1350例眼結(jié)膜囊分泌物病原菌及耐藥性分析

趙榮超 ，李潔平 ，趙巖 ，郭長(zhǎng)城

(鄭州市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450000；黃河水利委員會(huì)黃河中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450003)

結(jié)膜炎為眼科常見疾病之一，是結(jié)膜組織在外界和機(jī)體自身因素的作用下而發(fā)生的炎癥反應(yīng)的統(tǒng)稱[1]。該病最為常見的致病原因是微生物感染[2]，包括細(xì)菌、病毒、衣原體、真菌、寄生蟲以及立克次體等。結(jié)膜炎一般對(duì)視力影響不大，但若未及時(shí)對(duì)癥治療，致使炎癥范圍擴(kuò)大波及角膜引起并發(fā)癥時(shí)，可導(dǎo)致嚴(yán)重的視力損害，因此，鑒別病原菌種類及耐藥性對(duì)臨床治療具有正面作用。本文通過(guò)對(duì)1350例眼結(jié)膜囊分泌物進(jìn)行病原菌分離和鑒定，探究其分布狀況及耐藥性，為臨床提供抗生素用藥依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年5月到2017年5月我院收治的細(xì)菌性結(jié)膜囊炎患者1350例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合細(xì)菌性結(jié)膜囊炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；②起病急促，具有膿性分泌物增多，眼瞼腫脹、充血等表現(xiàn)；排除標(biāo)準(zhǔn)：①先天性淚囊和淚道發(fā)育異常；②臨床資料不全者。研究對(duì)象中男621例，女729例；年齡 4～82 歲，平均年齡為(44.13±8.88)歲。

1.2 儀器與試劑 采用梅里埃VITEKICompact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏測(cè)試儀，并配套使用GP和GN 鑒定卡，AST－GP67、AST－GP68 及 AST－GN09藥敏卡。實(shí)驗(yàn)中所用質(zhì)控菌株有金黃色葡萄球菌ATCC25923，銅綠假單胞菌ATCC27853，大腸埃希菌ATCC25922，均由南京都萊生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 方法 將無(wú)菌棉拭子用無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)后在患者眼瞼膜囊處旋轉(zhuǎn)蘸取結(jié)膜囊分泌物，在肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行増菌，35℃培養(yǎng)24h后轉(zhuǎn)種于血平板、巧克力培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂平板以及SS瓊脂平板，進(jìn)行分離純化鑒定。操作過(guò)程嚴(yán)格按照第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]中的相關(guān)規(guī)定和說(shuō)明進(jìn)行。將分離純化的待測(cè)菌株在RST－01B自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏測(cè)試儀上使用GP和GN鑒定卡作革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌的鑒定，使用ASTGP67、AST－GP68 及 AST－GN09 藥敏卡進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，執(zhí)行CLSI2016標(biāo)準(zhǔn)[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用 SPSS 21.0軟件包進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，計(jì)數(shù)資料以百分率(%)表示，分別采用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

1350例標(biāo)本中共檢出1161株致病菌，陽(yáng)性檢出率為86.00%，其中表皮葡萄球菌(491例)、金黃色葡萄球菌(157例)、銅綠假單胞菌(108例)、肺炎鏈球菌(105例)及溶血葡萄球菌(88例)是總體分離率在前五的菌株，其分離率依次為 36.37%、11.63%、8.00%、8.00%、7.78%。其中革蘭陰性菌 284 例，所占構(gòu)成比為24.46%(284/1161)，革蘭陽(yáng)性菌877例，所占構(gòu)成比為75.54%(877/1161)，另檢出了51例真菌。分別選取分離率在前五的革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌，對(duì)其耐藥性進(jìn)行分析，見表1和表2。

表1 284例革蘭陰性菌構(gòu)成及耐藥率[n(%)]

表2 877例革蘭陽(yáng)性菌構(gòu)成及耐藥率[n(%)]

3 討論

結(jié)膜炎是一種常見的眼部疾病，若按病因分類可分為細(xì)菌性、真菌性、病毒性和變態(tài)反應(yīng)性，其中最常見的是細(xì)菌性結(jié)膜炎。該疾病可導(dǎo)致結(jié)膜及角膜組織破壞，引起視力損傷[5]，嚴(yán)重者可導(dǎo)致失明，故及時(shí)有效的對(duì)癥治療在疾病轉(zhuǎn)歸中具有重要作用。細(xì)菌性結(jié)膜炎常采用抗生素治療，若藥物使用不當(dāng)可引起病原菌耐藥性，增加治療難度，影響疾病預(yù)后，故明確引起疾病的致病菌種類，了解其耐藥性，對(duì)臨床用藥具有指導(dǎo)意義。

本研究對(duì)1350例結(jié)膜囊分泌物進(jìn)行細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)，共分離出1161例病原菌，陽(yáng)性檢出率為86.00%(1161/1350)，與范寧[6]等人的研究結(jié)果相似。分離出的革蘭陰性菌為24.46%(284/1161)，革蘭陽(yáng)性菌為75.54%(877/1161)，提示該病致病菌以革蘭陽(yáng)性菌為主?？傮w分離率在前五的病原菌依次為表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌及溶血葡萄球菌。其中表皮葡萄球菌構(gòu)成比為36.37%，結(jié)果與多篇文獻(xiàn)報(bào)道一致[7，8]，究其原因有學(xué)者認(rèn)為與表皮葡萄球菌是皮膚表面正常菌群，可在取樣過(guò)程中污染標(biāo)本有關(guān)[9]。除此之外，有5例致病菌檢出為真菌，提示臨床醫(yī)生，在常規(guī)抗生素療效不佳時(shí)應(yīng)考慮真菌感染。細(xì)菌性結(jié)膜炎病原菌，亦可是嗜麥芽假單胞菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌等，表明細(xì)菌性結(jié)膜炎病原菌在分布上存在一定的地域差異。有研究發(fā)現(xiàn)[10]，表皮葡萄球菌可利用自身的生物膜特性吸附于人工晶體、隱形眼鏡等高分子聚合物之上，故在進(jìn)行人工晶體置換、角膜移植等操作前應(yīng)進(jìn)行充分的抗菌藥物預(yù)處理，做好隱形眼鏡的養(yǎng)護(hù)和存放，預(yù)防眼內(nèi)定值菌群條件性感染。

對(duì)分離率在前五的革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌耐藥試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌耐藥率最高，肺炎克雷伯菌耐藥率最低，但均對(duì)環(huán)丙沙星、苯唑西林、氨芐西林有較高耐藥率，可能由于上述各藥物是常見的抗感染眼藥水成分，使用頻率較高的原因。該類細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生機(jī)制是由于質(zhì)粒介導(dǎo)產(chǎn)生了內(nèi)酰胺酶[11]，導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)抗生素抵抗能力增加，從而形成耐藥性。表2結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌對(duì)苯唑西林的耐藥的檢出率高達(dá)98.63%，表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、產(chǎn)氣葡萄菌耐苯唑西林檢出率依次為75.34%、68.72%、53.44%，且對(duì)氨芐西林、頭孢唑啉、慶大霉素、環(huán)丙沙星、頭孢哌酮、頭孢他啶等藥物具有多重耐藥性。萬(wàn)古霉素、莫西沙星、利奈唑胺等藥物對(duì)葡萄球菌有良好療效，耐藥率均為0%，可作為治療用藥的首選藥物。