屈平平,李 濤,姜八一
(山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院,山東濰坊 261061)
合生素?zé)o毒副作用、無耐藥性、無殘留、生產(chǎn)成本低、生產(chǎn)效果顯著,是一種極佳的飼料添加劑和保健品。目前,關(guān)于毛皮動物專用合生素的研發(fā)及合生素對毛皮動物生產(chǎn)性能和免疫力的影響的研究鮮見報道。但水貂專用合生素的臨床需求是急迫的。本研究分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%芽孢桿菌制劑、0.05%低聚木糖、0.05%自制水貂合生素,連續(xù)飼喂90 d后,研究自制水貂合生素對水貂生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)及糞便微生物數(shù)量的影響,為下一步合生素的推廣應(yīng)用提供參考。
1.1 試驗(yàn)動物 濰坊某水貂養(yǎng)殖場45日齡斷奶仔貂。
1.2 試驗(yàn)材料與儀器 枯草芽孢桿菌(活菌含量均為10×1010CFU/g)、地衣芽孢桿菌(活菌含量均為4×1010CFU/g)由昌邑市明興飼料有限責(zé)任公司生產(chǎn)提供;低聚木糖(純度為95%)由山東龍力生物科技股份有限公司生產(chǎn)提供;自制水貂合生素由芽孢桿菌(枯草芽孢桿菌與地衣芽孢桿菌2∶1混合)和低聚木糖按1∶1比例均勻混合制備而成;Vrit-2900Vet Plus全自動血細(xì)胞分析儀、全自動生化分析儀、微生物培養(yǎng)基和設(shè)備。
1.3 試驗(yàn)步驟
1.3.1 試驗(yàn)分組和試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將160只45日齡斷奶仔貂分成對照組、益生菌組、益生元組、合生素組4組,每組4個重復(fù),每個重復(fù)10只水貂,公母各半。對照組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧,益生菌組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧+0.05%芽孢桿菌制劑(枯草芽孢桿菌與地衣芽孢桿菌2∶1混合),益生元組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧+0.05%低聚木糖,合生素組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧+0.05%自制水貂合生素,試驗(yàn)期為90 d。試驗(yàn)動物采取單籠飼養(yǎng),由專人進(jìn)行飼養(yǎng)管理。
1.3.2 生產(chǎn)性能測定 整個試驗(yàn)期每隔30 d,在早晨進(jìn)行空腹稱重,計(jì)算體重和平均日增重(ADG);每天記錄試驗(yàn)水貂的給料量和剩料量,計(jì)算每天的采食量,然后在統(tǒng)計(jì)出整個育成期動物平均日采食量(ADFI),計(jì)算料重比(F/G),即ADFI與ADG的比值。同時,記錄整個試驗(yàn)期間水貂的腹瀉發(fā)生率和成活率。
1.3.3 血液指標(biāo)測定 于試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天,每組選3只水貂,斷指采血4~5 mL,用于血液生化指標(biāo)測定。
1.3.4 糞便微生物數(shù)量檢查 采用平板涂布法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。于試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天,每個重復(fù)隨機(jī)采取3只水貂的直腸糞樣,用生理鹽水做10-1稀釋后再依次進(jìn)行梯度稀釋,分別取0.1 mL稀釋液接種于培養(yǎng)基,培養(yǎng)48 h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),取平均值。乳酸桿菌在瓊脂培養(yǎng)基的厭氧管中培養(yǎng),大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)。菌群數(shù)量以每克鮮糞樣中所含細(xì)菌的對數(shù)值(lg)表示(CFU/g)。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用單因素方差分析(one. way ANOVA)進(jìn)行差異性比較。
表1 合生素對育成期水貂生產(chǎn)性能的影響
2.1 合生素對育成期水貂生產(chǎn)性能的影響 由表1可知,合生素組平均日增重顯著高于對照組和益生元組(P<0.05),和益生菌組差異不顯著(P>0.05)。各組平均日采食量差異不顯著(P>0.05)。合生素組料重比顯著低于對照組和益生菌組(P<0.05),與益生元組差異不顯著(P>0.05)。結(jié)果表明,飼料中添加合生素可以顯著提高水貂平均日增重,降低料重比,但對水貂平均日采食量影響不大。
