,,,夢(mèng)菡
(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,四川成都 611130)
藏茶因產(chǎn)于雅安銷往藏區(qū)而得名,是中國(guó)典型的黑茶類產(chǎn)品,距今已有1300多年的歷史,被譽(yù)為藏族同胞的民生之茶[1-2]。研究表明,藏茶具有抗氧化、抗輻射、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、潤(rùn)腸通便等保健作用[3-6],深受消費(fèi)者青睞,逐漸形成“藏茶內(nèi)銷、漢飲”的消費(fèi)格局。藏茶屬后發(fā)酵茶,渥堆過(guò)程中以茶多酚為主的內(nèi)含成分發(fā)生氧化縮合,生成更加復(fù)雜的化合物如茶褐素等產(chǎn)物,對(duì)藏茶的品質(zhì)形成有重要作用[7-8]。鮮葉原料與渥堆后黑茶的品質(zhì)密切相關(guān),而嫩度是影響鮮葉物質(zhì)基礎(chǔ)的重要因素。銀霞[9]研究指出,茶多酚、兒茶素、水浸出物等含量高的茶樹(shù)鮮葉制成的黑毛茶往往滋味濃厚,品質(zhì)較好;劉曉東等[10]研究表明,適制六堡茶的鮮葉原料要求茶多酚、氨基酸、水浸出物等含量較高,一般以葉片厚度及海綿組織厚度較大的小喬木型大葉種為好。由于歷史原因,原料粗老是傳統(tǒng)藏茶的普遍特點(diǎn),這不僅導(dǎo)致藏茶氟、重金屬含量超標(biāo),而且使藏茶呈現(xiàn)出粗老氣、粗澀味等不良風(fēng)味,嚴(yán)重制約了藏茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
目前,關(guān)于原料嫩度與藏茶品質(zhì)關(guān)系方面的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本研究以不同嫩度鮮葉為原料,探討適制藏茶的最佳鮮葉嫩度標(biāo)準(zhǔn),對(duì)不同嫩度原料所制藏茶進(jìn)行品質(zhì)評(píng)價(jià),以期為藏茶加工的原料選擇提供參考。
芽、一芽一葉、一芽二葉、一芽三葉、一芽四葉、一芽五葉、粗老枝葉7種標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格鮮葉 茶樹(shù)品種為福選9號(hào),采摘時(shí)間為2017年4月中旬;PDMS/DVB萃取纖維 美國(guó)SUPELCO公司;堿式乙酸鉛、蒽酮、乙酸乙酯、福林酚等其它試劑 均為國(guó)產(chǎn)分析純。
小型多功能控溫控濕發(fā)酵機(jī) 實(shí)驗(yàn)室自制(見(jiàn)圖1);FA2204N型電子天平 常州市衡正電子儀器有限公司;U-T5APC型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海屹譜儀器制造有限公司;DHG-9245G型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海齊欣科學(xué)儀器有限公司;ICE3300型原子吸收光譜儀 英國(guó)賽默飛公司;GCMS-QP2020型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀 日本島津公司。
圖1 小型多功能控溫控濕發(fā)酵機(jī)結(jié)構(gòu)圖Fig.1 Structure diagram of small multifunctional temperature controlled wet fermentation machine
