HLA-DRB1等位基因多態(tài)性對(duì)食管癌發(fā)生影響的Meta分析

鄧桃枝 韓向陽 藍(lán) 程

(海南省人民醫(yī)院消化內(nèi)科，海南 ?？?570311)

食管癌是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一〔1〕。其發(fā)生是由包括行為方式、環(huán)境、社會(huì)、遺傳等多因素綜合作用所致，是一個(gè)多因素、多階段、多方式的過程〔2～4〕。人類白細(xì)胞抗原(HLA)是重要的免疫成分，其缺失被認(rèn)為是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的重要因素〔5〕。HLA主要參與向免疫細(xì)胞呈遞外源抗原，由此影響抗原的結(jié)合和呈遞，并且也會(huì)影響腫瘤的生長(zhǎng)〔5〕，甚至影響腫瘤患者預(yù)后〔6〕。Hu等〔7〕的研究也證實(shí)了HLA-DRB1基因與食管癌相關(guān)，但是其對(duì)食管癌發(fā)生的影響目前缺乏系統(tǒng)性的評(píng)價(jià)。因此，本文全面檢索相關(guān)研究，并進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，評(píng)估HLA-DRB1等位基因多態(tài)性對(duì)于食管癌發(fā)生的影響。

1 資料與方法

1.1納入排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究類型：病例對(duì)照試驗(yàn)；②研究對(duì)象：由病理檢查或內(nèi)鏡活檢確定的食管癌患者，性別、年齡、國(guó)籍、種族和組織類型不限；③暴露的確定：確定基因型方法不限，且提供原始數(shù)據(jù)，包括病例組和對(duì)照組HLA-DRB1基因型的表達(dá)數(shù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①重要資料不全；②發(fā)表文獻(xiàn)的作者和機(jī)構(gòu)存在重復(fù)。

1.2檢索策略 計(jì)算機(jī)檢索美國(guó)國(guó)立醫(yī)學(xué)圖書館(Medline，1960年1月至2016年3月)、EMbase(1980年1月至2016年3月)、Cochrane Library(1996年1月至2016年3月)、Web of Science(1980年1月至2016年3月)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)服務(wù)系統(tǒng)(CBM，1969年1月至2016年3月)、中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(CNKI，1981年1月至2016年3月)、中國(guó)科技期刊數(shù)據(jù)庫(VIP，1989年1月至2016年3月)及萬方數(shù)據(jù)資源系統(tǒng)(1998年1月至2016年3月)，查找關(guān)于HLA-DRB1等位基因多態(tài)性對(duì)食管癌發(fā)生影響的病例對(duì)照試驗(yàn)及其參考文獻(xiàn)。

1.3文獻(xiàn)篩選和資料提取 兩名研究員分別用同一張數(shù)據(jù)提取表提取數(shù)據(jù)，如果對(duì)數(shù)據(jù)有異議，則由第三名研究員決定。提取的數(shù)據(jù)包括第一作者姓名、發(fā)表年限、國(guó)家、平均年齡、病例組和對(duì)照組樣本數(shù)、對(duì)照組選擇的描述、HLA-DRB1基因型多態(tài)性、診斷方法。

1.4方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià) 由兩位研究者分別獨(dú)立按照Newcastle-Ottawa Scale(NOS)〔8〕標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)內(nèi)容包括研究人群的選擇(4 項(xiàng))，組間可比性(1 項(xiàng))，暴露因素的測(cè)量(3 項(xiàng))。結(jié)果相互校對(duì)，如遇分歧共同討論，若仍有分歧，邀請(qǐng)第三位研究者協(xié)助。

1.5統(tǒng)計(jì)分析 采用Stata12.0軟件，采用比值比(OR)及其95%可信區(qū)間(CI)為療效分析統(tǒng)計(jì)量。采用I2檢驗(yàn)分析各研究間的統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性，若I2≤50%，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行合并分析；若I2>50%，則采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。采用Egger線性回歸檢驗(yàn)潛在的發(fā)表偏倚。

2 結(jié) 果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果 通過計(jì)算機(jī)檢索獲得655篇文獻(xiàn)，通過剔重、篩選，最終獲得5篇病例對(duì)照實(shí)驗(yàn)納入研究。具體流程見圖1。