合生素組水貂腹瀉發(fā)生率顯著低于對照組(P<0.05),但對照組、益生菌組、益生元組水貂腹瀉發(fā)生率差異不顯著(P>0.05)。合生素組水貂成活率顯著高于對照組(P<0.05),對照組、益生菌組、益生元組水貂成活率差異不顯著(P>0.05),但有升高趨勢。結(jié)果表明,飼料中添加合生素可以提高水貂成活率,降低腹瀉病的發(fā)生。
2.2 合生素對育成期水貂血液生化指標(biāo)的影響由表2可知,合生素組血清總蛋白(TP)顯著高于對照組(P<0.05),但與益生菌組和益生元組差異不顯著(P>0.05);合生素組血清白蛋白(ALB)顯著高于對照組、益生元組和益生菌組(P<0.05),但對照組、益生元組和益生菌組間差異不顯著(P>0.05);益生元組、益生菌組和合生素組球蛋白(GL)顯著高于對照組(P<0.05)。
各組間血清尿素氮(BUN)差異不顯著(P>0.05),但對照組、益生菌組、益生元組和合生素組血清尿素氮(BUN)含量有下降趨勢;血液葡萄糖(GLU)含量各組間差異不顯著(P>0.05);合生素組總膽固醇(TC)顯著低于對照組(P<0.05),但對照組、益生元組和益生菌組差異不顯著(P>0.05);各組間甘油三脂(TG)差異不顯著(P>0.05),但有下降趨勢;各組間高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)差異不顯著(P>0.05),高密度脂蛋白(HDL)有升高趨勢,低密度脂蛋白(LDL)有下降趨勢。以上結(jié)果表明,合生素可以明顯提高血液總蛋白、白蛋白和球蛋白水平,顯著降低血液總膽固醇。
2.3 合生素對育成期水貂糞便微生物的影響由表3可知,益生菌組、益生元組和合生素組糞便大腸桿菌數(shù)量顯著低于對照組(P<0.05),但益生菌組、益生元組和合生素組組間差異不顯著(P>0.05);合生素組糞便乳酸桿菌數(shù)量高于對照組、益生菌組、益生元組(P<0.05),對照組、益生菌組、益生元組組間差異不顯著(P>0.05)。以上結(jié)果說明,合生素對腸道大腸桿菌有明顯的抑制作用,而且效果明顯優(yōu)于單獨(dú)使用低聚木糖和芽孢桿菌,合生素對腸道乳酸桿菌有明顯的增殖作用,效果明顯優(yōu)于單獨(dú)使用低聚木糖和芽孢桿菌。
表2 合生素對育成期水貂血生化指標(biāo)的影響
表3 合生素對育成期水貂糞便微生物的影響lg CFU/g
3.1 合生素對育成期水貂生產(chǎn)性能的影響 飼料中分別添加芽孢桿菌制劑、低聚木糖和聯(lián)合添加芽孢桿菌制劑與低聚木糖對水貂平均日采食量沒有影響,說明飼料適口性未發(fā)生明顯變化,不影響水貂的食欲,添加方式可行。飼料中添加芽孢桿菌制劑、低聚木糖和合生素后均可以提高水貂平均日增重,以合生素組效果最明顯。料重比以合生素組最低,因此,合生素具有明顯的促生長作用。劉進(jìn)軍等在60日齡水貂基礎(chǔ)日糧中添加0.06 g地衣芽孢桿菌+0.06g枯草芽孢桿菌(活菌含量均為2×1010CFU/g)未明顯改善水貂生產(chǎn)性能,可能與活菌數(shù)偏低有關(guān)(劉進(jìn)軍等,2013)。飼料中添加合生素后水貂腹瀉發(fā)生率比對照組降低了35.45%,水貂成活率高達(dá)90%,說明水貂使用合生素后機(jī)體免疫力和抗病力增強(qiáng)。
3.2 合生素對育成期水貂血液指標(biāo)的影響乜豪等在育成期水貂飼糧中添加枯草芽孢桿菌(1011CFU/kg),飼喂60 d后發(fā)現(xiàn),血清免疫球蛋白M含量顯著高于未添加組(乜豪,2018)。本研究也發(fā)現(xiàn),合生素組血清球蛋白顯著高于對照組,表明合生素可以顯著提高水貂免疫力。血清總膽固醇、甘油三酯水平是反映動物機(jī)體脂類代謝功能正常與否的兩個重要指標(biāo),本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),合生素組血清膽固醇含量顯著低于對照組,說明低聚木糖和芽孢桿菌制劑有降低膽固醇,保護(hù)肝臟的作用。刑煒等在水貂飼料中添加植物乳桿菌后,可能顯著降低血清膽固醇含量,但添加酵母菌血清膽固醇含量與對照組差異不顯著(荊祎等,2013),可見芽孢桿菌制劑具有明顯的降膽固醇作用,與低聚木糖聯(lián)合使用效果更佳。
3.3 合生素對育成期水貂糞便微生物的影響眾多研究表明,低聚木糖進(jìn)入動物胃腸后,可以調(diào)節(jié)水貂胃腸道微生態(tài)環(huán)境平衡,促進(jìn)有益菌如乳酸桿菌、雙歧桿菌等的生長和繁殖,抑制致病菌如大腸桿菌和沙門氏菌等對腸壁的黏附和定植,維持正常的消化道環(huán)境,從而降低腹瀉病的發(fā)生(寧俊,2015;方桂友等,2015;譚兵兵,2015;王俊峰等,2010)。而芽孢桿菌制劑進(jìn)入動物腸道后,可以產(chǎn)生多種細(xì)菌素、抗菌膚等活性物質(zhì)來抑制和阻止有害菌或致病菌的定植,同時,芽孢桿菌制劑被激活后增殖和生長還可消耗腸道內(nèi)多余的氧氣,降低腸道氧含量,有利于腸道厭氧菌的生長繁殖,減少好氧有害菌的吸附(華洵璐等,2015;孫梅等,2015;祝天龍等,2015)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,低聚木糖、芽孢桿菌制劑均可以提高腸道乳酸桿菌數(shù)量,但以低聚木糖和芽孢桿菌制劑聯(lián)合使用效果最佳。
從水貂斷奶至育成,每天在日糧中添加0.05%的合生素可提高水貂平均日增重,降低料重比和腹瀉發(fā)生率,具有良好的保健功能。