1.2.1 藏茶的生產(chǎn)工藝 鮮葉經(jīng)攤放、殺青、揉捻、初烘、渥堆、干燥的工藝流程[11]進(jìn)行制樣,然后對(duì)7種不同嫩度藏茶的感官品質(zhì)、化學(xué)成分及香氣組分進(jìn)行比較分析,試驗(yàn)重復(fù)3次;主要工藝參數(shù):殺青,各嫩度標(biāo)準(zhǔn)鮮葉5 kg,采用40型滾筒殺青機(jī),溫度260~300 ℃,殺青至色澤暗綠,無(wú)青草氣;揉捻,殺青葉利用35型揉捻機(jī)采用空壓和加壓交替進(jìn)行,揉捻至卷成緊結(jié)的條索型;初烘,將揉捻葉初烘至含水量30%左右;渥堆,在小型多功能控溫控濕發(fā)酵機(jī)中進(jìn)行渥堆發(fā)酵,溫度為70 ℃,含水量30%,渥堆發(fā)酵至葉色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S褐色或棕褐色,即為渥堆適度;干燥,渥堆完成后,烘干至含水量8%左右,既得試驗(yàn)茶樣。
1.2.2 小型多功能控溫控濕發(fā)酵機(jī)簡(jiǎn)介 啟動(dòng)加熱開(kāi)關(guān)即可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)控溫,精度為設(shè)置溫度±2 ℃;內(nèi)壁相對(duì)密閉,若不供風(fēng)(氧),蓋上進(jìn)茶口蓋子即可達(dá)到保濕效果,若按一定頻率供風(fēng)(氧),則調(diào)節(jié)供風(fēng)量、供風(fēng)頻率、供水量、供水頻率即可使水分保持恒定而達(dá)到自動(dòng)控濕保濕效果。
1.2.3 安全性指標(biāo)的測(cè)定 氟含量按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 21728-2008進(jìn)行測(cè)定[12];鉛含量采用原子吸收分光光度法測(cè)定[13]。
1.2.4 功能性成分含量的測(cè)定 茶色素含量,按文獻(xiàn)[14]方法測(cè)定;茶多糖含量根據(jù)文獻(xiàn)[15]方法測(cè)定。
1.2.5 滋味成分的測(cè)定 水浸出物、茶多酚、咖啡堿、游離氨基酸含量分別按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 8305-2013、GB/T 8313-2008、GB/T 8312-2013、GB/T 8314-2013進(jìn)行測(cè)定[16-19];兒茶素、可溶性糖含量根據(jù)文獻(xiàn)[15]方法測(cè)定。
1.2.6 感官審評(píng)方法 參照GB/T 23776-2009進(jìn)行密碼審評(píng)[20],審評(píng)小組由7名評(píng)茶員組成。綜合考慮,為盡可能反映嫩度對(duì)藏茶感官品質(zhì)的影響,舍去外形及葉底指標(biāo),評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參照表1。審評(píng)得分采用百分制,計(jì)算方法為:審評(píng)得分=(湯色×15%+香氣×25%+滋味×30%)/70%。
表1 藏茶品質(zhì)評(píng)語(yǔ)和品質(zhì)因子評(píng)分表Table 1 Tibetan tea quality reviews and quality factor scoring sheet
1.2.7 香氣成分的測(cè)定
1.2.7.1 香氣成分的提取 使用前,先將PDMS/DVB萃取纖維頭在GC進(jìn)樣口250 ℃老化1 h[21]。稱取粉碎的每種茶樣各2.00 g,放入20 mL頂空瓶中,加入5 mL燒沸的蒸餾水沖泡,立即密閉瓶口。自動(dòng)進(jìn)樣器條件:80 ℃保持10 min,80 ℃吸附60 min,解吸附3.5 min,轉(zhuǎn)速250 r/min,每樣品重復(fù)2次。
1.2.7.2 GC/MS條件 GC條件:HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);進(jìn)樣口溫度250 ℃;載氣為高純氦氣,純度≥99.99%,柱流量1.0 mL/min;升溫程序:初始溫度50 ℃,保持5 min,以3 ℃/min升至210 ℃,保持3 min,再以15 ℃/min 升至230 ℃;不分流進(jìn)樣。
MS條件:離子源EI,電子能量70 eV,離子源溫度230 ℃,發(fā)射電流34.6 μA,轉(zhuǎn)接口溫度280 ℃,電子倍增器電壓350 V,質(zhì)量掃描范圍m/z 35~400,溶劑延遲時(shí)間為2.8 min。
