1-(3-苯氧基丙基)-1H-1,2,4-三氮唑衍生物的合成及其抗驚厥活性

陳士龍，郭東福，喻圣旺，何世輝，趙文豪，鄧先清

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1-(3-苯氧基丙基)-1H-1,2,4-三氮唑衍生物的合成及其抗驚厥活性

陳士龍，郭東福，喻圣旺，何世輝，趙文豪，*鄧先清

（井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部，江西，吉安 343009）

合成一系列1-(3-苯氧基丙基)-1H-1,2,4-三氮唑衍生物，對(duì)其體內(nèi)抗驚厥活性進(jìn)行研究。以取代酚為起始原料，先后與1-溴-3-氯丙烷及1,2,4-三氮唑進(jìn)行烷基化反應(yīng)，得到目標(biāo)化合物2a-2m。化合物2a-2m通過(guò)核磁共振氫譜、碳譜和質(zhì)譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證；采用最大電休克發(fā)作模型和皮下戊四唑模型評(píng)價(jià)目標(biāo)化合物的抗驚厥活性，旋轉(zhuǎn)棒法評(píng)價(jià)目標(biāo)化合物的神經(jīng)毒性。合成了一系列單烷基取代的三唑類(lèi)衍生物，這些化合物對(duì)MES模型和Sc-PTZ 模型均有效，大部分在100 mg/kg劑量下表現(xiàn)出抗驚厥活性，使得該類(lèi)化合物具有廣譜的抗癲癇潛能。新合成的(3-苯氧基丙基)-1H-1,2,4-三氮唑衍生物具有較好的抗驚厥活性，使得該類(lèi)化合物具有廣譜的抗癲癇潛能。本研究進(jìn)一步豐富了三唑類(lèi)化合物的抗癲癇構(gòu)效關(guān)系，同時(shí)為研究大發(fā)作和失神發(fā)作類(lèi)癲癇的治療藥物提供了一定的基礎(chǔ)。

三氮唑；抗癲癇；最大電休克發(fā)作模型；戊四唑

0 前言

癲癇是一種影響所有年齡人群的非傳染性腦部功能紊亂慢性疾患。近年來(lái)，癲癇發(fā)病率逐年增高，已成為僅次于腦血管疾病的第二大神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)疾患[1]。世界衛(wèi)生組織調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，全世界癲癇患者人數(shù)已高達(dá)5000萬(wàn)，其中近80 %的癲癇患者在發(fā)展中國(guó)家，我國(guó)癲癇患者已超1000萬(wàn)[2]。最新流行病學(xué)研究表明，有近30 %的患者無(wú)法通過(guò)傳統(tǒng)抗癲癇藥物（AEDs）或其他治療手段使病情得以控制，有近50%的癲癇患者平均壽命僅為55歲[3]。此外，這些AEDs治療是對(duì)癲癇發(fā)作時(shí)的抑制，并不能阻斷或延緩癲癇疾病的產(chǎn)生，需要患者長(zhǎng)期服藥（半年以上甚至終身），因此而帶來(lái)了耐藥性和毒副作用的問(wèn)題。長(zhǎng)期服用AEDs易導(dǎo)致肝臟功能損害、血液系統(tǒng)異常、皮膚損害等嚴(yán)重的副作用[4-7]。癲癇患者在生存質(zhì)量明顯下降的同時(shí)也給家庭和社會(huì)增加了大量的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[8-9]。以美國(guó)為例，每年新增的癲癇病患者達(dá)15萬(wàn)，每年醫(yī)療花費(fèi)保守估計(jì)高達(dá)40~70億美元[10]，因此，開(kāi)發(fā)新的AEDs仍然是癲癇治療的重點(diǎn)。

