做探析,旨在為實(shí)踐提供指導(dǎo)。

      關(guān)鍵詞:分子生物學(xué)技術(shù);食品微生物;檢驗(yàn);應(yīng)用

      隨著食品安全事故的頻發(fā),人們對(duì)食品安全的重視度有了普遍的提升,所以有關(guān)部門和機(jī)構(gòu)在食品安全檢驗(yàn)方面的工作在進(jìn)行著不斷的強(qiáng)化,就目前的具體分析來看,食品安全檢驗(yàn)中的一項(xiàng)重要內(nèi)容是做微生物的檢驗(yàn),因?yàn)槲⑸锏姆N類、含量等會(huì)嚴(yán)重影響到食物的品質(zhì),所以采用科學(xué)的分析方法對(duì)食品中的微生物種類和含量做具體的判斷現(xiàn)實(shí)意義顯著。分子生物學(xué)技術(shù)在食品安全檢驗(yàn)中能夠很好的對(duì)微生物做具體的檢測(cè),所以在實(shí)踐中強(qiáng)化對(duì)其的應(yīng)用具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

      一、分子生物學(xué)技術(shù)概況

      在生命科學(xué)和化學(xué)不斷發(fā)展進(jìn)步的基礎(chǔ)上,人們對(duì)于生物體的認(rèn)知逐漸的走向了微觀,實(shí)現(xiàn)了對(duì)生物體由單個(gè)生物整體到器官到組織再到細(xì)胞的認(rèn)知深入,目前,人們對(duì)生物的認(rèn)知已經(jīng)深入到了細(xì)胞結(jié)構(gòu)核酸和蛋白的分子水平。就當(dāng)前研究來看,利用對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)核酸和蛋白分子水平的掌握,可以橫向比較不同物種,同物種不同個(gè)體,同個(gè)體不同細(xì)胞或不同生理(病理)狀態(tài)的差異,而這種差異分析可以可具體的病理學(xué)判斷或者是生物學(xué)檢測(cè)提供準(zhǔn)確的依據(jù)。在食品微生物檢測(cè)中,利用分子生物學(xué)技術(shù)可以更好的判斷食品中微生物的種類和含量,這對(duì)于保障食品安全來講有著重要的意義。

      而就現(xiàn)階段的分析生物學(xué)技術(shù)具體利用來看,在食品微生物檢驗(yàn)當(dāng)中利用比較普遍的有三種,分別是基因芯片技術(shù)、基因探針技術(shù)和PCR技術(shù),這三種技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)中的利用價(jià)值突出,所以需要對(duì)其做全面性的細(xì)節(jié)化分析。

      二、分子生物學(xué)技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用

      分子生物學(xué)技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)當(dāng)中進(jìn)行運(yùn)用能夠根據(jù)微生物的分子結(jié)構(gòu)序列差異來判斷微生物的具體種類以及其含量,這樣可以對(duì)食品當(dāng)中的微生物有具體的了解。而從現(xiàn)階段的分析來看,威脅食品安全的微生物種類是固定的,具體微生物數(shù)量對(duì)食品的質(zhì)量破壞也是有標(biāo)準(zhǔn)的,所以在獲取檢驗(yàn)結(jié)果之后進(jìn)行比對(duì)可以準(zhǔn)確的對(duì)食品的安全做出評(píng)價(jià),這對(duì)于食品安全質(zhì)量控制來講意義顯著。

      (一)基因探針技術(shù)

      基因探針技術(shù)是目前的食品微生物檢驗(yàn)遇到的比較常用的技術(shù),也稱之為分子雜交技術(shù),主要指的是利用DNA分子的變性、復(fù)性以及堿基互補(bǔ)配對(duì)的高度精確性,對(duì)某一特異性DNA序列進(jìn)行探查的新技術(shù)。從實(shí)際利用來看,所謂的基因探針指的是利用同位素、生物素等標(biāo)記的特定DNA片斷。就技術(shù)原理分析來件,互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠進(jìn)行雜交,這種結(jié)合是特異的,即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行,它不僅能在DNA和DNA之間進(jìn)行,也能在DNA和RNA之間進(jìn)行,所以利用其做具體的檢驗(yàn),微生物的種類分析和數(shù)量分析會(huì)更加的準(zhǔn)確。