2.2納入研究的基本特征 見表1。

2.3納入研究的方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià) 見表2。

圖1 文獻(xiàn)篩選流程及結(jié)果

納入研究及年份國(guó)家試驗(yàn)組n平均年齡(歲)對(duì)照組n平均年齡(歲)研究的等位基因數(shù)檢測(cè)方法對(duì)照類型Lin等〔9〕2003中國(guó)4260.013636.018序列特異引物聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-SSP)健康人群陳云昭等〔10〕2009中國(guó)20054.117752.84PCR-SSP健康人群Hu等〔7〕2012中國(guó)200-150-2PCR-SSP健康人群胡建明等〔11〕2010中國(guó)20054.415052.61聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)健康人群蔡金鳳等〔12〕2011中國(guó)125-250-1PCR或聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)健康人群

表2 納入文獻(xiàn)的NOS評(píng)分

2.4Meta分析結(jié)果

2.4.1HLA-DRB1*0901 納入的研究中篩選出4篇含有HLA-DRB1*0901的文獻(xiàn)〔7,9,10,12〕。各納入研究之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性(P=0.159，I2=42.1%)，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。Meta分析結(jié)果顯示：食管癌組HLA-DRB1*0901基因易感率明顯高于正常人，兩組基因易感率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔OR=1.70，95%CI(1.31,2.20)，P<0.001〕。敏感性分析結(jié)果表明，沒有單個(gè)結(jié)果對(duì)于整個(gè)研究影響過大的情況，研究的穩(wěn)定性良好，見圖2。

圖2 HLA-DRB1*0901基因多態(tài)性在兩組表達(dá)率比較的森林圖

2.4.2HLA-DRB1*1501和HLA-DRB1*0301 納入的研究中篩選出2篇含有HLA-DRB1*1501的文獻(xiàn)〔10,11〕。各納入研究之間存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性(P=0.06，I2=71.7%)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。Meta分析結(jié)果顯示：食管癌組HLA-DRB1*1501基因易感率明顯高于正常人，兩組基因易感率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔OR=3.02，95%CI(1.65,5.51)，P<0.001〕。敏感性分析結(jié)果表明，沒有單個(gè)結(jié)果對(duì)于整個(gè)研究影響過大的情況，研究的穩(wěn)定性良好，見圖3。

圖3 HLA-DRB1*1501和0301基因多態(tài)性在兩組表達(dá)率比較的森林圖

納入的研究中篩選出2篇含有HLA-DRB1*0301的文獻(xiàn)〔9,10〕。各納入研究之間存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性(P=0.001，I2=91.4%)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。Meta分析結(jié)果顯示：食管癌組HLA-DRB1*0301基因易感率明顯高于正常人，兩組基因易感率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔OR=2.84，95%CI(0.43,18.96)，P<0.001〕。敏感性分析結(jié)果表明，沒有單個(gè)結(jié)果對(duì)于整個(gè)研究影響過大的情況，研究的穩(wěn)定性良好，見圖3。

2.4.3證據(jù)評(píng)價(jià) 根據(jù)系統(tǒng)評(píng)價(jià)的結(jié)果，應(yīng)用GRADE系統(tǒng)推薦分級(jí)方法評(píng)價(jià)證據(jù)質(zhì)量，證據(jù)質(zhì)量分級(jí)如下：①高質(zhì)量：進(jìn)一步研究不可能改變?cè)摨熜гu(píng)估結(jié)果的可信度。②中等質(zhì)量：進(jìn)一步研究很可能影響該療效評(píng)估結(jié)果的可信度，且可能改變?cè)撛u(píng)估結(jié)果。③低質(zhì)量：進(jìn)一步研究極有可能影響該療效評(píng)估結(jié)果的可信度，且該評(píng)估結(jié)果很可能改變。④極低質(zhì)量：任何療效評(píng)估結(jié)果都很不確定。本文將觀察性研究和隨機(jī)對(duì)照研究分開進(jìn)行評(píng)價(jià)分析，并應(yīng)用GRADE profiler 3.6軟件對(duì)證據(jù)等級(jí)進(jìn)行編輯、分析和制圖，見表3。

表3 病例對(duì)照研究各結(jié)局證據(jù)等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果