三氮唑是一個(gè)藥物設(shè)計(jì)領(lǐng)域重要的活性片段，它的芳香性和富電子性質(zhì)使其易于與各種不同的酶和受體結(jié)合，從而賦予其廣泛的生物活性。自20世紀(jì)后期三唑侖和艾普唑侖作為抗癲癇藥物上市以來(lái)，藥物化學(xué)家們?cè)O(shè)計(jì)合成了大量的三唑衍生物，用于篩選其抗癲癇活性，發(fā)現(xiàn)新的抗癲癇藥物[11-13]。在之前的工作中，我們合成了大量三唑類(lèi)化合物并評(píng)價(jià)了它們的抗癲癇活性。這些化合物的三唑環(huán)大多是與其他芳環(huán)稠合，或者直接與芳環(huán)單鍵相連，這樣的連接方式可以使得芳環(huán)上的電子離域到三氮唑上，從而增強(qiáng)三唑環(huán)與受體的結(jié)合。但這種結(jié)構(gòu)中的三唑環(huán)由于與其他基團(tuán)緊密相連，在與受體結(jié)合時(shí)也可能因?yàn)榭臻g位阻而降低親和力，并且烷基單取代的三氮唑抗癲癇活性尚未見(jiàn)報(bào)道?；谝陨显?，為了進(jìn)一步闡明三唑類(lèi)衍生物抗癲癇活性的構(gòu)效關(guān)系，本研究設(shè)計(jì)了一系列烷基單取代的三氮唑衍生物，并采用最大電驚厥和皮下戊四唑模型初步評(píng)價(jià)了目標(biāo)化合物的抗癲癇活性。

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1　儀器與試劑

核磁共振分析采用BURKER AV-300 型核磁共振儀，四甲基硅(TMS)為內(nèi)標(biāo)，溶劑用DMSO-d(Bruker, Switzerland)；高分辨質(zhì)譜采用UltrafleXtreme MALDI-TOF/TOF 質(zhì)譜儀 (Bruker Daltonik GmbH, Leipzig, Germany)測(cè)定；熔點(diǎn)采用毛細(xì)管法測(cè)定(溫度計(jì)未經(jīng)校正)。實(shí)驗(yàn)所用試劑包括1,2,4-三氮唑 (99%，阿拉丁試劑公司)、各種取代酚（99%，麥克林試劑公司）、1-溴-3-氯丙烷(99%，麥克林試劑公司)，和其他常規(guī)溶劑（分析純，國(guó)藥基團(tuán)化工試劑有限公司）。

1.2　化合物合成

1.2.1化合物1a-1m的合成

以化合物1a（R = H）的合成為例：稱(chēng)取0.82 g（0.005 mol）苯酚、0.56 g(0.01 mol) KOH于裝有3.0 mL DMSO的50 mL圓底燒瓶中，在常溫下用磁力攪拌器進(jìn)行機(jī)械攪拌反應(yīng)，5 min后滴加1.57 g (0.01 mol)1-溴-3-氯丙烷，繼續(xù)常溫反應(yīng)6 h。反應(yīng)每隔1 h，用薄層色譜法TLC（展開(kāi)劑為石油醚：乙酸乙酯= 3:1）檢測(cè)反應(yīng)是否完全。當(dāng)確定反應(yīng)完全后停止反應(yīng)，向反應(yīng)液中加入30 mL水，用二氯甲烷（20 mL*3）萃取3次，再用鹽水（30 mL*2）洗滌2次，有機(jī)相加入無(wú)水硫酸鎂干燥過(guò)夜，柱層析純化（洗脫系統(tǒng)：石油醚：二氯甲烷 = 10:1）得到化合物1a，化合物1b-1m采用類(lèi)似方法制備。