      從當(dāng)前的具體利用分析來看,要在微生物檢驗(yàn)中利用基因探針技術(shù)需要具備兩個(gè)基本的條件。第一是具有特異性的DNA探針必須要有,第二是基因組DNA必須要存在,如果這兩個(gè)條件不能滿足,檢驗(yàn)無法進(jìn)行。從探針的分析來看,其需要攜帶DNA,而其的來源主要有三種方式:其一是一種來自基因組中有關(guān)的基因本身,稱為基因組探針;另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNa 探針;此外,還可在體外人工合成堿基數(shù)不多的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段,稱為寡核苷酸探針,目前的技術(shù)利用,所使用的探針多為寡核苷酸探針。

      (二)基因芯片技術(shù)

      基因芯片技術(shù)也是目前微生物檢測(cè)中利用到的一種較為普遍的分子生物學(xué)技術(shù)。就此技術(shù)的具體分析來看,其檢驗(yàn)的原理是:通過與一組已知序列的核酸探針雜交進(jìn)行核酸序列測(cè)定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當(dāng)溶液中帶有熒光標(biāo)記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對(duì)應(yīng)位置的核酸探針產(chǎn)生互補(bǔ)匹配時(shí),通過確定熒光強(qiáng)度最強(qiáng)的探針位置,獲得一組序列完全互補(bǔ)的探針序列,據(jù)此可重組出靶核酸的序列。

      從目前的技術(shù)利用來看,在微生物的具體檢驗(yàn)中,為了能夠使此技術(shù)發(fā)揮出較好的效果,一般需要做三部分工作:第一是制備基因芯片?;蛐酒菣z驗(yàn)中需要利用的重要工具,如果芯片本身不具備可參考性,那么其檢驗(yàn)價(jià)值便會(huì)大打折扣,所以需要制備出標(biāo)準(zhǔn)性較高的基因芯片。第二是確定對(duì)比、判斷標(biāo)準(zhǔn),這樣可以更加準(zhǔn)確的獲得具有可參考性的檢驗(yàn)結(jié)果。第三是做具體檢驗(yàn)和基因芯片的比對(duì)分析,由此對(duì)檢驗(yàn)中的微生物種類、數(shù)量做具體的判斷。從具體的技術(shù)利用來看,基因芯片技術(shù)具有高效率、快速度和低成本的顯著特點(diǎn),所以在微生物檢驗(yàn)中對(duì)其做利用實(shí)效性十分的顯著。

      (三)PCR技術(shù)

      在食物微生物的具體檢驗(yàn)中,PCR技術(shù)也有著重要的利用價(jià)值。從具體的分析來看,PCR技術(shù)即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,而此技術(shù)最大的特點(diǎn)便是能將微量的DNA大幅增加。

      在PCR技術(shù)的具體利用中,需要做PCR的創(chuàng)建,而其創(chuàng)建又分為四個(gè)基本的步驟:第一是反應(yīng)體系的創(chuàng)建。反應(yīng)體系是技術(shù)利用的基礎(chǔ),如果體系不完善,具體的技術(shù)利用實(shí)效會(huì)明顯的減弱,所以需要對(duì)體系做全面性和細(xì)節(jié)性的構(gòu)建。第二是做引物的設(shè)計(jì),這樣可以使得具體的DNA增加更有效果。第三是做模板的制備,這是技術(shù)利用中最終效果是否具有參考價(jià)值的關(guān)鍵,第四是反應(yīng)的控制,其控制效果影響最終的檢驗(yàn)??傮w來講,PCR技術(shù)的具體應(yīng)用和基因芯片技術(shù)應(yīng)用具有相似性,但是在實(shí)際操作中,二者還是存在明顯差異的。總結(jié)PCR技術(shù)的利用,發(fā)現(xiàn)其具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、簡便。快速的顯著優(yōu)點(diǎn),所以在實(shí)踐中強(qiáng)化其利用意義顯著。

      結(jié)束語:

      綜合來講,分子生物學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展使得人們認(rèn)識(shí)生物體的深度有了顯著的增加,在具體生物體的評(píng)價(jià)方面也更加的全面。再者,分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用為食品安全、疾病診療等都起到了十分明顯的作用,因此積極的分析分子生物學(xué)有著十分顯著的實(shí)效性價(jià)值。本文所分析的分子生物學(xué)技術(shù)能夠?yàn)槠湓谑称窓z驗(yàn)中的作用強(qiáng)化提供指導(dǎo),這對(duì)于食品安全控制來講意義十分的突出。

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