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    發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑對種公豬疫病防控中的應(yīng)用研究

    2019-04-22 07:20:48
    獸醫(yī)導(dǎo)刊 2019年7期
    關(guān)鍵詞:組方公豬中草藥

    余剛/河南省正陽縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所

    王艷*/河南省駐馬店市動物疫病預(yù)防控制中心

    以種公豬為對象,投喂添加不同水平復(fù)方中草藥復(fù)方制劑,研究中草藥復(fù)方制劑對種公豬血液生理生化指標(biāo)、疫苗抗體水平的影響。試驗共分10個小組分別為1個對照組和9個試驗組,每個小組各有6頭種公豬。共三個中草藥組方,每個組方設(shè)置3個不同比例中草藥復(fù)方制劑(分別為0.25%、0.5%、1%),分圈飼養(yǎng),后抽血進行血液細(xì)胞分析、免疫抗體水平檢測。本試驗結(jié)果表明,在飼料中添加中草藥復(fù)方制劑能改變種公豬的血液生理生化指標(biāo)、提高免疫抗體水平。

    目前,在畜牧業(yè)的研究中,中草藥以它獨特的作用方式、良好的治療效果、無抗藥性、無殘留以及無污染而受到廣大科研人員和生產(chǎn)人員的青睞。中草藥具有營養(yǎng)性、維生素樣、激素樣、增強機體免疫力、抗微生物、抗應(yīng)激和抗寄生蟲等作用,并且不容易產(chǎn)生抗藥性和耐藥性。因此,中草藥不僅可以治療個體而且可以進行群體防治。大力開發(fā)中草藥復(fù)方制劑不僅能夠解決動物疫病長期困擾畜牧業(yè)發(fā)展的問題,還能夠解決抗生素殘留問題及滿足人們對食品安全的需求,具有重要的經(jīng)濟效益和社會效應(yīng)。

    本研究主要依據(jù)中獸醫(yī)理論,圍繞中草藥調(diào)動自身抵抗力抵御外來疾病入侵這一主要法則,針對種公豬在生產(chǎn)上的應(yīng)用目的,優(yōu)化中草藥配方組合以及制作工藝所研發(fā)的一種發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑對種公豬疫病防控的研究,以充分發(fā)揮中草藥扶正祛邪、標(biāo)本兼顧的特色和優(yōu)勢,使中草藥的組合效應(yīng)達到最優(yōu)。

    一、材料和方法

    1.試驗動物。隨機抽取15月齡左右、體重180±10 kg、身體健康、繁殖性能相近的(某品種)種公豬60頭,對照組和9個試驗組各6頭。

    2.試劑與儀器。

    (1)儀器。全自動血液細(xì)胞分析儀(型號BC-5300Vet),購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;全自動酶標(biāo)儀(型號ELX800),購自美國伯騰儀器有限公司;一次性注射器;無菌離心管;微量移液器等。

    (2)試劑??谔阋呖贵w檢測ELISA試劑盒,購自洛陽萊普生信息科技有限公司;豬瘟、藍(lán)耳、偽狂犬抗體檢測ELISA試劑盒均購自愛德士生物科技有限公司。

    3.發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑的組方與配制。發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑組方:

    方一組成及比例:當(dāng)歸、黃芪、淫羊藿、桑椹、枸杞、甘草(1∶4∶2∶2∶2∶1)。

    方二組成及比例:當(dāng)歸、黃芪、淫羊藿、山茱萸、枸杞、甘草(1∶4∶2∶2∶2∶1)。

    方三組成及比例:當(dāng)歸、黃芪、淫羊藿、菟絲子、桑椹、山茱萸、枸杞、甘草(1∶4∶1∶1∶1∶1∶1∶1)。

    組方中各個藥材干燥粉碎后,噴灑乳酸菌,置于固態(tài)發(fā)酵裝置中發(fā)酵72 h,與日糧混合后按照試驗設(shè)計飼喂。

    4.試驗設(shè)計。本次試驗在某豬場進行,其品種為某品種種公豬60頭,試驗共分10個小組分別為1個對照組和9個試驗組,每個小組各有6頭種公豬。具體試驗分組見表1,試驗種公豬分別飼喂基礎(chǔ)日糧(對照組);混合0.25%方一發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗1組);混合0.5%方一發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗2組);混合1%方一發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗3組);混合0.25%方二發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗4組);混合0.5%方二發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗5組);混合1%方二發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗6組);混合0.25%方三發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗7組);混合0.5%方三發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗8組);混合1%方三發(fā)酵中草藥的基礎(chǔ)日糧(試驗9組)。10個組的基礎(chǔ)日糧完全一致,由某公司提供。日糧組成見表2。

    5.飼喂管理。為保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠,對種公豬的飼養(yǎng)應(yīng)保證在同一飼養(yǎng)水平下:每天投料2次,自由采食并保證充足飲水,每小組的試驗豬在一個圈舍飼養(yǎng),每日打掃圈舍2次,圈舍每周沖欄消毒2次。整個試驗期間,有專人飼喂,專人管理,保持種公豬每天運動 2 h。

    6.樣品采集。

    (1)每天有專人負(fù)責(zé)觀察實驗動物的健康狀況,并做好詳細(xì)記錄。

    表1 試驗設(shè)計

    表2 基礎(chǔ)日糧的組成

    (2)使用發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑之前通過前腔靜脈(或耳緣靜脈)采血,采集所有的實驗組和對照組動物全血各兩份,2 ml/份。