1.2.2化合物2a-2m的合成

以化合物2a（R = H）的合成為例：稱(chēng)取1.68 g（0.0099 mol）1a、1.36 g (0.0197 mol) 1,2,4-三氮唑，2.73 g（0.0198 mol）研磨后的碳酸鉀于裝有10 mL乙腈的100 mL圓底燒瓶中，用加熱磁力攪拌器進(jìn)行機(jī)械攪拌并加熱至90 ℃，反應(yīng)48 h。反應(yīng)每隔2 h，用薄層色譜法TLC（展開(kāi)劑為石油醚：乙酸乙酯= 3:1）檢測(cè)反應(yīng)是否完全。當(dāng)確定反應(yīng)完全后停止反應(yīng)，減壓蒸除溶劑后加入30 mL水，用二氯甲烷（20 mL*3）萃取3次，有機(jī)相加入無(wú)水硫酸鎂干燥，柱層析純化（洗脫系統(tǒng)：二氯甲烷：甲醇 = 100:1）得化合物2a，化合物2b-2m類(lèi)似方法制備。

1.2.3化合物2a, 2c-2f的成鹽

以化合物2a成鹽為例：將液態(tài)產(chǎn)物2a溶于20 mL二氯甲烷中，通入HCl氣體（用氯化鈉和濃硫酸反應(yīng)，產(chǎn)生鹽酸氣體），控制HCl氣體的流速，緩慢通入，維持2 h即可反應(yīng)完全。將反應(yīng)液減壓旋干得到固體、紅外燈下干燥收集得到2a鹽酸鹽。化合物2a-2m的理化數(shù)據(jù)如下：

1-(3-苯氧基丙基)-1H-1,2,4-三氮唑鹽酸鹽 (2a)

熔點(diǎn)142-144 ℃, yield 75%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.51 (s, 2H, CH2), 4.11 (s, 2H, CH2), 4.74 (s, 2H, CH2),6.81-6.94 (m, 3H, Ph-H), 7.22-7.27 (m, 2H, Ph-H), 8.38 (s, 1H, Triazole-H), 10.68 (s, 1H, Triazole-H), 12.24 (s, 1H, HCl).13C-NMR (CDCl3,75MHz):158.03, 143.09, 142.08, 129.43, 121.15, 114.38, 64.20, 49.62, 28.84. ESI-HRMS calcd for C11H14N3O+([M + H]+): 204.1131; found: 204.1127。

1-(3-(4-甲基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑鹽酸鹽（2b）

熔點(diǎn)42-44℃產(chǎn)率62%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.29 (s, 3H, CH3), 2.34 (t, 2H,= 6.0 Hz,CH2), 3.89 (t, 2H,= 5.8 Hz, CH2-N), 4.41 (t, 2H,= 6.7 Hz, CH2O), 6.77 (d, 2H,= 8.6 Hz, Ph-H), 7.10 (d, 2H,= 8.6 Hz, Ph-H), 7.96 (s, 1H, Triazole-H), 8.05 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):156.31, 152.11, 143.33, 130.38, 129.93, 114.31, 63.97, 46.22, 29.38, 20.35. ESI-HRMS calcd for C12H16N3O+([M + H]+): 218.1288; found: 218.1277。

1-(3-(4-丙基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑鹽酸鹽 (2c)

熔點(diǎn)109-110℃產(chǎn)率 63%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):0.91 (t, 3H,= 6.1 Hz,CH3), 1.54-1.61 (m, 2H, CH2), 2.46-2.51 (t, 4H, CH2),4.07 (s, 2H, CH2), 4.74 (s, 2H, CH2), 6.75 (d, 2H,= 7.3 Hz, Ph-H), 7.05 (d, 2H,= 7.3 Hz, Ph-H), 8.48(s, 1H, Triazole-H), 10.86(s, 1H, Triazole-H), 15.75 (s, 1H, HCl ).13C-NMR (CDCl3,75MHz):156.01, 142.05, 141.88, 135.23, 129.21, 114.05, 64.26, 49.85, 36.92, 28.76, 24.56, 13.60.ESI-HRMS calcd for C14H20N3O+([M + H]+): 246.1601; found: 246.1597。

1-(3-(4-戊基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑鹽酸鹽 (2d)