1)研究異質(zhì)性過大

2.5發(fā)表偏倚分析 采用Stata12.0軟件制作Begg圖并進(jìn)行Begg分析發(fā)表性偏倚。Begg檢驗(yàn)結(jié)果顯示HLA-DRB1*0901基因(P=0.308)、HLA-DRB1*1501基因(P=1.000)；HLA-DRB1*0301基因(P=1.000)易感率均未發(fā)現(xiàn)發(fā)表性偏倚。見圖4。

圖4 HLA-DRB1*0901基因多態(tài)性在兩組表達(dá)率結(jié)局的發(fā)表偏移分析

3 討 論

許多研究已經(jīng)證明食管癌的發(fā)生與吸煙、喝酒及飲熱水等生活習(xí)慣有關(guān)〔4,13〕，也有一些研究認(rèn)為與攝入的蔬菜水果量和攝入的黃油奶酪等飲食結(jié)構(gòu)有關(guān)〔14,15〕，然而也有研究認(rèn)為蔬菜、水果和魚肉的攝入與食管癌的發(fā)生無關(guān)〔4〕。在中國(guó)，食管癌的發(fā)生具有地區(qū)聚集性和家庭聚集性〔16〕。因此，食管癌的發(fā)生可能與環(huán)境及遺傳有關(guān)系。Lin等〔9〕認(rèn)為中國(guó)林縣地區(qū)食管癌的發(fā)生與HLA A1和B40 基因有關(guān)系。Feng等〔17〕認(rèn)為HLA DQB1基因的表達(dá)是人乳頭瘤病毒導(dǎo)致食管癌發(fā)病的途徑。但是，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于食管癌發(fā)生與基因方面的研究還比較少，因此，本文旨在系統(tǒng)評(píng)價(jià)食管癌的易感性與HLA-DRB1某些等位基因的相關(guān)性。

本研究認(rèn)為食管癌組的HLA-DRB1*0901基因易感率明顯高于正常人，這與Lin等〔9〕的研究一致。但是Hu等〔7〕研究結(jié)果認(rèn)為HLA-DRB1*0901基因易感率在食管癌患者和正常人之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這可能與他們研究人群的分布地區(qū)不同有關(guān)。目前對(duì)于HLA-DRB1*0901基因在食管癌中的研究還比較少。但是，Mizote等〔18〕研究日本婦女宮頸癌的發(fā)生與HLA-DRB1*0901基因有關(guān)。而且，也有研究證明HLA-DRB1*0901基因與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎〔19〕和多發(fā)性硬化〔20〕等自身免疫性疾病有關(guān)，且與1型糖尿病和嬰幼兒脈管性疾病也有一定的關(guān)系〔21,22〕。

本研究結(jié)果證明食管癌組HLA-DRB1*1501和HLA-DRB1*0301基因易感率明顯高于正常人，但研究結(jié)果異質(zhì)性較大，可能與納入的文獻(xiàn)較少和納入的研究類型有關(guān)；不過結(jié)果與Hu等〔7〕的研究結(jié)果一致，且HLA-DRB1*1501和HLA-DRB1*0301基因與HLA-DRB1*0901基因一樣與其他癌癥的發(fā)生有一定的關(guān)系。Riabov等〔23〕在大鼠上證明前列腺癌的發(fā)生可能與HLA-DRB1*1501基因有關(guān)。有Meta分析認(rèn)為宮頸癌的發(fā)生可能與HLA-DRB1*0301基因有關(guān)〔24〕。以上基因都表現(xiàn)出同一等位基因與不同癌癥遺傳易感性具有一定的關(guān)聯(lián)，這種現(xiàn)象值得我們探討，它可能是在連鎖不平衡或抗原特異性識(shí)別過程中該等位基因介導(dǎo)的改變〔9〕。

目前，食管癌的治療方式仍是以手術(shù)為主的綜合治療，而一些基因與食管癌易感性的關(guān)系將有可能成為食管癌免疫治療注入新的血液。 目前有關(guān)食管癌相關(guān)基因的研究少之甚少，故本文納入的研究相對(duì)較少，因此，有關(guān)食管癌基因方面的研究還需要走很長(zhǎng)的路。