1.2.7.3 定性與定量方法 由GC-MS分析得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)經(jīng)計(jì)算機(jī)在NIST 08.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行檢索,根據(jù)質(zhì)譜匹配度進(jìn)行核對(duì),然后再?gòu)奶卣麟x子、相對(duì)豐度、實(shí)際成分和保留指數(shù)等方面進(jìn)行綜合比較,確定其化學(xué)成分,同時(shí)采用峰面積歸一化法進(jìn)行定量,得到各組分的相對(duì)含量(組分峰面積占總峰面積的百分比)。
數(shù)據(jù)先采用Excel 2016進(jìn)行初步計(jì)算整理,然后利用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)分析。
氟和鉛元素是藏茶重要的安全性指標(biāo)。由表2可知,隨原料嫩度降低,藏茶氟和鉛含量均表現(xiàn)為逐漸升高的趨勢(shì),且各嫩度間差異顯著(p<0.05)。我國(guó)茶葉氟元素限量標(biāo)準(zhǔn)為300 mg/kg[22],表2顯示一芽五葉嫩度以內(nèi)藏茶氟含量為安全限量,氟含量范圍為28.26~201.57 mg/kg,而粗老枝葉藏茶氟含量遠(yuǎn)高于限量標(biāo)準(zhǔn),因此應(yīng)嚴(yán)格棄用粗老枝葉生產(chǎn)加工藏茶。我國(guó)茶葉鉛元素的限量標(biāo)準(zhǔn)為5 mg/kg[22],表2顯示一芽五葉嫩度以內(nèi)藏茶鉛含量均處于<3 mg/kg的水平,鉛含量范圍為0.78~2.88 mg/kg,而粗老枝葉藏茶鉛含量為4.13 mg/kg,遠(yuǎn)高于一芽五葉嫩度以內(nèi)藏茶的鉛含量,接近國(guó)家鉛元素限量標(biāo)準(zhǔn)。由此說(shuō)明,原料嫩度越低,所制藏茶的氟、鉛含量越高。
表2 原料嫩度對(duì)藏茶氟與鉛含量的影響Table 2 Effects of raw material tenderness on fluorine and lead content in Tibetan tea
由表3可知,不同嫩度原料所制藏茶的感官評(píng)分差異顯著(p<0.05)。隨原料嫩度降低,感官評(píng)分表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢(shì)。一芽三葉原料所制藏茶感官評(píng)分最高為89.55分,感官品質(zhì)表現(xiàn)為湯色橙黃明亮、香氣陳香高長(zhǎng)、滋味濃醇回甘;粗老枝葉原料所制藏茶感官評(píng)分最低為71.69分,感官品質(zhì)表現(xiàn)為湯色橙紅發(fā)暗、香氣粗老粗氣、滋味尚粗略澀。表3顯示,芽和一芽一葉藏茶湯色易出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象,表現(xiàn)為原料越嫩,湯色越渾濁,同時(shí)滋味上易出現(xiàn)稍酸的風(fēng)味特點(diǎn)。由此說(shuō)明,原料嫩度對(duì)藏茶的感官品質(zhì)影響較大。
表3 原料嫩度對(duì)藏茶感官品質(zhì)的影響Table 3 Effects of raw material tenderness on the sensory quality of Tibetan tea