熔點(diǎn)136-137 ℃, 產(chǎn)率61%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):0.88 (t, 3H, CH3), 1.26-1.36 (m, 4H, CH2), 1.51-1.58 (m, 2H, CH2), 2.49-2.54 (m, 4H, CH2), 4.07 (t, 2H,= 5.0 Hz, CH2), 4.72 (t, 2H,= 6.3 Hz, CH2), 6.75 (d, 2H,= 8.5 Hz, Ph-H), 7.06(d, 2H,= 8.5 Hz, Ph-H), 8.38 (s, 1H, Triazole-H), 10.62 (s, 1H, Triazole-H), 11.26 (s, 1H, HCl).13C-NMR (CDCl3,75MHz):156.03, 141.99, 141.54, 135.56, 129.20, 114.08, 64.19, 49.71, 34.87, 31.33, 31.27, 28.73, 22.42, 13.94. ESI-HRMS calcd for C16H24N3O+([M + H]+): 274.1914; found: 274.1910。

1-(3-(4-叔戊基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑鹽酸鹽（2e）

熔點(diǎn)138-139℃, 產(chǎn)率 64%.1H-NMR (DMSO-6, 300 MHz):0.66 (t, 3H, CH3), 1.24 (s, 6H, CH3), 1.61 (q, 2H,= 7.4 Hz, CH2), 2.49 (t, 2H,= 4.5 Hz, CH2), 4.07 (t, 2H,= 4.8 Hz, CH2), 4.72 (s, 2H,= 4.5 Hz, CH2), 6.78 (d, 2H,= 8.7 Hz, Ph-H), 7.22 (d, 2H,= 8.7 Hz, Ph-H), 8.43 (s, 1H, Triazole-H), 8.94 (s, 1H, Triazole-H), 10.67 (s, 1H, HCl).13C-NMR (DMSO-6,75MHz):155.70, 142.37, 142.11, 141.57, 126.88, 113.73, 64.08, 49.61, 37.16, 36.77, 28.74, 28.45, 9.02. ESI-HRMS calcd for C16H24N3O+/([M + H]+):274.1914; found: 274.1908。

1-(3-(4-甲氧基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑鹽酸鹽 (2f)

熔點(diǎn)142-143 ℃, 產(chǎn)率 63%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.46 (s, 2H, CH2), 3.74 (s, 3H, OCH3), 4.04 (s, 2H, CH2), 4.71 (s, 2H, CH2), 6.76 (d, 2H,= 8.6 Hz, Ph-H), 6.80 (d, 2H,= 8.6 Hz, Ph-H), 8.37 (s, 1H, Triazole-H), 10.51 (s, 2H, Triazole-H, HCl).13C-NMR(CDCl3,75MHz):154.45, 152.48, 143.10, 142.00, 115.73, 114.93, 65.27, 55.78, 49.53, 29.01. ESI-HRMS calcd for C12H16N3O2+([M + H]+): 234.1237; found: 234.1228。

1-(3-(4-丙氧基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2g)

熔點(diǎn)50-51 ℃, 產(chǎn)率 65%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):1.02 (t, 3H, CH3), 1.75-1.81 (m, 2H, CH2), 2.29-2.37 (m, 2H, CH2), 3.84-3.88 (m, 4H, Ph-H), 4.40 (t, 2H,= 6.7 Hz, CH2), 6.77-6.84 (m, 4H, CH2), 7.96 (s, 1H, Triazole-H), 8.05 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR(CDCl3,75MHz):153.71, 152.47, 152.11, 143.34, 115.55, 115.42, 70.17, 64.59, 46.24, 29.45, 22.61, 10.42. ESI-HRMS calcd for C14H20N3O2+([M + H]+): 262.1550; found: 262.1542。

1-(3-(4-苯氧基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2h)

