白酒中氰化物國標檢驗方法的驗證與探討

杜民杰

摘要：本研究驗證了分光光度法測定白酒中氰化物含量的國標方法，并對實驗操作中的關鍵點作了探討。結果表明，氰化物濃度在0-2.0mg/L范圍內線性良好，檢出限為0.02mg/L，回收率在90.00%-101.33%之間，RSD為1.2%。

關鍵詞：白酒；氰化物；分光光度法

氰化物是劇毒物質，進入機體會使細胞色素氧化酶失活，導致人體缺氧窒息。白酒中的氰化物主要由植物原料中的氰甙類配糖體在制酒過程中經水解產生，GB2757-2012中規(guī)定其限量為8.0mg/L，飲用氰化物超標的白酒會嚴重危害飲酒者的生命健康。目前，GB5009.36-2016中規(guī)定了分光光度法、氣相色譜法兩種氰化物定量檢測方法，對于基層實驗室而言，前者設備成本較低、操作簡便快速。因此，本研究對白酒中氰化物測定的分光光度法進行了驗證，并探討了實驗環(huán)節(jié)中的關鍵點。

1. 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

白酒（購自某超市）；氰化物標準溶液（GBW（E）080115，50μg/mL）。

氫氧化鈉；酚酞指示劑；乙酸；異煙酸；吡唑啉酮；氯胺T；去離子水等。

721G可見分光光度計（上海儀電公司）；電熱板；恒溫水浴鍋。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準系列配制

準確吸取1.0mL氰化物標準溶液，用氫氧化鈉溶液（2g/L）定容至50mL，制得1μg/mL的標準中間液。分別吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL上述中間液于10mL比色管中，加入氫氧化鈉溶液至5mL，待處理。

1.2.2 白酒試樣制備

準確吸取1.0mL酒樣至50mL燒杯中，加5mL氫氧化鈉溶液（2g/L），放置10min，用120℃電熱板加熱至約剩1mL轉移至10mL比色管中，以氫氧化鈉溶液（2g/L）多次洗滌燒杯后并入洗滌液至5mL。

1.2.3 試樣溶液測定

于放置標準系列和酒樣的比色管中滴入2滴酚酞指示劑，加入乙酸溶液（1+24）至紅色褪去，再以氫氧化鈉溶液（2g/L）調至近紅色后，依次加入2mL磷酸鹽緩沖溶液、0.2mL氯胺T溶液（10g/L），搖勻后放置3min，然后加入2mL異煙酸-吡唑啉酮溶液，用去離子水定容，振蕩搖勻，最后于37℃下水浴40min后在波長638nm測定吸光度，以標準系列點所含氰化物質量為橫坐標，對應的吸光度為縱坐標，制作標準曲線，并以此定量酒樣中的氰化物含量。

2. 結果與討論

2.1 線性關系及檢出限

測定標準系列的吸光度值，繪制標準曲線，回歸方程為y=0.2923x-0.0667，R2=0.9991。按照取樣量為1.0mL，定容體積為10mL，做20次空白平行試驗，測定并記錄吸光度值，根據(jù)公式DL=3SD/b（b為標曲斜率）計算得本方法的檢出限為0.02mg/L。

2.2 加標回收率與精密度

在白酒試樣（本底為0.33mg/L）中添加低（0.5mg/L）、中（1.0mg/L）、高（1.5mg/L）不同濃度水平的標準溶液，各濃度水平平行測定2次，考察加標回收率；將上述白酒試樣平行測定6次，考察精密度，經計算得本方法的加標回收率在90.00%-101.33%之間，相對標準偏差RSD=1.2%。

2.3 實驗室間比對試驗

為驗證本實驗方法的有效性，確保出具的數(shù)據(jù)準確可靠，本實驗室與河南華測檢測技術有限公司實驗室進行比對試驗，某批次的古月牌清香型白酒兩家實驗室測得氰化物含量均為0.29mg/L，比對結果滿意。

2.4 實驗操作關鍵點探討

分光光度法測定白酒中的氰化物需要將氰化物轉化為氯化氰，而該過程必須在體系pH=7.0條件下進行，實驗中需要兩次調節(jié)pH，然而酸堿用量須少于0.8mL才能確保最后定容準確。分光光度法基于朗伯比爾定律來定量，若顯色液渾濁對吸光度值影響很大，因此，酸堿調節(jié)過程要掌握好酸堿用量，以免超過定容體積導致實驗失敗。此外，對于渾濁或有色酒樣必須按照GB5009.36-2016中5.2.2蒸餾后取餾出液測定，以消除渾濁，準確定量。

3. 結論

白酒是節(jié)日慶典、親友聚會的必需品，氰化物含量是酒類的重要指標之一，白酒中氰化物的檢測是酒廠出廠檢驗和食品安全抽檢的常規(guī)項目。本研究驗證了白酒中氰化物檢測的國標方法，并對實驗關鍵點進行探討，旨在滿足本中心檢測需求的同時，為其它實驗室驗證方法提供參考。