茶褐素和茶多糖是藏茶重要的功能性成分。由表4可知,不同嫩度原料所制藏茶的茶黃素(TF)、茶紅素(TR)及茶褐素(TB)含量均表現(xiàn)出顯著差異(p<0.05)。茶色素總量以一芽二葉藏茶最高,為13.437%,茶褐素含量以一芽三葉藏茶最高,為10.479%。由此說(shuō)明,原料嫩度對(duì)藏茶茶色素的含量和組成比例存在顯著影響(p<0.05)。不同嫩度處理藏茶的TF、TR及TB含量均呈現(xiàn)出TB>TR>TF的特點(diǎn),表明茶褐素是藏茶茶色素的主體物質(zhì)。茶多糖含量以一芽五葉藏茶最高為2.827%,芽藏茶最低,為1.023%;一芽五葉嫩度范圍內(nèi),隨原料嫩度降低,茶多糖含量表現(xiàn)出逐漸增加的趨勢(shì),且相互間差異顯著(p<0.05),含量范圍為1.023%~2.827%,這一結(jié)果提示茶多糖含量與原料的成熟度并非完全呈正相關(guān),這與陳玉瓊[23]等人的研究結(jié)果基本一致。
表4 原料嫩度對(duì)藏茶功能性成分的影響Table 4 Effects of raw material tenderness on the functional components of Tibetan tea
茶葉滋味主要由茶湯中的呈味物質(zhì)種類、含量及組成比例所決定[22]。由表5可知,隨嫩度降低,藏茶水浸出物含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì),以一芽二葉藏茶水浸出物含量最高,為42.16%;藏茶茶多酚及兒茶素含量隨嫩度變化趨勢(shì)基本一致,一芽一葉渥堆后保留的茶多酚和兒茶素含量顯著高于其它嫩度處理(p<0.05),含量分別為17.48%和3.05%,這與其滋味偏澀的感官品質(zhì)特征相符;隨嫩度降低,藏茶咖啡堿和氨基酸均表現(xiàn)為逐漸降低的趨勢(shì),且不同嫩度間差異顯著(p<0.05),咖啡堿含量范圍為2.13%~4.19%,氨基酸含量范圍為1.70%~2.93%;隨嫩度降低,藏茶可溶性糖含量表現(xiàn)為先增加后降低的趨勢(shì),以一芽三葉藏茶可溶性糖含量最高為6.71%。
表5 原料嫩度對(duì)藏茶滋味成分的影響Table 5 Effects of raw material tenderness on the flavor components of Tibetan tea
由表6和圖2可知,不同嫩度藏茶均檢測(cè)出45種相同的香氣成分,其中醇類16種,酮類8種,醛類6種,酯類5種,酸類4種,吡咯類3種,其它類3種,且均以醇類物質(zhì)相對(duì)含量最高,檢出香氣組分?jǐn)?shù)量最多,但各類香氣物質(zhì)的相對(duì)含量和組成比例存在明顯差異。香葉醇是黑茶中大量存在的醇類香氣物質(zhì),相對(duì)含量以一芽一葉藏茶最高,為10.58%,一芽四葉藏茶最低為7.20%,與嫩度不構(gòu)成直接關(guān)系。苯甲醛具苦杏仁香氣[24],以嫩度較高的芽藏茶和一芽一葉藏茶含量較高,而反-2-反-4-庚二烯醛以嫩度較低的藏茶含量較高,推測(cè)這兩種香氣成分與藏茶的原料嫩度有關(guān),因?yàn)槟鄱瓤赡苁怯绊憙煞N香氣物質(zhì)的前體物在茶樹(shù)體內(nèi)形成的因素。酯類香氣物質(zhì)以水楊酸甲酯和二氫獼猴桃內(nèi)酯為主,各嫩度藏茶的酯類香氣物質(zhì)相對(duì)含量差異不大,含量范圍為9.20%~11.57%;吡咯類物質(zhì)以1-乙基-2-甲酰吡咯為主,具桂皮香[24]。感官審評(píng)香氣評(píng)分顯示一芽三葉、一芽四葉藏茶香氣最優(yōu),這可能與其香氣成分的配比有關(guān),而嫩度是影響藏茶香氣物質(zhì)配比的重要因素之一。
表6 原料嫩度對(duì)藏茶香氣組分的影響Table 6 Effects of raw material tenderness on aroma components of Tibetan tea
圖2 原料嫩度對(duì)藏茶香氣組分種類及相對(duì)含量的影響Fig.2 Effects of raw material tenderness on the species and relative content of aroma components of Tibetan tea