熔點(diǎn)61-63℃, 產(chǎn)率79%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.33-2.41 (m, 2H, CH2), 3.91 (t, 2H,= 5.7 Hz, CH2), 4.43 (t, 2H,= 6.7 Hz, CH2), 6.83-7.07 (m, 7H, Ph-H), 7.26-7.33 (m, 2H, Ph-H), 7.97 (s, 1H, Triazole-H), 8.07 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):158.19, 154.55, 152.10, 150.48, 143.33, 129.53, 122.46, 120.70, 117.61, 115.35, 64.23, 46.12, 29.29. ESI-HRMS calcd for C17H18N3O2+([M + H]+):296.1394; found: 296.1391。

1-(3-(4-(芐氧基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2i)

熔點(diǎn)84-85 ℃, 產(chǎn)率69%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.29-2.37(m, 2H, CH2), 3.86 (t, 2H,= 5.7 Hz, CH2), 4.40 (t, 2H,= 6.6 Hz, CH2),5.01 (s, 2H, CH2), 6.80 (d, 4H,= 9.2 Hz, Ph-H), 6.90 (d, 4H,= 9.2 Hz, Ph-H), 7.26-7.44 (m, 4H, Ph-H), 7.96 (s, 1H, Triazole-H), 8.05 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):153.19, 152.67, 152.12, 143.38, 137.09, 128.47, 127.83, 127.38, 115.81, 115.27, 70.55, 64.34, 46.17, 29.35..ESI-HRMS calcd for C18H20N3O2+([M + H]+): 310.1550; found: 310.1543。

1-(3-((苯并[d][1,3]二氧五環(huán)-5-基)氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2j)

熔點(diǎn)78-79℃產(chǎn)率 65%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.28-2.36 (m, 2H, CH2), 3.84 (t, 2H,= 5.7 Hz, CH2), 4.39 (t, 2H,= 6.7 Hz, CH2), 5.91 (s, 2H, OCH2O), 6.27 (dd, 1H,1= 2.5 Hz,2= 8.5 Hz, Ph-H), 6.46 (d, 1H,= 2.5 Hz, Ph-H), 6.69 (d, 1H,= 8.5 Hz, Ph-H), 7.96 (s, 1H, Triazole-H), 8.05 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):153.78, 152.07, 148.22, 143.31, 141.85, 107.87, 105.44, 101.09, 97.88, 64.65, 46.10, 29.26. ESI-HRMS calcd for C12H14N3O3+([M + H]+):248.1030; found: 248.1022。

1-(3-(4-(乙酰基苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2k)

熔點(diǎn)69-71℃,產(chǎn)率 74%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.34-2.42 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, COCH3), 3.99 (t, 2H,= 5.5 Hz, CH2), 4.40 (t, 2H,= 6.5 Hz, CH2), 6.88 (d, 2H,= 8.7 Hz, Ph-H), 7.91 (d, 2H,= 8.7 Hz, Ph-H), 7.94 (s, 1H, Triazole-H), 8.05 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):196.52, 162.13, 152.10, 143.26, 130.59, 130.51, 113.95, 64.10, 46.01, 29.11, 26.23. ESI-HRMS calcdfor C13H16N3O2+([M + H]+):246.1237; found: 246.1228。

1-(3-(4-氯苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2l)

熔點(diǎn)58-59℃, 產(chǎn)率 62%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.31-2.40 (m, 2H, CH2), 3.89 (t, 2H,= 5.8 Hz, CH2), 4.40 (t, 2H,= 6.7 Hz, CH2),6.79 (d, 2H,= 9.0 Hz, Ph-H), 7.24 (d, 2H,= 9.0 Hz, Ph-H), 7.96 (s, 1H, Triazole-H), 8.04 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):156.90, 152.11, 143.26, 129.31, 125.89, 115.56, 64.12, 46.04, 29.18. ESI-HRMS calcd for C11H13ClN3O+([M + H]+): 238.0742; found:238.0736。

1-(3-(2,4-二氯苯氧基)丙基)-1H-1,2,4-三氮唑 (2m)