    (3)使用發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑之后每間隔15 d通過前腔靜脈(或耳緣靜脈)采集所有的實驗組和對照組動物全血各兩份2 ml/份,連續(xù)采取6次。

    7.樣品處理與檢測。

    (1)采集全血樣品中的其中1份4℃保存,利用全自動血液細(xì)胞分析儀進行血液白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等計數(shù)分析。

    (2)采集全血樣品中的另外1份室溫靜置30 ~ 50 min,以 3 000 r/min 離心 20 min,取血清待檢。利用ELISA檢測試劑盒檢測豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬、口蹄疫的抗體水平。

    表3 發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑對種公豬免疫細(xì)胞數(shù)量的影響

    二、結(jié)果與分析

    1.發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑對種公豬血液中免疫細(xì)胞數(shù)量的影響。見表3。

    從試驗組和對照組血細(xì)胞的檢測分析比較,由表1得知,飼喂組方三(試驗7、試驗8、試驗9)復(fù)方中草藥制劑的種公豬所檢測各項血細(xì)胞數(shù)目均處在正常范圍值內(nèi),而組方一(試驗1、試驗2、試驗3)和組方二(試驗4、試驗5、試驗6)的各項細(xì)胞檢測值普遍偏高,接近于對照組的檢測值。

    2.發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑對種公豬抗體水平的影響。見表4。

    表4 發(fā)酵中草藥復(fù)方制劑對種公豬抗體水平(平均值)的影響

    由表2可見:在豬瘟、豬藍(lán)耳、豬O型口蹄疫、豬偽狂犬抗體方面,從各試驗組的ELISA檢測值顯示得出組方一(試驗1組、試驗2組、試驗3組)和組方三(試驗7組、試驗8組、試驗9組)的抗體水平均較高,而組方二(試驗4組、試驗5組、試驗6組)的抗體水平相對低些,通過組方一和組方三的試驗檢測數(shù)據(jù)比較分析得知組方三的的免疫抗體水平相對較高些;在組方間的中草藥投飼混合比例方面,混合1%比例組方的試驗組ELISA檢測值顯示以上四種抗體水平均高于0.25%和0.5%的比例;而對照組的ELISA檢測值均基本接近臨界值,疫苗抗體一般,不具有很好的保護率。本試驗最終得出飼喂組方三1%比例的復(fù)方中草藥制劑其疫苗免疫抗體水平最高,具有很高的免疫效力。

    三、討論與結(jié)論

    白細(xì)胞是動物機體內(nèi)主要免疫活性細(xì)胞之一,在正常生理條件下,白細(xì)胞數(shù)量決定機體免疫能力的高低。在白細(xì)胞分類中,當(dāng)血清與病原菌(抗原)相互作用產(chǎn)生趨化因子時,機體內(nèi)的中性粒細(xì)胞被吸引并用于殺死細(xì)菌;單核細(xì)胞通過血液進入組織轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞并吞噬各種異物,調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、白細(xì)胞生成等;嗜酸性粒細(xì)胞具有吞噬能力,參與非特異性免疫及中和組胺保護機體;嗜堿性粒細(xì)胞的顆粒內(nèi)含有組織胺、肝素及過敏性慢反應(yīng)物質(zhì)等,參與炎癥反應(yīng)和速發(fā)型的過敏反應(yīng),調(diào)節(jié)微血管張力或者血液凝固性;淋巴細(xì)胞參與機體的細(xì)胞和體液免疫,調(diào)節(jié)其反應(yīng)。機體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)目往往維持在相對恒定狀態(tài),盡管在不同生理或時間白細(xì)胞分裂指數(shù)出現(xiàn)一定的波動,但是死亡與生成的白細(xì)胞實際處于一個動態(tài)平衡;相對于白細(xì)胞分類百分比,白細(xì)胞分類數(shù)更能反映外周血白細(xì)胞對機體防御和保護的狀態(tài)。

    血細(xì)胞數(shù)量及其相關(guān)成分可因家畜種類、品種和性別等因素而發(fā)生變動,其生理生化值在一定程度上反映家畜新陳代謝及生理機能狀況。特定血液生理指標(biāo)是品種特征之一,并且與經(jīng)濟性狀存在一定相關(guān)性。在臨床上,由于血細(xì)胞參與機體免疫反應(yīng),具有防御和保護作用,因此成為疾病診斷及其病理過程監(jiān)測的主要依據(jù)之一。

    本研究結(jié)果表明,飼料中添加復(fù)方中草藥制劑(1%組方三)能顯著改善種公豬體內(nèi)部分血液生理生化指標(biāo),使種公豬長期處于健康狀態(tài);并能顯著提高豬體內(nèi)疫苗免疫抗體水平,使疫苗充分發(fā)揮其作用對種公豬具有很好的保護。從飼料工業(yè)的長遠(yuǎn)發(fā)展來看,通過對中草藥作用機理、檢測標(biāo)準(zhǔn)的進一步研究,必將促進天然中草藥飼料添加劑在種公豬飼料中的廣泛應(yīng)用。在飼料中添加中草藥對種公豬生長、免疫和消化機能的影響,有待于進一步做深層次的研究。

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