氟、鉛作為茶葉中重要的安全性限量元素,與人體健康密切相關(guān)[25-26]。本研究表明,藏茶氟、鉛含量隨嫩度降低均表現(xiàn)為逐漸升高的趨勢(shì),可見(jiàn)藏茶氟、鉛含量與鮮葉嫩度有著密切關(guān)系,表現(xiàn)為累積效應(yīng),這與前人的研究結(jié)果一致[26-28]。在茶樹(shù)生長(zhǎng)過(guò)程中,樹(shù)體吸收累積氟和鉛元素,轉(zhuǎn)移或富集于鮮葉內(nèi),這是造成藏茶氟、鉛元素超標(biāo)的直接原因[29]。因此,嚴(yán)格控制加工藏茶的鮮葉嫩度,能減少茶樹(shù)氟、鉛富集時(shí)間,有效降低氟、鉛污染問(wèn)題。
湯色、香氣及滋味作為茶葉品質(zhì)評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。本研究表明,鮮葉嫩度過(guò)高或過(guò)低都不利于藏茶品質(zhì)形成。一芽三葉藏茶感官品質(zhì)最優(yōu),具有較高的水浸出物、可溶性糖、茶多糖和茶褐素含量,同時(shí)伴有相對(duì)較低的咖啡堿含量,有利于形成藏茶醇厚的品質(zhì)特征,這與丁健、唐飛等研究結(jié)果一致[30-31]。推測(cè)適當(dāng)成熟的一芽三葉原料具有形成藏茶良好滋味特征的物質(zhì)基礎(chǔ),渥堆過(guò)程中伴隨著茶多酚及兒茶素為主體的一系列物質(zhì)的復(fù)雜變化,最終形成藏茶獨(dú)特的風(fēng)味品質(zhì)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),單芽和一芽一葉嫩度較高的鮮葉所制藏茶,湯色易出現(xiàn)渾濁沉淀現(xiàn)象,表現(xiàn)為原料越嫩藏茶湯色越渾濁,原因有待進(jìn)一步研究。同時(shí),芽和一芽一葉藏茶滋味上易表現(xiàn)為稍酸的風(fēng)味特點(diǎn),可能與其較高的有機(jī)酸組分有關(guān),這與唐飛研究結(jié)果基本一致[31]。
茶褐素和茶多糖具有較強(qiáng)的生物活性和保健功效[32-33]。本研究表明,茶褐素是藏茶茶色素的主體物質(zhì)且與原料嫩度明顯相關(guān),這可能是由于不同嫩度鮮葉茶多酚及兒茶素的含量與組成比例不同,使得渥堆后生成的茶色素組成比例不同[24]。宋勵(lì)修等[34]研究表明,六大茶類中黑茶的茶多糖含量較高;陳玉瓊等[23]研究表明,茶樹(shù)品種、部位和嫩度對(duì)茶多糖含量和活性具有顯著影響,這與本試驗(yàn)研究結(jié)果基本一致,表明適當(dāng)成熟的原料具有形成藏茶高茶多糖含量的物質(zhì)基礎(chǔ)。
茶葉香氣是決定茶葉品質(zhì)的重要因子之一,不同芳香物質(zhì)以不同濃度組合形成茶葉特有的香型并伴有香氣高低、持久性差異,藏茶的香氣特征以陳香為主[35]。本研究表明,不同嫩度藏茶具有45種共同香氣物質(zhì),且均以醇類物質(zhì)相對(duì)含量最高,檢出數(shù)量最多,這與鄒瑤等[36]的研究結(jié)果一致。同時(shí),鄭淑娟等[37]研究也表明,萜烯醇類化合物、醇類、酮類和醛類等物質(zhì)是形成黑茶香氣的主要成分。然而,何華鋒等[38]研究表明,甲氧基苯類和烯醛類化合物是黑茶獨(dú)特香型的特征成分,這與本研究結(jié)果不一致,推測(cè)這可能與不同產(chǎn)地黑茶的鮮葉原料品種、嫩度及加工工藝有關(guān)。
綜上所述,原料嫩度對(duì)藏茶的品質(zhì)及香氣存在明顯影響。隨嫩度的降低,藏茶氟、鉛含量均呈現(xiàn)為逐漸升高的趨勢(shì),感官評(píng)分表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢(shì),以一芽三葉藏茶感官評(píng)分最高,為89.55分,同時(shí)具有較高的水浸出物、可溶性糖、茶多糖、茶褐素含量和較低的咖啡堿含量。不同嫩度藏茶均檢測(cè)出45種相同的香氣成分,包括醇類16種,酮類8種,醛類6種,酯類5種,酸類4種,吡咯類3種,其它類3種,且均以醇類物質(zhì)相對(duì)含量最高,檢出香氣組分?jǐn)?shù)量最多,嫩度對(duì)藏茶香氣物質(zhì)的相對(duì)含量和組成比例有明顯影響。綜合考慮,鮮葉嫩度過(guò)高或過(guò)低都不適合藏茶加工,建議采用適度成熟的一芽三葉鮮葉作為藏茶生產(chǎn)原料。