熔點(diǎn)55-57 ℃, 產(chǎn)率 64%.1H-NMR (CDCl3, 300 MHz):2.38-2.46 (m, 2H, CH2), 3.92 (t, 2H,= 5.7 Hz, CH2), 4.48 (t, 2H,= 6.8 Hz, CH2),6.78 (d, 1H,= 8.4 Hz, Ph-H), 7.17 (dd, 1H,1= 2.5 Hz,2= 8.4 Hz, Ph-H), 7.39 (d, 1H,= 2.5 Hz, Ph-H), 7.96 (s, 1H, Triazole-H), 8.08 (s, 1H, Triazole-H).13C-NMR (CDCl3,75MHz):152.55, 152.22, 143.54, 129.95, 127.61, 126.17, 123.55, 114.00, 64.98, 45.65, 28.88. ESI-HRMS calcd for C11H12Cl2N3O+([M+H]+): 272.0352; found: 272.0344。

1.3 化合物抗驚厥活性及神經(jīng)毒性評(píng)價(jià)

按照美國(guó)衛(wèi)生院的抗癲癇藥物開(kāi)發(fā)方案，采用最大電驚厥模型和皮下戊四唑模型評(píng)價(jià)目標(biāo)化合物的抗驚厥活性，旋轉(zhuǎn)棒法評(píng)價(jià)目標(biāo)化合物的神經(jīng)毒性[14-15]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用昆明種小鼠（湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK(湘)2016-0003），體重20~24 g，雌雄各半、實(shí)驗(yàn)前3 d飼養(yǎng)于20~25 ℃、相對(duì)濕度45%~65% 的實(shí)驗(yàn)室中，可以自由采食和飲水。目標(biāo)化合物溶于DMSO中以0.05 mL/20 g容積腹腔注射。初期實(shí)驗(yàn)中，評(píng)價(jià)化合物在300、100、30 mg/kg三個(gè)劑下的抗驚厥活性和神經(jīng)毒性。

最大電休克發(fā)作實(shí)驗(yàn)(MES)：在最大電驚厥實(shí)驗(yàn)中，使用110V，60 Hz的交流電，小鼠耳電極通電0.3 s，出現(xiàn)后肢強(qiáng)直的視為驚厥。正式實(shí)驗(yàn)前一天預(yù)篩小鼠，出現(xiàn)驚厥的小鼠用于正式實(shí)驗(yàn)。給藥后0.5 h對(duì)小鼠進(jìn)行電刺激，觀察藥物的抗電誘導(dǎo)驚厥活性。

皮下戊四唑?qū)嶒?yàn)(Sc-PTZ)：小鼠給藥后0.5 h皮下給予85 mg/kg的戊四唑（該劑量可以使97%以上的小鼠產(chǎn)生連續(xù)5 s的陣攣性驚厥），小鼠單獨(dú)放置在鼠籠中觀察30 min，以沒(méi)有出現(xiàn)連續(xù)5 s以上的陣攣性驚厥為有效，認(rèn)為該藥物可以對(duì)抗由戊四唑誘導(dǎo)的驚厥。

神經(jīng)毒性實(shí)驗(yàn)：神經(jīng)毒性實(shí)驗(yàn)采用旋轉(zhuǎn)棒法，于給藥 0.5 h后將小鼠置于直徑1英寸、轉(zhuǎn)速為6 r/min的木棒上, 在連續(xù)3次的測(cè)試中小鼠均不能在木棒保持1 min而掉下視為有神經(jīng)毒性，反之則無(wú)神經(jīng)毒性。

2　結(jié)果與討論

2.1　合成部分

本實(shí)驗(yàn)以取代酚為起始原料，先后與1-溴-3-氯丙烷及1,2,4-三氮唑進(jìn)行烷基化反應(yīng)，得到目標(biāo)化合物（圖1）?；衔?a-1m的制備過(guò)程中，取代酚與1-溴-3-氯丙烷1:2的反應(yīng)當(dāng)量比較關(guān)鍵。由于丙烷兩端均可以進(jìn)行威廉姆生烷基化反應(yīng)，1-溴-3-氯丙烷需要過(guò)量，通過(guò)多次嘗試，發(fā)現(xiàn)2倍量時(shí)幾乎沒(méi)有雙取代副產(chǎn)物產(chǎn)生。由于化合物2a, 2c-2f得到的是油狀物，為了便于稱(chēng)量，我們將其通入鹽酸氣體得到了其鹽酸鹽, 均為白色晶體粉末。化合物2a-2m的結(jié)構(gòu)通過(guò)核磁共振氫譜、碳譜和質(zhì)譜得到了確證。結(jié)構(gòu)解析以化合物2b為例：在1H-NMR 中，2.29處的單峰為苯環(huán)上甲基的吸收峰，2.34 , 3.89, 4.41處的三個(gè)三重峰為丙基的三個(gè)亞甲基的吸收峰，δ 6.77和7.10處的兩對(duì)雙重峰為對(duì)位取代苯環(huán)的特征質(zhì)子信號(hào)，7.96和8.05位置的兩個(gè)單峰則為三氮唑上的兩個(gè)氫的吸收峰。13C NMR譜也準(zhǔn)確的給出了該化合物結(jié)構(gòu)的各種信息，恰好是10種不同化學(xué)環(huán)境的碳。高分辨質(zhì)譜分析中，化合物4b理論分子量為218.1288，實(shí)際測(cè)定值為218.1277，結(jié)合氫譜和碳譜可以確證其分子結(jié)構(gòu)。

圖1 目標(biāo)化合物2a-2m的合成路線(xiàn)

2.2　藥理實(shí)驗(yàn)部分

本實(shí)驗(yàn)采用了MES和Sc-PTZ 模型來(lái)評(píng)價(jià)目標(biāo)化合物2a-2m的抗驚厥活性. 這兩個(gè)模型目前依然是抗癲癇藥物篩選的首要選擇, 被美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(NIH)推薦為主要的抗癲癇藥物篩選模型[16]。其中MES 模型用于篩選能對(duì)抗全身強(qiáng)直陣攣性發(fā)作的候選藥[17], 而Sc-PTZ 模型則用來(lái)篩選失神發(fā)作的候選藥物[18]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)目標(biāo)化合物2a-2m進(jìn)行了30、100、300 mg/kg 三個(gè)劑量的活性和神經(jīng)毒性評(píng)價(jià), 其結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn), 除了化合物2f, 2j和2k，其他化合物在100 mg/kg劑量下都顯示出抗MES活性，化合物2f, 2j和2k也在300 mg/kg劑量下顯示出活性；在Sc-PTZ 模型中, 化合物2a-2h和2j-2m在100mg/kg劑量下表現(xiàn)出了抗驚厥活性, 其中化合物2h在低劑量30 mg/顯示出活性。在旋轉(zhuǎn)棒法中，化合物2a-2m在300 mg/kg劑量下均未顯示出神經(jīng)毒性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明大部分化合物在MES 和Sc-PTZ 模型中均表現(xiàn)出保護(hù)活性, 說(shuō)明其對(duì)強(qiáng)直性發(fā)和失神發(fā)作均有效，并且它們均表現(xiàn)出較低的神經(jīng)毒性。該系列化合物在結(jié)構(gòu)上屬于單烷基取代的三氮唑類(lèi)，在之前的報(bào)道中，大多是稠合的三唑衍生物表現(xiàn)出抗癲癇活性。本研究的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了三氮唑片段是一個(gè)良好的抗癲癇活性基團(tuán)，并且單烷基取代的三氮唑同樣具有良好的抗癲癇活性，這為三氮唑在藥物設(shè)計(jì)尤其是抗癲癇藥物的設(shè)計(jì)中提供了進(jìn)一步的科學(xué)依據(jù)。

表1 化合物2a-2m的抗驚厥活性及神經(jīng)毒性(小鼠腹腔給藥)

aNumber of animal used = 3-5, Doses of 15, 30, 100, and 300 mg/kg were administered. The figure in the table indicates the minimum dose whereby bioactivity was demonstrated in half or more of the mice. The animals were examined at 0.5 h after injection was administered. A dash indicates the absence of anticonvulsant activity and neurotoxicity at the maximum dose administered (300 mg/kg).bMaximal electroshock test.cSubcutaneous pentylenetetrazole test.dNeurotoxicity screening (rotarod test).

3 小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)合成了一系列未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的1-(3-苯氧基丙基)-1H-1,2,4-三氮唑衍生物，其結(jié)構(gòu)均經(jīng)過(guò)光譜方法確證。體內(nèi)抗癲癇活性評(píng)價(jià)表明，該系列化合物均表現(xiàn)出不同程度的抗驚厥活性，尤其是該系列化合物對(duì)MES模型和Sc-PTZ模型均有效，使得該類(lèi)化合物具有廣譜的抗癲癇潛能，這為研究大發(fā)作和失神發(fā)作類(lèi)癲癇的治療藥物提供了一定的基礎(chǔ)。

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SYNTHESIS OF 1-(3-PHENOXYPROPYL)-1H-1,2,4-TRIAZOLE DERIVATIVES AND THEIR ANTICONVULSANT ACTIVITIES

CHENG Shi-long, GUO Dong-fu, YU Sheng-wang, HE Shi-hui, ZHAO Wen-hao,*DENG Xian-qing

(Faculty of Medicine, Jinggangshan University, Ji’an, Jiangxi 343009, China)

To synthesize a series of 1-(3-phenoxypropyl)-1H-1,2,4-triazole derivatives and investigate their anticonvulsant effects.Various phenols were used as the starting material, which reacted with 1-bromo-3-chloropropane and 1,2,4-triazole in sequential order to provide the target compounds 2a-2m. The structures of these compounds were confirmed by 1H-NMR, 13C-NMR, and MS spectrum. Their anticonvulsant activities were evaluated using maximal electroshock shock (MES) and subcutaneous pentylenetetrazole (scPTZ) seizure models in mice. The neurotoxicity was evaluated with rotating rod test.A series of alkyl substituted triazoles were synthesized, and their anticonvulsant activities were confirmed by the both models.The alkyl substituted triazoles reported in this work exhibited broad-spectrum anticonvulsant activity. This found enriches the antiepileptic structure-activity relationships of triazole compounds, and provides the reference, to some extent, to the research and development of new drugs of the grand and apathetic seizures.

triazole; anticonvulsant; maximal electroshock shock; sc-PTZ

1674-8085(2019)01-0088-06

R914.3

A

10.3969/j.issn.1674-8085.2019.01.018

2018-10-01；

2018-11-21

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(21562028)；井岡山大學(xué)第七批校級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目

陳士龍(1996-)，男，甘肅張掖人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專(zhuān)業(yè)2016級(jí)本科生(E-mail: 2652036221@qq.com);

郭東福(1995-)，男，甘肅酒泉人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專(zhuān)業(yè)2016級(jí)本科生(E-mail: 1905104791@qq.com);

喻圣旺(1998-)，男，江西南昌人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專(zhuān)業(yè)2016級(jí)本科生(E-mail: 1779326748@qq.com);

何世輝(1994-)，男，江西九江人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專(zhuān)業(yè)2016級(jí)本科生(E-mail:924233669@qq.com);

趙文豪(1995-)，男，河南鶴壁人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專(zhuān)業(yè)2016級(jí)本科生(E-mail: 1732247757@qq.com);

*鄧先清(1962-)，男，湖南衡陽(yáng)人，副教授，博士，主要從事合成藥物研究(E-mail: dengxianqing1211@126.com).